Biologia Molecular e

Biotecnologia
Natália de Morais Cordeiro, PhD
 Apresentação da disciplina
Fundamentos de biologia molecular: estrutura e propriedades dos ácidos
nucléicos, replicação do DNA, transcrição e tradução.
Técnicas de biologia molecular aplicadas ao diagnóstico: extração de ácidos
nucléicos, hibridização de ácidos nucleicos, desenho de
primers/oligonucleotídeos, a reação em cadeia da polimerase e suas variações,
eletroforese de DNA, PCR convencional e em Tempo Real, clonagem gênica.

Conceitos em diagnóstico e funcionamento de um laboratório de diagnóstico

molecular.
Conceito da Biotecnologia. Biotecnologia clássica. Importância sócio-
econômica.

Biotecnologia atual. Engenharia genética.

As novas tecnologias: transposons, tecnologia do DNA recombinante, cultura

de tecidos vegetais e animais.

Terapia com células-tronco. Aplicação dos princípios da Genética e Citogenética

na Biotecnologia. Biotecnologia na saúde.
 Atividades importantes

Apresentação dos modelos de Biologia Molecular

Aulas Práticas:
Extração de DNA
Montagem de Primers
Paternidade
Cariótipo

Seminário
Modelos de Biomol
Modelos de Biomol
Modelos de Biomol
Vamos conversar
 Biologia molecular
Assassinato de 1988 é desvendado graças a carta enviada a jornal
há 32 anos – Pensilvânia - EUA
• Anna Kane - 26 anos - estrangulada até a
morte
• Material coletado de suas roupas na
época
• 1990 - publica matéria pedindo ajuda
com informações sobre o caso
• Jornal recebeu uma carta anônima
assinada por um "cidadão preocupado"
com "detalhes íntimos" do crime
2022: Resultados indicaram • O envelope lacrado com saliva em que a
que o possível suspeito era carta foi enviada foi submetido a um
Scott Grim, que morreu em teste de DNA.
2018 de causas naturais, aos • O código encontrado correspondia ao
58 anos. Ele teria 26 anos na perfil de DNA encontrado nas roupas de
Kane
época do assassinato
https://www.cnnbrasil.com.br/internacional/apos-34-anos-assassino-e-
descoberto-depois-de-deixar-dna-em-envelope-lambido/
 Biologia molecular
Assassinato de Evelyn Marie Fisher-
Bamforth - 22 de janeiro de 1980
Florida, EUA

Homicídio brutal com agressão sexual

Principal suspeito morava a 13 casas de Evelyn, em
uma área de trailers para moradia; porém, nunca Foi confirmado em
havia sido preso por insuficiência de provas. 2022 o autor do
crime: Ronald
Na época foi coletada uma amostra de sangue na Eugène Richards
cena do homicídio

Foi justamente a partir dessa amostra, em conjunto

dos avanços da tecnologia de análise de DNA da
atualidade, que o suspeito pôde ser ligado ao crime
https://spdiario.com.br/noticias/policia/assassinato-cruel-
ocorrido-em-1980-e-finalmente-solucionado-atraves-de-
metodo-impressionante.html
 Biologia molecular

Mas antes, vamos jogar!

www.kahoot.it
 Biologia Molecular
O estudo do universo vivo mostra que a evolução produziu uma
diversidade de formas celulares

Existem em torno de 4 milhões de espécies diferentes de

bactérias, protozoários, vegetais e animais

Biologia Molecular explora o estudo da vida em escalas

moleculares
 Hereditariedade
Passagem de informações específicas dos organismos
parentais para seus descendentes durante a
reprodução
 O início de tudo Revista da Biologia (2012) 9(2) 39
lógicos como a respiração. “Sobressaiu-se mais como um
pesquisador em extensão que em profundidade: aparente-
mente, satisfazia-se com o domínio da reprodução mecâ-
nica do fenômeno, sem aprofundar-se nos fundamentos

Robert Hooke fez a primeira

teóricos” (Os cientistas, 1971, p. 137).
Robert Hooke realizou um grande número de es-
tudos, dentre os quais as observações microscópicas. Ele

1665
publicou os resultados obtidos em uma obra intitulada

observação de uma célula num

Micrographia, or some phsiological descriptions of minute
bodies made by magnifying glasses with observations and
inquiries thereupon (Micrografia, ou algumas descrições
fisiológicas de pequenos corpos, feitas com lentes de au-
mento, com observações e investigações sobre os mes-

microscópio “Micrographia”
mos). O livro contém 57 observações microscópicas, além
de três realizadas com um telescópio.
Ao microscópio, Hooke observou diversos objetos
inanimados, como a ponta de uma agulha, o fio de uma
navalha, gotas e bastões de vidro, grãos de areia, cristais de
neve, tecidos como tafetá e linho.
Além disso, observou diversos organismos ou par-
tes de organismos, como cogumelos, algas, folhas, cabelo,
ferrão de uma abelha, penas, patas de moscas e outros in-
setos, asas e cabeça de uma mosca, dentes de uma cobra, Figura 1. O microscópio composto representado por Hooke na
ovos do bicho da seda, uma formiga, vermes do vinagre e Micrographia. Fonte: Hooke, 1665, prancha 1.
pedaços de cortiça. Como se depreende da vistoria dessa
lista, o interesse de Hooke não era absolutamente biológi-

1831: Robert Brown descobriu unidade nuclear presente nas células

co, mas microscópico (Martins, 2011, p. 14).
Habilidoso na construção de instrumentos, Hooke
fez essas observações em um microscópio composto
construído por ele próprio. O instrumento possuía partes
removíveis, as diferentes lentes podiam ser trocadas con-
forme a conveniência de observar partes maiores do ob-
jeto em vez de algum detalhe. De acordo com a descrição
que forneceu (Figura 1), o instrumento “permitia obter
regulares.” (Hooke, 1665, p. 112-113)
A sequência do relato mostra que a observação da
cortiça foi guiada pelo interesse em compreender três pro-
priedades físicas dessa substância: leveza, flutuabilidade e
elasticidade.
As suas observações ao microscópio permitiram
concluir que a leveza da cortiça, assim como a de “um
favo vazio, uma esponja, uma pedra-pome ou outro se-

1865: Gregor Mendel - lei da hereditariedade – Primeira Lei de

aumento de aproximadamente 40 diâmetros” (Martins,
2011, p. 16).
Nessa época o microscópio composto possuía pe-
melhante”, era devido a “uma quantidade muito pequena
de corpo sólido estendido em dimensões extremamente
grandes” (Hooke, 1665, p. 113). Ou seja, o “corpo sólido”
correspondia ao que hoje chamamos as paredes celulares
queno poder de ampliação e oferecia dificuldades de ilu-

Mendel minação. Porém, Hooke introduziu novidades técnicas

no seu instrumento: pequeno tamanho; um sistema de
iluminação mais poderoso, empregando luz difusa para
evitar os fortes reflexos ocasionados pela luz solar direta;
a introdução de uma lente intermediária entre a objetiva
e a ocular; o sistema de sustentação do microscópio, que
permitia movimentos do seu corpo em qualquer direção;
uma plataforma giratória para colocar as amostras estuda-
das (Mayall apud Martins, 2011, p. 18).
Como observou Roberto Martins, comparado aos
padrões atuais, o poder de ampliação desse microscópio
composto era pequeno. Porém, Hooke também construiu
e utilizou microscópios de uma só lente, capazes de am-
pliar cerca de 200 ou 300 vezes. Isso também foi feito por
outros pesquisadores da época, especialmente os do norte
da Europa (Wilson apud Martins, 2011, p. 19).
Quanto ao exame da cortiça, ele é encontrado na 18ª
observação do Micrographia com os seguintes termos:
“Pude perceber claramente que ela era toda perfura-
da e porosa, como um favo de mel, mas os poros não eram
das células da casca da árvore, que por estarem mortas,
delimitavam espaços de “dimensões extremamente gran-
des”.
A flutuabilidade decorria de a substância da cortiça
ser “toda preenchida de Ar, e que esse Ar é perfeitamen-
te fechado em pequenas Caixas ou Células distintas umas
das outras” (Hooke, 1665, p. 113).
Quanto à elasticidade, Hooke inferiu que ela podia
ser explicada por ser essa uma propriedade tanto do ar
que preenchia as cavidades, quanto das paredes que as de-
limitam. Assim ele se expressou:
“O Microscópio facilmente informa [...] a massa
toda [da cortiça] consiste de uma associação infinita de
pequenas Caixas ou Balões de Ar, que é uma substância de
natureza elástica e que sofre uma condensação conside-
rável [...]. Além disso, parece bastante provável que aque-
les filmes, ou lados dos poros, tenham, eles mesmos, uma
qualidade elástica, como ocorre a quase todo outro tipo de
substâncias Vegetais, de modo a ajudar que retomem sua
posição inicial.” (Hooke, 1665, pp. 113-114)

ib.usp.br/revista
Introdução à Biologia molecular
 O início de tudo
1868 - Friedrich Miescher (bioquimico)

1ºs Estudos Bioquímicos do Núcleo Celular

Núcleos de células derivadas de curativos cirúrgicos

(leucócitos de secreção purulenta)
Conhecimento atual
•Porção ácida (DNA) e uma porção básica (proteína)

Nucleína
(rica em P )
 O início de tudo

1953 Vários trabalhos sobre o DNA:

Trabalho de Chargaff (sobre a composição do DNA e as

proporções das bases)
Trabalhos de Wilkins (difração de raios-X de moléculas de DNA)

Watson e Crick descreveram o DNA como:

- Dupla fita
- Enrolada em hélice ao redor de um eixo, sendo as fitas
antiparalelas
- DNA possui uma estrutura periódica que se repete a cada 10
nucleotídeos
- As bases nitrogenadas das duas fitas voltadas para o interior da
hélice
 ... E Rosalind Franklin?

1952 – imagens
do DNA com raio Ácido
X, em especial a desoxiribonicleotídeo
“fotografia 51” do timo de vitela

Ficou com essas imagens por meses, mas não percebeu que se tratava da dupla
hélice, com uma escada em caracol
Aluno de Franklin mostrou a foto a Wilkins, sem que ela soubesse, querendo
saber se ele teria alguma proposta de estrutura.

Wilkins mostrou a imagem a Watson e Crick, seus colegas de

Cambridge, que propuseram a estrutura e publicaram na Nature
 O início de tudo
J.D. Watson and F.H.C. Crick
(1953)
A structure for deoxyribose nucleic
acid.
Nature 171:737

CONSIDERADA UMA DAS

MAIORES DESCOBERTAS DO
SECULO XX
Dogma Central da Biologia Molecular

transcrição tradução

replicação
 Dogma Central da Biologia Molecular

1970: Transcriptase Reversa

DNA – guardião da
informação genética

RNAs e proteínas celulares

Síntese dos constituintes

celulares
 Dogma Central da Biologia Molecular

Genes: Segmentos do • Genoma: Conjunto do

DNA/RNA que codificam material genético
uma cadeia polipeptídica (RNA/DNA) de uma
ou uma molécula de RNA célula viva ou vírus