PRÁTICAS DE BACTÉRIAS BIOINDICADORAS

Docente: Victor Nathan Lima da Rocha

Discentes: Janaína Porfirio da Silva, Pedro Henrique Soares da silva, Edimar Antas de Sousa

Disciplina: Saúde Ambiental

INTRODUÇÃO

A água, um recurso indispensável para a sobrevivência humana e de todas as espécies

vivas, além de ser um importante insumo para a grande maioria das atividades econômicas,
nomeadamente da agricultura e da indústria, exerce uma influência decisiva na qualidade de
vida das populações, especialmente ao tanger a área do abastecimento, o qual tem forte
impacto sobre a saúde públicas são muitos os poluentes potenciais que podem prejudicar a
qualidade das águas dos rios, lagos e águas costeiras e marinhas (MDF Neto 2007).

A qualidade microbiológica da água é extremamente importante para o consumo

humano, uma vez que a presença de microrganismos patogênicos pode causar
doenças graves. A ingestão de água contaminada pode levar a complicações
gastrointestinais, como diarreia, cólera, hepatite A, febre tifoide, entre outras. A
contaminação microbiológica da água pode ocorrer de várias formas, como através do
contato com esgoto, dejetos animais ou resíduos de atividades humanas, ou mesmo
por meio de fontes naturais, como rios e lagos. Além disso, as condições de
armazenamento e distribuição da água podem favorecer o crescimento de bactérias,
vírus e outros microrganismos.

As bactérias coliformes em geral se originam no intestino de animais de sangue

quente. Coliformes fecais são capazes de crescer na presença de sais biliares ou
agentes de superfície semelhantes, são oxidase negativa, e a produção de ácido e gás a
partir de lactose no prazo de 48 horas a 44 ± 0,5 ° C. As bactérias coliformes incluem
géneros que se originam em fezes (por exemplo, Escherichia ), assim como géneros de
origem fecal não (por exemplo, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter).(Portal SF.,2015).

A água pode abrigar diversos microrganismos que transmitem doenças ao homem,

entre eles, protozoários, bactérias e vírus. Outras doenças são causadas por parasitas
encontrados em organismos que vivem na água ou por animais vetores com ciclo de
vida na água. O alto número de casos de doenças relacionadas à água não se restringe
a áreas desfavorecidas pela falta de abastecimento ou saneamento básico. A falta de
conhecimentos ou a forma como a informação chega à população é um dos fatores
relacionados à persistência de doenças infecciosas no Brasil (FERREIRA;
MEIRELLES,2005).
 A contagem de coliformes totais e termotolerantes é um teste importante para
avaliar a qualidade bacteriológica da água e pode ser usado para monitorar a eficácia
dos tratamentos de água e saneamento" (APHA, 2017).

A presença de coliformes totais e termotolerantes em água potável é um sinal de

contaminação fecal e, portanto, representa um risco potencial para a saúde pública. É
importante monitorar esses indicadores para garantir que a água potável esteja livre
de patógenos" (WHO, 2011).

Os coliformes totais e termotolerantes são amplamente utilizados como indicadores

de contaminação fecal em água, mas é importante lembrar que eles não são
indicadores específicos de patógenos humanos. Portanto, o uso de outros testes
microbiológicos complementares pode ser necessário para avaliar a segurança da água
para consumo humano" (Cabral, 2010).

No seguinte trabalho foram realizados três etapas em aulas práticas no laboratório

de microbiologia nos dias 27, 28 e 29 de março de 2023 com o objetivo de realizar uma
análise microbiológica sobre os coliformes totais e termotolerantes. A primeira etapa
consistiu na técnica de inoculação dos tubos múltiplos, preparando-os para o teste
presuntivo. Na segunda etapa foi realizada a análise dos resultados dos testes
presuntivo e da inoculação dos tubos para o teste confirmatório. Por fim a terceira
etapa, foi realizada a análise dos resultados do teste confirmatório e calculado da
estimativa de coliformes termotolerantes e coliformes totais em (NNP/100 mL).

Essa etapas são muito importantes para a identificação e quantificação de micro-

organismos em recolha de água, permitindo avaliar sua qualidade e determinar se ela
está imprópia ou adequada para o consumo humano.

Objetivo Geral

Efetuar uma análise Microbiológica da água do açude localizado na cidade de

Princesa Isabel - PB , através do teste presuntivo para detectar a presença de
coliformes totais e termotolerantes.

Objetivos Específicos

Observar se há presença na água de coliformes (totais e termotolerantes);

caucular a quantidade provável dos coliformes (totais e termotolerantes);

fazer análise final comparando os resultados pela presença de coliformes (totais e

termotolerantes).

METODOLOGIA

• Preparação do meio de cultura:

A primeira etapa consiste na formação do meio de cultura para os coliformes
coletados. São utilizados três tipos de meio de cultura: caldo lactosado, caldo
lactosado verde brilhante Bile a 2% e caldo EC, realizado no laboratório de Biologia.

• Teste presuntivo:

Na segunda etapa, 30 tubos são preparados com o mesmo desenvolvimento. 5 tubos

contêm caldo lactosado em concentração dupla, inoculados com 10 ml de amostra a
ser examinada em diluição 1:1. Os outros 10 tubos contêm caldo lactosado em
concentração simples, sendo que 5 têm 1 ml de amostra em diluição 1:10 e os outros 5
têm 0,5 ml de amostra em diluição 1:100. Esta etapa é realizada no laboratório de
microbiologia.

Os tubos são incubados por 24 horas a uma temperatura de 0,5 graus Celsius. Em
seguida, o teste presuntivo é realizado, pegando os tubos que deram positivos para
formação nas três diluições de 1:1; 1:10; 1:100.

• Teste confirmatório:

Os tubos que apresentaram resultado positivo no teste presuntivo são submetidos ao

teste confirmatório. Nesta etapa, é utilizado o meio de cultura verde brilhante a 2%. A
alça de platina é flambada na chama e resfriada em cada tubo positivo em uma porção
da amostra. Em seguida, há a inoculação no meio no tubo contendo o verde brilhante
durante 24 horas a 0,5 graus Celsius.

• Análise dos resultados:

A análise dos resultados é feita com base na técnica da análise microbiológica dos
tubos múltiplos. Os tubos que apresentarem crescimento bacteriano indicam a
presença de coliformes totais e termotolerantes na amostra.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

A análise microbiológica realizada nos coliformes coletados apresentou resultados

positivos para coliformes totais e termotolerantes. O teste presuntivo, realizado em
duas etapas, apresentou a formação de gás em todos os tubos de ensaio positivos,
indicando a presença dessas bactérias na amostra analisada, lenbrando que teve erro
em dois tubos no trasporte da bactéria tendo que deixar o procedimento incompleto.

O cálculo do NMP para coliformes totais foi realizado a partir das diluições 1:1 (3
positivos), 1:10 (2 positivos) e 1:1000 (obteve 0) do caldo EC, resultando em um valor
de 1600 NMP/100ml com a combinação (3-2-0). Já para os coliformes termotolerantes,
o cálculo do NMP foi realizado a partir das diluições 1:1(3 positivos), 1:10 (2 positivos)
e 1:100 (1 positivo) do caldo verde brilhante a 2%, resultando em um valor de 1600
NMP/100ml com a combinação (3-2-1).
CONCLUSÃO

A presença de coliformes totais e termotolerantes indica contaminação na amostra

analisada. O resultado do teste presuntivo positivo em todas as diluições sugere uma
alta contagem de bactérias. No entanto, é importante observar que houve erro no
transporte de duas das bactérias, o que pode afetar os resultados.

Os resultados do cálculo do NMP indicam que a contagem de coliformes totais e

termotolerantes na amostra é de 1600 NMP/100 ml. Isso sugere que a amostra pode
representar um risco para a saúde pública se consumida sem tratamento adequado.

Portanto, é necessário investigar as possíveis fontes de contaminação e tomar

medidas para evitar a disseminação dessas bactérias. Além disso, é importante
garantir que a amostra seja tratada adequadamente antes de ser consumida para
evitar possíveis problemas de saúde.

REFERÊNCIAS

MDF Neto, M. (2007). Água, meio ambiente e desenvolvimento: o desafio da gestão

integrada. Revista Saúde e Meio Ambiente, 2(1), 1-18.

Portal da Saúde. (2015). Qualidade microbiológica da água. Recuperado em 14 de abril

de 2023, de http://portalsaude.saude.gov.br/images/pdf/2015/janeiro/15/Qualidade-
Microbiologica-da-Agua.pdf.

Ferreira, A. S., & Meirelles, M. (2005). Doenças relacionadas à água no Brasil: análise
de informações divulgadas na imprensa escrita. Cadernos de Saúde Pública, 21(2), 506-
513.

Associação Americana de Saúde Pública (APHA). (2017). Métodos Padrão para o Exame
de Água e Efluentes. Washington, DC: Associação Americana de Saúde Pública.

Organização Mundial da Saúde (OMS). (2011). Diretrizes para a Qualidade da Água

Potável, 4ª Edição. Genebra, Suíça: Organização Mundial da Saúde.

Cabral, J.P.S. (2010). "Microbiologia da água. Patógenos bacterianos e água." Revista

Internacional de Pesquisa Ambiental e Saúde Pública, 7(10), 3657-3703.

ANEXOS

• PREPARAÇÃO MEIO DE CULTURA

• TESTE PRESUNTIVO E TESTE CONFIRMATÓRIO