Análises Clínicas

Análises clínicas
Web Aula 2
Profª. Farmª. Jennifer Ferreira de Oliveira Silva CRF-MG 34.336
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Composição do Sangue
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Análises Clínicas – Web Aula 2

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O sangue parece um líquido homogêneo, no entanto, com a
observação por microscópio pode-se verificar que ele é
heterogêneo, sendo composto por glóbulos vermelhos,
glóbulos brancos, plaquetas e plasma.

O plasma, corresponde até 60% do volume do sangue, é a
parte líquida onde ficam suspensos os glóbulos vermelhos,
glóbulos brancos e plaquetas. A quantidade de cada
componente pode variar conforme o sexo e idade da pessoa.
Algumas doenças, como a anemia, também podem causar

modificações nos valores normais dos componentes do
sangue.

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Glóbulos Vermelhos
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Hemácias no interior
de uma artéria

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Os glóbulos vermelhos, também chamado de hemácias
ou eritrócitos, são células em maior quantidade nos
humanos. Possuem a forma de um disco côncavo de
ambos os lados e não apresentam núcleo.

• Produzidos onde?
Eles são produzidos pela medula óssea, ricos
em hemoglobina, uma proteína cujo pigmento vermelho
dá a cor característica ao sangue.
• Função:
Ela tem a propriedade de transportar o oxigênio,
desempenhando papel fundamental na respiração.

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Glóbulos Brancos
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Glóbulos brancos visualizados por meio de
microscopia eletrônica

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• Os glóbulos brancos, também chamados de leucócitos.
• Produzidos onde?
São produzidos na medula óssea.

• Função:
São células de defesa do organismo que pertencem ao sistema

imunológico (sendo seu número variante entre 4.500 a
11.000/m³) e destroem os agentes estranhos, como bactérias,
vírus e as substâncias tóxicas que atacam nosso organismo e
causam infecções ou outras doenças. Além disso, também
possuem papel importante na coagulação do sangue.

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• Tipos de Leucócitos:
No sangue há diversos tipos de leucócitos com diferentes

formatos, tamanhos e formas de núcleo: neutrófilos,

monócitos, basófilos, eosinófilos e linfócitos.
• Características:
Os leucócitos são maiores que as hemácias, porém, a

quantidade deles no sangue é bem menor. Quando o
organismo é atacado por agentes estranhos, o número de
leucócitos aumenta significativamente.

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• Outras características
Os leucócitos são células incolores, que possuem diferentes

tipos, distinguidos pela forma de seus núcleos e modo de
atuação.

Esses glóbulos brancos atuam na defesa do organismo da
seguinte forma:
• Fagocitose (defesa ativa):

captura de partículas identificadas como antígenos (corpos
estranhos). Nesse processo, as células sanguíneas de defesa
englobam, digerem e destroem os microrganismos invasores;

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• Defesa passiva:
fabricação de anticorpos, proteínas especiais, para neutralizar
os antígenos e as substâncias tóxicas produzidas pelos seres
invasores ou presentes em alimentos e substâncias diversas;

• Diapedese:
propriedade de atravessar os vasos sanguíneos, sair pelas
paredes capilares e migrarem para os tecidos próximos.
Os leucócitos apresentam proteínas que atuam como

“marcadores de identidade celular”, trata-se do
sistema Antígenos Leucocitários Humanos (em inglês, Human
leukocyte antigen - HLA), que é capaz de identificar corpos
estranhos e impedir que se espalhem pelo organismo.

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Tipos de Leucócitos
No sangue, há vários leucócitos de diferentes formatos,

tamanhos, formas de núcleos e funções, sendo os principais

tipos:
• Neutrófilos
• Eosinófilos Leucócitos granulares
• Basófilos
• Linfócitos Leucócitos agranulares
• Monócitos

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Neutrófilo (Leucócito granular)

• São ativos e numerosos (55% a 65%) e, por isso, são os
primeiros a agirem quando há uma infecção.
• Morrem rapidamente após fagocitarem o invasor.
• São também chamados de piócitos ou corpúsculos de
pus.

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Eosinófilo (Leucócito granular)

• São comuns na mucosa intestinal (2% a 4%).
• Seu número aumenta muito no sangue em processos
alérgicos e infecções parasitárias, atuando como uma
resposta primária.

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Basófilos (Leucócito granular)

• São os menos numerosos (1% a 2%)
• Produzem heparina, um anticoagulante, e histamina, uma
substância vasodilatadora liberada nos estados alérgicos.

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Linfócitos (Leucócito agranular)

• Os linfócitos são ativos (25% a 35%) nas reações a
antígenos, relacionando-se à produção de anticorpos.
• Participam também dos mecanismos de rejeição de
enxertos, sendo chamadas de células de rejeição,
encontram-se em maior quantidade no sistema linfático.

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Linfócitos – possuem 2 divisões
• Linfócitos B
São produzidos pela medula óssea, são especializados na
produção de proteínas denominadas anticorpos. Reconhecem

e combatem invasores que entram no corpo.
• Linfócitos T
Originam-se também na medula óssea, porém migram-se para
o timo, onde amadurecem. São responsáveis pela imunidade
do organismo.
• Linfocitose: infecções virais

• Linfopenia: imunodeficiência e terapia farmacológica
prolongada.

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Monócitos (Leucócito agranular)

• São leucócitos grandes, de intensa atividade fagocitária
(3% a 5%).
• Podem concentrar-se em maior número em regiões de
focos infecciosos.
• A ação é mais demorada que a resposta dada pelos
neutrófilos, porém tem um tempo de vida maior.

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Plaquetas
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As plaquetas são fragmentos celulares anucleados

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As plaquetas, também chamadas de trombócitos, não são
células, mas fragmentos celulares.
• Função
A sua principal função está relacionada ao processo de

coagulação sanguínea - quando há um ferimento, com
rompimento de vasos sanguíneos, as plaquetas aderem às áreas
lesadas e produzem uma rede de fios extremamente finos que
impedem a passagem das hemácias e retém o sangue.
As plaquetas estão presentes em cada gota de sangue e seu

número é de aproximadamente 150.000 a 400.000 plaquetas
por m³ em condições normais de saúde.

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Plasma
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O plasma é a parte líquida do sangue

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O plasma é um líquido de cor amarela e corresponde a
mais da metade do volume do sangue.
• Composição

Ele é constituído por grande quantidade de água, mais de
90%, onde encontram-se dissolvidos os nutrientes (glicose,
lipídios, aminoácidos, proteínas, sais minerais e vitaminas),
o gás oxigênio e hormônios, e os resíduos produzidos pelas
células, como gás carbônico e outras substâncias que
devem ser eliminadas do corpo.

Hematopoese
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Origem das células sanguíneas
• O que é?
A hematopoese ou hemopoiese (hemato ou hemo significa
sangue, poieses significa fazer).

• É o processo de produção, desenvolvimento e
amadurecimento das células sanguíneas.
• A hematopoiese se inicia bem cedo na vida fetal, no

mesoderma do saco vitelino. Após um certo tempo com o
avanço da ossificação a medula óssea passa a ser o
principal local da hematopoiese, onde permanece até a
vida adulta.

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Células-tronco
• As células-tronco dão origem as células filhas, onde
algumas permanecem como células-tronco para garantir a

população dessas células, enquanto outras se diferenciam.
• A partir daí elas se proliferam e formam a linhagem de

células linfoides (formação dos linfócitos) e mielóides
(formação de eritrócitos, plaquetas, monócitos e
granulócitos).

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Hematopoiese

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• Quando se inicia?
- Surge a partir do 19º dia até o 6º mês de gestação –
surgindo células sanguíneas no saco vitelino.
- Segue para o fígado fetal, baço e timo e finalmente

aloja-se na medula óssea.
• Período medular:
- Até os 5 anos de idade a medula de todos os ossos da
participam do processo.
- Vida adulta somente os ossos da pelve, esterno, ossos
do crânio, úmero, fêmur e costelas

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Hemograma

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• O que é analisado?
Avalia os elementos celulares do sangue

- Quantitativamente
- Qualitativamente

• Utilidade
- Útil na avaliação das anemias além de evidenciar

indicadores que podem ser correlacionadas com infecções
viróticas e bacterianas.

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• Fatores Pré-analíticos
- Local da punção
- Padronização

____________________________________
Anticoagulantes
- Em geral, interferem no mecanismo de coagulação in
vitro, inibindo a formação da protrombina ou da
trombina.

- Os mais usados são:
- Citrato – provas de coagulação

- Heparina (sódio ou litio)
- EDTA (ácido etileno-diamino-tetracético)
- Fluoreto

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• Garroteamento (máximo 1 minuto)

- Hemoconcentração
- Variações do hematócrito (2 a 4%)
- Pseudoneutrofilia
- Homogeneização da amostra
- Condições do paciente: jejum, estresse
- Posição do paciente
Armazenamento
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• Glóbulos brancos
- Até 3hs: alterações mínimas
- 12 á 18hs: alterações aparentes

• Glóbulos vermelhos
- Até 6hs: alterações mínimas
- Após 8hs: hemácias crenadas e esferócitos
Fatores Fisiológicos
Gestação, Altitude, Exercícios, Fumantes

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Tipos de Hemograma

• Eritrograma
• Leucograma
• Extensões sanguíneas
• Plaquetograma

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Eritrograma

É a parte do hemograma que avalia a massa eritróide
circulante
• Ht (hematócrito)
• Hb (hemoglobina)
• GV (glóbulos vermelhos)
• Índices hematimétricos

____________________________________
• Hematócrito
É a razão entre o volume da massa de eritrócitos e

o volume de sangue total.
O resultado em % exprime a concentração de

eritrócitos obtidos por centrifugação do sangue não
coagulado.
Valores normais:
- ♂: 40 a 50
- ♀:35 a 45
- Crianças até um ano: 34 a 40 %
- Recém-nascidos : 50 a 60 %
____________________________________
• Valores falsamente diminuídos
- Diluição com anticoagulante
- Longo período de centrifugação
- Microcentrífuga descalibrada (> força)
- Tubos mais finos

- Armazenamento da amostra
- Microcitose
• Valores falsamente aumentados

- Garroteamento excessivo
- Curto período de centrifugação
- < força de centrifugação

____________________________________
Dosagem de hemoglobina

____________________________________
- Principal componente eritrocitário
- Dosagem realizada por métodos colorimétricos
• Drabkin-> ferrocianeto de potássio converte o ferro

ferroso da hemoglobina à ferro férrico formando
metahemoglobina.
• A metahemoglobina combina com o cianeto de potássio

para formar um composto estável ->
cianometahemoglobina.

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Dosagem da hemoglobina

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Valores de referência:
Valores normais
- ♂ - 14 a 18
- ♀: 12 a 16 g/dL

- Crianças de até um ano: 11 a 12 g/dl
- Recém- Nascido: de 14 a 19 g/dl

____________________________________
A dosagem de Hb está diretamente relacionada com o
conteúdo e coloração do eritrócito, de grande valia no
diagnóstico das anemias.

Causas de erro
- pipetagem
- lipemia
- alta contagem de leucócitos
- sujeira na parede de leitura
- presença de carboxihemoglobinas (fumantes)

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Contagem de glóbulos vermelhos
• Consiste na determinação do número de eritrócitos por

mm3 de sangue.

• O sangue é diluído na porção 1:200 com o líquido de
Hayem
• Líquido de Hayem:
- Bicloreto de mercúrio
- Cloreto de sódio
- Sulfato de sódio
- Água destilada

____________________________________
Contagem de glóbulos vermelhos
Reativo de Hayem

Valores de referência
- ♂ - 4,5 a 5,5 milhões/mm3
- ♀ - 4,0 a 5,0 milhões/mm3
- Recém nascidos – 5,5 a 7,0 milhões / mm
____________________________________
Índices hematimétricos
• VCM- volume corpuscular médio
• VCM= Ht x 10 / GV
• Correlaciona-se inversamente com o número de GV.

• Causas comuns de erro:
- Rouleaux
- Conservação prolongada in vitro ⇑ VCM
- Excesso EDTA- desidrata a célula-⇓VCM
- Valores normais: 82 a 92 fL
• Através do VMC classifica-se as anemias como:

Macrocíticas, microcíticas e normocíticas.

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Alteração no VCM
• Microcitose
- Hemácias abaixo de 80 fL (adulto).

- Está associada à deficiência de ferro e talassemias.
• Macrocitose
- Hemácias acima de 100 fL (adulto).
- Está associada à deficiência de vitamina B12,
quimioterapia, doença hepática, hipotireoidismo e
mieloma.

• HCM - hemoglobina corpuscular média
____________________________________
- HCM= Hb x 10/GV (pg)
- Valores normais – 27 a 32 pg
• CHCM - concentração de hemoglobina corpuscular

média

- CHCM= Hb x 100
Ht
- Valores normais 32 a36%
• RDW - (Red blood cell Distribution Width) expressão

numérica da anisocitose
- Variação do volume das hemácias – contadores
automatizados
- Valores normais: 11-14,5
Anisocitose - Variação no tamanho das hemácias
____________________________________
Leucograma

• Contagem de glóbulos brancos (WBC)
• Contagem diferencial
- Extensão sanguínea

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Contagem de glóbulos brancos
Realizada com pipeta de Thoma ou pipeta volumétrica
• Pipeta volumétrica
- Pipetar em tubo de ensaio 20 µL de sangue total para

400 µL de solução de Turk, ou seja, diluir o sangue de
1:20
- O líquido de Turk lisa as hemácias mantendo a
morfologia dos leucócitos
- Homogeneizar e transferir aproximadamente 15 µL
para a câmara de Neubauer

____________________________________
• Cálculo: – Contar os quatro quadrados laterais externos e
multiplicar por 50
• Valores de referência:
- ♂ e ♀ - 5,0 a 10.000/mm3
- Crianças até 7 anos – 5,0 a 15.000/mm3
- Recém nascidos – 10,0 a 25.000/mm3
____________________________________
Extensão sanguínea
• Qual a necessidade da extensão sanguínea?

- Verificação da morfologia celular
- Verificação dos tipos celulares
- Contagem e diferenciação de glóbulos brancos,
plaquetas e reticulócitos.
- Coloração de glóbulos vermelhos
- Presença de Inclusões
- Maturidade celular

____________________________________
____________________________________
____________________________________
Fixação e coloração da lâmina depois de seca
• Derivados de Romanowsky:
- Giemsa (azul-eosina)

- Leishman e Wright
- Panótico (solução 1 , 2 e 3)
• Corante ácido - eosina: – afinidade por substâncias

alcalinas – citoplasma
• Corante alcalino - azul de metileno – afinidade por

substâncias ácidas – núcleo

____________________________________
• Devido ao tamanho variado dos diferentes glóbulos
brancos, sua distribuição no esfregaço nem sempre será
uniforme, assim:
- Nas bordas e na cauda há maior quantidade de Ne, Eo,

Mo, Ba.
- Linfócitos restritos à região central do esfregaço
- Leitura feita do corpo para cauda em zig-zag.
• Ler em objetiva de imersão

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____________________________________
Como calcular o valor absoluto?
Fácil!!!! Muito fácil!!!!

50 neutrófilos ------ 100 células
X Neutrófilos -------- 8.000 GB (ex de gb
totais)
X = 4000 neutrófilos / mm3

____________________________________
VHS – Velocidade de hemossedimentação
• Avalia a velocidade de separação dos glóbulos vermelhos

e o plasma

• Utilizado para o diagnóstico de processos infecciosos
• Utilização da pipeta de Westergreen ou tubo de

Wintrobe
• Valor de referência:
- Homens: 3 a 8 mm em 1 hora
- Mulheres: 3 a 11 mm em 1 hora

Valores aumentados:
____________________________________
• Crianças
• Período menstrual
• A partir do 4 mês de gestação
• Temperaturas elevadas
• Anemias

• Neoplasias
• Aumento do fibrinogênio plasmático
• Processos infecciosos e agudos
Valores diminuídos:
• Policitemia vera
• Caqueixa
• Insuficiência cardio congestiva
• < fibrinogênio plasmático
• Anticoagulantes em excesso
____________________________________
Contagem de plaquetas (método de fônio)

____________________________________
Contagem de plaquetas em câmara
TÉCNICA DE BRECHER
• Utilização da pipeta de Thoma
• Aspirar o sangue até a marca 0,5 e completar com o
diluidor de Brecher até a marca 101.

• Agitar a pipeta e colocar a solução na câmara de
Neubauer. Aguardar 10 minutos
• Contar os 25 quadrados do retículo central e multiplicar
por 2,000 (diluição 1:200)
• LÍQUIDO DILUIDOR DE BRECHER:

- Azul de Metileno 1%............................................... 2 gotas
- Oxalato de Amônia.................................................. 1,0 g
- Água destilada q.s.p................................................ 100 ml

____________________________________
Causas de erro:
• Agregação plaquetária – EDTA, atraso na coleta,
conservação in vitro
• Satelitismo plaquetario - é mediado por um fator plasmático
(IgG ou IgM). As plaquetas aderem in vitro aos neutrófilos,
envolvendo-os como uma coroa)

____________________________________
Alterações quantitativas:
• Trombocitose – é o aumento na contagem de plaquetas.

• Trombocitopenia - é a diminuição na contagem de
plaquetas.

Agregação plaquetária e Satelitismo

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Plaquetas normais

____________________________________
Macroplaquetas

____________________________________
Por hoje é só!
Agradeço a atenção de todos!

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