Extração de DNA da banana Extração de DNA da banana
Você vai precisar de: Você vai precisar de:
Saco plástico tipo Zip Loc Saco plástico tipo Zip Loc 1/2 banana 1/2 banana Um copo com a boca não muito larga Um copo com a boca não muito larga Um bastão de vidro ou um palito de madeira (um hashi, Um bastão de vidro ou um palito de madeira (um hashi, por exemplo) por exemplo) Álcool etílico gelado Álcool etílico gelado Conta-gotas Conta-gotas Filtro de café Filtro de café Água mineral Água mineral 10ml de solução extratora de DNA (calma, é fácil de fazer: 10ml de solução extratora de DNA (calma, é fácil de fazer: basta misturar 50ml de detergente líquido, duas colheres basta misturar 50ml de detergente líquido, duas colheres de sal e 900ml de água em um copo). de sal e 900ml de água em um copo).
Como extrair o DNA: Como extrair o DNA:
1. Coloque a banana dentro do saco zip loc e esmague 7. Coloque a banana dentro do saco zip loc e esmague usando as mãos até virar um purê homogêneo. Cuidado usando as mãos até virar um purê homogêneo. Cuidado para não rasgar o saco. para não rasgar o saco. 2. Misture a solução extratora de DNA até ficar uniforme. 8. Misture a solução extratora de DNA até ficar uniforme. 3. Coloque a mistura no filtro de café e deixe-a filtrando até 9. Coloque a mistura no filtro de café e deixe-a filtrando até que metade do copo esteja cheio. que metade do copo esteja cheio. 4. Misture o álcool gelado com a substância com cuidado, 10. Misture o álcool gelado com a substância com cuidado, deixando-o escorrer pelas bordas. A quantidade de álcool deixando-o escorrer pelas bordas. A quantidade de álcool deve ser mais ou menos a mesma quantidade do líquido deve ser mais ou menos a mesma quantidade do líquido que está no copo. A ideia é que o líquido resultado se que está no copo. A ideia é que o líquido resultado se separe em duas fases (igual a um copo com água e óleo, separe em duas fases (igual a um copo com água e óleo, por exemplo). por exemplo). 5. Coloque o bastão de madeira ou vidro dentro do copo, 11. Coloque o bastão de madeira ou vidro dentro do copo, até a solução mais turva, que contém as moléculas de até a solução mais turva, que contém as moléculas de DNA. Você vai ver claramente que os filetes do líquido se DNA. Você vai ver claramente que os filetes do líquido se aglutinam em volta do bastão. 'Pesque' um deles e voilà, aglutinam em volta do bastão. 'Pesque' um deles e voilà, você acabou de pescar um filete de DNA da banana! você acabou de pescar um filete de DNA da banana! 6. Se você tiver o microscópio e as lâminas em casa, pode 12. Se você tiver o microscópio e as lâminas em casa, pode colocar um desses filetes em uma lâmina, pingar uma colocar um desses filetes em uma lâmina, pingar uma gota de solução extratora, colar a lâmina menor em cima gota de solução extratora, colar a lâmina menor em cima e observar o código genético da banana no microscópio. e observar o código genético da banana no microscópio.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: RESULTADOS E DISCUSSÃO:
A banana é macerada para que os constituintes da A banana é macerada para que os constituintes da solução de lise (água, detergente e cloreto de sódio) solução de lise (água, detergente e cloreto de sódio) atinjam mais facilmente todas as células da fruta. atinjam mais facilmente todas as células da fruta. O detergente presente na solução de lise ocasionou o O detergente presente na solução de lise ocasionou o rompimento da bicamada lipídica que compõe a rompimento da bicamada lipídica que compõe a membrana plasmática das células da banana (onde está membrana plasmática das células da banana (onde está contido o DNA) e das organelas. Sob a ação do contido o DNA) e das organelas. Sob a ação do detergente, os lipídios constituintes, tornam-se solúveis detergente, os lipídios constituintes, tornam-se solúveis e são removidos juntamente com as proteínas que e são removidos juntamente com as proteínas que também estão presentes na membrana. também estão presentes na membrana. Já o cloreto de sódio (NaCl) contribui com íons positivos Já o cloreto de sódio (NaCl) contribui com íons positivos que neutralizam a carga negativa do DNA e são de que neutralizam a carga negativa do DNA e são de fundamental importância por ajudar a manter as fundamental importância por ajudar a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído, bloqueando a proteínas dissolvidas no líquido extraído, bloqueando a sua precipitação associado com o DNA. sua precipitação associado com o DNA. Com a adição do álcool etílico, observou-se a precipitação Com a adição do álcool etílico, observou-se a precipitação do DNA devido a sua baixa solubilidade nesse solvente. do DNA devido a sua baixa solubilidade nesse solvente. Quanto mais gelado o álcool estiver, menos solúvel o Quanto mais gelado o álcool estiver, menos solúvel o DNA será, pois além de formar uma mistura heterogênea DNA será, pois além de formar uma mistura heterogênea em ambiente salino, ele fará com que as moléculas do em ambiente salino, ele fará com que as moléculas do DNA se aglutinem, constituindo uma massa DNA se aglutinem, constituindo uma massa esbranquiçada e filamentosa. esbranquiçada e filamentosa.