UNIVERSIDADE DO EXTREMO SUL CATARINENSE – UNESC

BACHARELADO EM ENGENHARIA AMBIENTAL E SANITARIA

GABRIEL CAMILO DAGOSTIN

RELÁTORIO AULAS PRÁTICAS

CRICIÚMA
2023
GABRIEL CAMILO DAGOSTIN

RELÁTORIO AULAS PRÁTICAS

Relatório das aulas práticas realizadas em

laboratório referente a matéria de
Microbiologia e Saúde ambiental no curso
de Engenharia ambiental e sanitária.

Professora: Claudia Peluso Martins

CRICIÚMA
2023
 SUMÁRIO

1. Aula prática I - Solo

1.1 Introdução
1.2 Referencial teórico
1.3 Materiais e métodos
1.3.1 Materiais utilizados
1.3.2 Método de conservação em placas de petri
1.4 Resultados experimentais
1.5 Conclusão

2. Aula Prática II - Água

2.1 Introdução
2.2 Referencial teórico
2.3 Materiais e métodos
2.3.1 Materiais utilizados
2.3.2 Método cromogênico/fluorogênico
2.4 Resultados experimentais
2.5 Conclusão

3. Aula Prática III - Ar

3.1 Introdução
3.2 Referencial teórico
3.3 Materiais e métodos
3.3.1 Materiais utilizados
3.3.2 Método de sedimentação em placas
3.4 Resultados experimentais
3.5 Conclusão
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1. AULA PRÁTICA I - SOLO - CONTAGEM DE COLÔNIAS DE

MICRORGANISMOS E UMIDADE EM SOLO.

1.1 INTRODUÇÃO
A qualidade do solo é extremamente importante para a saúde e produtividade
de um ecossistema e dos ambientes relacionados, ela reflete a capacidade do solo de
sustentar plantas e animais, mantendo ou aumentando a qualidade da água e do ar.
Além disso, um solo de boa qualidade favorece processos como a ciclagem e
mineralização de nutrientes, infiltração, retenção e condutividade hidráulica, aeração,
agregação, supressão de pragas e doenças
A qualidade do solo pode ser avaliada por vários parâmetros, um dos quais é a
quantidade de microbiota presente. Substâncias tóxicas podem reduzir drasticamente
o número desses microrganismos.
No experimento, bactérias e fungos são observados. As placas de Petri, que
foram expostas à água misturada com fragmentos de solo, são mantidas em uma
estufa, um ambiente ideal para a multiplicação desses microrganismos. Isso permite
a observação da quantidade de microrganismos e a determinação se o solo está
sendo afetado por algum material que possa estar eliminando a microbiota.

1.2 REFERENCIAL TEÓRICO

O solo pode ser definido como uma mistura de materiais inorgânicos e
orgânicos, formados a partir de uma série de processos intempéricos operantes na
superfície terrestre que provocam a decomposição de rochas e minerais primários,
graças à ação de agentes físicos, químicos e biológicos (Hunt, 1972).

Para os seres humanos e para a maioria dos seres vivos, o solo é a mais
importante parte da geosfera. Mesmo compreendendo uma finíssima camada
de material, em comparação ao diâmetro total do planeta, é o meio onde se
produz a maior parte dos alimentos indispensáveis a quase todas as espécies
de vida. Segundo Manahan (1999)
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1.3 MATERIAIS E MÉTODOS

1.3.1 Materiais utilizados

• Espátulas.
• Placas de petri pca.
• Tubos de ensaio.
• Placas de petri com ágar sabouraud.
• Pipetador.
• Placas de petri neutras.
• Bico de bunsen.
• Pipeta.
• Espalhadores.

1.3.2 Método de conservação em placas de petri

Primeiramente foram pegas duas amostras de solo, o solo bom foi coletado em
um terreno atrás da minha residência em Içara, em um ambiente rural, e o solo “ruim”
foi coletado em um rural onde se encontra alguns animais também em içara.

As amostras foram levadas para o laboratório para análise, foi feita a medição
da umidade por meio da relação do peso inicial e do peso após ser seco na estufa.
Após a medição foi encontrada os seguintes valores:

• Solo bom: 23,46 %

• Solo ruim: 21,38%

Iniciamos o processo de diluição do solo em água, adicionando x gramas de

solo a um tubo de ensaio contendo 10mL de água usando uma pipeta. A mistura foi
então agitada. Em seguida, transferimos 1mL da solução do primeiro tubo (10-¹) para
o segundo tubo (10-²), e 1mL do segundo tubo (10-²) para o terceiro (10-³),
continuando esse processo até o tubo 10-8.
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Depois, transferimos com a pipeta alguns mL das soluções dos tubos 10-¹, 10-
4, 10-6 e 10-8 para as respectivas placas de Petri contendo os meios de cultura pca
e sabouraud. As soluções foram então espalhadas com espalhadores. Finalmente, as
placas foram colocadas em uma estufa a 1 atm e x graus Celsius, criando um
ambiente favorável para a proliferação de microrganismos.

1.4 Resultados experimentais

No término do processo, as amostras foram mantidas na estufa por várias

semanas. Após esse período, tentamos contar as colônias nas placas de Petri. No
entanto, devido ao agrupamento excessivo das colônias, a contagem não foi possível.

Fonte: Gabriel Camilo Dagostin (2023). Solo ruim Fonte: Gabriel Camilo Dagostin (2023). Solo bom

Foi observado que o solo “ruim” havia uma quantidade de microbiota mais alta
e aparente que o solo “bom” possivelmente pela localização que foi coletada devido a
presença de animais.

1.5 Conclusão

Assim, um experimento básico de cultivo de bactérias e fungos pode indicar a

presença de contaminação, uma vez que a microbiota seria substancialmente
impactada. Contudo, isso não foi aparente neste experimento, já que o solo
considerado "ruim" não foi obtido de uma área com contaminação química ou
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industrial e sim de uma área rural. Isso ressalta a necessidade de se realizar análises
regulares do solo em locais afetados.

2. Aula prática II - Determinação de Coliformes totais e Termotolerantes em

águas

2.1 Introdução

Os coliformes totais e termotolerantes são indicadores microbiológicos

amplamente utilizados na avaliação da qualidade da água. Os coliformes totais são
um grupo de bactérias que são comumente encontradas no ambiente, incluindo o solo,
a vegetação e a superfície da água. Eles são capazes de fermentar a lactose a 36°C.

Por outro lado, os coliformes termotolerantes, também conhecidos como

coliformes fecais, são um subgrupo de coliformes totais que podem sobreviver a
temperaturas mais altas, até 44,5°C. Eles são normalmente encontrados no trato
intestinal de animais de sangue quente e são frequentemente associados à
contaminação fecal. A presença desses organismos na água pode indicar a presença
de patógenos potencialmente prejudiciais e, portanto, um risco para a saúde humana.
A Escherichia coli é o membro mais conhecido deste grupo.

Portanto, a detecção e quantificação de coliformes totais e termotolerantes são

essenciais para garantir a segurança da água para consumo humano.

2.2 Referencial teórico

Ainda, a escassez do saneamento básico, a falta de informação por parte de
muitos agricultores e a falta de orientação dos consumidores quanto à indispensável
descontaminação das hortaliças e frutas de origem duvidosa são fatores que
contribuem para a transmissão de doenças. Dessa forma, o controle da qualidade das
águas utilizadas para irrigação é de grande importância em saúde pública, sendo uma
maneira de diminuir ou conter essa contaminação (Beraldo, 2010).
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2.3 Materiais e métodos

2.3.1 Materiais utilizados

• Pipetador.
• Tubos de ensaio.
• Bico de bunsen.
• Reagente.
• Pipeta.

2.3.2 Método de cromogênico/fluorogênico

Inicialmente, foram recolhidas duas amostras de água de 100mL cada. A

primeira amostra considerada “boa”, que continha cloro, foi obtida da torneira da
minha casa. Seguimos um método específico para a coleta: limpamos o interior e o
exterior da torneira com álcool 70%, deixamos a água correr por cerca de 2 minutos
para eliminar a água da tubulação e coletar a água do reservatório. Todo esse
processo foi realizado usando luvas e sem conversar para evitar contaminação. A
segunda amostra considerada “ruim” foi coletada em um rio próximo a minha
residência localizada na cidade de Içara.

Depois de levar as amostras para o laboratório, adicionamos o reagente a cada

frasco e misturamos. Em seguida, transferimos com uma pipeta 20mL para um tubo
de ensaio, resultando em um total de 5 tubos de 20mL para cada tipo de água
coletada. Finalmente, colocamos os tubos em uma incubadora a 37°C e os deixamos
lá por uma semana.

2.4 Resultados experimentais

Após 1 semana, foi analisado que:

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Amostra clorada:
Coliformes Totais: Coliformes Fecais:
Tubos positivos: 0 Tubos positivos: 0
Tubos negativos: 4 Tubos negativos: 5
NMP:: 1,1/dL NMP: <1,1/dL

Amostra natural:
Coliformes Totais:5 Coliformes Fecais:
Tubos positivos: 5 Tubos positivos: 5
Tubos negativos: 0 Tubos negativos: 0
NMP:: >8/dL NMP: >8/dL

Fonte: Gabriel Camilo Dagostin (2023). Tubo de ensaio com a amostra de água natural sem cloro e
água clorada.

A partir desses resultados, observamos que a água clorada atende aos padrões
de potabilidade, algo já esperado por ser uma água tratada e usada diretamente no
consumo humano.
Por outro lado, a água natural sem cloro, como esperado, testou positivo tanto
para coliformes totais quanto para coliformes fecais. Isso era previsível, já que amostra
foi coletada em uma zona rural onde tem alta concentração de agricultura e pecuária
e por não ser uma água tratada.
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2.5 Conclusão

A microbiologia da água é um campo crucial para a saúde pública e a gestão

ambiental. A presença de microrganismos, como coliformes totais e fecais, pode
indicar contaminação e riscos potenciais à saúde. Portanto, a análise regular e o
tratamento adequado da água são essenciais para garantir sua segurança para o
consumo humano e a preservação do meio ambiente.

3. Aula prática III - Microbiologia do ar.

A qualidade do ar é crucial para a saúde humana, podendo causar doenças

respiratórias se for ruim. Ela também afeta o meio ambiente, contribuindo para a
mudança climática. Além disso, a qualidade do ar influencia a visibilidade e a
qualidade de vida em geral.
A avaliação da qualidade do ar é vital em determinados setores da indústria,
onde desempenha um papel crucial na qualidade do produto. Isso se aplica a
indústrias como as de bebidas, medicamentos e alimentos, além de hospitais, onde a
contaminação bacteriana pode ter consequências sérias. Assim, é imprescindível o
controle da microbiota aérea nesses locais, o que pode ser feito através de processos
de filtragem, radiação ou vaporização de agentes germicidas.

3.2 Referencial teórico

poluição do ar por microrganismos pode ser de origem natural ou
antropogênica, e corresponde de 5 a 34% da poluição de ambientes internos, sendo
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formados por partículas biológicas aéreas viáveis (cultiváveis) ou não-viáveis (células

mortas) presentes na atmosfera (SRIKANTH et al., 2008).

A poluição do ar é um grande desafio para cidades e estados em todo o Brasil,

sendo responsável por mais de 51 mil mortes anuais, de acordo com relatório
publicado pela Organização Pan-Americana da Saúde (OPAS, 2018b).

3.3 Materiais e métodos

3.3.1 Materiais utilizados

• Placa de petri pca.

• Placa de petri sabouraud.

3.3.2 Método de sedimentação em placas

Foi escolhido um lugar na instituição para deixar as placas abertas em

exposição, foi escolhido o a sacada do primeiro andar do Bloco R2 da Unesc, por ser
bem em frente ao estacionamento e ter uma grande movimentação de veículos e
pessoas, no momento do experimento ninguém ficou por perto para não ter nenhuma
interferência no experimento
Após 20 minutos de exposição da placa, foi levada ao laboratório para
deposição na estufa a 1 atm e x graus, para a proliferação da microbiota.

Em decorrência de um feriado regional do aniversario da cidade não foi analisado o

resultado.

3.4 Conclusão

Neste experimento, a metodologia empregada para avaliar a qualidade do ar

envolveu a exposição de placas em um local selecionado, especificamente na sacada
do primeiro andar do bloco R2 da Unesc.
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Embora o resultado deste experimento não tenha sido analisado, a metodologia

empregada fornece uma base sólida para futuras investigações sobre a qualidade do
ar. Através de experimentos como este, podemos coletar dados valiosos que podem
ser usados para entender melhor a composição microbiológica do ar em diferentes
ambientes. Isso, por sua vez, pode ter implicações significativas para a saúde pública
e a gestão ambiental.
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4. Referências

1. Ministério da Saúde. Disponível em:

<https://bvsms.saude.gov.br/bvs/saudelegis/gm/2021/prt0888_07_05_2021.ht
ml>.

2. ADMIN, F. E. M. O que é a microbiologia do solo e como usá-la a nosso

favor. Disponível em: <https://elevagro.com/conteudos/materiais-tecnicos/o-
que-e-a-microbiologia-do-solo-e-como-usa-la-a-nosso-favor>.

3. Microbiologia do Solo – SBM. Disponível em:

<https://sbmicrobiologia.org.br/areas/microbiologia-do-solo/>. Acesso em: 10
dez. 2023.

4. “Água Potável: A Importância Do Controle Microbiológico.” Kasvi, 28 Aug.

2019, kasvi.com.br/agua-potavel-a-importancia-do-controle-microbiologico/.

Acesso em: 10 Dez. 2023.

5. GUITARRARA, Paloma. "Solo"; Brasil Escola. Disponível em:

https://brasilescola.uol.com.br/geografia/o-solo.htm. Acesso em 10 de
dezembro de 2023.

6. Socorro, May, et al. A QUALIDADE DO AR EM AMBIENTES

HOSPITALARES CLIMATIZADOS E SUA INFLUÊNCIA NA OCORRÊNCIA
de INFECÇÕES. Vol. 6, no. 2, 22 Dec. 2006,
https://doi.org/10.5216/ree.v6i2.818. Acesso em: 10 dez. 2023.

7. Machado, Rodrigo. Estrutura E Dinâmica de Populações. 2012.

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8. Batista, P, et al. “Scientific Electronic Archives Análise de Coliformes

Totais E Termotolerantes Em Água de Irrigação de Hortas No Município

de Sinop -MT, Brasil Analysis of Total and Fecal Coliforms on Irrigation

Waters of Vegetable Gardens in Sinop-MT, Brazil.” Issue ID: Sci. Elec.

Arch, vol. 8, 2015, p. 1. Accessed 11 Dec. 2023.