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CAPITULO 2
Derivado del término griego gonos, que significa “aquello que genera”,
las gónadas son los órganos femeninos y masculinos que producen
óvulos y espermatozoides, respectivamente. Las hormonas
glicoproteicas hipofisarias, que se unen a los receptores diana en las
células de la granulosa y la teca en el ovario o las células de Sertoli y
Leydig en los testículos, por lo tanto, se han denominado hormonas
gonadotropinas. La nomenclatura de la Unión Internacional de Química
Pura y Aplicada para las hormonas gonadotropinas hipofisarias
humanas es folitropina para la hormona estimulante del folículo (FSH),
lutropina para la hormona luteinizante (LH) y para la hormona coriónica
placentaria, coriogonadotropina (CG). Aquí los abreviaremos como
FSH, LH y CG. Como lo implican sus nombres, el papel de las
gonadotropinas es activar las células gonadales para producir ovocitos
y espermatozoides necesarios para la procreación. Además de su
papel en la estimulación de la proliferación y diferenciación de las
células gonadales que apoyan la gametogénesis, son esenciales para
la producción de hormonas esteroides por parte de sus células diana
en las gónadas. Algunos de estos esteroides son esenciales para
producir gametos de alta calidad y características sexuales secundarias
asociadas con la madurez sexual, mientras que otros son esenciales
para la receptividad del útero para la implantación y el mantenimiento
del embarazo.
Una característica única de las gonadotropinas, independientemente
de su origen, es que, a nivel de secuencia primaria, comparten una
subunidad idéntica o común codificada por un gen único, y cada una
tiene una segunda subunidad única que se combina con la subunidad
idéntica/común para formar tróficos activos. hormonas
La subunidad común se ha denominado subunidad ÿ y la subunidad
única se ha denominado subunidad ÿ. Por lo tanto, son heterodiméricas
y, dicho sea de paso, las tres gonadotropinas comparten esta subunidad
ÿ común con otra hormona hipofisaria, la hormona estimulante de la
tiroides o la tirotropina (TSH).
Las tres gonadotropinas actúan a través de dos receptores
acoplados a proteína G (GPCR). El receptor de LH reconoce tanto la LH
*Los autores desean reconocer las contribuciones pasadas de los Dres.
David Puett y Mario Ascoli, quienes fueron autores de versiones anteriores
de este capítulo en ediciones anteriores de este libro.
gonadotropina
hormonas y sus
Receptores
prema narayan
Alfredo Ulloa Aguirre
James A. Días*
y hCG; por lo que se conoce como hormona luteinizante /
el receptor de coriogonadotropina [LHCGR] en primates, ya que la CG
solo se expresa en primates (y équidos, que expresan CG equina), y
el receptor de FSH (FSHR), que es específico de FSH. Ambos
receptores se expresan en las gónadas masculinas y femeninas; el
LHCGR se expresa en las células de Leydig, la teca, la granulosa y la
lútea, mientras que el FSHR se expresa en las células de la granulosa
y de Sertoli. Aunque se ha informado la presencia de receptores de
gonadotropina en tejidos extragonadales, su importancia fisiológica
aún es objeto de debate.
gonadotropinas
• Las gonadotropinas son glicoproteínas heterodiméricas de la cistina
familia de nudos
• Su biosíntesis y secreción así como su actividad biológica dependen
de la glicosilación.
• Sus órganos diana son los testículos y los ovarios.
Proteínas de gonadotropina
(LH, hCG y FSH)
Atributos estructurales de proteínas
Las tres gonadotropinas y la TSH comprenden los miembros mejor
caracterizados de una familia de proteínas complejas conocidas como
hormonas glicoproteínicas (GPH).1 Son heterodímeros unidos de
forma no covalente compuestos por una subunidad ÿ común y
subunidades ÿ distintas. La subunidad común de gonadotropina ÿ
(subunidad ÿ), codificada por el gen CGA , contiene 92 residuos de
aminoácidos, y las subunidades LHÿ, FSHÿ y hCGÿ tienen,
respectivamente, 121, 110 y 145 residuos de aminoácidos de longitud.
La longitud adicional de la subunidad hCGÿ se debe a una extensión
del terminal carboxi que surge de una mutación de cambio de marco
en un gen ancestral de la subunidad ÿ de LH, lo que da como resultado
una lectura completa en una región no traducida de la subunidad LHÿ
y una extensión del marco de lectura abierto. .2-4 Esta extensión se
conoce como péptido carboxi-terminal (CTP). Las secuencias de
aminoácidos de las subunidades (h) humanas se muestran en la Fig. 2.1, y puede
25
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 25.e1

Resumen

Las gónadas (ovario, testículo) producen gametos (ovocitos y

espermatozoides). Las hormonas glicoproteicas hipofisarias, la
hormona luteinizante (LH, lutropina) y la hormona estimulante del
folículo (FSH, folitropina) son gonadotropinas porque sus objetivos
son las gónadas. Otra hormona producida por el tiotrofoblasto
sincronizado de la placenta humana es la gonadotropina coriónica
humana (hCG, coriogonadotropina) y su actividad es similar a la LH.
Esta revisión describe la estructura de la proteína, la estructura del
gen y la regulación de la biosíntesis tanto de las gonadotropinas
como de sus receptores unidos a la membrana. Las funciones tanto
de las hormonas como de los receptores se cubren ampliamente,
así como las mutaciones naturales que se han identificado en los
estados de enfermedad y las terapias derivadas de su estudio.

Palabras clave

Gonadotropina,
gametogénesis,
reproducción,
estructura y función,
mutaciones, receptores
acoplados a proteína G, receptores
de gonadotropina, hormonas
glicoproteicas, ingeniería de
proteínas, transducción de señales.
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26 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción

hFSHÿ - 1 - - - - - S C mi L T
norte norte yoT Ayo yo mi k mi mi C R FC yo S yo norte T TW C A GRAMO Y CY T RD LVY k D A R k PAGS PAGS yo
q k T C T F k mi L V Y mi T V RV PAGS V C A H 68
hLHÿ 1 S R mi PAGS L R WC H
PAGS PAGS yo norte A T LA V mi k mi GRAMO C VC
PAGS yo TV norte T T CA yo GRAMO YC TPAGS RV Lq A V L L
METRO METRO PAGS PAGS PAGS q V V C T Y RDV R F mi S RL
yo C R 74
PAGS GRAMO PAGS

hCGÿ 1 S k mi PAGS L R RC R
PAGS PAGS yo norte A T LA V mi k mi GRAMO C VC
PAGS yo TV norte T T CA yo GRAMO Y C T T RV Lq V L A L
PAGS METRO GRAMO PAGS PAGS q V V C Y RDV R Fnorte mi S RL
yo C $ 74
PAGS GRAMO PAGS

hFSHÿ H 69 A D S L Y T Y V A T q C H C k C D S D S T D C T V R L
PAGS GRAMO GRAMO GRAMO PAGS SYCS F GRAMO mi k mi - - - - - - - - - - - - - - - mi k E 111
METRO
- - hLHÿ
- - - - - - - METRO

V DhCGÿ
L 75 121 V V S F V A L S C RC
GRAMO PAGS C RRS T S DC
PAGS k DH GRAMO PAGS GRAMO GRAMO PAGS PAGS LT CDH PAGS
- - - - - - - - - - - - - - - - - - -q LS - - - - - L L F GRAMO

75 145V V V SY A V A L SCq CA L C RRS T T DC

GRAMO norte PAGS k DH GRAMO GRAMO PAGS PAGS LT CDD PAGS R Fq DS S S S k A S L S SRL PAGS S DT
PAGS L P
PAGS PAGS PAGS PAGS GRAMO PAGS PAGS yo PAGS

ÿ 1 APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMG 74

75 KVENHTACHCSTCYYHKS 92

FIGURA 2.1 Secuencias de aminoácidos de la subunidad de gonadotropina ÿ humana (subunidad ÿ), hormona luteinizante (LH)ÿ, gonadotropina coriónica (CG)ÿ y
hormona estimulante del folículo (FSH)ÿ. Las secuencias de aminoácidos se obtuvieron del sitio web de Ensembl (http://www.ensembl.org/index.html ), y las subunidades ÿ
están alineadas para maximizar la homología. Los residuos idénticos, altamente conservados y semiconservados entre las tres subunidades ÿ están resaltados por los recuadros
azul, verde y amarillo, respectivamente. Todas las cisteínas participan en la formación de enlaces disulfuro en las proteínas nativas. hCG, gonadotropina coriónica humana; hFSH,
hormona estimulante del folículo humano; hLH, hormona luteinizante humana.
(Copyright 1999–2008 The European Bioinformatics Institute and Genome Research Limited, y otros. Todos los derechos reservados).

Se puede observar que las subunidades ÿ y ÿ son relativamente ricas

en residuos de Cys y que existe una homología considerable en las
subunidades ÿ.
Se han determinado estructuras cristalinas para hCG desglicosilada
parcialmente activa,5,6 hCG unida a anticuerpos glicosilada,7 una
hFSH totalmente activa parcialmente desglicosilada8 y un complejo C
parcialmente desglicosilado de una hFSH de cadena sencilla unida a
un fragmento N-terminal grande (residuos 1 a 268) del ectodominio C norte

hFSHR (ECD)9 y el complejo FSH-FSHR que contiene todo el ECD,

incluida la región bisagra que se requiere para la especificidad de la
señal.10 La Fig. 2.2 muestra las estructuras cristalinas de hCG y hFSH. norte
norte
norte

Las conformaciones de hCG y hFSH son bastante similares,

siendo cada una moléculas muy alargadas con las dos subunidades C
C
entrelazadas entre sí de forma ligeramente retorcida.
A pesar de la ausencia de una homología de secuencia sorprendente,
las dos subunidades en ambos heterodímeros tienen pliegues
similares, caracterizados por tres bucles principales, y cada subunidad
contiene un motivo de nudo de cistina, que consta de tres disulfuros
ubicados en el núcleo de cada subunidad. Las subunidades ÿ y ÿ
contienen, además de los tres disulfuros en el nudo de cistina, dos y FIGURA 2.2 Estructuras cristalinas de la gonadotropina coriónica humana
tres disulfuros, respectivamente. Una región de residuos de 20 (hCG; izquierda) y la hormona estimulante del folículo humana (hFSH; derecha).
Las estructuras5-8 muestran que las dos subunidades están muy alargadas y
aminoácidos de la subunidad ÿ, denominada cinturón de seguridad,
entrelazadas (subunidad ÿ, amarilla; hCGÿ, verde; y FSHÿ, azul), formando una
envuelve una porción de la subunidad ÿ como un cinturón de seguridad
superficie de contacto relativamente grande. Como se discute en el texto, hay varias
molecular sujeto con enlaces disulfuro. Una diferencia importante en
características interesantes asociadas con las estructuras: cada subunidad contiene
las estructuras de hCG y hFSH está en las porciones C-terminales de un motivo de nudo de cistina; la subunidad ÿ envuelve una porción de la subunidad ÿ,
los cinturones de seguridad, que exhiben conformaciones distintas. formando lo que se denomina un cinturón de seguridad (blanco); aunque tienen poca
Tanto en la hCG como en la hFSH, las dos subunidades están homología de secuencia, las dos subunidades adoptan patrones de plegamiento
asociadas en una disposición de cabeza a cola (v . fig. 2.2). Aunque similares; La hCG y la hFSH forman estructuras muy similares, pero las subunidades
no hay estructuras disponibles para LH y TSH, las similitudes de las respectivas de cada una exhiben diferencias sutiles en sus conformaciones. C, C-
estructuras de hCG y FSH generan confianza en que las terminal; N, N-terminal.

conformaciones generales de LH y TSH estarán estrechamente

relacionadas con estas estructuras conocidas. También se han
obtenido estructuras en solución para la subunidad ÿ humana
desglicosilada11,12 utilizando espectroscopia de resonancia magnética Sin embargo, la subunidad ÿ es la que sufre el mayor cambio de
nuclear. El conjunto global de estructuras determinado para la conformación. Además, los dos residuos C-terminales en la subunidad
ÿ están desordenados en la estructura cristalina de la FSH, pero en el
subunidad ÿ es similar al obtenido en las estructuras cristalinas de hCG y hFSH.
Con estructuras cristalinas disponibles para FSH8 y un complejo complejo con el receptor están completamente ordenados.
FSH FSHR ECD9 (discutido en otra parte de este capítulo), es posible
delinear los cambios conformacionales del heterodímero libre que
ocurrieron luego de la unión al receptor.
glicosilación
La forma libre de la hormona es más flexible que la forma unida. Es la Las gonadotropinas son transportadas desde el retículo endoplásmico
región C-terminal del (RE) al cis-Golgi y se someten a glicosilación.
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 27

a medida que atraviesan el Golgi llegando al trans-Golgi, para producir las
hormonas maduras. Las secuencias primarias de la subunidad humana
contienen sitios de glicosilación unidos a N (secuencia de consenso Asn-X-Ser/
Thr, donde X es cualquier aminoácido excepto prolina): dos en la subunidad ÿ
en Asn52 y Asn78, dos en la subunidad ÿ de hCG (Asn13 y Asn30), dos en
FSHÿ (Asn7 y Asn24) y uno en la subunidad ÿ de LH en Asn30. Además, la
subunidad ÿ de hCG contiene cuatro glicanos ligados a O de tipo mucina en la
serina 121, 127, 132 y 138, ubicados en el CTP (Fig.
LH, las estructuras ligadas a N biantenario tienden a terminar principalmente
en sulfatos, lo que resulta en una disminución de su vida media circulatoria en
comparación con las hormonas que contienen ácido siálico.
Esto surge de un receptor hepático que reconoce el sulfato de N-acetil
galactosamina terminal, eliminándolo rápidamente de la circulación.25 De
hecho, la ablación del gen en ratones que codifica GalNAc-4-sulfotransferasa,
la enzima responsable de LH con sulfato, resultó en un aumento de la vida
media y los niveles circulantes de LH.26

2.3), lo que resulta en una vida media más prolongada de la hCG en

comparación con la LH.4 Los restos de carbohidratos parecen ser importantes
en el ensamblaje y la estabilización de subunidades, la secreción y la vida
media circulatoria. Aunque estudios anteriores sugirieron un papel del glucano
unido a N en Asn52 en la subunidad ÿ en la activación del receptor, la
evidencia más reciente indica que el glucano actúa más como un determinante
conformacional o estabilizador de la proteína.13,14
Además, existe una creciente evidencia de que el tipo particular de glicosilación
puede influir en la actividad biológica.15-21 Es de destacar que los
oligosacáridos en la subunidad ÿ difieren de una manera específica de la
hormona, aparentemente influenciados por su compañero afín desde la
caracterización de los oligosacáridos. , liberada de la subunidad ÿ, puede
identificar la subunidad ÿ con la que estaba asociada.22-24
Estas son solo generalizaciones ya que, por ejemplo, la hFSH también
contiene glucanos triantenarios y tetraantenarios unidos a N, y algunas
subunidades ÿ de hFSH carecen por completo de estructuras unidas a
N.21,27-29 Una variedad de glicosiltransferasas son responsables de N- y O
-biosíntesis de glicanos: en particular, la sulfatación en la hipófisis requiere N-
acetilgalactosamina transferasa y sulfotransferasa, las cuales faltan en la
placenta.27,28 Además, la fucosa se encuentra a menudo en las GPH.
Como se resume, se han informado cerca de 50 glicanos ligados a N y ligados
a O diferentes en preparaciones de hCG ÿ y ÿ.30-32
Los principales glucanos ligados a N y ligados a C de las gonadotropinas se
muestran en la figura 2.3.

Los glucanos biantenarios unidos a N en la hFSH y la hCG terminan en

ácido siálico (y en menor medida en sulfato), y el número de dichos restos
Plegado y Montaje
varía de 0 a 2, lo que explica en gran parte la microheterogeneidad de estos Las investigaciones sobre las vías de plegamiento cinético de las subunidades
GPH. En de hCG llevaron a la interesante sugerencia de que el disulfuro

N-acetil-glucosamina
manosa
galactosa
Ácido siálico
Subunidad ÿ H2N norte
norte
COOH N-acetil-galactosamina
(92 aa) 52 78
SO4 SO4

norte

LHÿ H2N 30 COOH

(121 aa)

norte
norte

H2N
FSHÿ 7 24 COOH
(110 aa)

norte

O O COOH
norte

CGÿ H2N O O
13 30
(145 aa) 121 127 132 138

FIGURA 2.3 Ubicación y estructuras típicas de los glicanos ligados a N y ligados a O en las gonadotropinas. Los sitios de glicosilación en cada una de las subunidades
de gonadotropina y las estructuras representativas de los diversos glucanos unidos a N en la hormona luteinizante humana (hLH), la gonadotropina coriónica humana (hCG)
y la hormona estimulante del folículo humano (hFSH). Como se analiza en el texto, se han identificado decenas de estructuras diferentes, a menudo con presencia de fucosa;
además, algunos sitios carecen de glicosilación en varias preparaciones de gonadotropina. Se muestra una estructura representativa de los glucanos unidos a O de tipo 1 en
el péptido carboxi-terminal de hCGÿ; También se han informado estructuras de tipo 2, y algunos sitios no muestran glicosilación en algunas preparaciones de gonadotropina.
Los cuadrados azules representan GlcNAc; los cuadrados amarillos representan GalNAc; los círculos verdes representan manosa; los círculos amarillos representan
galactosa; y los diamantes morados representan ácido siálico.
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28 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
el intercambio se produce durante el proceso de maduración y la asociación
de subunidades se produjo antes de que se completara el plegamiento de
proteínas y la formación de disulfuro.33-37 Además, se postuló que la
asociación de subunidades se produjo antes de que el cinturón de seguridad
se enganchara mediante el cierre de Cys26 y Cys110 (modelo envolvente).
En contraste con estos informes, se ha propuesto un mecanismo diferente en
el que el ensamblaje de la subunidad involucraba el cierre del pestillo del
cinturón de seguridad, seguido del enhebrado del lazo ÿ 2 (modelo de
enhebrado).38-42 Otros también estudiaron los patrones de plegado de la
hCG e informaron que la asociación de subunidades ocurrió entre una
subunidad ÿ casi completamente plegada y una subunidad ÿ inmadura.43-46
Un estudio reciente sugiere que la subunidad ÿ de LH no está completamente
plegada antes del ensamblaje con la subunidad ÿ, y que la subunidad ÿ La
subunidad sirve como acompañante para facilitar la formación del nudo de
cisteína y el cierre del cinturón de seguridad.47
Además de la naturaleza heterodimérica de las hormonas, también se
han encontrado homodímeros para la subunidad ÿ de LH,48,49 y para la
subunidad ÿ.45,46,50 Queda por saber si estas formas homodiméricas de las
GPH tienen alguna bioactividad asociada. mostrado, aunque se ha informado
que la subunidad ÿ libre potencia la decidualización mediada por progesterona.51
Proteínas homólogas
Una búsqueda en el genoma humano reveló dos glicoproteínas GPA2 y GPB5
similares a las subunidades ÿ y ÿ de GPH, respectivamente52. Se pueden
formar heterodímeros entre GPA2 y GPB5, y el complejo es capaz de estimular
el receptor de TSH. Se postula que este heterodímero, llamado tiroestimulina,
actúa de manera paracrina para activar el receptor de la hormona estimulante
de la tiroides (TSHR) de la hipófisis.53
El análisis comparativo de la estructura de las subunidades GPH y GPA2 y
GPB5 sugiere que GPA2 y GPB5 no pueden formar heterodímeros estables a
baja concentración en circulación, ya que carecen de los residuos de cistina
potencialmente involucrados en la estructura del nudo de cistina y GPB5 no
posee una secuencia homóloga al asiento. belt.54 Esto sugiere un papel
paracrino, en lugar de endocrino, para la tiroestimulina. Los estudios
filogenéticos sugieren que la tiroestimulina puede ser, de hecho, una hormona
"vieja" cuyas subunidades aparecieron con la aparición de los metazoos
bilaterales hace más de 500 millones de años.52,55
En el cordado basal, el anfioxo, la tiroestimulina parece desempeñar un papel
en el desarrollo embrionario y es posible que no se requiera heterodimerización
para su actividad.55 Estudios recientes sugieren que la tiroestimulina puede
funcionar en otros tejidos de mamíferos.
En el ovario de rata, se expresa en el ovocito donde funciona como un
regulador paracrino de TSHR que está presente en las células de la granulosa
y es capaz de estimular la proliferación de células epiteliales de cáncer de
ovario a través de la transregulación del receptor del factor de crecimiento
epidérmico (EGF) ( EGFR).56,57 Otro estudio sugiere que puede regular
negativamente la formación de hueso osteoblástico durante el desarrollo
esquelético.58
Estudios de estructura-función
• Antes de la determinación estructural, se establecieron extensas
relaciones estructura-función mediante mutagénesis, lo que
finalmente confirmó la autenticidad de las estructuras cristalinas del
receptor de gonadotropina.
• Estos mutantes establecieron el requisito de postraduccional
modificaciones para el ensamblaje, secreción y actividad biológica
de las gonadotropinas.
• Los esfuerzos de ingeniería de proteínas se han dirigido a producir
formas de gonadotropinas de acción prolongada y superagonistas.
Mutagénesis dirigida al sitio
Como se analiza en otra parte de este capítulo, solo se ha identificado un
número limitado de mutaciones naturales en las subunidades ÿ y ÿ de las
GPH. Por el contrario, existe una gran cantidad de información disponible a
partir de la mutagénesis dirigida al sitio, seguida de la caracterización biológica
de las hormonas mutantes. Se han descrito pocos mutantes en los que haya
un aumento significativo de la bioactividad; la mayoría de las mutaciones no
tienen efecto o inducen una pérdida de función, interrumpiendo el plegamiento,
el ensamblaje de subunidades o la unión/activación del receptor. Las
mutaciones de ganancia de función en hCG se obtuvieron reemplazando uno
o varios residuos de aminoácidos en la región N-terminal de la subunidad ÿ
con Lys.59 Se obtuvo un aumento del doble en la potencia de hCG con un
solo reemplazo de Phe con Thr en la posición 18 de la subunidad ÿ.60 Las
formas mutantes de la subunidad ÿ que carecen del oligosacárido unido a N
en Asn52 son capaces de asociarse con la subunidad ÿ de hCG o la subunidad
FSHÿ, dando un heterodímero que se une al receptor afín pero ha disminuido
eficacia de señalización . 61 Aunque todavía es controvertido, parece que el
papel de la glicosilación ligada a N en Asn52 es estabilizar la conformación
activa del heterodímero mediante la formación de un enlace de hidrógeno con
una Tyr en la subunidad ÿ. 8
Mutaciones en la región central62-64 y en el C-terminal65,66
de la subunidad ÿ produjo mutantes que se asociaron con las subunidades ÿ
de hCG y hFSH pero mostraron una funcionalidad comprometida en la unión
al receptor.
Se ha preparado y caracterizado una gran cantidad de mutaciones de la
subunidad ÿ.67-75 Al igual que con las mutaciones en ÿ, muchas interfieren
con el plegamiento, el ensamblaje de la subunidad o la unión del receptor, y
los datos, en general, son consistentes con las estructuras cristalinas de hCG
y FSH. Sin embargo, a diferencia de los mutantes de la subunidad ÿ, no ha
habido informes de mutantes de la subunidad ÿ que conserven la capacidad
de formar heterodímeros y unirse al receptor, pero que no emitan señales.
Esto sugiere que la subunidad ÿ puede desempeñar un papel predominante
en la activación de los receptores de gonadotropina después del evento de
unión inicial.
Ingeniería de proteínas
La ingeniería de proteínas se ha utilizado para producir una variedad de
derivados de eliminación de subunidades, hormonas de cadena única y
hormonas quiméricas, con resultados bastante interesantes.
Los mutantes por deleción C-terminal de la subunidad ÿ dan como resultado
fragmentos N-terminales que retienen la capacidad de unirse a la subunidad
ÿ, pero los heterodímeros resultantes exhiben una capacidad de unión al
receptor mínima, si es que existe alguna. Varios grupos han informado sobre
mutantes por deleción en los extremos N y C de la subunidad ÿ de la hCG
,67,68,71,76 y la forma más corta que conserva una funcionalidad mínima en
el ensamblaje de la subunidad y la posterior unión y activación del receptor es
un fragmento compuesto por los residuos 8 a 100.71
Se han diseñado y caracterizado varias quimeras de GPH, que brindan
información útil sobre residuos de aminoácidos específicos involucrados en la
unión y activación del receptor.77-83
En general, estos resultados enfatizan el papel de la región del cinturón de
seguridad de la subunidad ÿ en la unión al receptor, aunque diferentes
porciones son importantes en la especificidad del receptor.
Un enfoque novedoso para estudiar las relaciones estructura-función de
las gonadotropinas involucró el diseño de hormonas de cadena única,
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores
derivado de la fusión de las subunidades ÿ y ÿ utilizando una secuencia peptídica
intermedia, o simplemente alineando los ADNc para las subunidades ÿ y ÿ y
eliminando el codón de parada de la proteína N-terminal, creando así una única
proteína contigua compuesta por ambos subunidades Los primeros informes de
una hCG unida o en yugo demostraron que la gonadotropina de cadena sencilla,
en la configuración N-hCG ÿ-subunidad-ÿ-C, era bioactiva.84,85
Posteriormente, también se encontró que proteínas de fusión similares de LH y
FSH eran bioactivas . en muchos casos con mutaciones interesantes en una o
ambas subunidades.89,90 A partir de estos estudios, se concluyó que la
configuración de la subunidad ÿ-C de N-ÿ-hCG también era bioactiva y,
sorprendentemente, que cada disulfuro de las subunidades podría eliminarse
sin pérdida de actividad.91-93 Las hormonas monocatenarias también mostraron
una mayor estabilidad y resistencia al calor in vitro, en comparación con sus
contrapartes heterodiméricas.86
Extendiendo el enfoque de unir covalentemente las dos subunidades, se
diseñaron y expresaron heterodímeros unidos por disulfuro.94-98
Estos análogos de gonadotropina corroboraron la noción de que ÿ-Asn52
contribuyó a la estabilidad del heterodímero y no estuvo directamente involucrado
en la transducción de señales,13 y también condujo a sugerencias de que el
extremo C de la subunidad ÿ no es necesario para la unión de LHR. Este último
hallazgo es consistente con la observación de que los cinco residuos C-
terminales pueden eliminarse de la subunidad ÿ sin pérdida de unión a
LHCGR.99 Esto contrasta con la observación de que las mutaciones de hFSH
ÿS85A, ÿT86A, ÿK91A o ÿ S92A en el contexto de hFSH heterodimérica solo
retuvo el 10 % o menos de la actividad de unión al receptor de hFSH. El uso de
pines gonadotrópicos de cadena sencilla, particularmente en la configuración N-
ÿ-ÿ-C, también plantea preguntas interesantes sobre el papel de la región C-
terminal de la subunidad ÿ en la FSH, donde la estructura del complejo hFSH-
hFSHR ECD muestra un gran movimiento de la subunidad ÿ en el complejo del
receptor en comparación con el heterodímero.9 Es poco probable que este
enigma se resuelva hasta que se determine la estructura cristalina de la
gonadotropina de cadena sencilla en el complejo con el receptor. De gran interés
fue el informe de que los homodímeros ÿ-ÿ de hCG de cadena sencilla se unen
a LHCGR, aunque con una afinidad unas tres veces menor que la hCG de tipo
salvaje; este homodímero diseñado no provoca una respuesta biológica y
bloquea la unión de hCG a LHCGR.100 Se diseñó un segundo antagonista de
hCG de cadena sencilla mediante la mutación de tres de los cuatro sitios de
glicosilación ligados a N que están asociados con la activación de LHCGR
(Asn13 y Asn30 en el ÿ -subunidad y Asn52 en la subunidad ÿ). Asn78 en la
subunidad ÿ, asociada con la unión al receptor, se dejó intacta. Este análogo se
comportó como un antagonista competitivo y suprimió el síndrome de
hiperestimulación ovárica (SHEO) en ratas.101
El enfoque de convertir GPH en cadenas sencillas se ha ampliado para
producir proteínas de fusión con actividades dobles y triples. Por ejemplo, una
proteína de fusión de tres dominios de la forma N-FSHÿ-hCG ÿ-subunidad-ÿ-C
exhibió actividades tanto de LH como de FSH.102-104 Curiosamente, la
gonadotropina bifuncional es secretada por las células como dos especies, una
con LHCGR y el otro con actividades FSHR.105 Esto, por supuesto, plantea la
simple explicación de que se están formando heterodímeros entre dos proteínas
de fusión. Aquí nuevamente, hasta que se pueda obtener una estructura
cristalina para estos análogos, su mecanismo de acción sigue sin estar claro.
Se encontró que una proteína de fusión de cuatro dominios, N-TSHÿ-FSHÿ-hCG
ÿ-subunidad-ÿ-C, aunque secretada de manera ineficiente, exhibe tres distintos
29
bioactividades tanto en estudios celulares como en animales completos.106,107
Estos resultados plantean preguntas intrigantes con respecto a la asociación y
conformación de subunidades, como se manifiesta en la unión y activación del
receptor. Un hallazgo muy provocativo se basó en una proteína de fusión
bifuncional de triple dominio de la forma N-FSHÿ-hCG ÿ-subunidad-ÿ-C.93 Estos
investigadores demostraron que la interrupción de la formación de heterodímeros
por mutación de Cys10-Cys60 o Cys32-Cys84 no eliminó la bioactividad y, por
lo tanto, concluyó que los contactos ÿÿ no son necesarios para la unión y
activación del receptor. Estos resultados seleccionados, junto con otros que no
se tratan aquí, indican que los GPH de cadena sencilla exhiben algunas
propiedades distintas de las de los heterodímeros. La mayor estabilidad de las
proteínas de cadena única, los antagonistas de hCG de cadena única y las
actividades duales, bioactivas similares a LH/hCG y similares a FSH, las
convierten en formulaciones interesantes como candidatas para utilidad clínica.
El enfoque de las gonadotropinas monocatenarias se amplió para producir
proteínas de fusión de hCG monocatenario con LHCGR, que cuando se
expresaban conducían a la activación constitutiva del receptor en células
transfectadas y ratones transgénicos.88,108-111 Este modelo también se utilizó
para demostrar que las fusiones proteicas de la las subunidades individuales
con LHCGR carecían de bioactividad.112
Genes y Transcripciones
• Con la excepción de la subunidad ÿ de hCG, la gonadotropina
subunidades están codificadas por un gen.
• Las mutaciones en los genes de gonadotropina descubiertas en pacientes
sintomáticos a menudo afectan el ensamblaje, la conformación y, por lo
tanto, la actividad biológica.
• Los polimorfismos en las regiones codificantes de proteínas de los genes de
la gonadotropina pueden tener un efecto perjudicial o no tener ningún
efecto, dependiendo de si el polimorfismo produce cambios en la secuencia
de aminoácidos y si el cambio en la estructura primaria afecta la función.
• Los polimorfismos en regiones no codificantes pueden afectar la transcripción
o procesamiento de ARNm que puede o no estar asociado con
condiciones clínicas.
Genes de la subunidad de gonadotropina
La subunidad ÿ común y las subunidades ÿ de LH y FSH están codificadas por
genes únicos; en cambio, la subunidad ÿ CG, expresada en primates, está
codificada por seis genes.113,114
Sin embargo, en los équidos, la subunidad ÿ CG y la subunidad ÿ LH son
productos del mismo gen.115 Se ha sugerido que las subunidades ÿ y ÿ de GPH
divergieron de un gen ancestral común hace más de 900 millones de años,113
con el gen de la subunidad ÿ experimenta duplicaciones y mutaciones para
producir la familia actual. En humanos, el gen que codifica la subunidad ÿ común
está en el cromosoma 6, el de FSHÿ está en el cromo 11 y los de LHÿ y CGÿ
están en el cromosoma 19 (http://www.ensembl.org). El gen de la subunidad ÿ
humana tiene 9,4 kb y contiene cuatro exones y tres intrones; el de la subunidad
ÿ de FSH es de 4,2 kb con tres exones y dos intrones; para la subunidad ÿ de
LH, el gen es de 1,1 kb con tres exones y dos intrones; y los de la subunidad ÿ
CG son de longitud variable.
Los genes de una subunidad ÿ de LH y seis de la subunidad ÿ de CG existen
en un grupo grande que abarca aproximadamente 52 kpb.113,114 Los seis
genes que codifican la subunidad ÿ de CG (es decir, CGB, CGB1, CGB2, CGB5,
CGB7 y CGB8) existen como repeticiones en tándem e invertidas.116 Los
genes para la subunidad ÿ CG han sido analizados
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30 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
en detalle.113,114 Cuatro de los genes de la subunidad ÿ de CG,
CGB, CGB5, CGB7 y CGB8, muestran una identidad de secuencia del
97 % al 99 %, mientras que su identidad con el gen LHB es del 92 %
al 93 %. Estas similitudes genéticas conducen a secuencias de
aminoácidos de proteínas que son 98% a 100% idénticas para los
cuatro productos génicos de la subunidad ÿ de CG y 85% idénticas
con la subunidad ÿ de LH. CGB, CGB5, CGB7 y CGB8 codifican
proteínas con una extensión carboxi terminal, la CTP, que parece
haber surgido del gen LHB por cambio de marco, lo que lleva a una
lectura completa en una región previamente no traducida.2,3,117
Transcripciones de subunidades de gonadotropina
La evidencia disponible indica transcripciones únicas para los genes
de gonadotropina, con la excepción del FSHB humano.
gen para el cual se han descrito cuatro especies de ARNm, que surgen
del corte y empalme alternativo y la utilización de dos sitios de
poliadenilación.118 La familia CGB es interesante porque los seis
genes parecen expresar transcripciones de diferentes longitudes,
aunque a veces sin producción de proteína detectable. CGB5 y CGB8
se expresan en gran medida en la placenta.113,114,119 Aunque se
expresan en la placenta,113,114
pituitaria,120 testículos,121 y cáncer de mama,122 aún no se han
identificado proteínas para los genes CGB1 y CGB2 . Los tamaños
predichos de las proteínas CGÿ1 y CGÿ2 son más pequeños que los
de la subunidad ÿ de hCG; esta observación, junto con las distintas
secuencias de aminoácidos predichas, sugiere que estas proteínas, si
se biosintetizan, pueden tener funciones muy diferentes a las de la
hCG. Utilizando ratones transgénicos que expresaban un inserto de
cósmido de 36 kb que contenía los seis genes CGB , se encontró que
las transcripciones de los genes CGB1 y CGB2 estaban presentes en
el cerebro en niveles comparables a los de los otros cuatro genes
CGB.123 El ARNm de LHB humano tiene 700 nucleótidos. de longitud,
y dependiendo de la especie, el gen CGA codifica un ARNm para la
subunidad ÿ de 730 a 800 nucleótidos.118
Mutaciones que ocurren naturalmente
Las mutaciones en los genes de la hormona gonadotropina, aunque
raras, ayudan a dilucidar sus funciones fisiológicas y a definir los
importantes dominios estructurales de las hormonas. La única mutación
informada en el gen CGA es la de un carcinoma humano, Glu56Ala,
que da como resultado una forma mutante de la subunidad ÿ que no
se asocia con la subunidad ÿ de la LH.124 Por el contrario, hay varios
informes de mutaciones en los genes que codifican las tres subunidades
ÿ de gonadotropina, lo que resulta en pérdida de función y, por lo tanto,
hipogonadismo.114,125,126
El primer informe de una mutación en el gen LHB fue el de una
mutación de sentido erróneo en un varón que presentaba pubertad
tardía e hipogonadismo.127 Este mutante condujo a un reemplazo de
Gln54 con Arg; aunque podía ocurrir el ensamblaje de la subunidad, el
heterodímero no podía unirse a LHCGR. Otros estudios mostraron que
la subunidad ÿ de LH y la subunidad ÿ de hCG con reemplazos de
Gln54 formaron heterodímeros con la subunidad ÿ, pero estos
heterodímeros exhibieron una unión reducida a LHCGR.72,75
Otra mutación sin sentido en la subunidad ÿ de LH fue la de Gly36 a
Asp, informada en un hombre con pubertad retrasada e infertilidad.128
Gly36 es parte de la secuencia CAGYC en la subunidad ÿ de LH que
es fundamental para la formación del nudo de cistina. ; presumiblemente,
un Asp en esta posición evita que se forme al menos uno de los
disulfuros.
La tercera mutación identificada fue una sustitución de GC en la
posición +1 del intrón 2 (un sitio donante de corte y empalme en 5')
que conduce a una hipotética proteína aberrante con una inserción de
residuos de 79 aminoácidos que comienza después de Met41 y un
cambio de marco en el exón 3, eliminando así el lazo del cinturón de
seguridad esencial de ÿ e importantes cisteínas.129 Se estudió a la
descendencia de padres consanguíneos que eran heterocigotos para la mutación.
Tres hermanos homocigotos presentaron hipogonadismo e infertilidad,
niveles indetectables de LH y altos niveles de subunidad ÿ libre,
mientras que sus hermanos heterocigotos eran fértiles.
Los dos hombres tenían FSH elevada y testosterona baja, mientras
que la mujer tenía valores de FSH, estradiol y progesterona en el rango
normal y experimentó un desarrollo puberal y una menarquia normales
a la edad de 13 años.
Se informó una eliminación de 9 pb en el exón 2 que resultó en la
eliminación de los residuos de aminoácidos 10 a 12 de LHÿ en un
hombre y su hermana.130 Ambos eran homocigotos para la eliminación,
mientras que otros dos hermanos no afectados eran heterocigotos. A
pesar de los niveles indetectables de LH, el suero bajo y las
concentraciones de testosterona intraticular, el hombre tenía una
espermatogénesis completa y un recuento de espermatozoides normal.
Presumiblemente, la baja actividad de la LH mutante detectada in vitro
fue suficiente para una espermatogénesis normal. La hermana pasó
por una pubertad y menarquia normales, pero posteriormente tuvo
amenorrea, infertilidad, quistes ováricos y niveles bajos de estradiol.
Un informe reciente describió una mutación heterocigota compuesta
en un varón de 31 años con pubertad retrasada, azoospermia e
hipogonadismo debido a la falta de LH.131 La primera mutación se
identificó como una deleción de 12 pb en el exón 2 del gen LHB . ,
provocando una deleción de cuatro residuos de leucina en el péptido
señal, y la segunda mutación fue una mutación de G a T en el sitio de
empalme 5' del intrón 2, lo que resultó en un empalme de ARN
aberrante. La hermana de 16 años de la paciente que albergaba las
mismas mutaciones tuvo un desarrollo puberal normal pero desarrolló
oligomenorrea. En dos hermanos con deficiencia de LH e hipogonadismo
se identificó una deleción homocigótica de 3 pb en el gen LHB que
resultó en la deleción de Lys40 en LHÿ. La subunidad ÿ de LH mutada
pudo heterodimerizarse con la subunidad ÿ, pero no fue secretada.132
Se han identificado raras mutaciones heterocigotas sin sentido en
la subunidad hCGÿ en una población del norte de Europa.114,133,134
Se identificó una variante sin sentido Val56Leu en el gen CGB5 en un
paciente con aborto espontáneo recurrente (RM), que deterioró el
ensamblaje de la subunidad pero provocó una fuerte respuesta de
señalización. 133 Una variante de Pro73Arg encontrada en cinco
individuos (tres RM y dos controles) resultó en una conformación
alterada, pero no afectó la actividad biológica. No se han identificado
individuos homocigotos para esta variante, tal vez porque tales
genotipos resultarían en el fracaso del embarazo.
Hasta la fecha, 10 pacientes con mutaciones en el exón 3 de FSHB
han sido identificados y se presentan con ausencia de desarrollo
puberal, amenorrea e infertilidad en mujeres y pubertad tardía o normal
con azoospermia e infertilidad en hombres.114,125,126 La primera
mutación reportada fue una deleción homocigota de 2 pb en el codón
61 (Val61X) causando un cambio de marco y terminación prematura
de la subunidad ÿ en una mujer de 27 años,132 y más tarde también
identificado en un hombre de 18 años con pubertad tardía.135,136
Estas observaciones fueron seguidas por un informe de una mutación
heterocigota compuesta, siendo una la mutación Val61X y la otra una
mutación sin sentido que resulta en un reemplazo de Cys51Gly.137
Otras mutaciones identificadas incluyen una mutación sin sentido
(Tyr76X),138,139 a
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mutación de cambio de marco en el codón 79 (Ala79X) causada por una
deleción de 1 pb que resultó en una terminación prematura,140 y dos
mutaciones de cambio de sentido que resultaron en reemplazos de
Cys82Arg y Cys122Arg.141,142 Estas mutaciones resultan en la pérdida
de bioactividad debido a la producción de una proteína truncada o debido
a estructura terciaria aberrante como resultado de mutaciones en los
residuos de cisteína involucrados en la estructura del nudo de cistina y
la incapacidad de asociarse con la subunidad ÿ. Se informó un caso de
hipoglucosilación, probablemente causado por una conformación
alterada, para la FSH, lo que resultó en una hormona con actividad disminuida.143Se ha informado un número limitado de variantes silenciosas de
En general, los fenotipos observados asociados con las mutaciones
naturales en LHB, FSHB y CGB son consistentes con las relaciones
estructura-actividad conocidas de las gonadotropinas, aunque la fertilidad
en los hombres no siempre parece ser sensible a algunas mutaciones de
FSH.
polimorfismos
Una variante bastante bien caracterizada en el gen LHB (V-LHÿ) aparece
en frecuencias variables en grupos étnicos de todo el mundo y resulta de
dos polimorfismos de un solo nucleótido (SNP) que se encuentran juntos
en un alelo. La sustitución de Trp8 por Arg provocó una alteración de la
inmunorreactividad de la hormona, y la sustitución de Ile15 por Thr
introduce un sitio de glicosilación adicional en la LHÿ.
subunidad.114,125,126 La V-LH demuestra una mayor biopotencia in
vitro con una vida media alterada en la circulación.144,145 Se ha
evaluado la asociación de la V-LH con varias condiciones
clínicas.114,125,126 Varios estudios han abordado la asociación entre la
V-LH y diversas condiciones clínicas tales como infertilidad, síndrome de
ovario poliquístico y trastornos menstruales. No se encontró una
asociación clara con el SOP.114
Los estudios han encontrado una asociación con la infertilidad femenina pero
no masculina.146-149
Otra variante de la subunidad ÿ de LH es un reemplazo de Gly102
con Ser, lo que da como resultado una biopotencia de LH reducida in
vitro y se ha asociado con trastornos reproductivos en algunas
poblaciones. Las mujeres Han con SOP y las portadoras de SOP tenían
niveles más bajos de LH y más altos de glucosa en ayunas,150 pero no
en una población de mujeres coreanas.151
Una variante polimórfica inusual de la subunidad ÿ de LH implica un
reemplazo de Ala por Thr de tres residuos antes del sitio de escisión del
péptido señal.125,126 Usando ensayos in vitro, se descubrió,
sorprendentemente, que la proteína madura de la variante parece menos
potente que tipo salvaje” (WT) LH en la producción de AMPc, pero más
potente en la producción de fosfato de inositol. La alteración relacionada
con SNP puede interferir con el procesamiento adecuado de la subunidad
ÿ, aunque los estudios no han abordado esta posibilidad.
Se informó un polimorfismo en el exón 3 de CGB5, lo que resultó en
un reemplazo de Val79 con Met.152. Este SNP da como resultado una
subunidad ÿ deficiente en plegamiento e interacción con la subunidad ÿ.
Se desconoce la frecuencia y consecuencias fisiológicas de esta variante;
una muestra de poco menos de 600 muestras de cuatro grupos europeos
no logró detectar un solo caso.125,126 Se han detectado otras variantes,
pero estas eran silenciosas o estaban ubicadas en regiones de
intrones.125,126 En un estudio de caso en el que se analizaron los genes
CGB5 y CGB8 en RM y control de pacientes fértiles de Estonia y
Finlandia, se identificaron 71 polimorfismos, de los cuales 48 eran
nuevos.134 Un efecto protector
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 31
contra RM se asoció con dos SNP ubicados en posiciones idénticas en
CGB5 y CGB8, y con cuatro variantes del promotor CGB5 . Un estudio
de seguimiento que incluyó una cohorte danesa con RM además de
sujetos estonios y finlandeses confirmó que dos SNP en la región
promotora de CGB5 parecían ofrecer protección contra RM, pero las
variantes en la región promotora de CGB8 no tuvieron efecto.153 Estos
polimorfismos se puede encontrar en la base de datos dbSNP (http://
www.ncbi
.nlm.nih.gov/SNP/).
FSHB.114,125,126 Recientemente, un polimorfismo del promotor de
FSHB (–211G/T) identificado en una cohorte de hombres europeos se
ha asociado con niveles reducidos de FSH en suero en heterocigotos GT
y homocigotos TT.154 Esto Se encontró que el polimorfismo era más
frecuente entre los hombres infértiles.155
Se ha demostrado que los niveles bajos de FSH en suero asociados con
este SNP se deben a la unión reducida del factor de transcripción LHX3
y a la transcripción reducida de FSHB.156
Los polimorfismos LHB y FSHB se pueden encontrar en la base de datos
SNP (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP/
snp_ref.cgi?geneId=3972 y http://www.ncbi.nlm.nih.gov/
proyectos/SNP/snp_ref.cgi?geneId=2488).
Expresión y Secreción
de las Gonadotropinas
• La producción de gonadotropina biológicamente activa está regulada en
el eje hipotálamo-pituitario a nivel de transcripción, glicosilación
y secreción.
• Las vías de señalización intracelular iniciadas por el factor trófico regulan
transcripción de las gonadotropinas.
• La glicosilación y la secreción, que en última instancia determinan la
producción de la proteína afín, dependen de la estructura primaria de
la proteína naciente adecuada y están guiadas por ella.
• La variación en la normalidad o la presencia de proteínas aberrantes
permiten el diseño de marcadores de diagnóstico o terapias útiles.
Regulación Transcripcional
Ahora se sabe que el eje reproductivo neuroendocrino, compuesto por el
hipotálamo, la pituitaria anterior y las gónadas, está regulado,
aparentemente en gran parte, por la kisspeptina, un producto de KISS1,
que actúa a través del GPCR, GPR54, ubicado en las neuronas
GnRH.157,158 tres genes de la subunidad de gonadotropina en la
hipófisis responden de manera diferente a la frecuencia y magnitud del
pulso de GnRH: LHB se transcribe preferentemente a frecuencias de
pulso de GnRH altas y FSHB a frecuencias más bajas. Aunque CGA se
transcribe preferentemente a frecuencias de pulso altas, su regulación
es menos importante, porque la subunidad ÿ se produce en exceso de
LHÿ y FSHÿ en frecuencias de pulso de GnRH tanto altas como
bajas.159,160 La regulación mediada por esteroides sexuales ocurre
principalmente a nivel hipotalámico, aunque también hay algunas
acciones directas en la hipófisis, y la evidencia reciente sugiere un papel
fundamental del sistema kisspeptina GPR54 en la acción de los
esteroides sexuales.161-163
Se ha dedicado una cantidad considerable de investigación a
comprender el mecanismo por el cual la GnRH regula la síntesis y
secreción de LH y FSH. La unión de GnRH a su receptor en los
gonadotropos activa principalmente Gÿq/11, lo que da como resultado la
activación de la fosfolipasa Cÿ, la entrada de calcio, la activación de la
proteína quinasa C (PKC) y la calcio-calmodulina quinasa
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32 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
II.164,165 La PKC media en la activación corriente abajo de las cascadas
de la proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK): quinasa regulada
por señales extracelulares (ERK1/2), quinasa N-terminal jun (JNK) y
P38.165-167 La vía MAPK también puede ser activado por la estimulación
de GnRH de Gÿs 168,169 Los mecanismos
de señalización que regulan diferencialmente LHB y FSHB
la transcripción en respuesta a las frecuencias diferenciales de los pulsos
de GnRH no se conocen bien. La evidencia actual sugiere que la GnRHR
se acopla a diferentes proteínas G para activar diferencialmente distintas
vías de señalización en respuesta a distintas frecuencias de pulsos de
GnRH.160,170,171
Nuestra comprensión de los mecanismos que median la transcripción
de los genes de gonadotropina hipofisaria proviene principalmente de
estudios sobre los genes de roedores en dos líneas celulares de
gonadotropos inmortalizados murino, ÿT3-1 y LÿT2, y más recientemente
de estudios in vivo en modelos de ratón. Se encuentran disponibles varias
excelentes revisiones recientes sobre la regulación transcripcional de estos
genes mediada por GnRH y esteroides.165,172-179
Brevemente, la activación de GnRH de las cascadas de señalización de
MAPK aumenta la transcripción de los genes tempranos inmediatos,
incluidos Egr1, Jun y Atf3, que codifican las proteínas de ADN proteína de
respuesta temprana 1 (EGR1), JUN y el factor de transcripción activador 3
(ATF3), respectivamente. EGR1, SF-1 y PITX1 forman un complejo tripartito
que se une a una secuencia promotora proximal altamente conservada
para activar sinérgicamente el LHB/ Lhb
165,175,176 La proteína activadora 1 (AP1), NR5A1, el factor nuclear Y,
PITX1 y LHX3 son algunos de los factores implicados en la expresión de
Fshb.165,172,174,176,177 La ÿ-catenina regula tanto Lhb como Fshb en
respuesta a GnRH,180,181 mientras que la factor, FOXO1, inhibe Lhb y
Fshb
transcripción en células gonadotrópicas LÿT2.182,183 Curiosamente, un
estudio reciente demostró que la ÿ-catenina no es esencial para la síntesis
de gonadotropinas in vivo.184
Activina, un miembro del factor de crecimiento transformante ÿ
(TGFÿ), es un regulador importante de la expresión del gen Fshb ,185 y el
factor de transcripción FOXL2 es necesario para la capacidad de respuesta
de la activina.186-189 La señalización de la activina está mediada por
proteínas SMAD. Los cultivos celulares y los estudios in vivo con ratones
knock-out han demostrado que SMAD 4 y FOXL2 funcionan sinérgicamente
para regular la transcripción de Fshb.172,190-193
Se ha propuesto que en la capa trofoblástica de la placenta, la
asociación de la proteína de unión a la respuesta de cAMP (CREB) y ETS2,
aumentada por la proteína quinasa A, regula la expresión de CGA . Un
elemento regulador aguas arriba en CGA
contiene sitios de unión para varios factores de transcripción, y un segundo
elemento de control, ÿ-ACT, se une a un factor GATA y la expresión de
194,195
hCGÿ está regulada por la transcripción AP2ÿ.
factores como AP2, SP1 y SP3.196-198
Regulación Postraduccional (Glicosilación)
Como se discutió anteriormente, la estructura de carbohidratos entre las
gonadotropinas es muy variable y puede ser el resultado de la
microheterogeneidad, debido a la heterogeneidad estructural de los
carbohidratos en el mismo sitio, o de la macroheterogeneidad debido a la
ausencia de una o más cadenas de glucano en los sitios de glicosilación
conocidos.199 Ahora está bien establecido que la microheterogeneidad de
carbohidratos de GPH puede variar con los estados fisiológicos.15
Los ejemplos incluyen un cambio en las estructuras de los oligosacáridos
ligados a N de hCG durante el embarazo en la diferenciación de
citotrofoblastos a sincitiotrofoblastos,19,200-203 cambios en la glicosilación
ligada a N de LH y FSH durante la menstruación.
y con el aumento de la edad,199,204 y alteraciones en los glicanos ligados
a N de la FSH durante la adolescencia en niños varones.15,18 Se ha
demostrado que la complejidad del oligosacárido de la hFSH recombinante
afecta de manera diferencial la esteroidogénesis y la expresión génica en
las células de la granulosa humana.205
Varios laboratorios han demostrado que una variante hiperglucosilada
de hCG se produce al principio del embarazo (es decir, a partir de
citotrofoblastos) y en enfermedades trofoblásticas gestacionales, donde la
hCG es secretada por el sincitiotrofoblasto.201,202,206,207
Las moléculas de hCG hiperglucosiladas han mejorado la ramificación en
oligosacáridos enlazados a N triantenarios y biantenarios inusuales y una
prevalencia del Core 2 más complejo, a diferencia del Core 1, azúcares
enlazados a O.207,208 En estudios clínicos, la hCG hiperglucosilada se
identifica mediante la unión de un anticuerpo monoclonal B152 que
reconoce específicamente los azúcares enlazados a O Core 2 en Ser
132.209,210 Se ha sugerido que además de la función fisiológica canónica
de "rescatar" el cuerpo lúteo, la hCG hiperglucosilada actúa de manera
autocrina/paracrina para promover la formación del trofoblasto.
invasión.19,20,211,212 También hay datos que sugieren que la hCG
producida por el citotrofoblasto y el coriocarcinoma tiene fracciones de
carbohidratos distintas.213 Los oligosacáridos ligados a N en la hCG del
cáncer invasivo de lunares y testículos se caracterizan por estructuras
biantenarias y triantenarias, y a menudo más glicanos fuertemente
fucosilados, mientras que las cuatro unidades ligadas a O tienden a tener
más estructuras de tipo Core-2 res.32
Las muestras de pacientes con coriocarcinoma, cáncer testicular y
lunares invasivos mostraron diferencias interesantes en su complejidad de
glicanos. Los glicanos ligados a N triantenarios aumentan en el
coriocarcinoma207 en Asn30 pero no en Asn13,32
mientras que se observaron glucanos ligados a N monoantenarios tanto en
Asn13 como en Asn30.32 Varios grupos han investigado el estado de la
fucosilación de hCG en pacientes embarazadas y con cáncer,214 con
algunos resultados contradictorios. En las neoplasias malignas, se informó
que la fucosilación aumentaba en Asn13, pero no en Asn30.32
Más recientemente, se han identificado cuatro variantes de glicosilación
de FSH hipofisarias humanas de origen natural basadas en la pérdida de
uno o más N-glicanos en FSHÿ. 29,215,216 Estas
glicoformas reciben su nombre por su masa molecular predicha de la
subunidad FSHÿ en el análisis de transferencia Western. En la Fig. 2.4 se
muestra una representación de cómo pueden verse estas formas .
La FSH completamente glicosilada que posee N-glucanos tanto en Asn7
como en Asn24 migra como una banda de 24 kDa y se designa como
hFSH24, mientras que la ausencia de ambos glucanos produce una banda
de 15 kDa (FSH15). Las variantes hipoglucosiladas individuales son una
mezcla de hFSH18 y hFSH21 y representan una pérdida de glicosilación
en Asn7 y Asn24, respectivamente. Se secretan tres variantes, hFSH18,
hFSH21 y hFSH24, y la mayoría de las preparaciones hipofisarias y
urinarias de hFSH consisten en una mezcla de las más abundantes hFSH24
y hFSH21 en una proporción de 80 :20.29,216
La hFSH15 desglicosilada no se secreta y los estudios in vivo que utilizan
ratones nulos para Fshb han demostrado que los glucanos unidos a N en
la subunidad ÿ son necesarios para un ensamblaje eficiente con la
subunidad ÿ en la pituitaria y la secreción subsiguiente.217
Se ha detectado una disminución progresiva de hFSH21 en mujeres
entre 24 y 55 años, lo que resulta en una disminución de la relación hFSH21
a hFSH24.215 Esta disminución de hFSH21 sugiere una pérdida en la
actividad biológica de la hFSH circulante, ya que la hFSH hipoglucosilada
contiene de hFSH18 y hFSH21 fue más activo in vitro en la unión al receptor
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 33

A hFSH24 BhFSH21 C hFSH18 DhFSH15

FSH FSH FSH FSH

52 78 52 78 52 78 52 78

FSH 24 FSH 21 FSH 18 FSH 15

7 24 7 24 7 24 7 24

FIGURA 2.4 Modelos de variantes de glicosilación de hFSH y estructuras de los glicanos más abundantes. El panel superior muestra modelos de (A)
hFSH24 con los cuatro N-glicanos; (B) hFSH21, que carece del glicano Asn24 en FSHÿ; (C) hFSH18, que carece del glicano Asn7 en FSHÿ; (D) hFSH15, que
carece de ambos glicanos. Se muestran los esqueletos polipeptídicos de la subunidad ÿ (verde) y FSHÿ (azul) . Los glicanos unidos a N se muestran como
esferas y representan los glicanos más abundantes. El panel inferior muestra una representación simbólica del glicano más abundante en cada sitio de
glicosilación. Los cuadrados azules representan GlcNAc; los círculos verdes representan manosa; los círculos amarillos representan galactosa; los diamantes
morados representan ácido siálico; y los triángulos rojos representan fucosa. (Figura proporcionada amablemente por el Dr. George Bousfield, Universidad
Estatal de Wichita y modificada de Davis JS, Kumar TR, May JV, Bousfield GR: variantes de glicosilación de la hormona estimulante del folículo natural. J Glycomics Lipidomi
4:e117, 2014.)

ensayos y en la estimulación de la vía cAMP y la génesis de esteroides
en células de la granulosa humana en comparación con hFSH24.199,218
Un estudio reciente sugiere que hFSH21/18 y hFSH24 pueden activar
distintas vías biológicas.219 Se ha propuesto que la pérdida de FSH
hipoglucosilada puede contribuir a la pérdida de la función ovárica
asociada con el envejecimiento.199
Regulación de la Secreción
Las vías de secreción y la polaridad de la liberación de hormonas son
diferentes para las diversas gonadotropinas. Aunque la LH y la FSH son
sintetizadas por la misma célula, la LH se empaqueta en densos gránulos
de almacenamiento,220 con secreción regulada que ocurre desde la
superficie basolateral bajo el control del secretogogo pulsátil,
GnRH.221-223 En contraste, la secreción de FSH es constitutiva,
vinculada a su síntesis, y no muestra una polaridad aparente de secreción .
225,226 y un solo residuo de
leucina en la posición 118 contribuye a la clasificación de LH a través de
la vía regulada. El heptapéptido dirige la LHÿ
subunidad a un subdominio perinuclear del RE, lo que sugiere que la
entrada en la vía secretora regulada es un evento pre-Golgi.227 Los
estudios in vivo han demostrado que la FSH que contiene el heptapéptido
se libera a través de la vía secretora regulada
vía similar a la LH y puede mejorar la eficiencia de la ovulación y
prolongar la supervivencia del folículo ovárico.228 Además, la sulfatación
de LH no juega un papel en su secreción regulada229 pero puede ser
importante para su bioactividad extracelular.26
Aunque LHÿ y CGÿ comparten una identidad de secuencia del 85 %
y son funcionalmente intercambiables, la hCG no se almacena en
gránulos, sino que se secreta de forma constitutiva en la circulación
materna en el lado apical de los trofoblastos.230 La secuencia CTP,
exclusiva de la hCG, es el determinante importante en la secreción
constitutiva,231 y los oligosacáridos ligados a O en el CTP son esenciales
para la liberación apical de hCG.232
fisiológicos y fisiopatológicos
Condiciones
La acción fisiológica aceptada de hCG es en el inicio y mantenimiento
del embarazo. En las gónadas, mantiene la funcionalidad del cuerpo
lúteo y la producción de progesterona, particularmente durante el primer
trimestre del embarazo. También interviene en múltiples funciones
placentarias, uterinas y fetales, incluida la invasión del trofoblasto, el
desarrollo de células sincitiotrofoblásticas, la angiogénesis en el
endometrio uterino, el crecimiento y la diferenciación uterinos, el
desarrollo de la placenta y la supresión localizada del sistema
inmunitario.233,234 En
Machine Translated by Google
34 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
Además, la hCG se encuentra en la hipófisis,235 pero se desconoce su
importancia fisiológica allí. Al igual que con la hCG hipofisaria, hay
informes de pequeñas cantidades de síntesis de GPH en varios tejidos
no hipofisarios y no placentarios,50,236 pero no se han atribuido
funciones específicas a estas hormonas producidas ectópicamente. Se
han delineado las principales formas de LH y hCG circulantes, junto con
sus patrones en condiciones fisiológicas normales y diversos
trastornos.204
Existe amplia evidencia que apoya la producción ectópica en una
variedad de trastornos. Es bien sabido que la hCG se expresa en formas
malignas de enfermedad trofoblástica gestacional (p. ej., mola invasiva
y coriocarcinoma).203,214,237,238
En hombres y mujeres, la hCGÿ, la hCGÿ hiperglucosilada y solo
ocasionalmente la hCG intacta se expresan en una variedad de otras
neoplasias malignas, incluidas las de mama, vejiga, colorrectal,
ginecológica, de cabeza y cuello, hematológicas, pulmonares,
neuroendocrinas, orales/faciales, pancreáticas. , próstata y cáncer
testicular.238-242 La detección de la subunidad CGÿ libre en estos
tumores malignos generalmente se asocia con un mal pronóstico.
En un análisis de la expresión génica humana de GCA, LHB y CGB
en cáncer de mama, los estudios mostraron que la mayoría de los tejidos
normales expresaban solo CGB7, mientras que CGB3, CGB5 y CGB8
se expresaban en tejidos trofoblásticos y se correlacionaban con la
transformación maligna del cáncer de mama y otros . neoplasias
malignas no trofoblásticas.122,243 Sin embargo, CGA, LHB, CGB1,
CGB2 y CGB7 humanos no estaban regulados al alza en el cáncer de
mama.
Se ha postulado un posible papel de la LH en la etiología y la
progresión de la enfermedad de Alzheimer.244-247 La reducción de la
testosterona sérica y el aumento de la LH se asocian con una disminución
de la función cognitiva y se informa que tanto la LH como la LHCGR se
expresan en el cerebro.248 -250 Es de interés la observación de que la
LH y la hCG modulan el procesamiento de la proteína precursora de
amiloide-ÿ, lo que produce el depósito del péptido amiloide-ÿ.251,252 La
ablación genética de Lhcgr en ratones transgénicos con proteína
precursora de amiloide mejoró la patología amiloide, lo que sugiere que
de LH puede promover la formación de placas de amiloide-ÿ.253
Aplicaciones Diagnósticas y Terapéuticas de
las Gonadotropinas
Las mediciones basadas en inmunoensayos de las concentraciones
séricas de gonadotropinas derivadas de la pituitaria han sido el pilar de
la monitorización de la funcionalidad del eje hipotálamo-pituitario-gonadal. 95 ) elimina células de cáncer de mama, próstata y ovario cultivadas y
La detección de hCG es el estándar de oro para el diagnóstico de
embarazo, así como para el seguimiento de tumores malignos trofoblásticos. malignos de células de Leydig y de la granulosa a través de necrosis o
Los biomarcadores especializados incluyen hCG hiperglucosilada para
la detección temprana del embarazo o sus complicaciones,209
y como un componente del cribado sérico para detectar el síndrome de
Down,210,254 junto con otros marcadores.255 La hCGÿ y la hCGÿ
hiperglucosilada se utilizan como marcadores tumorales para la detección
de neoplasias malignas.214,238 La inmunocitoquímica también se utiliza
comúnmente para evaluar la expresión de la subunidad ÿ de la hCG en
secciones de tejido sospechoso de tumor. Durante décadas se ha
reconocido que múltiples variantes de hCG están presentes en el
embarazo normal, lo que da lugar a micro y macroheterogeneidad.256
Estos incluyen hormona intacta o heterodimérica, hCG cortada, hormona
heterodimérica con roturas de enlaces en la región 43 a 48 de la
subunidad ÿ de hCG, subunidades ÿ y ÿ libres, fragmento central de la
subunidad ÿ de hCG cortada (es decir, subunidad ÿ libre con enlace
escisiones en la región 43 a 48), y el núcleo de la subunidad ÿ de hCG
fragmento, que consta de dos fragmentos unidos por enlaces disulfuro,
6 a 40 conectados a 55 a 92.202 La hCG hiperglucosilada puede
presentarse con un número similar de derivados. Algunas de estas
variantes pueden ser herramientas de diagnóstico útiles para las células
germinales y las neoplasias malignas ginecológicas.214 Por lo tanto, los
ensayos de hCG deben ser capaces de distinguir las variantes. Varias
revisiones, actas de talleres e informes han abordado este tema y los
desafíos de obtener y usar estándares apropiados.19,213,214,237,256
La preparación y adopción de estándares universales, junto con la
caracterización y divulgación completas de las especificidades de los
anticuerpos, facilitará en gran medida la estandarización de los
inmunoensayos de GPH.
Si bien la inmunorreactividad es la técnica principal para determinar
las concentraciones de hormonas en los fluidos corporales, a menudo
es necesario medir la bioactividad. Los engorrosos ensayos in vivo
anteriores para las GPH se han reemplazado en su mayoría con ensayos
de radiorreceptores y señalización en células transfectadas. Tales
mediciones proporcionan datos cuantitativos sobre la unión de hormonas
a receptores y la eficacia de la transducción de señales, pero no brindan
información sobre la vida media circulatoria y, por lo tanto, sobre la potencia in vivo.
Para esto, obviamente se requieren estudios en animales y humanos.
Los albores de la biología molecular permitieron la preparación de
gonadotropinas recombinantes expresadas en células de ovario de
hámster chino (CHO) que se utilizan en el tratamiento de la infertilidad.
La vida media circulatoria más prolongada de la hCG, atribuida a la
subunidad ÿ CTP, se ha utilizado de manera más eficaz para producir
análogos de acción prolongada de FSH y TSH, con una CTP diseñada
para el extremo C de la subunidad ÿ.257-260 Otro enfoque que ha
demostrado tener éxito en la extensión de la vida media de la FSH es
una extensión diseñada en el extremo N de la subunidad ÿ con dos sitios
de N-glicosilación.261 El análogo resultante se glicosiló según la
movilidad en SDS-PAGE y se exhibió. aumento de la vida media
circulatoria y potencia in vivo.
Recientemente, han aparecido varios informes que sugieren que la
hCG, en particular, podría usarse terapéuticamente en el tratamiento del
cáncer. Un ensayo clínico de fase I reciente ha demostrado que la
administración de hCG a pacientes posmenopáusicas con cáncer de
mama condujo a una reducción en el índice proliferativo (Ki67) y los
niveles de receptores de estrógeno y progesterona.262 En contraste, los
ratones transgénicos hembra que sobreexpresan hCG o LH exhiben
múltiples sitios de tumorigénesis.263 Un conjugado del péptido lítico,
Hecate (un residuo de péptido de 23 aminoácidos similar a la melitina
del veneno de abeja que rompe las membranas celulares), a un residuo
de péptido de 15 aminoácidos de la subunidad ÿ de hCG (residuos 81 a
reduce los xenoinjertos tumorales en ratones desnudos.264-267 tumores
muerte celular similar a la necrosis. terapias fic de tumores LHCGR-
positivos.
Receptores de gonadotropina
• Los receptores de gonadotropina pertenecen a la familia de la rodopsina de
receptores acoplados a proteína G (GPCR).
• Están compuestos mínimamente por un único polipéptido con un
un dominio N-terminal extracelular, un dominio C-terminal
intracelular y un dominio transmembrana helicoidal alfa de
siete miembros.
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• Tras la activación de la hormona, el receptor sufre un cambio
conformacional que disocia los complejos de proteínas G en
sustituyentes, que activan los efectores aguas abajo.
Proteínas receptoras de gonadotropina
Atributos estructurales de proteínas
Los receptores de gonadotropinas y el TSHR pertenecen a la subfamilia
altamente conservada de los GPCR, la llamada familia de la rodopsina,
y más específicamente al grupo ÿ de esta gran clase de GPCR, según la
clasificación filogenética propuesta por Fredriksson269. Los GPCR son
de membrana receptores que varían considerablemente en tamaño
molecular pero que comparten una topología molecular común que
consiste en una sola cadena polipeptídica de longitud variable que
atraviesa la bicapa lipídica, formando siete hélices alfa hidrofóbicas
transmembrana características (dominios transmembrana [TMD])
conectadas por secuencias extracelulares e intracelulares alternas o
bucles (EL e IL, respectivamente), con un extremo NH2 extracelular y un
dominio carboxilo terminal intracelular (Ctail). Estos receptores se unen
característicamente a una o varias proteínas G heterotriméricas que se
activan con la unión del agonista, que a su vez actúan como mediadores
de la activación de efectores (enzimas y/o canales iónicos) y señalización
intracelular. En particular, los receptores de GPH (GPHR) se caracterizan
por la presencia de un gran dominio extracelular (ECD) o ectodominio
que contiene varias repeticiones ricas en leucina (LRR), donde se
produce el reconocimiento y la unión de alta afinidad de los GPH
correspondientes.
El humano (h) LHCGR y hFSHR (http://www.ncbi.nlm
.nih.gov/gene/3973 y http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/
2492) tienen 699 y 695 residuos de aminoácidos, respectivamente (Figs.
2.5 y 2.6). Por convención, las secuencias primarias de hLHCGR y
hFSHR se numeran a partir de la metionina iniciadora de sus secuencias
precursoras obtenidas por traducción virtual de los marcos de lectura
abiertos del ADNc afín,270,271 que incluye el péptido señal. Se prevé
que los sitios más probables de escisión de los péptidos señal estén
entre los residuos 24 y 25 de hLHCGR y los residuos 17 y 18 de hFSHR,
lo que produce proteínas maduras completamente procesadas de 675 y
678 residuos de aminoácidos de largo con pesos moleculares aparentes
de 68 a 75 kDa y aproximadamente 75 kDa para las formas inmaduras y
85 a 95 kDa y aproximadamente 80 kDa para las formas maduras
expresadas en membrana completamente glicosiladas,
respectivamente.270,272
Por lo tanto, los sitios de inicio del terminal NH2 previsto para hLHCGR
y hFSHR son Leu25 y Cys18 (Figs. 2.5, 2.6 y 2.7).
Tanto el FSHR como el LHCGR exhiben un alto grado de homología
de secuencias de aminoácidos. Mientras que las secuencias de
aminoácidos ECD de los receptores de gonadotropina son
aproximadamente idénticas en un 46 %, las porciones de la secuencia
de siete dominios transmembrana (7TMD) de los receptores comparten
casi un 72 % de homología.270,272-275 Entre los tres dominios de los
receptores de gonadotropina, las regiones intracelulares exhiben la
homología de secuencia de aminoácidos más baja (~27% de identidad),
con la excepción de las porciones amino-terminales de su cola carboxilo-
terminal. El ECD de los receptores es esencial para el reconocimiento y
la unión de hormonas, así como para iniciar la activación del receptor,
mientras que el 7TMD propaga los cambios conformacionales inducidos
por la unión del agonista ortostérico al ECD. A su vez, estos cambios
conformacionales, incluidas las regiones citosólicas del receptor,
promueven la unión y
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 35
activación de efectores de señalización aguas abajo. Los dominios
intracelulares están estrechamente relacionados con el acoplamiento y
la activación de efectores, así como con el tráfico de receptores, el
desacoplamiento estimulado por agonistas y la desensibilización.
Dominio extracelular
Como se mencionó anteriormente, los GPHR se caracterizan por un gran
ECD donde se produce el reconocimiento y la unión de sus ligandos
afines. Este dominio se puede dividir en tres subregiones: (1) una región
rica en cisteína NH2-terminal; (2) una región compuesta por varias copias
de un motivo estructural rico en residuos de leucina (el LRR; 12 en
hFSHR y 9 en hLHCGR y hTSHR), que se comparte con varios otros
receptores de membrana involucrados en la selectividad de ligando y
interacciones proteína-proteína específicas (ver Figs. 2.5
y 2.6);10,276,277 y (3) un dominio rico en cisteína carboxilo-terminal.
Este último dominio muestra la llamada región bisagra, que vincula
estructuralmente el ECD rico en leucina con la serpentina, 7TMD de
GPHR que está involucrada en la unión de hormonas de alta afinidad, la
activación del receptor, la transducción de señales intramoleculares y/o
el silenciamiento de la actividad basal. del receptor en ausencia de
ligando.278 En el extremo carboxilo-terminal de esta región, existe una
secuencia de aminoácidos particularmente importante (FNPCEDIMGY)
que se comporta como una unidad agonista interna ante cambios
estructurales en el ECD provocados por la unión hormonal.279,280 El
ECD de los receptores de gonadotropina contiene varios sitios de
glicosilación putativos: seis en hLHCGR y tres en hFSHR. La única
evidencia bioquímica directa que existe en cuanto a qué sitios están
glicosilados proviene de las estructuras cristalinas de los residuos 25 a
250 de FSHR ECD. adherido al residuo N199, que sobresale de la lámina
ÿ plana hacia la interfaz de unión del receptor de hormonas. No hay
información estructural disponible para los residuos 293 y 318 en este
momento. Sin embargo, los estudios con FSHR de rata han sugerido
que el receptor humano podría estar glicosilado en dos de las tres
secuencias de consenso de glicosilación (191, 199 y 293), mientras que
en LHCGR de rata, al menos cinco o quizás los seis sitios de glicosilación
tienen se ha informado que está glicosilado.270 Aunque los carbohidratos
no juegan ningún papel en la unión de hormonas, su papel en el
plegamiento y el tráfico del receptor a la superficie celular se discutirá
más adelante en este capítulo. El ECD de los receptores de
gonadotropinas también tiene varios enlaces disulfuro (cinco en cada
receptor) que estabilizan la estructura tridimensional del ECD, incluida la
región bisagra (v . figs. 2.5 y 2.6). Sin embargo, es cuestionable si el
puente Cys interno en la región bisagra del LHCGR es esencial porque
en los monos del nuevo mundo, el LHCGR ("LHCGR tipo 2") con omisión
constitutiva del exón 10 (que codifica 27 aminoácidos en la región
bisagra) región) todavía funciona normalmente cuando es estimulado por
CG.281
La primera estructura cristalina de una gran parte de la ECD de la
hFSHR (residuos 18-268; Figs. 2.7 y 2.8) complejada con un análogo de
hFSH de cadena sencilla arroja luz importante sobre la estructura
tridimensional de esta región del receptor y su participación en Unión de
ligandos y activación de receptores.9,10
Aunque estudios bioquímicos e in silico previos282,283 habían predicho
la relación entre el ectodominio de GPHR y la unión y el reconocimiento
del agonista de GPH, no fue hasta que se descubrió la primera estructura
de la FSH en complejo con el dominio de unión a hormonas extracelulares
de la FSHR (FSHRHB).
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FIGURA 2.5 Representación esquemática de la estructura del receptor de la hormona estimulante del folículo humano (FSHR) , incluida la secuencia
de aminoácidos (círculos). La numeración de los residuos de aminoácidos incluye la secuencia líder. (A) Subdominio de unión a hormonas (HBSD)
del dominio extracelular. Los residuos de FSHR que están enterrados en la interfaz FSH/FSHR y ubicados en el sitio de unión de alta afinidad se muestran en
círculos de colores: los residuos que se muestran en verde, azul o naranja están enterrados en la interfaz receptor-ligando por FSHÿ, FSHÿ o ambas subunidades,
respectivamente. Las hebras ÿ ubicadas en la superficie cóncava (correspondiente a las repeticiones ricas en leucina [LRR]) o convexa del HBSD se indican
mediante flechas grises (esquema según la estructura de Fan y Hendrickson9 ). (B) Subdominio de especificidad de señal (Bisagra). Los elementos regulares de
la estructura secundaria de los LRR 11 y 12 se muestran como flechas grises para las hebras ÿ y como un cilindro para la hélice ÿ. El residuo Y335, que interactúa
con un bolsillo de unión ubicado en la interfaz de las subunidades ÿ y ÿ de FSH (representadas por los dibujos de forma libre de cereza y naranja, respectivamente),
está rodeado por un óvalo rojo de línea discontinua. Los residuos de aminoácidos en esta región del FSHR que están enterrados en la interfase FSH/FSHR se
muestran en azul (M265, que está oculto por FSHÿ) y gris (residuos enterrados por FSHÿ y/o FSH).289 (C) Siete transmembrana ( 7TMD ), incluidos los bucles
extracelulares (EL), los bucles intracelulares (IL) y el dominio carboxilo terminal (Ctail). Las hélices alfa del 7TMD (1 a 7) se muestran como cilindros.
También se indican los residuos de aminoácidos que están involucrados en la interacción APPL1-IL1 (K393) o que conforman motivos y secuencias importantes
involucrados en la función del receptor que incluyen: la secuencia FNPCEDIMGY involucrada en la actividad agonista interna; los motivos F(X6)LL y BXXBB (el
último motivo encontrado invertido en el extremo NH2-terminal de la Ctail) involucrados en el tráfico de receptores; motivos implicados en el acoplamiento de
proteína G y la activación del receptor (motivos ERW y NPXXY en la unión TMD3-IL2 y dentro de TMD7, respectivamente, y otro motivo BXXBB invertido en
IL3); el grupo Ser/Thr para la fosforilación del receptor por GRK 2 (grupo clase B en Ctail); y los residuos de cisteína diana para la palmitoilación representados
en garabatos rojos (C644, 646 y 672) (revisado en 498.569.572.629). Las ubicaciones de las mutaciones de pérdida de función que ocurren de forma natural
informadas hasta la fecha se muestran como círculos de color rojo, mientras que las de las mutaciones de ganancia de función se muestran como cuadrados
verdes. Las mutaciones de ganancia de función en D567, I545 y T449 conducen a la activación promiscua del receptor por otras hormonas glicoproteicas,
mientras que la mutación en N431 conduce a una desensibilización e internalización alteradas del FSHR.306 Mutación en V514 (círculo magenta en el EL2 )
condujo a una mayor expresión de la membrana plasmática del receptor y del SHO a dosis bajas de FSH.686 La ubicación de la mutación en el dominio HBSD
que conduce a la unión promiscua del ligando también se muestra en magenta (S128). La ubicación de los polimorfismos comunes A307T y N680S se indica en
amarillo, los enlaces disulfuro se muestran como líneas discontinuas rojas y los sitios de glicosilación por las estructuras en forma de árbol.
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FIGURA 2.6 Representación esquemática de la estructura del receptor de coriogonadotropina/hormona luteinizante humana (LHCGR) , incluida la
secuencia de aminoácidos (círculos). La numeración de los residuos de aminoácidos incluye la secuencia líder. (A) Subdominio de unión a hormonas
(HBSD) del dominio extracelular. Los residuos de LHCGR que probablemente están enterrados en la interfase LHCG/LHCGR y ubicados en el sitio de unión
de alta afinidad se muestran en círculos de colores: los residuos que se muestran en verde, azul o morado probablemente estén ocultos en la interfase receptor-
ligando por la ÿ, ÿ o ambas subunidades de la hormona luteinizante (LH) o la gonadotropina coriónica humana (hCG), respectivamente. (B) Subdominio de
especificidad de señal (Bisagra). El residuo Y331, que interactúa con un bolsillo de unión ubicado en la interfaz de las subunidades ÿ y ÿ de la hormona
luteinizante/gonadotropina coriónica (LH/ hCG) (representadas por los dibujos de forma libre de color cereza y azul, respectivamente) está rodeado por un
patrón roto . línea ovalada roja (esquema preparado por analogía con la estructura tridimensional informada del ectodominio FSHR en complejo con
FSH9,10,289). También se muestra la secuencia FNPCEDIMGY involucrada en la actividad agonista interna. (C) Siete dominios transmembrana (7TMD),
incluidos los bucles extracelulares (EL), los bucles intracelulares (IL) y el dominio carboxilo terminal (Ctail). Las hélices alfa del 7TMD (1 a 7) se muestran como
cilindros. El esquema también muestra la ubicación de algunos motivos y secuencias importantes implicados en la función del receptor, entre ellos: el motivo
F(X6)LL implicado en el tráfico de receptores desde el retículo endoplásmico hasta la membrana plasmática; motivos implicados en el acoplamiento de proteína
G y la activación del receptor (motivos ERW y NPXXY en la unión TMD3-IL2 y dentro de TMD7, respectivamente, y el motivo BXXBB invertido en IL3); los
residuos de cisteína diana para la palmitoilación (C643 y C644) y los residuos implicados en el tráfico postendocítico (indicados con un asterisco). Las
ubicaciones de las mutaciones de pérdida de función que ocurren de forma natural informadas hasta la fecha se muestran como círculos de color rojo, mientras
que las de las mutaciones de ganancia de función se muestran como cuadrados verdes; los polimorfismos comunes se muestran como círculos de color azul
claro. El enlace disulfuro entre EL1 y EL2 se muestra como una línea discontinua roja y los sitios de glicosilación por las estructuras en forma de árbol.
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38 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción

Región rica en cisteína N-terminal

hLHR 25 LREA LC - mi PAGS C norte C V PAGS D GRAMO

- - - - - - - A L RC PAGS GRAMO
- PAGS T A GRAMO L T R L S L A Y L PAGS V k VI PAGS S q A F R GRAMO L norte mi V yo k yo mi yo S q yo D 85
S
hFSHR 18 C H R yo C HC S norte R V F LC q mi S k V T mi 1 PAGS S D L PAGS R norte A yo mi L R F V L T k L R VI q k A FS GRAMO GRAMO F GRAMO D L mi k yo mi yo S q norte D 82

hLHR 86 L mi R yo mi A norte A F D norte L L norte L S mi yo L yo

q norte T k norte L RY yo mi PAGS GRAMO A F yo norte L PAGS GRAMO L k Y L S yo C norte T GRAMO yo R k F PAGS D V T k V F S S mi S F L mi norte yo yo 155

hFSHR 83 L mi V yo mi A D V F S norte L PAGS k L H mi yo R yo mi k A norte norte L L Y yo norte PAGS mi A Fq norte L PAGS norte Lq Y L L yo S norte T GRAMO yo k H L PAGS DV H k H S - L q k V L L D yo yo 151

Región motivo rico en leucina

hLHR 156 C D norte L H yo T T yo PAGS GRAMO norte A F O GRAMO METRO norte norte mi SV T L k LY GRAMO norte GRAMO F mi mi V q S H A F norte GRAMO TT LT S L mi L k mi norte V H L mi k METRO H norte GRAMO A FR GRAMO A T GRAMO PAGS K 255
hFSHR 152 q D norte yo norte yo HT yo mi R norte S F V GRAMO L S F mi SV yo LW L norte k norte GRAMO yo
q mi yo H C A F
norte norte GRAMO Tq LD mi L norte L S D norte norte norte L mi mi L PAGS norte D V FH GRAMO A S GRAMO PAGS 221

hLHR 226 T L D yo S S T k L q A L PAGS S Y GRAMO L mi S yo

q R L A T S SY S L k k L yo PAGS S R mi T FV norte L L mi A T LTY PAGS S H C CA FR norte L PAGS T k mi O norte F S H 295
S
hFSHR 222 yo L D yo S RT R H S L yo PAGS S Y GRAMO L mi norte L k k L RA R S T Y L k k L norte PAGS norte L mi k LV A L METRO mi A S LTY PAGS S H C CA FA norte W R Rq yo S mi LH PAGS yo 291

Región bisagra

hLHR 296 yo S mi norte F S k q C mi S T V R k V norte norte k T LY S S METRO L A mi S - - - - - - mi LS GRAMO W DY mi Y GRAMO F C L PAGS k T PAGS R - C A PAGS mi PAGS D A F norte PAGS C mi D yo METRO G 358
hFSHR 292 C norte k S L R q mi V D Y
yo T q T R METRO GRAMO q RSS L A mi D norte mi S SY S R GRAMO F D METRO T Y T mi F D Y D L C norte mi V V D VT C S PAGS k PAGS D A F norte PAGS C mi D yo METRO 361

TM-1 IL-1 TM-2 EL-1

hLHR 359 Y D F L R V L yo W L yo norte yo L A yo METRO GRAMO norte METRO T V L F V L L T S RY k L T V PAGS R FL METRO C norte L S FA D FC METRO GRAMO LY L L L yo A SV D S q T k q Y GRAMO N 428
hFSHR 362 Y norte yo L R V L yo W F yo S yo L A yo T GRAMO norte yo yo V L V yo LT T S q Y k LT V PAGS R FL METRO C norte LA FA D LC yo GRAMO yo Y L L L yo A SV D H T k Sq Y yo N 431

TM-3 IL-2 TM-4

hLHR 429 H A yo D W q T GRAMO S GRAMO C S T A GRAMO F FTV FA S mi L S V YT LT V yo T L mi R W H T yo T Y A yo H L D q k L R L R H A L yo yo METRO L GRAMO GRAMO W L F S S L yo A 498
hFSHR 432 Y A yo D W q T GRAMO A GRAMO C DA A GRAMO F FTV FA S mi L S V YT LT A yo T L mi R W H T yo T H A METRO q L D C k V q L R H A AS V METRO V METRO GRAMO W yo F A F A A un 501

EL-2 TM-5 IL-3

hLHR 499 METRO L PAGS LV GRAMO V S norte Y METRO k V S yo C F PAGS METRO DV mi TT L S q V Y L T L L yo yo yo norte V VA F F yo yo C A C Y yo k yo Y FA V R norte PAGS mi L METRO A T norte k DT k yo A 568
hFSHR 502 L F PAGS yo F GRAMO yo S S Y METRO k V S yo C L PAGS METRO D yo D S L S q LYV S L LV L
PAGS METRO norte V L A F VV yo C GRAMO C Y yo H yo Y LT V R norte PAGS norte yo V S S S S DT R yo 571

TM-6 EL-3 TM-7 Hélice 8

hLHR 569 k k METRO A yo L yo F T D FT C METRO A PAGS yo S FF A yo S A A F k V PAGS L yo T V T norte S k V L LV L F Y PAGS yo norte S CA norte PAGS F LY A yo F T k T F q R D F F L L L 638
hFSHR 572 k R METRO A METRO L yo F T D F L C METRO A PAGS yo S FF A yo S A S L k V PAGS L yo T V S k A k yo L LV L F H PAGS yo norte S CA norte PAGS F LY A yo F T k F R R D F F L L 641 norte yo

hLHR 639 S k F GRAMO C C k R R A mi L Y R R D F S AY T S C k norte norte GRAMO FT GRAMO S norte k PAGS S q S T L k LS T L H C q GRAMO TA L L D k T
KhFSHR 642 S k C GRAMO C Y mi METRO q A q yo Y R - - T mi T S S T V H T H norte PAGS R norte GRAMO H C S S A RVT S S T Y
PAGS L V GRAMO yo PAGS L S H L A q N RY TEC

FIGURA 2.7 Alineación de la secuencia de aminoácidos del receptor de la hormona luteinizante/ coriogonadotropina humana (hLHCGR) y el receptor
de la hormona estimulante del folículo humano (hFSHR). Las secuencias de aminoácidos se obtuvieron de un sitio web público (http://www.ensembl.org/
index.html ). Los límites de las tres regiones distintas del dominio extracelular discutido en el texto (región rica en cisteína N-terminal, región con motivos ricos
en leucina y región bisagra) están marcados con flechas verdes, rojas y verdes, respectivamente. Las siete hélices transmembrana (TM) y la hélice
citoplasmática putativa 8 están delimitadas por recuadros negros y etiquetadas como TM-1 a TM-7 y hélice 8, respectivamente.
Los tres bucles extracelulares (EL) y los tres intracelulares (IL) que conectan las regiones transmembrana están etiquetados como EL-1 a EL-3 e IL-1 a IL-3,
respectivamente. Los residuos idénticos entre los dos receptores se muestran con recuadros de color azul claro. Las secuencias consenso para la glicosilación
ligada a N se muestran con recuadros de color verde claro. La tirosina que participa en la formación de dímeros para el FSHR y se conserva en el hLHCGR se
muestra en amarillo. Las tirosinas conservadas en la región bisagra que pueden estar sulfatadas se muestran en violeta claro. Las cisteínas conservadas que
se cree que están palmitoiladas se muestran con el recuadro verde. Los residuos que están altamente conservados entre la familia de receptores acoplados a
proteína G rodopsina/ÿ2-adrenérgicos se muestran en marrón. (Copyright 1999–2008 The European Bioinformatics Institute and Genome Research Limited, y
otros. Todos los derechos reservados).

se estableció9 que esta relación estaba plenamente documentada; receptor con carga y dominancia estereoquímica dictando
esta estructura, sin embargo, no incluía la región bisagra, que habíaespecificidad; y, lo que es más importante, que los carbohidratos no
sido considerada como una estructura separada esencial para la participan en la interfaz de unión de la estructura FSH-FSHRHB,
activación de FSHR, como lo habían sugerido los estudios sino que son secuestrados en la periferia del complejo.9,288 Una
bioquímicos.284-287 La estructura de Fan-Hendrickson mostró que comparación de la estructura cristalina de la hFSH8 libre con la de
hFSH se une a hFSHRHB como un “ apretón de manos”, como la hormona unida al receptor9 también reveló que las estructuras de
predijeron previamente los estudios in silico;275 que la mayoría de la hFSH libre y unida son bastante similares, pero la hormona es
las hebras ÿ en la superficie interna participan en la unión de FSH; más rígida cuando se une al receptor, quizás porque la estructura
que ambas subunidades hormonales están implicadas en la especificidadde
delalahoja
unión al
ÿ del
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores
FIGURA 2.8 Estructura cristalina de la hormona foliculoestimulante
humana desglicosilada (hFSH)/FSHRHB. El dominio de unión a hormonas
del receptor es de color magenta. La subunidad beta es de color azul y la
subunidad alfa es de color verde. Los residuos de carbohidratos se modelaron
en la subunidad alfa (amarilla) y la subunidad beta (verde). La estructura 1XWD
se obtuvo de la base de datos de proteínas.
El dominio extracelular del receptor es rígido. El cambio más obvio
en la hormona está en el extremo carboxilo de la subunidad FSHÿ,
que se entierra en la interfaz del receptor donde forma contacto con
los residuos del receptor que están altamente conservados entre los
tres GPHR.9
Más recientemente, se determinó la estructura cristalina de la
FSH unida con todo el ectodominio FSHR (FSHRED) (Fig. 2.9).10
La estructura describía más claramente el papel del ECD hFSHR (y
también de otros GPHR) en la unión del ligando y, más importante,
la activación del receptor. La nueva estructura sugiere que la FSH
es inicialmente reclutada por la FSHRHB9 previamente descrita a
través de interacciones de alta afinidad entre la gonadotropina y la
superficie cóncava de los LRR 1 a 8. Sin embargo, la interfaz entre
la FSH y la FSHRED es más amplia que la identificada previamente
en la estructura FSH-FSHRHB debido a la presencia de sitios de
interacción secundarios. En consecuencia, la unión de FSH al FSHR
en el dominio de unión a hormonas provoca alteraciones
conformacionales en el bucle L2ÿ (V38ÿ a Q48ÿ) de FSH que dan
lugar a interacciones entre los residuos de este bucle y los LRR 8 y
9, así como a interacciones de residuos de FSHR ubicado en la
región bisagra (discutido más adelante) con residuos en ambas
subunidades de FSH. La especificidad del FSHR por su ligando está
determinada por varios residuos, incluidos L55, E76, R101, K179 e
I222, entre los cuales L55 y K179 son importantes para distinguir
entre LH, hCG y FSH, debido a su interacción con el "cinturón de
seguridad". ” de FSHÿ, mientras que los otros residuos dictan
especificidad para TSH.10,289 Un mapa detallado de
39
La interacción entre los residuos de FSH y FSHED se muestra en
la Fig. 2.10.
La estructura FSHR ECD identificó la región bisagra (o
subdominio de especificidad de señal [SSSD]) como parte integral
del ECD (ver Fig. 2.5); la estructura determinada también confirmó
que esta región en particular juega un papel esencial en la activación
del receptor provocada por la mutación, como lo habían indicado
estudios bioquímicos anteriores sobre FSHR y TSHR.274,284,290-292
De hecho, estos y estudios bioquímicos más recientes280 sugieren
fuertemente que el ECD de los GPHR actúa como un agonista
inverso atado, que cambia a un agonista al unirse al ligando (es
decir, la región bisagra desocupada inhibe la activación del receptor)
y la activación del agonista interno. Unidad de secuencia FNPCED
IMGY ubicada en el carboxi-terminal de la región bisagra (véanse
las Figs. 2.5 y 2.6). La región bisagra del FSHR lleva un residuo Tyr
sulfatado (Y335; Y331 en el hLHCGR) que interactúa con un bolsillo
de unión ubicado en la interfaz de las subunidades ÿ y ÿ de FSH y
formado a través de cambios conformacionales en el ligando que
ocurren después de la unión. al subdominio de unión a hormonas
(v . fig. 2.5).
El Y335 sulfatado se encuentra justo después de un bucle de
horquilla rígido, que se cree que se levanta cuando Y335 se une al
bolsillo ÿ-ÿ; Se cree que este cambio del bucle desbloquea los
efectos inhibidores del bucle en el 7TMD, lo que conduce a cambios
conformacionales en el último dominio y, finalmente, a la activación
del receptor. Esta región agonista inversa anclada en el ECD se
había asignado previamente a los segmentos del bucle en horquilla
296 a 331 del receptor.284 Como parte de este proceso, una hélice
corta fija formada por los residuos S273 a A279 (S277 y R283 en el
hLHCGR) rota, funcionando como un pivote, contribuyendo
adicionalmente al cambio conformacional del FSHR SSSD. La
importancia de este movimiento helicoidal en la activación de FSHR
se destaca por el hallazgo de que la sustitución de los residuos
S273 y S277 en hFSHR y hLHCGR, respectivamente, con residuos
hidrófobos no polares (p. ej., mutantes S273I y S277I) conduce a la
activación constitutiva de la 641 Además, el enlace disulfuro C275-
C346 (ver Fig. 2.5; C279-C343 en el hLHCGR) sujeta la última hebra
ÿ (LRR12) a la hélice corta formando un cuerpo rígido. Mientras
tanto, el puente disulfuro C276-C356 (C280-C353 en hLHCGR) une
esta hélice a los últimos residuos antes del primer TMD. Debido a
estas limitaciones, el movimiento del bucle en horquilla que se
produce tras la unión del ligando podría influir directamente en la
conformación de la hélice 1 de TMD, promoviendo así la
reorganización dentro de los TMD restantes, lo que en última
instancia conduce a la activación del receptor.
Dada la similitud entre las estructuras de GPH y GPHR, es muy
posible que todos los GPHR compartan este proceso de
reconocimiento de dos pasos (reclutamiento de ligando por parte de
HBSD seguido de acoplamiento de tirosina sulfatada de SSSD:
Y335 en FSHR, Y331 en hLHCGR e Y385 en el TSHR), aunque con
algunas diferencias en los arreglos espaciales cuando hLH y hCG
interactúan con el residuo Y331 sulfatado en el hLHCGR en
comparación con la interacción hFSH con Y335.293 De hecho, la
mutación de GPHR en este residuo crítico de tirosina sulfatada
condujo a la pérdida de sensibilidad de sus correspondientes ligandos.285,286,29
Además, las sustituciones en los residuos de aminoácidos ubicados
debajo del bolsillo de unión de tirosina sulfatada (ÿPhe74Glu) o en
el exositio potencial (ÿLeu73Phe) aumentaron la señalización de los
mutantes de hFSH, quizás al forzar el bucle en horquilla hacia arriba
en la parte superior del bolsillo.10 Aunque ambos LH y hCG se unen
al mismo receptor, diferencias en la unión de hLHCGR, activación,
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40 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción

Glicano-N52
V57

Y58 Y110
2
T75
E87
T60

R62 L73 E84

R59
D71

3
H68

B
FIGURA 2.9 Trímero de ectodominio de hormona estimulante del folículo (FSH)-FSHR (FSHRED) . (A) Vista superior del complejo trimérico. Las subunidades ÿ
y ÿ de FSH se muestran en cintas verdes y gris claro, respectivamente, mientras que FSHRED se muestra en magenta. Los átomos de oxígeno en la cadena lateral
del Y335 sulfatado se representan como bolas de color rojo. Los átomos de carbohidratos en N52ÿ se muestran como bolas amarillas. Recuadro: una región
ampliada muestra las interacciones detalladas entre FSH y FSHRED en la interfaz del trímero. (B) Modelo teórico de una sola molécula de FSH completamente
glicosilada que se une a un trímero de FSHR, visto desde arriba. Para mayor claridad, se omite la glicosilación, excepto para N52ÿ de la hormona. El trímero del
receptor se muestra como una superficie magenta . La cadena ÿ de FSH se muestra como una cinta verde, la cadena ÿ como una cinta azul y los carbohidratos como bolas amarillas.
(De Jiang X, Dias JA, He X: Biología estructural de las hormonas glicoproteicas y sus receptores: información sobre la señalización. Mol Cell Endocrinol 382:424–
451, 2014, con autorización de Elsevier).

y la señalización295,296 se han sugerido sobre la base de modelos
de homología y mutagénesis dirigida al sitio en la región bisagra,
específicamente en el exón 10,293,297 específico de primate, que
es esencial para la activación completa de LHCGR por hLH pero no
por hCG.281 En este sentido , es importante tener en cuenta que la
secuencia flanqueante carboxilo terminal del bucle L2ÿ (que participa
en la unión de hLH y hCG a la región bisagra de hLHCGR) difiere
entre hLH y hCG con respecto a los residuos de prolina, lo que lleva
a diferencias en la interacción entre hLH y hCG con el Y331.293
sulfatado
También se ha resuelto la estructura cristalina de una gran región
del ECD del TSHR en complejo con un autoanticuerpo del TSHR298.
Aunque el número de LRR es diferente entre el TSHR y el FSHR, la
estructura general de sus correspondientes ECD es muy similar. 299
Curiosamente, la superficie de TSHR que se une al autoanticuerpo
es notablemente similar a la superficie de FSHR que se une a
FSH.299,300
Un matiz interesante es la promiscuidad de hFSHR (y hTSHR
también, pero no hLHCGR) para la especificidad del ligando, que
ocurre con modificaciones estructurales en el ECD causadas por
mutaciones particulares (véanse las Figs. 2.5 y 2.11B), un fenómeno que puede
tener importantes consecuencias en el campo clínico. Los pares
GPH GPHR han evolucionado de tal manera que un número limitado
de residuos tanto en el dominio del "cinturón de seguridad" del
ligando como en los LRR del receptor en el dominio de unión a la
hormona participan en interacciones electrostáticas en la interfaz de
la hormona del receptor para definir la unión y la especificidad. .
Debido a las similitudes estructurales entre el GPH y el GPHR, es
concebible que pueda ocurrir una "activación cruzada" de un GPHR
dado por otro ligando que no sea su cognado, aunque con una baja
afinidad de unión, sin desencadenar la activación del receptor
detectable basal en condiciones fisiológicas. condiciones. Por lo
tanto, no sorprende que las sustituciones en residuos clave que
directa o indirectamente participen en la interacción del receptor con
su ligando afín puedan disminuir la discriminación del ligando
relacionado estructuralmente, dando como resultado la interacción
del receptor alterado con GPH diferente a su propio afín. Este es el
caso, por ejemplo, de la mutación Ser128Tyr en el hFSHR (ver Fig.
2.5), que conduce al SHO relacionado con el embarazo.301 En su
forma grave, el SHO puede ser potencialmente mortal debido a la
mayor capacidad de respuesta del FSHR a hCG, que circula a niveles
muy altos durante el primer trimestre del embarazo.302 En este particular
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 41

Y103
LRR1
L55 L99
LRR2
D81 k45 r42
K51
LRR3 E76 R97
K104 R101
LRR4 V96
Y124 D93
D90
LRR5
D153 Y88 S89
K91
LRR6 D150

LRR7 K179

LRR8
I222
LRR9

P45
LRR10

FSHRHB FSH

FIGURA 2.10 Ilustración esquemática de la interacción detallada entre la hormona estimulante del folículo (FSH) y el receptor de FSH (FSHR )
interfaz. Los residuos de contacto del dominio de unión a hormonas del FSHR (FSHRHB) se muestran como puntos amarillos, los de FSHÿ como puntos rojos y los
de FSHÿ como puntos azules. La columna del medio resume las interacciones específicas de la cadena lateral entre FSH y FSHRHB. Las interacciones que
contribuyen a las afinidades comunes entre todos los miembros de la familia de la hormona glicoproteica (GPH) y el receptor de GPH (GPHR) se muestran como
círculos verdes (para interacciones carga-carga) o recuadros (para contactos atómicos no cargados), y están conectados por las líneas verdes vuelven a los puntos
amarillos en FSHR o los puntos rojos o azules en las subunidades ÿ o ÿ de FSH , respectivamente. Las interacciones que contribuyen a la especificidad se muestran
como círculos o recuadros rosados o rojos, y están conectadas por líneas rojas a los residuos punteados en FSHR y FSH. LRR, repeticiones ricas en leucina. (De
Jiang X, Dias JA, He X: Biología estructural de las hormonas glicoproteicas y sus receptores: información sobre la señalización. Mol Cell Endocrinol 382:424–451,
2014, con autorización de Elsevier).

EL1 N431I
EL3
EL2 EL1
NH2
EL3

TM7 NH2
TM6
TM3 TM2
TM6 EL2
TM1
C581R TM4 T449A/I
TM5 L368P TM2 TM3 TM5
D578G/A/E/H TM1
A373V TM6 TM4
L457R C617Y
I542L T577I I545T
I575L M398T TM7
M571I
IL1
A572V
IL1
A568V IL2 TM6 hélice 8 D567G/N
IL2
D564G IL3
COOH IL3
COOH
A B
FIGURA 2.11 Modelos moleculares de los siete dominios transmembrana del receptor de la hormona luteinizante/coriogonadotropina humana (A) y el
receptor de la hormona estimulante del folículo humano (B), que indican las posiciones de las mutaciones activadoras naturales (esferas verdes). Las
mutaciones interrumpen el estado inactivo o estabilizan la conformación activa del receptor. Para mayor claridad, se omiten el ectodominio y Ctail. (De Ulloa-Aguirre
A, Zarinan T, Dias JA, Conn PM: Mutations in G protein-coupled receptors that impact receptor Trafficing and Reproductive Function. Mol Cell Endocrinol 382:411–
423, 2014, con permiso de Elsevier Inc.)

mutación, el reemplazo SerÿTyr permite que hFSHR forme puentes de
hidrógeno con ÿArg95 de hCG, lo que conduce a la activación del receptor.
Un panorama diferente se observa en el caso de mutaciones en el 7TMD,
que conducen a la activación constitutiva del FSHR y la unión promiscua
concomitante de hCG y/o TSH, como se discutirá más adelante.
Asas extracelulares
Los EL, o exoloops, de GPHR transducen la señal generada por las
interacciones ligando-ECD a las hélices transmembrana, ya sea a través
del contacto hormonal directo y/o modulando las interacciones entre
dominios entre la región bisagra y el TMD. De hecho, EL1 y 3 están
expuestos a solventes.
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42 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
y accesible a la hormona gonadotropina, lo que representa sitios de unión
secundarios potenciales para la gonadotropina, específicamente en las
puntas de sus subunidades ÿ en el estado unido, como lo respaldan los
estudios estructurales en el FSHR.303,304 Además, según estudios
mutagénicos y funcionales y el teórico 7TMD modelo de hFSHR propuesto
por Jiang et al.289, parece que las EL interactúan con el bucle en horquilla
de la región bisagra para desencadenar la activación de FSHR;
aparentemente, la elevación del Y335 sulfatado al bolsillo de unión de FSHÿ/
ÿ (Fig. 2.5B) libera los exobucles sujetos a bisagra, lo que libera la influencia
inhibidora del ECD en la activación del receptor.289 En consecuencia, las
mutaciones en los residuos ubicados en hFSHR y hLHCGR ELs 1 a 3,
además de alterar el tráfico intracelular del receptor,305,306
también puede atenuar la unión del agonista,307-309 alterar la transducción
de la señal estimulada por la hormona,308-313 o provocar la activación
constitutiva del receptor.306 La relación entre los exobucles de los receptores
de gonadotropina y la región bisagra está respaldada por estudios sobre el
TSHR, en qué residuos particulares (p. ej., Tyr563 y Lys565 en el exoloop 2
[Tyr511 y Lys513 en el FSHR, y Tyr508 y Lys510 en el LHCGR]) son
cruciales para la activación del receptor estimulado por ligando.273,314
Dominios transmembrana
Como se describió anteriormente, las hélices ÿ que forman el 7TMD de los
receptores de gonadotropina están unidas por tres IL y EL alternantes (v .
figs. 2.5 y 2.6). Aunque falta una estructura tridimensional del 7TMD de los
GPHR, ahora se ha resuelto la estructura tridimensional de varios otros
GPCR con dominios extracelulares cortos (ver también http://gpcr.usc.edu),315
y es probable que el TMD de los receptores de gonadotropina sea muy
similar, en particular entre la subfamilia de GPCR similar a la rodopsina/
receptor adrenérgico (AR) ÿ2 . Los residuos de TMD que están muy
conservados en esta subfamilia de GPCR se destacan en la Fig. 2.7. Ambos
receptores de gonadotropina exhiben los motivos generales ERW y NPXXY
(en la unión TMD3-IL2 y dentro de TMD7, respectivamente), que son
características comunes de la subfamilia GPCR similar a la rodopsina y
juegan un papel crucial en la activación del receptor. Además, la importancia
de los cambios conformacionales en el 7TMD en la activación del receptor
se enfatiza por el hecho de que la mayoría de las mutaciones naturales que
conducen a la activación constitutiva de los GPHR se ubican en este dominio
del receptor (ver Figs. 2.5, 2.6 y 2.11). 316 Además, varios residuos de
aminoácidos en la cara citoplásmica del 7TMD de los receptores de
gonadotropina (es decir, en las IL) también desempeñan papeles importantes
como interactuadores con efectores y adaptadores involucrados en la
señalización intracelular y el procesamiento posendocitario (discutido más
adelante).317-322
Dado que actualmente no hay datos estructurales disponibles para el
receptor de gonadotropina 7TMD, solo a través del modelado de homología
basado en datos de modelado biofísico, estructural y computacional de otros
GPCR ha sido posible explorar los mecanismos moleculares que favorecen
la activación del receptor y la propagación de la señal de activación del
7TMD. a los dominios intracelulares. En particular, tres estructuras
demostraron ser particularmente cruciales para comprender el mecanismo
de activación: una forma de opsina sin ligando cocristalizada con el extremo
carboxilo terminal de la subunidad ÿ de la proteína Gt visual heterotrimérica,323
un RA-ÿ2 unido a un agonista estabilizado en la conformación activa de un
nanocuerpo que imita una proteína G,324 y un RA-ÿ2 unido a un agonista
co-cristalizado con proteína Gs heterotrimérica (Gÿs-ÿ1ÿ2).325
Sobre la base de estas estructuras, la activación estimulada por agonistas
parece conducir a un conjunto de reordenamientos estructurales comunes.326
Primero, la parte extracelular del paquete transmembrana se ve inicialmente
afectada por los cambios estructurales locales inducidos por el agonista: (1)
una pequeña distorsión de TMD5; (2) reubicación de TMD3 y TMD7; y (3)
reorganización de TMD5 y TMD6. Al mismo tiempo, se produce un
reordenamiento de un grupo de residuos hidrofóbicos y aromáticos
conservados llamado "interruptor de transmisión" más profundo en el núcleo
del receptor (que involucra los residuos 6.48, 6.44, 5.50, 5.51 y 3.40,† ,
numeración genérica de aminoácidos de acuerdo con el la nomenclatura de
Ballesteros y Weinstein327), lo que lleva a un reordenamiento en la interfaz
TMD3-TMD5 y a la formación de nuevos contactos no covalentes en la
interfaz TMD5-TMD6.328 Muchos de los residuos involucrados en este
cambio de transmisión están altamente conservados en la familia de GPCR
de rodopsina, lo que sugiere que es probable que constituyan una
característica común de la activación de GPCR y ahora se analizan en el
contexto de la estructura primaria de FSHR. Por lo tanto, los cambios locales
se traducirían en cambios conformacionales helicoidales a mayor escala que
ocurren en el lado citosólico,326 lo que resulta en reordenamientos de TMD5
en su lado citoplasmático329 asociado con una modificación de la interfaz
TMD5-TMD6, lo que produce la reubicación a gran escala del lado
citoplasmático. de TMD6.330 Como resultado, se abre la hendidura necesaria
para la unión de la subunidad Gÿ. Los residuos de IL2 y el extremo
citoplásmico de TMD3 (es decir, el residuo de arginina de la secuencia ERW
conservada en los receptores de gonadotropina; véanse las Fig. 2.5 y 2.6)
participan en la interacción con la proteína G después de la activación.324
Específicamente, como consecuencia de activación del receptor, el puente
salino entre el residuo 3.5† (que corresponde a Arg467 y Arg464 en hFSHR
y hLHCGR, respectivamente) y el residuo 6.30†
(Asp567 y Asp564 en el TMD6 de hFSHR y hLHCGR, respectivamente)
presentes en estado inactivo se romperían.323
Estos estudios biofísicos y estructurales indican que la unión del agonista
por sí sola puede no ser suficiente para estabilizar los estados completamente
activos del receptor y, por lo tanto, es necesaria la unión de una proteína
efectora en el lado citosólico del receptor para alcanzar el estado
331
completamente activo. Además, es posible que no haya un solo
estado activo , y diferentes ligandos y moduladores alostéricos pueden
estabilizar conformaciones claramente diferentes, lo que da lugar a diversas
respuestas aguas abajo que pueden diferir en magnitud.271,332,333
carboxilo-terminal
La cola C de los receptores de gonadotropinas es la más divergente de los
tres dominios. Estos dominios albergan secuencias y motivos importantes,
que desempeñan papeles cruciales en la función del receptor, e incluyen
residuos de cisteína estrechamente asociados a la membrana plasmática
(PM; Cys644 y 646 en hFSHR y Cys 643 y 644 en hLHCGR) para la
palmitoilación,334-336
un motivo de secuencia primaria [Phe(X)6Leu-Leu] en el extremo NH2 de la
Ctail dentro de un segmento helicoidal que en otros GPCR se denomina
hélice 8 (ver http://gpcr.usc.edu), y que regula el tráfico ascendente de la ER
a la PM,270.321.337
un grupo de cinco residuos de serina y treonina (656 y 658
†
El primer número corresponde al TMD, donde se encuentra el residuo, y el
segundo al residuo más conservado en este TMD, que se asigna
arbitrariamente a 50, con números que disminuyen hacia el extremo NH2 y
aumentan hacia el extremo carboxilo.
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores
a 661) que son un objetivo de las quinasas del receptor de proteína G
(GRK)338-340 que fosforilan el hFSHR mientras promueven
simultáneamente el reclutamiento de ÿ-arrestina (que son proteínas de
andamiaje que regulan la internalización estimulada por ligando y la
señalización intracelular mediada por quinasas reguladas por señales
extracelulares [ERK1/2]338), y residuos involucrados en el tráfico
postendocítico del receptor internalizado (Pro688 y Leu689, y Gly687 y
Thr688 en FSHR y hLHCGR, respectivamente).341-343 La importancia
de estas secuencias en la función del receptor de gonadotropina es
más extensamente discutido más adelante.
Expresión y regulación génica
• La producción de receptores de gonadotropina comienza con la inducción
de expresión génica.
• Estructuras del gen del receptor de gonadotropina y transcripcional
se discute el control.
• Se consideran los correlatos fisiológicos de conformidad con el control
genético y la producción de un receptor totalmente funcional.
genes
Los receptores humanos de lutropina y folitropina están codificados por
genes únicos ubicados en el brazo corto del cromosoma 2 (LHCGR,
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/3973 y FSHR, http://
www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/2492). El FSHR tiene una longitud de unos
190 Kb y está compuesto por 10 exones, mientras que el LHCGR tiene
una longitud de unos 70 Kb y está compuesto por 11
exones. Los primeros 9 exones del FSHR y los primeros 10 exones del
LHCGR codifican el gran dominio extracelular de los receptores, incluida
parte de la región bisagra, mientras que el extremo carboxilo terminal
de este último, el 7TMD y el Ctail de los receptores, están codificados
por los grandes exones 10 y 11 de FSHR y LHCGR, respectivamente.
Las similitudes estructurales, moleculares y genómicas entre las
hormonas gonadotrópicas y sus receptores sugieren fuertemente que
los genes del receptor de gonadotropina evolucionaron a partir de la
duplicación de un gen ancestral común. De hecho, la ubicación de los
genes está separada por sólo ~200 Kb. Además, las similitudes entre
los genes de los receptores de gonadotropina y otros GPCR también
sugieren que el precursor de los genes del receptor de gonadotropina
surgió de la combinación de un ancestro común de GPCR.344
Regulación Transcripcional
Las regiones flanqueantes 5' de los genes LHCGR y FSHR son ricas
en nucleótidos GC, y los promotores proximales de ambos genes
carecen de cajas TATA y tienen múltiples sitios de iniciación de la
transcripción dentro de una región similar a un elemento iniciador. A
pesar de estas similitudes, las características funcionales particulares y
divergentes de las características reguladoras clave presentes en el
promotor LHCGR/ Lhcgr y el FSHR/Fshr
los sitios reguladores distales enfatizan la regulación diferencial de
cada gen receptor.345,346 Los estudios del control transcripcional del
gen FSHR se han realizado principalmente en roedores.346
Las características notables del control de la expresión del gen FSHR
incluyen lo siguiente: (1) su regulación mediante una combinación de
mecanismos transcripcionales y postranscripcionales inducidos por FSH
y activina en el ovario y FSH en los testículos; (2) la expresión de FSHR/
Fshr requiere elementos reguladores ubicados tanto dentro como fuera
de la región promotora (es decir,
43
97 kb aguas arriba del exón 1 a 57 kb aguas abajo del exón 10), el
primero incluye elementos que se unen a NR5A1 (SF1) así como
factores estimulantes aguas arriba (USF), y el último incluye DHS-3
(sitio hipersensible a la ADNasa I), ubicado ~4 kb
río abajo en el intrón 1, que se une al complejo de proteína de unión a
GATA y POU2F1 (proteína de unión a octámero 1) en células que no
expresan FSHR , lo que sugiere una asociación con el silenciamiento
del gen ing347; y (3) en varias especies animales, incluidos los seres
humanos, el promotor FSHR muestra un elemento de caja E común,
que contribuye significativamente a la actividad del promotor, y se une
a sus factores de transcripción afines USF1 y USF2, que regulan la
expresión génica diferencial en las células de Sertoli y de la granulosa . 348,349
Los estudios de Fshr también han demostrado que la unión de USF a
la caja E aumenta durante la diferenciación y disminuye, junto con la
actividad del promotor, tras la administración de FSH mediante el
aumento del inhibidor del ADN de la unión al ADN.
proteína de diferenciación-2 (ID2), que inhibe la unión de la caja E y la
actividad del promotor.350-352 En algunas especies, incluidos roedores,
humanos y/u ovejas, el promotor del gen FSHR también contiene un
así como una secuencia similar al elemento de respuesta de cAMP
(CRE) que puede estar involucrada en la regulación transcripcional
mediada por cAMP;353-356
algunas especies de roedores también contienen elementos putativos
que actúan en cis para los factores de transcripción de la familia HMG-
box SRY/Sox, que parecen importantes en la regulación transcripcional
positiva del gen FSHR.355 Muchos de los factores reguladores que se
extienden más allá del gen FSHR siguen siendo desconocidos , como
lo revelan los estudios en ratones transgénicos portadores de un
cromosoma artificial de levadura (YAC) con el Fshr completo más las
secuencias limítrofes 5' de 50 kbs y 3' de 30 kbs, que no lograron
expresar el receptor en las células de Sertoli.357
Los elementos que actúan en cis y los factores de transacción que
controlan la transcripción del gen LHCGR humano, de ratón y de rata
se han examinado con más detalle . dominio de 176 pb; aunque en la
rata, la transcripción del gen LHCGR es inhibida por secuencias aguas
arriba ubicadas entre –175 pb y –2056 pb, en el promotor humano esta
inhibición es mínima.359 Los elementos que regulan la activación
transcripcional del gen LHCGR incluyen un motivo ERE/DR imperfecto ,
así como los elementos Sp1(II) y Sp1(I) ubicados en –79 pb y –119 pb
desde el sitio de iniciación del codón (ATG) en el gen humano.360
Estos elementos y sus factores de transcripción correspondientes
inhiben o estimulan la transcripción dependiendo en los reguladores
unidos (EAR2/EAR3 o TR4)361. El motivo ERE/DR se une a los
receptores nucleares huérfanos (OR) factores EAR2 y EAR3, que
inhiben la transcripción, y TR4, que la estimula. EAR2/EAR3 inhibe la
transcripción de LHCGR al interrumpir la interacción positiva entre el
TFIIB unido al complejo de preiniciación y los factores Sp1/Sp3 unidos
a sus elementos correspondientes.
Mientras tanto, Sp1 y Sp3 unidos al elemento Sp1(I) interactúan directa
o indirectamente con el complejo regulador silenciador mSim3A/RbAp48
para reprimir la transcripción. El silenciamiento activo de la expresión
de LHCGR procede a través de una diafonía entre COUP-TF1/EARs,
Sp1/ Sp3 y TFIIB.361 Durante la estimulación con gonadotropinas, las
concentraciones de EAR2/EAR3 cambian, lo que se correlaciona con
la desrepresión de la actividad del promotor. En el folículo ovárico, el
ciclo de desrepresión-silenciamiento gobernado por los factores
huérfanos depende de la etapa de maduración folicular, con represión
presente en folículos pequeños y tempranos y activación de desrepresión
en folículos preovulatorios y lúteos.
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44 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
La estimulación de la hormona estimulante del folículo en las células
de la granulosa induce la expresión de CYP19A1 y los niveles de
transcripción y expresión de LHCGR necesarios para los pasos finales
en el proceso de maduración del ovocito y para la ruptura folicular.
Estos huérfanos, incluido TR4, también se unen al elemento DR
humano en el testículo LHCGR. La regulación epigenética también ha
estado involucrada en la expresión de LHCGR , y la acetilación y
desmetilación de las histonas desempeñan funciones importantes.362,363
La acetilación se produce mediante la inhibición de HDAC1/2 (histona
desacetilasa) unida al complejo mSin3A/RbAP48 o el factor Sp1 en el
Sp1(I) sitio, y el reclutamiento de H3 y H4 acetilados al promotor.361
La desmetilación del ADN del promotor parece necesaria para superar
la restricción inhibitoria impuesta por el complejo HDAC/mSin3A. Por
lo tanto, el silenciamiento epigenético y la activación de LHCGR se
logra a través de la acción concertada tanto a nivel de histonas como
de ADN, con factores coactivadores y correpresores que desempeñan
importantes funciones reguladoras.358,364
Varias vías de señalización están involucradas en la regulación
compleja del LHCGR, incluida la vía PI3/PKCÿ, que fosforila Sp1 y
elimina los factores correpresores, y la vía PKC-ÿ/ERK, que también
fosforila Sp1 y conduce a la disociación de los complejos inhibidores.
como HDAC1/
mSin3A y contratación de TFIIB.358.363.365
Transcripciones
Se han encontrado múltiples transcritos de los receptores de
gonadotropina, que aparentemente surgen de empalmes alternativos,
diferentes sitios de inicio transcripcional o el uso de diferentes sitios de
poliadenilación (revisado en Simoni366). La ontogenia de los múltiples
transcritos de FSHR y LHCGR en ratas macho y hembra se ha revisado
en otro lugar.272 Aunque existe cierta evidencia controvertida con
respecto al número y la naturaleza de los múltiples transcritos de FSHR
,346 al menos 4 y 2 transcritos de ARNm de FSHR , que varían en
tamaño desde 7,7 a 1,8 kb, se han detectado en ovarios y testículos
de rata, respectivamente, siendo la transcripción de 2,5 kb la más
abundante.367,368
Se han detectado varias variantes heterogéneas de empalme de FSHR
en varias especies animales,369-376 incluidos los humanos.377-383
Se han detectado cuatro productos de empalme que afectan el ECD
del hFSHR en células del cúmulo que rodean a los ovocitos aislados
de aspirados foliculares de mujeres que se someten a fertilización in
vitro. Cuando estas variantes se expresaron in vitro, se observó una
respuesta reducida a la estimulación de FSH exógena.378 También
hay informes de transcritos en la FSHR de oveja que surgen de corte
y empalme alternativo, y que presumiblemente se traducen en proteínas
funcionales con distintas propiedades de señalización.384 Dado que
muchas de las transcripciones alternativas detectadas no se traducen
en una proteína, o la traducción produce proteínas severamente mal
plegadas que no pueden traficar a la superficie celular PM, la función
y el papel regulador de FSHR
variantes de transcripción ha sido escasamente estudiada. Dos
transcritos empalmados alternativamente del gen FSHR ovino con el
exón 10 alterado son particularmente interesantes, debido a sus
posibles consecuencias funcionales. en el Ctail y que la variante es 25
aminoácidos más corta; esta variante de FSHR se expresa en el PM,
no emite señales a través de la vía cAMP/PKA y se comporta como un
receptor negativo dominante cuando se coexpresa con el receptor WT
en las células HEK293.387 La segunda variante de FSHR consiste en
una transcripción que codifica solo
exones 1 a 8, junto con un TMD putativo único, a diferencia de
cualquier cosa en FSHR, y una extensión carboxilo terminal, todos
más característicos de los receptores de citoquinas/factor de crecimiento.376
Cuando se expresó en las células de la granulosa, los efectos de
promoción del crecimiento de esta variante fueron independientes de
la vía cAMP/PKA y estuvieron más bien mediados por la activación de
las vías dependientes de Ca2+ y ERK1/2.386 Estudios posteriores
demostraron que esta variante particular también se expresa en el
ovario de ratón, y que está regulado al alza por la estimulación de
gonadotropinas.373 Estudios más recientes en ovejas388 encontraron
que el receptor similar al factor de crecimiento de FSH se expresaba
más que la variante WT en folículos de todos los tamaños,
particularmente en folículos de tamaño mediano obtenidos durante el
comienzo. del estro, lo que sugiere que esta isoforma del receptor
puede participar en el desarrollo del folículo en esta especie animal en
particular. Todavía se necesitan estudios adicionales para definir con
mayor precisión el papel de estas y otras variantes de la transcripción
de FSHR en la mediación de los efectos pleiotrópicos de la FSH
(discutidos más adelante), particularmente en humanos.
Los tamaños de transcripción del gen LHCGR varían según la
especie estudiada. El gen del receptor de rata expresa cuatro
transcritos, cuyo tamaño oscila entre 6,7 y 1,8 kb, mientras que en las
células de la granulosa humana se han detectado dos transcritos de
ARNm.345,389,390 Se han identificado varias variantes de empalme
de ARNm de LHCGR en diferentes especies animales,391-393
incluidos los humanos.394 -398 Una variante que carece del exón 9
aislada de un cuerpo lúteo humano es particularmente interesante, ya
que ejerce efectos negativos dominantes tanto en hFSHR como en hLHCGR,397-399
lo que puede representar un mecanismo que regula el estímulo
gonadotrópico en esta estructura ovárica. Un exón críptico (exón 6A),
localizado entre los exones 6 y 7 identificados en primates, produce
transcripciones que conducen a la descomposición del ARNm mediada
por tonterías; aunque se desconoce el significado fisiológico de estas
variantes, las mutaciones en este exón críptico se han asociado con
pseudohermafroditismo masculino humano secundario a hipoplasia de
células de Leydig.400,401
Estudios recientes sugieren que los receptores de gonadotropina
pueden expresarse en una serie de tejidos extragonadales, donde
podrían ejercer distintas funciones en ciertas funciones fisiológicas y/o
o estados patológicos. Este interesante aspecto se analiza más
adelante en este capítulo.
Regulación postranscripcional
La regulación postranscripcional también es un aspecto importante de
la regulación del ARNm de LHCGR y los niveles de LHCGR durante el
pico preovulatorio de LH o en respuesta a niveles suprafisiológicos de
gonadotropina.402 Este importante nivel de regulación parece estar
mediado por varios factores, incluido un Proteína de unión al ARNm de
LHCGR (LRBP), que se ha identificado como mevalonato quinasa, una
enzima que interviene en el metabolismo del colesterol y que también
es una LRBP402.
La activación de la esteroidogénesis inducida por LHCG y el posterior
agotamiento del colesterol desencadenan un aumento en la
transcripción de genes que participan en la biosíntesis del colesterol,
incluida la mevalonato quinasa, a través de una vía de señalización
PKA/ERK1/2.402,403 El aumento de los niveles de esta proteína
puede servir el papel dual de mejorar la síntesis de colesterol (una
función enzimática) y disminuir los niveles de LHCGR
ARNm en virtud de su capacidad para unirse al ARNm de LHCGR y
promover su degradación, regulando a la baja de forma transitoria la
expresión del receptor.404,405 Esta disminución transitoria de LHCGR
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores
Luego, los niveles de mRNA son seguidos por una recuperación
completa y una mayor expresión durante el desarrollo del cuerpo lúteo,
solo para finalmente volver a caer con la regresión de esta estructura
ovárica altamente esteroidogénica. Estudios más recientes han
demostrado que los niveles de LRBP están regulados por el microARN
miR-122, que activa la vía de la proteína de unión al elemento regulador
de esteroles (SREBP) que conduce a la PKA/
Regulación al alza mediada por ERK1/2 de los niveles de ARNm y
proteína LRBP406,407 . Otro miARN involucrado en la regulación
postranscripcional del ARNm de LHCGR es miR-513a-3p, que interactúa
con el ARNm a través de tres sitios de unión ubicados en la región
3'UTR, lo que lleva a una regulación a la baja de LHCGR
niveles de ARNm en células de la granulosa humana,408 así como MiR
136-3p, que se ha encontrado que está asociado con la regulación a la
baja de LHCGR en células de la granulosa de rata.409
La regulación postranscripcional de la expresión de FSHR se ha
estudiado menos extensamente, aunque se sabe que varios factores,
incluidos TGFÿ y activina, aumentan la estabilidad y la vida media del
ARNm de FSHR , regulando al alza FSHR .
expresión.410,411 En ratas hembra, la estimulación de FSH puede
regular hacia arriba y hacia abajo la expresión de la proteína FSHR y el
ARNm de FSHR, dependiendo de la etapa de maduración folicular.367
Además de miR-126, que recientemente se demostró que regula a la
baja el ARNm de FSHR y actúa sinérgicamente con los andrógenos
para inhibir la producción de proteína FSHR en células de la granulosa porcina,412
poco se sabe acerca de si otros miARN están involucrados en la
regulación postranscripcional del ARNm de FSHR .
Plegado, maduración y tráfico
El ciclo de vida de los GPCR comienza en el RE, donde se produce la
síntesis, el plegamiento y el ensamblaje de las proteínas (fig. 2.12). A
continuación, los receptores correctamente plegados se dirigen al
complejo intermedio ER-Golgi y, posteriormente, al aparato de Golgi y
la red trans-Golgi; aquí, se completa el procesamiento y las proteínas
receptoras están listas para completar su tráfico hacia el PM de la
superficie celular, donde se vuelven accesibles para sus ligandos
afines.413 La interacción entre los GPCR y los agonistas en el PM
desencadena el tráfico del receptor a través de una serie de distintos
procesos, que incluyen (1) la fosforilación (que finaliza la señalización
mediada por la proteína G) y el reclutamiento de ÿ-arrestina, que
interactúa con la clatrina y el adaptador de clatrina, AP2, para impulsar
la internalización del receptor en los endosomas; y (2) el reciclaje del
receptor de vuelta a la PM o el direccionamiento a los lisosomas y/o
proteasomas para su degradación. Por lo tanto, el equilibrio entre el
tráfico desde el RE hasta el MP y la vía de endocitosis-reciclado/
degradación determina la cantidad neta de proteína receptora disponible
para interactuar con el agonista y provocar una respuesta biológica
medible. Los GPCR están sujetos a un estricto sistema de control de
calidad (QCS) que monitorea y corrige, cuando es necesario, el
plegamiento del receptor naciente en una estructura tridimensional.414
Al monitorear las características estructurales y conformacionales de las
proteínas recién sintetizadas, el QCS determina qué proteínas debe
retenerse en el RE y eventualmente degradarse o enrutarse al aparato
de Golgi y luego al PM.415 Por lo tanto, el QCS evita la acumulación de
proteínas mal plegadas que pueden agregarse e interferir con la función
celular. La exportación de GPCR del RE al aparato de Golgi está
modulada por la interacción de las proteínas de tráfico con factores de
plegamiento especializados, proteínas acompañantes, factores de
retención, enzimas y miembros del sistema molecular.
45
familias de chaperonas, que pertenecen al ER QCS y a la llamada red
de proteostasis.416-418 En particular, las chaperonas moleculares son
componentes esenciales del ER QCS que evalúan la conformación del
receptor nativo y promueven la entrega desde el ER al aparato de Golgi,
donde la proteína La molécula se procesa antes de la entrega final de
la forma madura al PM.419-421. Las chaperonas moleculares son un
importante mecanismo de control de calidad que no solo reconoce sino
que también retiene y se dirige a confórmeros de proteínas no nativos
mal plegados para su degradación final a través de la vía de
poliubiquitinación/proteasoma. 422-425
Al igual que otros GPCR, los receptores de gonadotropina deben
plegarse correctamente en una conformación que pase el QCS y sea
compatible con la exportación de ER (Fig. 2.12).414
La glicosilación, que junto con los enlaces disulfuro es una característica
frecuente de los GPCR, se produce durante la biosíntesis y facilita el
plegamiento de los precursores de proteínas al aumentar su solubilidad
y estabilizar la conformación proteica.426 De hecho, las mutaciones que
afectan la glicosilación en el ECD o la formación de enlaces disulfuro
dificultan la proceso de plegamiento de estos receptores que conduce a
la retención intracelular de los intermedios mal plegados y, finalmente,
a la enfermedad. Por lo tanto, la glicosilación juega un papel importante
no solo en el plegamiento, sino también en la maduración y el tráfico
intracelular de los receptores desde el RE hasta la superficie celular PM.
Los estudios en ratas han demostrado que se requiere al menos un sitio
de glicosilación en el ECD de FSHR para el plegamiento adecuado del
receptor y el tráfico eficiente al PM.427 La falta de glicosilación del
FSHR de rata madura no afecta la unión o la afinidad, lo que indica que
esta estructura no participa en la interacción del ligando. Del mismo
modo, los mutantes de LHCGR de rata que impidieron la glicosilación
en las primeras tres secuencias consenso no afectaron la síntesis del
receptor ni la unión del ligando, pero disminuyeron la eficiencia del
plegamiento del receptor, lo que provocó una reducción de la maduración
y una mayor degradación de la proteína precursora.428 Por lo tanto, los
carbohidratos en ambos receptores de gonadotropina , aunque no están
involucrados en la unión de hormonas, son jugadores importantes en el
proceso de maduración de los receptores recién sintetizados,
promoviendo su plegamiento y estabilidad conformacional y su tráfico
hacia el PM.
Los estudios de co-inmunoprecipitación han identificado algunas
proteínas que interactúan y que apoyan el plegamiento de los receptores
de gonadotropinas durante su residencia en la sala de emergencias.
Estos estudios han demostrado que el proceso de plegamiento de los
precursores de FSHR y LHCGR de rata (glucosilados cotraduccionalmente
en el RE mediante la adición de los azúcares centrales N-acetil
glucosamina, manosa y glucosa) implica interacciones con las
chaperonas calnexina y calreticulina, que facilitan el plegamiento
adecuado de las moléculas de glicoproteína intermedias.429,430 El
ciclo de estas chaperonas se centra predominantemente en los N-
glucanos de sustrato presentes en el precursor del receptor de
glicoproteína, lo que agrega hidrofobicidad a la proteína de plegamiento. La calnexina/
El ciclo de la calreticulina depende de la acción concertada de las
enzimas modificadoras de carbohidratos (glucosidasas I y II), que
conducen a la formación de estructuras de oligosacáridos
monoglucosilados que interactúan con las chaperonas, así como a la
eliminación del residuo de glucosa restante del oligosacárido, terminando
el proceso. asociación con los chaperones.
Luego, el GPHR (ya en su conformación nativa) se exporta al complejo
de Golgi para continuar con el procesamiento de las cadenas de
oligosacáridos. Otra chaperona que interactúa con GPHR es la proteína
disulfuro isomerasa, o PDI,429 que
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46 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción

ligando

5 7
Plasma
membrana

Gas
8
4 10
internalización
8
10
Reciclaje
recubierto de clatrina
vesícula
4

trans-golgi
la red
3 9

aparato de Golgi Degradación

aparato

1
2
Proteasoma
2

endoplásmico
retículo
2

Núcleo

FIGURA 2.12 Tráfico intracelular de receptores de gonadotropina. Las proteínas recién sintetizadas se pliegan en el retículo endoplásmico (RE). A continuación, las
proteínas plegadas correctamente se trasladan al aparato de Golgi para iniciar o completar el procesamiento, como la glicosilación (puntas de flecha verdes rodeadas de
círculos azules; pasos 1 y 3). Los productos mal plegados y mal ensamblados se retienen en el ER y se exponen a chaperonas residentes, que intentan corregir el
plegamiento y estabilizar la proteína en una conformación compatible con la exportación al ER. Cuando falla el plegamiento correcto, la proteína mal plegada se disloca
en el citoplasma para la degradación proteosomal (paso 2). Luego, los receptores maduros se exportan a la membrana plasmática (paso 4), donde interactúan con
ligandos afines (pasos 5 y 6). La activación del receptor provocada por el agonista (paso 6) es seguida por la fosforilación del receptor y el reclutamiento de ÿ-arrestinas
(rombos morados), como es el caso de la FSHR, que promueve la endocitosis (paso 7) y la internalización del receptor. receptor (paso 8). El receptor incrustado en las
vesículas recubiertas de clatrina puede dirigirse a los lisosomas y/o proteosomas para su degradación (paso 9) o reciclarse a la membrana plasmática (paso 10) para
interactuar de nuevo con el agonista afín (paso 5). (De Ulloa-Aguirre A, Zarinan T, Dias JA, Conn PM: Mutations in G protein-coupled receptors that impact receptor
Trafficing and Reproductive Function. Mol Cell Endocrinol 382:411–423, 2014, con autorización de Elsevier).

es una enzima residente en el RE implicada en la formación de
enlaces disulfuro de intermediarios de plegamiento, y que
probablemente actúa como chaperona conjunta con la calnexina y la
calreticulina durante su asociación con el GPHR. Todavía no se ha
documentado ninguna interacción de GPHR con otras chaperonas
moleculares, con la excepción de TSHR, que aparentemente
interactúa con BiP, una chaperona que mantiene las proteínas en un
estado competente para el posterior plegamiento y oligomerización,
y que media la translocación retrógrada de confórmeros mal
plegados. para la degradación proteosomal.414,431,432
Varios motivos de secuencia presentes en los GPCR están
involucrados en la salida de los receptores del RE y del aparato de
Golgi. Entre estos motivos se encuentra la secuencia Phe(X)6LeuLeu
mencionada anteriormente, identificada en la cola C de varios GPCR,
incluidos los receptores de gonadotropina (véanse las Figs. 2.5 y 2.6)337.
hFSHR, este motivo de exportación está ubicado entre los residuos
de aminoácidos 633 y 641, mientras que en hLHCGR, este motivo
está ubicado entre los residuos 630 y 638.270,272 El péptido Ctail
de hFSHR también contiene el motivo BBXXB mínimo invertido en
su región yuxtamembrana (residuos 631 a 635)321; los dos últimos
residuos de este motivo (R634 y R635) y el F633 anterior constituyen
el extremo NH2-terminal del motivo F(X)6LL altamente conservado
y, por lo tanto, las mutaciones en estos residuos afectan el tráfico del
receptor y la localización de PM del receptor.321,433 La IL3 de los
receptores hFSH y hLHCG también contiene este motivo BXXBB
(residuos 569 a 573 en hFSHR y 566 a 570 en hLHCGR), y la
eliminación o el reemplazo de los residuos básicos de este motivo
con alanina alteran la expresión de PM del modificado
receptores.321,322 Otro motivo que influye en la gonadotropina
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores
el plegamiento del receptor es el motivo AFNGT (residuos de
aminoácidos 193 a 197 en hLHCGR y 189 a 193 en hFSHR), que
tiene un sitio de glicosilación potencial (N195GT y N191GT, en
hLHCGR y hFSHR, respectivamente). Por lo tanto, las mutaciones en
este motivo influyen en el plegamiento del receptor y el tráfico hacia el
PM.321,322
Las células de mamíferos que expresan hLHCGR recombinante
muestran varias especies distintas de glicoproteínas con masas
moleculares (estimadas a partir de geles SDS) que oscilan entre 65 y
240 kDa.270 La hLHCGR madura expresada en PM se ha identificado
como una proteína de 85 a 95 kDa, mientras que La banda de 65 a 75
kDa se ha identificado como un precursor inmaduro parcialmente
glicosilado que se encuentra en el RE.270 Las bandas de mayor peso
molecular que van desde 165 a 240 kDa son oligómeros de los
receptores inmaduros o maduros.270,434 Precursor, maduro , y
también se pueden detectar formas oligoméricas de hFSHR en células
transfectadas, pero hay más variación en los pesos moleculares
notificados de estos productos. Las estimaciones de la masa molecular
del FSHR de superficie celular madura oscilan entre 74 y 80 kDa,
mientras que las estimaciones de la masa molecular del precursor
intracelular inmaduro oscilan entre 67 y 75 kDa.366,435,436 Las
formas de FSHR de mayor peso molecular (~170 kDa) también se han
identificado y parecen ser oligómeros del precursor intracelular
inmaduro.436 Cabe señalar que muchos de los estudios sobre los
tamaños y la naturaleza de las diferentes formas de receptores de
gonadotropina se han basado en la detección inmunológica de
receptores etiquetados con epítopo expresados en células heterólogas.
líneas. La detección inmunológica de los receptores endógenos de
gonadotropina expresados en los testículos, los ovarios o los tejidos
extragonadales ha sido mucho más difícil porque se expresan a bajas
densidades y debido a la naturaleza de los anticuerpos del receptor
de gonadotropina disponibles. Usando anticuerpos monoclonales o
policlonales (algunos de los cuales han sido rigurosamente validados),
las formas maduras e inmaduras de hLHCGR y hFSHR descritas
anteriormente pueden detectarse inmunológicamente en tejidos diana
y líneas celulares homólogas.270,437,438
Otra modificación postraduccional importante para el tráfico de
GPCR es la palmitoilación. Se ha demostrado que los residuos de
cisteína en la cola C de varios GPCR son el objetivo de la acilación S
con ácido palmítico; en algunos receptores, esta modificación
postraduccional a menudo se requiere para la entrega eficiente de la
proteína a la membrana celular,439-443 donde facilita el anclaje del
receptor Ctail al PM. El hFSHR tiene en su Ctail dos residuos de
cisteína conservados (en las posiciones 646 y 672) y un residuo de
cisteína no conservado en la posición 644. Aunque el hFSHR está
palmitoilado en todos los residuos de cisteína, independientemente de
su ubicación en la Ctail del receptor,335 S- la acilación en C627 y
C655 no es esencial para la localización eficiente de hFSHR PM,
mientras que en C629 sí lo es, ya que el reemplazo de este residuo
con glicina o alanina redujo la detección de la forma madura del
receptor en aproximadamente un 40 % a un 70 %. Además, cuando
se eliminan todos los sitios de palmitoilación del hFSHR, la expresión
de PM en la superficie celular se reduce aproximadamente entre un
10 % y un 30 % de lo que muestra el receptor WT.335 El hLHCGR se
palmitoila en dos residuos de cisteína conservados (643 y 644),444
pero a diferencia del hFSHR, la palmitoilación de este receptor no es
importante para el tráfico hacia la PM, ya que la anulación de la
palmitoilación no pareció afectar la expresión de la PM ni la unión del
agonista.334,444 receptor expresado en PM
47
la siguiente formación del complejo hormona-receptor depende del
receptor. Mientras que en hFSHR, la palmitoilación no desempeña
ningún papel en la internalización del complejo receptor/hormona, en
hLHCGR la prevención de la palmitoilación aumenta la tasa de
internalización estimulada por agonistas. En ambos receptores, la
anulación de la palmitoilación perjudica el reciclaje del receptor a PM
y aumenta la fracción de receptor/
complejo hormonal dirigido a la degradación a través del proteasoma/
vías de los lisosomas.334,336 La mayor parte del hFSHR internalizado
se recicla nuevamente a la PM, mientras que en el hLHCGR, solo el
30 % del receptor internalizado se recicla nuevamente a la superficie
celular. Además de la palmitoilación, la clasificación posendocítica
también está influenciada por secuencias específicas en la cola C de
los receptores.341,343
La estimulación de los GPCR por parte de los agonistas va seguida
de una serie de modificaciones estructurales y asociaciones con
proteínas de andamiaje que finalmente conducen al desacoplamiento
del efector, la internalización y el reciclaje de regreso a la PM o la
degradación en lisosomas y/o proteasomas (fig. 2.12). Se ha informado
que el hFSHR es fosforilado por las quinasas PKA y PKC dependientes
de segundos mensajeros, pero también por las GRK 2, 3, 5 y 6 en
varios modelos . desensibilización del receptor independiente del
agonista (heterólogo). La fosforilación mediada por GRK conduce a
efectos más complejos, ya que están centralmente involucrados en la
desensibilización homóloga, mientras que simultáneamente regulan el
reclutamiento de ÿ-arrestina y los subsiguientes efectos de ÿ-arrestina
en la internalización del receptor a través de fosas recubiertas de
clatrina y señalización independiente de proteína G. Como se describió
anteriormente, se ha demostrado que un grupo de cinco residuos de
serina y treonina ubicados en la cola C del hFSHR (ver Fig. 2.5)
explica la mayor parte de la fosforilación inducida por FSH como
resultado de la acción de GRK2.338 También se ha demostrado que
documentaron que las ÿ-arrestinas son reclutadas para el FSHR
fosforilado por GRK y ocupado por agonistas.338-341,445
Se ha sugerido que las ÿ-arrestinas reclutadas por FSHR fosforilado
por GRK2 o GRK5/6 ejercen distintas funciones intracelulares338,446;
El hFSHR fosforilado por GRK2 predomina en el proceso de
desensibilización mediado por ÿ-arrestina, mientras que la fosforilación
inducida por GRK5 y 6 del FSHR activado es necesaria para la vía de
señalización dependiente de ÿ-arrestina en la línea celular inmortalizada
HEK293.338,446 Está bien establecido que La unión de ÿ-arrestina 1
y 2 a FSHR fosforilado por GRK conduce a la internalización y el
reciclaje del receptor . receptor con factor de ribosilación de ADP
nucleótido-binding site opener (ARNO), un factor de intercambio para
el factor de ribosilación de ADP 6 (ARF6), que luego recluta ÿ-
arrestinas cuando se une a GTP.448 Aquí es importante mencionar
que el reclutamiento a ÿ-arrestinas unido por el hFSHR juega un papel
importante para iniciar distintas vías de señalización mediadas por
arrestina, principalmente MAPK ERK, como se describirá más
adelante. En el caso del hLHCGR, las ÿ-arrestinas aparentemente no
están involucradas en la señalización de MAPK ERK y, por lo tanto,
este receptor no muestra una señalización sesgada a través de esta
cascada de señalización particular.333
Expresión extragonadal
LHCGR y FSHR se localizan en las células gonadales, que contienen
sus objetivos, evidenciado por la ablación hormonal temprana
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48 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
experimentos y posterior desarrollo de bioas dice in vitro. En los
testículos, la ubicación canónica de LHCGR y FSHR está restringida
a las células de Leydig y Sertoli, respectivamente.
En el ovario, la expresión de LHCGR ocurre en las células de la teca,
intersticiales y de la granulosa de los folículos preovulatorios y en el
cuerpo lúteo, mientras que la FSHR se limita a las células de la
granulosa de los folículos en maduración. En todos los casos, se
pueden demostrar fácilmente las lecturas, después del tratamiento
con niveles fisiológicos de hormona y, lo que es más importante, la
unión de la hormona radiomarcada a estos tejidos con alta afinidad y
capacidad. Ciertamente, las principales funciones fisiológicas de los
receptores de gonadotropina se pueden atribuir a sus acciones en
los ovarios y los testículos, como lo demuestran los fenotipos de los
individuos que albergan mutaciones activadoras o inactivadoras de
estos genes (se analiza más adelante). Además, los fenotipos de
ratones modificados genéticamente con acciones de gonadotropina
exageradas o ausentes,263,449-451 o ratones con inactivación
dirigida o receptores activados constitutivamente,316,452-455
parecen explicarse completamente por las acciones clásicas de LH y
FSH en los tejidos gonadales.
Sin embargo, en los últimos años ha habido informes de expresión
de FSHR de bajo nivel en tejidos extragonadales, donde se ha
propuesto que tiene distintas funciones fisiológicas.
Los sitios extragonadales donde se ha detectado la FSHR incluyen
osteoclastos óseos456,457 y monocitos,381,458 células endoteliales
de la vena umbilical,459 vasculatura tumoral y metástasis ,460,461
diferentes sitios del tracto reproductivo femenino, la placenta en
desarrollo,462 el endometrio,463 y el hígado.464 Datos sobre la
expresión (ARNm y proteína) de FSHR WT o la variante de empalme
identificada originalmente en células de la granulosa bovina372 tanto
en osteoclastos como en monocitos,381
y, en consecuencia, sobre el papel de la FSH en la función ósea,
siguen siendo bastante controvertidos.456-458,465-469 Los estudios
inmunohistoquímicos que emplean anticuerpos monoclonales anti-
FSHR han sido el pilar para la documentación del receptor, porque la
unión del ligando no es detectable. La expresión de hFSHR en vasos
sanguíneos de varios tumores malignos460,470
y se han notificado metástasis tumorales461 . Aunque los autores
postulan que la FSHR en estos lugares puede contribuir al crecimiento
y la expansión del tejido tumoral al promover la angiogénesis, aún se
necesitan más estudios para validar estos hallazgos, dado que tales
afirmaciones pueden generar una incertidumbre innecesaria en las
mujeres que reciben terapia hormonal para la infertilidad. o durante
la menopausia, cuando los niveles de FSH son altos.
Recientemente se ha identificado FSHR en varios tejidos reproductivos
no ováricos.459,462,463 Curiosamente, la haploinsuficiencia
fetoplacentaria del Fshr en ratones se asoció con defectos en el
crecimiento placentario y pérdida fetal en animales heterocigotos y
homocigotos con Fshr nula.462 Más recientemente, un papel del
FSHR en en lesiones endometriósicas463 y en tejido hepático464 ;
los autores afirmaron que en estos lugares el FSHR podría estar
involucrado en la producción de estrógeno estimulada por FSH y la
progresión de la endometriosis, así como en la expresión del receptor
de lipoproteínas de baja densidad y la regulación de la eliminación
del colesterol de lipoproteínas de baja densidad, respectivamente.
Sin embargo, todavía se justifican más estudios para confirmar la
existencia y dilucidar con mayor fuerza la expresión y el significado
fisiológico de los FSHR extragonadales y, de ser así, si son
estructuralmente similares a los que se expresan principalmente en
las gónadas o si son variantes de empalme del receptor WT que
pueden expresarse en las PM en cantidades suficientes para provocar
un efecto biológico tras la exposición a concentraciones fisiológicas
de FSH.
Hay una gran cantidad de literatura igualmente controvertida que
sugiere que LHCGR funcional también puede expresarse en varios
tejidos extragonadales.451,471 La sugerencia de expresión de
LHCGR extragonadal se ha basado en muchos casos en la detección
de fragmentos del ARNm de LHCGR .
Los intentos de detectar la proteína LHCGR inmunorreactiva a
menudo resultan en la identificación de una proteína (o proteínas)
que no coinciden con el peso molecular esperado del LHCGR
gonadal auténtico (discutido anteriormente). Una comparación de las
acciones de LH/CG en células o tejidos aislados de ratones WT y
LHCGR nulos contribuiría en gran medida a arrojar luz sobre esta
controversia, pero curiosamente, esto no se ha hecho con frecuencia.
En un estudio reciente sobre la posible actividad angiogénica de la
GC, se demostró que el efecto proangiogénico de la gonadotropina
mejoró claramente en los vasos sanguíneos aislados de los ratones
sin LHCGR.472 Este hallazgo sugiere que una LHCGR funcional
podría expresarse en la sangre. vasos Además, el LHCGR se ha
detectado en el endometrio secretor, particularmente alrededor de
las arterias espirales, así como en el sitio de implantación en primates
no humanos.473 Los autores afirmaron que la expresión temporal
del LHCGR en este tejido podría desempeñar un papel importante en
induciendo la expresión de genes específicos importantes en la
modulación de varios procesos, incluida la decidualización, el sistema
inmunitario, la supervivencia celular y la vascularización en la interfaz
materno-fetal.474
Algunas de las pruebas más claras de la expresión extragonadal
de un LHCGR funcional provienen de estudios realizados en una
mujer que desarrolló el síndrome de Cushing asociado al embarazo
y luego volvió a desarrollarlo después de la menopausia.474 Después
de la menopausia, hay pruebas claras de que los niveles de cortisol
en esta mujer fueron controlados por LH porque la supresión del eje
hipotalámico/pituitario con agonista de GnRH controló el
hipercortisolismo.474 Los hallazgos clínicos en varios otros casos
también parecen explicarse por la expresión inapropiada de LHCGR
en la corteza suprarrenal o en tumores adrenocorticales. .475,476 La
expresión ectópica de LHCGR funcional en la corteza suprarrenal
parece ser un hallazgo común en modelos de ratones transgénicos o
knock-out con niveles elevados de gonadotropinas,475 y la expresión
de LHCGR maduro puede documentarse fácilmente en las glándulas
suprarrenales de ratas preñadas. 477
Por último, algunos informes indican que durante el desarrollo
otros tejidos extragonadales de rata, como los riñones, expresan la
forma inmadura del LHCGR, mientras que los tejidos nerviosos
expresan tanto la forma madura como la inmadura477,478 . Las
acciones directas de las gonadotropinas sobre estos tejidos aún son controvertidas.
Oligomerización
Varios estudios bioquímicos, farmacológicos y biofísicos respaldan el
concepto de autoasociación u oligomerización del receptor como un
proceso fundamental que permite la actividad de GPCR.479
Actualmente se acepta que la multimerización de GPCR está
involucrada en la regulación fina de varios procesos fisiológicos,
como la unión de ligandos, el tráfico de receptores y la regulación de
los niveles de expresión de PM, así como la activación de las vías de
señalización.479,480 Al igual que con muchos otros GPCR, los
GPHR también se asocian para formar homodímeros/oligómeros e
incluso heterodímeros, en los que dos receptores estrechamente
relacionados expresan simultáneamente en el mismo asociado celular
(p. ej., LHCGR y FSHR en células de la granulosa madura de ovario481).
En el caso de los receptores de gonadotropina y el TSHR, varios
estudios han demostrado que estos receptores
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores
auto-asociarse.434,480,482,483 Aunque la estructura de la FSH
FSHRHB9 reveló que la FSHR ECD puede formar dímeros débilmente
asociados, con cada molécula que lleva una molécula de FSH,
estudios posteriores que emplean enfoques bioquímicos y biofísicos
combinados demostraron directamente que la FSHR se autoasocia
temprano durante el receptor biosíntesis, y que se puede identificar
como homodímeros FSHR/FSHR o FSHR/
Heterodímeros LHCGR en la membrana superficial de las células
HEK293.436,484 El mecanismo y el grado de autoasociación de
FSHR no se conocen, pero parece razonable asumir que los
contactos que ocurren a través de los TMD juegan un papel
importante.433,485,486 La estructura cristalina más reciente del
ligando El ECD unido a FSHR10 demostró un modo adicional de
asociación de FSH con el ECD de FSHR completo y una estructura
cuaternaria que contiene tres ECD individuales (es decir, una
estructura de receptor trimérico; véase la Fig. 2.9A); esta estructura
predice el alojamiento de una molécula de FSH completamente
glicosilada o tres moléculas desglicosiladas (ver Fig. 2.9B).485 En el
primer escenario, el FSHR puede activarse, mientras que en el último
la estructura permanece inactiva, lo que respalda las primeras
observaciones sobre la falta de efecto de la FSH desglicosilada para
desencadenar la transducción de señales en el FSHR.487,488 El
modelo trimérico también explica las diferencias reportadas en la
actividad de unión al receptor entre las isoformas de FSH
completamente glicosiladas e hipoglucosiladas, donde la primera
exhibe actividades de unión más bajas y retrasadas,489 y proporciona
un mecanismo para Asociación de FSHR con múltiples proteínas
efectoras y uso de varias vías de señalización.
El LHCGR también forma oligómeros en el RE y en el PM, en un
proceso que no está relacionado con la activación del receptor.490
Es importante destacar que la coexpresión de un LHCGR mal
plegado con su contraparte WT afecta la expresión de la superficie
celular del receptor de tipo salvaje y atenúa la señalización,
434,490,491 un efecto negativo dominante. La coexpresión de
variantes de empalme de LHCGR también puede regular la expresión
de LHCGR y FSHR mediante la formación de oligómeros intracelulares
que impiden el procesamiento adecuado del precursor de LHCGR
intracelular. Por ejemplo, los transcritos de LHCGR que carecen del
exón 9 prevalecen en los ovarios humanos normales, pero la proteína
resultante no puede unirse a la hCG ni procesarse adecuadamente
para expresarse en la superficie celular.398,399 Cuando se coexpresa
con WT hLHCGR o hFSHR, el mutante que carece del exón 9 se
asoció con las formas inmaduras de estos receptores y ejerció efectos
negativos dominantes al disminuir su expresión en la superficie
celular.398,399
La formación de complejos FSHR/FSHR explica la
complementariedad intermolecular entre los dímeros FSHR mutantes,
en los que la función de un protómero FSHR deficiente en la unión a
hormonas puede ser rescatada por una contraparte de señal
deficiente después de la exposición al agonista,492 así como la
cooperación negativa entre los protómeros FSHR (es decir, cuando
al unirse al ligando un protómero bloquea o disminuye la afinidad del
segundo protómero por su ligando o compañeros de señalización
intracelular, lo que conduce a un desplazamiento a la derecha de la curva de
También se ha documentado que la complementariedad funcional en
el LHCGR ocurre tanto in vitro como in vivo.494-496 La
complementariedad entre los homo o heterocomplejos del receptor
de gonadotropina transmite implicaciones fisiológicas importantes
para los receptores de gonadotropina, como asociación temporal y
cooperatividad negativa alternante entre el FSHR y el LHCGR en las
células de la granulosa ovárica podría proteger al folículo de la
luteinización prematura o, por el contrario, de la hiperestimulación
ovárica, según el nivel de expresión
49
de cada receptor.497 Las mutaciones heterocigotas que inactivan los
receptores pueden permanecer silenciosas en virtud del rescate con
el receptor WT, o por el contrario pueden expresarse como
clínicamente adversas, en virtud del receptor inactivo (es decir, con
un defecto de tráfico), evitando que el receptor WT nativo tráfico a la
superficie celular. La aparición de homodimerización y
heterodimerización como mecanismo de cooperatividad negativa o
complementariedad intermolecular entre los receptores de
gonadotropinas representa una oportunidad única para las intervenciones terapéutic
Vías de señalización mediadas por
Receptores de gonadotropina
• Los receptores de gonadotropina como GPCR se representan como receptores
canónicos de señalización de proteína G.
• Conceptos emergentes indican que la señal del receptor de gonadotropina
ing es más complejo.
• Recientemente se ha descubierto que los receptores de gonadotropina exhiben
señalización sesgada.
Caminos canónicos y nuevos
Aunque la mayoría de los investigadores están de acuerdo en que
los efectos de las gonadotropinas sobre la función diferenciada de
sus células diana están mediados principalmente por la activación de
la vía canónica Gs/adenilil ciclasa/cAMP/PKA, que posteriormente
activa CREB modulando así la transcripción génica ,
270-272,366,404,498 Ahora está claro que esta no es la única
cascada de señalización activada por estos receptores. Se activan
vías adicionales, como se detalla más adelante, y estas pueden estar
involucradas en varios eventos dependientes de gonadotropina,
como la proliferación y/o diferenciación de células diana y, a nivel
molecular, selectividad funcional y expresión génica diferencial.
En los últimos años se ha hecho evidente que el FSHR está
conectado a través de la selectividad conformacional a una red de
señalización compleja y no lineal mediada por varios subtipos de
proteínas G, incluidas las proteínas Gs, Gi, Gq/11 y Gh499-502 ;
otros tipos de receptores (p. ej., el receptor del factor de crecimiento
similar a la insulina 1 y el receptor del factor de crecimiento epidérmico
[EGF] [ EGFR ]) 503; y/u otras proteínas asociadas con el receptor
(p. ej., ÿ-arrestinas y proteínas adaptadoras que contienen un dominio
de homología pleckstrina, fosfotirosina
dominio de unión y motivo de cremallera de leucina [APPL]) 319,504-506
para promover la activación de varias vías de señalización, incluidas
las mediadas por distintas quinasas (como PKA, PKC, PI3K, PKB/
Akt y ERK1/2).271,338,500,501,503,507-509
Esta compleja red de vías permite una regulación precisa del estímulo
gonadotrópico, donde la activación/
la inhibición de sus múltiples componentes puede variar según el
contexto celular, la etapa de desarrollo de las células huésped y la
concentración de receptores y ligandos.295,503,508,510,511
Dedosis-respuesta).493
particular interés son las vías mediadas por FSHR
desencadenadas por la acumulación de AMPc pero independientes
de la activación de PKA, como las activadas por la proteína de
intercambio directamente activada por AMPc (EPAC). Además de
CREB, la PKA activada por AMPc activa la proteína quinasa activada
por mitógeno p38, ERK 1/2, quinasa p70S6 (p70S6K) y PI3K a través
del sustrato 1 del receptor de insulina (IRS-1), lo que lleva a la
transactivación de PKB/Akt y FOXO1 y por lo tanto a la activación/
represión de genes regulados por FSH.512-515 Mientras tanto, EPAC
promueve la fosforilación de p38 MAPK y PKB/Akt, y la regulación positiva de la
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50 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
EGFR.507,516 Además de las proteínas G, FSHR también se asocia con
otras proteínas citoplásmicas que interactúan, incluidos los adaptadores
APPL1,2 y 14-3-3ÿ y los andamios ÿ-arrestina 1,2.318,319,338,505,517 La
unión de FSHR con APPL1 se produce en el IL1 del receptor, específicamente
en Lys393 (ver Fig.
2.5),506 mientras que la asociación con 14-3-3ÿ se mapea en la IL2,
superponiéndose con los sitios de unión a la proteína G canónica.318,319
La estimulación con agonistas induce rápidamente la fosforilación de FOXO1a
en las células HEK293, lo que conduce a la inhibición de la apoptosis a través
del suero y la quinasa inducida por glucocorticoides (Sgk) o la interacción de
APPL1 con la vía anterior de PI3K/ Akt.507,517,518
Además, APPL1 también participa en la vía del inositol 1,4,5 trifosfato (IP3)
inducida por FSH y lo implica en la señalización del calcio intracelular en las
células de la granulosa506. La coexistencia de APPL1 y 14-3-3ÿ, asociada
con la FSHR, sugiere que la FSH hace que FOXO1a fosforilado sea
secuestrado por 14-3-3ÿ, y APPL1 facilita este proceso antiapoptótico.319
El FSHR activa la fosforilación y señalización de ERK1/2, que se ha
demostrado que desempeña un papel importante en las células de la
granulosa inmaduras en la inducción de un subconjunto de genes de FSH
que definen las células de la granulosa preovulatorias maduras, incluidos los
genes que codifican la subunidad ÿ. de inhibina, LHCGR, EGFR y la enzima
aromatasa.519,520
La activación de ERK1/2 ocurre a través de dos vías distintas, una mediada
por Gsÿ y la otra por ÿ-arrestinas,338,521,522
que están principalmente involucrados en la desensibilización estimulada
por agonistas y la internalización del complejo FSH/FSHR (anotado
anteriormente). Como se discutió anteriormente, la fosforilación por GRK5 y
6 es necesaria para la señalización independiente de Gsÿ y dependiente de
ÿ-arrestina.338,446 Fosfotirosina fosfatasa kDa que inhibe la activación de
ERK y su translocación al núcleo . la activación es más lenta y sostenida, y
ocurre principalmente durante los siguientes 10 a 30 minutos de exposición
al agonista.338
La LH es esencial para estimular la producción de andrógenos por parte
de las células de Leydig y de la teca, así como para finalizar el programa
regulado por FSH para la esteroidogénesis y el crecimiento de las células de
la granulosa, y para promover la luteinización de las células en células lúteas.508 reguladora aguda esteroidogénica (StAR) en las células teca-
La LH también induce los genes necesarios para promover la maduración
del ovocito, la ruptura del folículo y la ovulación. Para hacer esto, el LHCGR
activado por LH debe activar una variedad de vías de señalización. El LHCGR
fue uno de los primeros GPCR que activaron de forma independiente distintas
vías de señalización dependientes de proteína G, adenilil ciclasa (a través de
Gsÿ) y fosfolipasa C (a través de Gÿq/11).523,524 Aunque esta observación
se realizó inicialmente en células heterólogas que expresaban la proteína
recombinante LHCGR de ratón, ahora se ha reproducido ampliamente en
una variedad de líneas celulares transfectadas con LHCGR humano o de
roedor.270 Activación mediada por LHCGR de Gsÿ/PKA/
La vía del cAMP conduce a la activación de varias cascadas de señalización
aguas abajo, como la red EGF, que incluye la expresión de los factores de
crecimiento similares a EGF anfiregulina (AREG), epirregulina (EREG) y
betacelulina (BTC) que se unen y transactivan el EGFR en la pared . y
células del cúmulo de forma autocrina/paracrina, lo que lleva a la activación
de la cascada ERK1/2 y a la expresión de genes importantes
para la expansión del cúmulo.525-531 La activación de la red regulada por
EGFR también es un factor importante involucrado en la reanudación de la
meiosis del ovocito, ya que promueve la disminución de los niveles de cGMP,
cuyas concentraciones regulan negativamente la actividad de las
fosfodiesterasas necesarias para reducir el cAMP intraovocitario y promover
la reanudación meiótica.525,527,529,530,532-536 La cascada ERK1/2,
activada a través de EGFR-Ras y probablemente también por cAMP y/o PKC,
es fundamental para varios procesos estimulados por LH, incluida la
producción de andrógenos,537,538 y los que ocurren alrededor de la
ovulación, como el cúmulo expansión, reanudación de la meiosis del ovocito,
ovulación y luteinización.508,530,539,540
Además, se ha demostrado que la mayoría de los genes ováricos que están
regulados al alza o a la baja por la LH son objetivos de ERK1/2.508,530
Estudios en varios modelos experimentales han encontrado que LHCGR
activa miembros de otras familias de proteínas G, incluida la proteína Gÿq/
11,524,541-543 que a través del receptor de progesterona contribuye al
proceso ovulatorio, como se ha demostrado en ratones con una célula de la
granulosa deleción específica de Gÿq/11.544 Aunque estos ratones
deficientes en Gÿq/11 reanudaron la meiosis y mostraron expansión del
cúmulo tras la exposición a hCG, no lograron aumentar la acumulación de
fosfato de inositol ni expresar el receptor de progesterona, y exhibieron una
marcada subfertilidad debido a la captura de los ovocitos destinados a
ovulación en folículos preovulatorios o cuerpos lúteos.544 La Gÿq/11 activada
por LHCG y la fosfolipasa C también están involucradas en la movilización
de Ca2+ de las reservas intracelulares; aunque el Ca2+ no es necesario para
la maduración del ovocito, aparentemente está involucrado en la
luteinización.545
Además, LHCGR activa PI3K y PKB/Akt de forma independiente de
cAMP.525,546 Se cree que esta vía está implicada en la reanudación
meiótica de los ovocitos, aunque de manera prescindible, dado que los
ratones que carecen de PTEN (fosfatasa y homólogo de tensina eliminados
en el cromosoma 10, que funciona como un regulador negativo de la acción
de PI3K) o PDK (quinasa dependiente de fosfoinositido, que fosforila PKB/
Akt) no mostró alteraciones en la progresión de la meiosis II o la ruptura de la
vesícula germinal.547-549 El LHCGR también activa el objetivo de los
mamíferos del complejo 1 de rapamicina (mTORC1)
señalización a través de la vía de señalización cAMP/PI3K/Akt para regular
la proliferación celular y la expresión de varias enzimas clave involucradas
en la biosíntesis de andrógenos, incluida la enzima de escisión de cadena
lateral P450 (P450scc), 3ÿ-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 1 y 17ÿ-
hidroxilasa/17, 20liasa (P450c17), sin modificar la expresión de la proteína
intersticiales550,551 .
En resumen, una serie de estudios en animales de experimentación y
seres humanos indican que varias vías de señalización intracelular reguladas
por gonadotropinas deben unirse para regular de forma coordinada distintos
procesos celulares implicados en la esteroidogénesis, el crecimiento y la
maduración folicular, la diferenciación celular y la ovulación. Estas cascadas
de señalización se activan de forma regulada en el tiempo, dependiendo de
la expresión diferencial de los receptores de gonadotropinas durante las
diferentes etapas del ciclo ovárico. Así, las células de la granulosa de los
pequeños folículos antrales expresan el FSHR, con un aumento progresivo
durante la maduración folicular. La expresión de LHCGR inicialmente
confinada a las células intersticiales de la teca también se induce a expresarse
en los folículos antrales, y la expresión aumenta durante el crecimiento
folicular en respuesta a la FSH, la producción de estrógeno estimulada por
FSH y otros factores paracrinos. De hecho, ambos receptores de
gonadotropina se expresan simultáneamente en
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células de la granulosa de folículos preovulatorios maduros, en los que
la activación de LHCGR por su ligando afín finalmente suprime los
efectos de la FSH sobre la esteroidogénesis y el crecimiento folicular y
promueve el proceso ovulatorio. Después de la ovulación y la
diferenciación de las células de la granulosa en células lúteas, la
expresión de LHCGR regula la producción de progesterona y estradiol
por parte de las células lúteas hasta que se produce la regresión del
cuerpo lúteo.508,552,553
Agonismo sesgado
Actualmente se acepta que la activación preferencial de distintas
cascadas de señalización mediada por GPCR puede ocurrir a través
de señalización sesgada que resulta de la estabilización de distintas
conformaciones de receptores326,554 en respuesta a ligandos
particulares o mutaciones de receptores.554-557 En el caso de FSHR,
la selectividad funcional o Se ha documentado un agonismo sesgado
hacia la señalización mediada por Gi para algunas variantes glicosiladas
naturales de FSH humana558,559 y FSH recombinante expresada en
células de insecto,560 así como para compuestos alostéricos selectivos
con propiedades agonistas o antagonistas de FSH.561,562
También se ha observado un sesgo hacia la señalización de ERK1/2
MAPK mediada por ÿ-arrestina cuando la FSHR se trata con un
agonista modificado (LHÿ equina truncada [ÿ121 a 149], combinada
con LHÿ equina desglicosilada con Asn56) 563; esta molécula es
particularmente interesante, porque mientras activa preferentemente el
módulo de fosforilación de ÿ-arrestina-ERK1/2, se comporta
concomitantemente como un antagonista de la señalización de cAMP-
PKA estimulada por FSH cuando se prueba en concentraciones
equimolares.563,564 A nivel del receptor, sesgado El agonismo se ha
documentado cuando la expresión de hFSHR PM está gravemente
alterada como resultado de una mutación de pérdida de función
(Ala189Val, que se comenta más adelante565; véase la fig. 2.5). En
este caso, las arrestinas ÿ reclutadas en el receptor unido al agonista falta de desarrollo puberal y amenorrea primaria, con detención de la
ensamblaron un módulo MAPK, mientras que la señalización dependiente demaduración
También es interesante la mutación missense Met512Ile hFSHR, que
condujo a una respuesta alterada de la FSH en términos de acumulación
de AMPc y activación de PI3K, pero no de fosforilación de ERK1/2.567
La señalización condicional (señalización sesgada que depende del
contexto celular) en el LHCGR se ha informaron sobre dos moduladores
alostéricos negativos de FSHR562 (discutidos más adelante), en los
que inhibieron diferencialmente la esteroidogénesis mediada por hCG
cuando se probaron en la línea celular mLTC-1 derivada de tumor de
células de Leydig murinas y en células de Leydig primarias de rata.332
Aunque queda por definir el papel fisiológico de la señalización
sesgada en los receptores de gonadotropina, este fenómeno abre la
puerta al diseño de fármacos que puedan regular positiva o
negativamente las vías de señalización selectiva en el folículo y que
puedan ser potencialmente útiles en el ámbito clínico para tratar
enfermedades dependientes de estrógenos y/o andrógenos e
infertilidad, así como en la anticoncepción.
Mutaciones y polimorfismos de los
Genes del receptor de gonadotropina
• Las mutaciones naturales de los receptores de gonadotropina han
sido identificado.
• Algunas mutaciones naturales causan enfermedades.
• Algunos polimorfismos, aunque no causan enfermedades, pueden
modificar la respuesta a la terapia con gonadotropinas.
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 51
Mutaciones que ocurren naturalmente
Varias mutaciones naturales del LHCGR
y FSHR asociados con trastornos reproductivos humanos han sido
reportados. Estos se muestran en las Figs. 2.5, 2.6,
y 2.11, y se revisaron ampliamente con anterioridad.126,271,316,568-572
Las mutaciones en los receptores de gonadotropina pueden conducir
a la pérdida o ganancia de la función de la proteína receptora,
dependiendo de la ubicación, la naturaleza de la sustitución de
aminoácidos y cómo el la mutación altera la conformación y función del
receptor.
Las mutaciones de pérdida de función en los genes del receptor de
gonadotropina pueden conducir a la enfermedad, siempre que ambos
alelos estén afectados por una mutación, como ocurre en individuos
que son homocigotos o heterocigotos compuestos para mutaciones en
FSHR o LHCGR. Se han descrito varias mutaciones inactivadoras que
se producen de forma natural dispersas por toda la secuencia
polipeptídica de las moléculas del receptor de gonadotropina. En 46,
individuos XY, mutaciones de pérdida de función en el LHCGR
conducen a diferentes fenotipos, desde ambigüedad genital severa
(hipoplasia de células de Leydig tipo 1), debido al efecto de la mutación
en la respuesta de las células de Leydig fetal al estímulo de hCG, que
es determinante para la diferenciación fenotípica sexual masculina)
hasta criptorquidia y micropene (Tipo II LCH). Aunque las mujeres con
mutaciones inactivadoras en LHCGR muestran desarrollo puberal, con
frecuencia presentan amenorrea primaria o secundaria e infertilidad.
Mientras tanto, las mutaciones inactivantes y de pérdida de función de
hFSHR en los hombres conducen a una calidad deficiente de la
espermatogénesis con producción normal de testosterona, lo que
probablemente contribuya a la preservación de la fertilidad.573 En
mujeres con mutaciones inactivantes de hFSHR, el panorama es
completamente diferente y comprende un variedad de fenotipos, desde
la proteína folicular
G permaneció
entre laalterada.566
etapa primordial y preantral y resistencia
completa a la estimulación con FSH, hasta amenorrea secundaria e
insuficiencia ovárica prematura.565,574,575 En cualquier caso, el nivel
de Se ha demostrado que los receptores en el PM se correlacionan
con la gravedad del fenotipo clínico expresado por los pacientes que
tienen mutaciones inactivantes en estos receptores,568-570 que es un
determinante importante para la respuesta a las gonadotropinas
exógenas y otros fármacos potencialmente útiles, como el receptor
moduladores alostéricos (discutidos más adelante).
La mayoría de las mutaciones inactivadoras de los receptores de
gonadotropina son mutaciones sin sentido de la línea germinal que
dan lugar a sustituciones de un solo aminoácido en la proteína
receptora (v . fig. 2.5 y 2.6). Además, también se han detectado
mutaciones que causan deleciones o inserciones de aminoácidos, o
truncamientos prematuros del receptor. Debido a la distribución
dispersa de las mutaciones a lo largo de la secuencia del receptor, las
mutaciones pueden comprometer los dominios implicados en la unión
del agonista, la activación del receptor o el acoplamiento a los
efectores. Con frecuencia, las mutaciones también conducen a
proteínas mal plegadas o defectuosas que no pueden transportarse
desde el ER al PM. Estos defectos funcionales no son mutuamente
excluyentes, ya que una mutación puede conducir a defectos
funcionales tanto en el tráfico intracelular como en cualquier otra función. Es el caso,
El mutante de hLHCGR mal plegado Val609, que a pesar de expresarse
en niveles bajos en el PM y mostrar una afinidad de unión normal, es
incapaz de activar la proteína Gs tras la exposición al agonista.576 Lo
mismo parece ocurrir con el
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52 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción

mutante Ile625Lys hLHCGR, que conduce a LCH parcial; los estudios
in vitro mostraron que además de la baja expresión de PM, el mutante
se acoplaba deficientemente con los efectores.577,578 Dado que
además del plegamiento defectuoso y la retención intracelular de la
proteína, las mutaciones también pueden afectar una función intrínseca
del receptor (p. ej., transducción de señales) ; por lo tanto, podría
esperarse que el beneficio del tratamiento con chaperonas farmacológicas
para corregir el plegamiento y el tráfico sea limitado (se analiza más
adelante).
Entre los aproximadamente 34 mutantes de hLHCGR descritos hasta
ahora (ver Fig. 2.6), al menos 14 son defectos de tráfico en los que la
cantidad neta de receptores funcionales expresados en el PM disminuye
en un grado variable.572 El fenotipo de los individuos que albergan este
tipo Por lo tanto, el número de mutaciones inactivadoras de hLHCGR se
define por la densidad de receptores residuales no retenidos
intracelularmente que alcanzan el PM y se unen al agonista. Estos
receptores defectuosos de tráfico tienen mutaciones en su dominio
extracelular: Val144Phe, Phe194Val, Cys343Ser; las inserciones en
marco Gln18 Leu19ins11 y Gln18 Leu19ins9 inmediatamente aguas
arriba del sitio de escisión del péptido señal predicho, y Leu10Pro
(también en el péptido señal 572, 577-584); los TMD 5 a 7 (Cys543Arg,
Ala593Pro, delLeu608-Val609, Ser616Tyr e
Ile625Lys576-578,581,582,585-587) o el Ctail (1850delG).588
Algunos de estos hLHCGR mutantes son interesantes desde la
perspectiva de la relación estructura-actividad. El mutante mal plegado
de Phe194Val lleva la sustitución en un motivo altamente conservado
de los receptores de gonadotropina (193AFNGT197 en el ECD de
hLHCGR) que contiene el motivo de glicosilación de NGT.
Esta mutación afecta gravemente el tráfico del receptor mutante al PM
sin alterar la afinidad del agonista.580 En el caso de los hLHCGR
mutantes Ala593Pro y Ser616Tyr inactivadores, que conducen a formas
severas o moderadas de HCL, respectivamente, ambos exhibieron una
afinidad normal de unión al ligando, pero la respuesta al agonista estuvo
ausente o gravemente afectada debido al mal plegamiento y la retención
intracelular de la mayoría de los receptores mutantes sintetizados.429,581
Además, se demostró que estos mutantes particulares tienen
conformaciones distintas y muestran diferentes conformaciones de
plegamiento durante su maduración en el RE.429 Curiosamente ,
Newton y colegas589 encontraron que el agonista de molécula pequeña
alostérico permeable a las células (Org 42599) rescató parcialmente el
predominantemente variantes LHCGR no funcionales oa productos de
traducción del transcrito anormal que inhiben la función del receptor
normal a través de un efecto dominante negativo400,401 . El fenotipo
asociado a la deleción del exón 10 también merece una mención
especial. Este mutante se encontró inicialmente en un individuo 46, XY
que no logró la pubertad a pesar de la diferenciación sexual normal .
región bisagra del ECD (ver Fig. 2.6) se transportó correctamente a la
superficie celular, se unió tanto a la hLH como a la hCG con gran
afinidad, pero su sensibilidad a la hLH (y no a la hCG) se redujo unas
cuarenta veces.591 Por lo tanto, los residuos codificado por el exón 10
del LHCGR parece estar involucrado en la activación del receptor por
hLH pero no por hCG. En este sentido, la CGR del mono tití proporciona
un paralelo evolutivo interesante con la variante LHCGR mutante que
carece del exón 10. Dado que la hipófisis del tití no expresa LHÿ592 y el
exón 10 de este gen LHCGR de mono se separa del ARNm maduro,
este truncado el receptor solo se une y responde a hCG.593
Las mutaciones de ganancia de función en el LHCGR dan lugar a
mutantes constitutivamente activos (CAM; véanse las figuras 2.6 y 2.11A ).
y Tabla 2.1). Numerosas CAM hLHCGR han sido reportadas, detectadas
fácilmente muy probablemente debido al fenotipo dramático de la
pubertad precoz familiar isosexual limitada al varón independiente de la
gonadotropina.125 testosterona
Tabla 2.1 CAM que ocurren naturalmente en LHCGR y FSHR, y las
mutaciones correspondientes en posiciones homólogas en TSHR
Ubicación LHCGR TSHR FSHR
TMD1 Ala373(1,46)Val
Leu368(1,41)Pro*
Ala428Val - -
Met398(2,43)Thr Met453Thr -
TMD2 -
ECL2 asn431ile
TMD3 Leu457(3.43)arg
Leu512Arg/
-
gln Thr449(3.32)/

plegamiento, la expresión de PM y la función de estos dos mutantes, Isla/Ala

Ile 542 (5,54) Leu
TMD5 Val597Phe/ Ile545 Thr
comportándose como una chaperona farmacológica.415 La mutación
Leu
1850delG en el exón 11 también es interesante; esta es una mutación TMD6 Asp564(6.30)Gly
Asp619Gly Asp567Gly/Asn
de cambio de marco que da como resultado el reemplazo de los últimos Ala568(6.34)Val -
Ala623Ile/
83 residuos de aminoácidos del receptor por una secuencia de 21 Gato cerval
Met571(6,37)Ile -
Met626Ile
aminoácidos que carece del F(X)6LL que regula el tráfico en el extremo Ala572(6,38)Val
Ala627Val -
NH2-terminal de Ctail (anotado anteriormente). Este mutante no es una Ile575(6,41)Leu -
Ile630Leu/
proteína mal plegada sino un mutante que carece de una secuencia Reunió
Thr577(6.43)Ile -
importante crítica para el tráfico intracelular del receptor. No era Thr632Ala/
funcionalmente rescatable por chaperones farmacológicos.588 isla
Asp578(6.44)Gly/ -
Asp633Ala/
Tiro/Glu/His Glu/His/Tyr
El estudio de la fisiopatogénesis molecular de otras mutaciones ha Cys581 (6,47) Arg -
Cys636Trp
revelado importante información sobre las relaciones estructura-función TMD7 Cys617 (7,47) Tyr -
Cys672Thr
del LHCGR. Estos incluyen mutaciones en el exón 6A del LHCGR (en
*Los números entre paréntesis representan la numeración de aminoácidos según
los nucleótidos A557C y G558C, y el codón 580A>C [Lys194Glu]; las la nomenclatura de Ballesteros y Weinstein.327
dos últimas mutaciones observadas en un estado heterocigoto CAM, mutantes constitutivamente activos; ECL, asa extracelular;
compuesto que dan como resultado las sustituciones Thr461Ile e FSHR, receptor de la hormona estimulante del folículo; LHCGR,
Ile415Thr, respectivamente), lo que condujo a LCH tipo 1 o 2, debido a hormona luteinizante/receptor de coriogonadotropina; TMD, dominio
transmembrana; TSHR, receptor de la hormona estimulante de la tiroides.
una descomposición aberrante sin sentido mediada por el ARNm de las
Modificado de Ulloa-Aguirre A, Reiter E, Bousfield G, Dias JA,
transcripciones internas del exón 6A, lo que conduce a proporciones Huhtaniemi I: Constitutive activity in gonadotropin receptors. Adv Pharmacol
alteradas de las transcripciones de LHCGR que producen 70:37–80, 2014, con permiso de Elsevier Inc.
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hipersecreción presente en los sujetos afectados,125,594,595 las
características bioquímicas cardinales en los niños afectados son
niveles elevados de testosterona circulante frente a niveles
inmunorreactivos séricos indetectables de LH.596,597 Los signos de
la pubertad aparecen temprano en la infancia, entre los 2 y los 6
años de edad, y la la histología testicular se caracteriza por
hiperplasia de células de Leydig.594,595,597 El patrón de herencia
es autosómico dominante, aunque también se han informado casos
esporádicos.598 La expresión fenotípica es variable y también puede
mostrar penetrancia incompleta, como lo ejemplifican los casos con
la mutación Met398Thr. , en el que algunos miembros masculinos de
la familia que son portadores de la mutación exhiben fenotipos de
pubertad precoz.599 Esto sugiere que otros factores, como la
interacción con un gen modificador que silencia el efecto activador
del cambio de aminoácido, pueden afectar la expresión de el fenotipo
clínico. Una situación enigmática que aún permanece es la aparente
falta de fenotipo en mujeres con CAM hLHCGR. En este sentido,
recientemente se ha informado sobre las características fenotípicas
de un modelo animal portador de una CAM LHCGR; Los ratones
hembra knock-in que expresaban Asp582Gly (Asp578Gly en
humanos) LHCGR CAM exhibieron pubertad precoz, infertilidad, ciclo
estral irregular, niveles elevados de hormonas esteroides, ovarios
poliquísticos y tumores de células de la granulosa.600 Estos fenotipos provocaron por estas mutaciones particulares no condujo a una
contrastantes (es decir, fenotipo normal en mujeres versus un
fenotipo muy alterado en ratones hembra) puede deberse a varios
factores, incluidas las diferencias entre especies en la regulación de lugar, la mutación Asp578His solo se ha encontrado en niños con
la expresión y función de LHCGR, así como al hecho de que en las
mujeres la actividad basal del receptor en ausencia de ligando es
modesta, mientras que en ratones es mucho mayor (aumento de tres
a cinco veces en cAMP basal en comparación con el receptor WT en
mujeres versus 23 veces en ratones).601
Hasta la fecha, se han informado 14 mutaciones de ganancia de
función de origen natural en hLHCGR.316 En contraste con la
ubicación dispersa de las mutaciones de pérdida de función de
origen natural de hLHCGR, todas las CAM de origen natural
notificadas hasta la fecha se localizan en exón 11, que codifica el
extremo carboxilo-terminal de la región bisagra del ECD, así como el
7TMD y las regiones intracelulares del hLHCGR (véanse las Figs.
2.6 y 2.11A).316,571 Más específicamente, las CAM hLHCGR
surgen del aminoácido sustituciones en el dominio serpentino de la
proteína receptora, en particular en las hélices ÿ que conforman los
TMD o en la unión de las hélices con los bucles intracelulares (p. ej., la cual no se ha descrito ningún fenotipo reproductivo clínico; Se
la mutación Asp564Gly; véanse las figs. 2.6 y 2.11A y el cuadro 2.1).
La primera LHCGR CAM identificada estaba ubicada en el aminoácido
578 (Asp578Gly) en el TMD6,602,603 y desde entonces se han
identificado siete ubicaciones adicionales en esta hélice como sitios
para las CAM de este receptor.596,597,602-608 son puntos calientes
para las CAM hLHCGR de origen natural. El resto de CAM LHCGR
se ubican en el resto de TMD, excepto TM4.596,599,604,607-610
Varias características importantes caracterizan a las CAM
LHCGR. Estos incluyen, primero, la ubicación en residuos altamente
conservados entre los GPHR; de hecho, las CAM TSHR en estos
mismos residuos conservados también se han identificado en
pacientes con adenomas tiroideos autónomos (en el caso de
mutaciones somáticas) o hipertiroidismo no autoinmune hereditario/
esporádico (mutaciones de la línea germinal; consulte la Tabla
2.1),611 lo que sugiere que estos Los receptores comparten mecanismos comunes de activación.
Como en el caso de las CAM hLHCGR, el TMD6 de la hTSHR es un
punto caliente para las mutaciones que ocurren naturalmente.611 En
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 53
Por el contrario, solo dos de las cuatro CAM hFSHR identificadas
hasta la fecha (Ile545Thr en TMD3 y Asp567 en la cara citoplásmica
de TMD6) comparten ubicaciones con las CAM LHCGR y
TSHR.612-614 En segundo lugar, cuando se expresan en tipos de
células heterólogas, las CAM hLHCGR muestran una variable los
niveles de actividad constitutiva (es decir, independiente de
hormonas) y la adición de hLH o hCG a las células que expresan
estos mutantes pueden o no dar como resultado una activación
adicional,571 lo que probablemente refleja tanto la estabilización del
receptor en estados intermedios de activación como secundariamente
la fuerte, Estimulación mediada por AMPc de la actividad de la
fosfodiesterasa en estado basal610,615. Por otro lado, se ha
demostrado que diferentes CAM son capaces de estimular múltiples
proteínas G y segundos mensajeros en estado basal. Es el caso, por
ejemplo, de las CAM Leu457Arg y Asp578Tyr, que activan las
proteínas Gs, Gi/o y Gq/11 y estimulan la producción de AMPc,
fosfatos de inositol y progesterona, así como la fosforilación de
ERK1/2 en ausencia de agonista cuando se expresa en las células
tumorales Leydig MA-10 de ratón.616-618 Además, ninguno de estos
mutantes exhibió una activación preferencial o selectiva de cualquiera
de estas proteínas G en condiciones basales o estimuladas por
agonistas, lo que sugiere que las conformaciones del receptor activo
señalización sesgada del receptor mutante, al menos en el contexto
celular de esta línea de células tumorales en particular.616 En tercer
pubertad precoz independiente de gonadotropina con adenomas de
células de Leydig. .619-621 Esta mutación de sentido erróneo hace
que las células de Leydig experimenten una transformación
neoplásica y, a diferencia de todas las demás LHCGR CAM, que son
mutaciones de la línea germinal, la Asp578His se produce de forma
somática. lly Parece que los efectos oncogénicos de la CAM
Asp578His son una característica particular de las células de Leydig
humanas, y que estos efectos mitógenos probablemente estén mediados por meca
Las mutaciones naturales del FSHR son menos numerosas, pero
pueden clasificarse de manera similar (v . fig. 2.5). De hecho, hasta
la fecha solo se han informado 17 mutaciones inactivantes en el
hFSHR.271,316,569,570 Como se ha observado con el inactivante
hLHCGR, en general existe una buena correlación entre la actividad
residual exhibida por los mutantes hFSHR y la gravedad del fenotipo
clínico. expresado por los pacientes portadores de la(s)
mutación(es).125,575 La excepción es la mutación Phe591Ser para
encontró que esta mutación en particular, que conduce a la unión de
agonistas y la señalización intracelular severamente alterada, está
asociada con el desarrollo de tumores de los cordones sexuales.622
es el hipogonadismo hipergonadotrópico, la detención de la
maduración folicular más allá de la etapa primaria y la ausencia total
de respuesta a la hFSH.575,623 Se observan fenotipos menos
graves en mujeres homocigóticas o heterocigóticas compuestas para
otras mutaciones, e incluyen amenorrea secundaria, resistencia a las
gonadotropinas y desarrollo folicular hasta la etapa antral.125,574 El
fenotipo en hombres homocigotos no es clínicamente obvio, ya que
se altera la calidad del esperma pero se conserva la fertilidad.573
Las propiedades funcionales de muchos de estos mutantes de
hFSHR se han estudiado expresando los mutantes en heterólogos
líneas celulares. Ala419Thr en TM2 y Arg573Cys en la cara
citoplasmática de TM6 alteran la transducción de señales, mientras
que tienen poco o ningún efecto.
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54 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
sobre la unión de hFSH o el tráfico adecuado del hFSHR al PM.574,624
Los defectos funcionales de los mutantes Val221Gly (en el ECD)625 y
Ala575Val (en el TMD6)626 no se han estudiado en detalle, mientras
que en el caso del Pro348Arg hFSHR (ubicado en la región bisagra
del receptor), tanto la unión del ligando como la señalización estimulada
por agonistas se vieron gravemente afectadas . 627 Aún se desconoce
si estas tres mutaciones de hFSHR interfieren con el tráfico adecuado
del receptor desde el RE hasta el MP.
Como en el caso de hLHCGR, muchas mutaciones de pérdida de
función en hFSHR son proteínas con transporte alterado del receptor
al PM, lo que induce una falta total de unión a hFSH y, por lo tanto, de
respuesta al agonista.572
Entre los hFSHR mutantes informados hasta la fecha, al menos seis
son receptores defectuosos que se han detectado como moléculas
retenidas intracelulares (Ile160Thr, Ala189Val, Asn191Ile, Asp224Val
en el ECD, 312,574,628 Asp408Tyr en el TMD2,629 y Pro519Thr en
el EL2623) por en estudios in vitro. La mutación natural Ala189Val
provoca un profundo defecto en la orientación de la proteína receptora
a PM,630, lo que confirma la importancia del motivo 189AFNGT para
el tráfico intracelular de hFSHR. Este es también el lugar de las
mutaciones de pérdida de función en hLHCGR (ver arriba).580 La
valina en la posición 189, así como la isoleucina en la posición 191,
pueden interferir con la integridad estructural de los LRR, que albergan
el sitio de glicosilación, y la perturbación de esta estructura
probablemente perjudica la formación adecuada del receptor LRR,
particularmente su porción ÿ-helicoidal. Aunque la supuesta pérdida de
glicosilación puede afectar el plegamiento y el tráfico del receptor
mutante a la PM, aún debe determinarse si esta forma mutante del
receptor está glicosilada o no en el sitio Asn191. Cuando el mutante
Ala189Val se sobreexpresa in vitro, solo una proporción muy pequeña
del receptor mutado está presente en el PM pero es funcional,566,630
aunque la producción de AMPc estimulada por FSH por el receptor
residual expresado en PM es relativamente mayor de lo esperado
dada su baja expresión en la membrana.579 En cambio, la mayor
parte del receptor mutado queda secuestrado dentro de la célula, lo
que explica el mecanismo de inactivación.630 Curiosamente, el nivel
reducido de La expresión de PM de Ala189Val hFSHR confiere un
acoplamiento preferencial a la vía de señalización mediada por ÿ-
arrestina, similar a la observada cuando el receptor WT se expresa a
bajas densidades de PM, lo que indica que la señalización selectiva
se debe al bajo nivel de expresión de PM en lugar de a la mutación en
sí.579 Esta observación podría ayudar a aclarar por qué las mutaciones
de FSHÿ son más perjudiciales para la fertilidad masculina que la
mutación hFSHR Ala189Val,139,141,573 que conserva una fracción
de su repertorio de señalización del receptor.
También son interesantes otras mutaciones inactivadoras en el
hFSHR. La mutación Asn191Ile se detectó originalmente en estado
heterocigoto en una mujer fenotípicamente normal.628
Aunque la mutación afecta el sitio de glicosilación putativo en la
posición 191 del receptor (discutido anteriormente), no se han realizado
estudios sobre el efecto de esta mutación en la capacidad de unión y
la expresión de PM del FSHR; en este sentido, los estudios in vitro
han sido algo contradictorios en cuanto al impacto de esta mutación
en la señalización estimulada por agonistas580,628, pero sin embargo
sugirieron que una fracción del receptor transfectado estaba, de hecho,
presente en el PM.
Dado que la glicosilación en una sola posición en el ECD es suficiente
para el plegamiento y el tráfico del FSHR al PM,427 estos estudios
sugieren que la expresión limitada de PM
del receptor mutante puede deberse principalmente a la alteración en
la integridad estructural del motivo AFNGT, más que a la ausencia de
glicosilación en este sitio en particular. Como se mencionó
anteriormente, la ubicación de la mutación y la naturaleza de la
sustitución de aminoácidos son fuertes determinantes de las
características funcionales exhibidas por los hFSHR mutantes. Por
ejemplo, la mutación Pro519Thr en el centro de EL2 conduce a una
falla completa para unirse al agonista y desencadenar la señalización
intracelular; las mujeres homocigóticas para esta mutación expresan
un fenotipo grave que incluye ausencia de pubertad, amenorrea
primaria y ovarios pequeños.623 Los efectos de esta mutación en
particular contrastan con los provocados por otras mutaciones en la
región serpentina de hFSHR (Ala419Thr, Arg573Cys y Leu601Val) ,
que por lo general da como resultado la inactivación parcial del
receptor, con efectos mínimos sobre la unión de FSH.312,574,624 Por
lo tanto, parece que la sustitución de prolina en la posición 519 provoca
un defecto conformacional grave que lleva al atrapamiento del receptor
en el RE.623
Debido a que el esqueleto peptídico de la prolina está restringido en
una estructura de anillo, la aparición de este aminoácido se asocia con
un giro forzado en la secuencia de la proteína, que probablemente se
pierde por la sustitución con la treonina más reactiva; por lo tanto, es
posible que el giro abrupto en el medio de EL2 sea probablemente un
requisito no solo para la actividad311 sino también para el enrutamiento.
A diferencia del hLHCGR, hasta ahora solo se ha detectado una
CAM hFSHR "pura" (Asp567Gly, en la unión IL3-TMD6) y solo en un
paciente masculino.631 Esta CAM hFSHR se identificó en un hombre
que exhibió una espermatogénesis normal en un configuración de
gonadotropinas circulantes indetectables debido a hipofisectomía
previa. Los ratones transgénicos generados que albergan la mutación
FSHR Asp567Gly en un fondo deficiente de gonadotropina han
confirmado que este mutante en particular se comporta como una
CAM in vivo y puede estimular una respuesta de AMPc en las células
de Sertoli y acciones autónomas similares a las de la FSH en un medio
deficiente en ligandos.632-634 Otras mutaciones específicas de FSHR
están asociadas con OHSS635-638 espontáneo o asociado con el
embarazo o desensibilización e internalización alteradas (ver Figs. 2.5,
2.11B y Tabla 2.1).306 En los casos de SHO, los FSHR mutantes
exhiben un bajo nivel de activación constitutiva. como se detecta in
vitro, pero el fenotipo OHSS es causado por la pérdida de especificidad
de ligando de los receptores mutados, haciéndolos sensibles a niveles
altos de hCG o hTSH (discutido más adelante). 635-640 Por lo tanto,
el fenotipo femenino de un hFSHR CAM genuino aún permanece
desconocido, y el fenotipo masculino puro se basa en un solo paciente.
La CAM Asn431Ile hFSHR se identificó por casualidad en un hombre
sano que presentaba espermatogénesis normal, FSH sérica suprimida
y niveles normales o elevados de marcadores bioquímicos para la
acción de la FSH.306
Fue particularmente interesante que la mutación se ubicara en EL1, y
el bajo nivel de actividad constitutiva (muy probablemente debido a la
reducción de la expresión de PM) se asoció con una desensibilización
e internalización estimuladas por agonistas marcadamente alteradas.
Estudios posteriores con este mutante en particular mostraron que la
desensibilización tardía y la internalización del mutante probablemente
se debieron a una falla en el reclutamiento de la ÿ-arrestina 1 endógena
adecuadamente.306
Las CAM del receptor de la hormona estimulante del folículo que
conducen al SHO espontáneo (Asp567Asn; Thr449Ala en TM3; e
Ile545Thr en TMD5) son particularmente interesantes. Estas
mutaciones conducen a cambios conformacionales en la estructura
del receptor que, además de desencadenar una modesta actividad constitutiva, “relajan”
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la especificidad de unión del receptor, lo que permite que el receptor
alterado se una y se active por altas concentraciones de hCG635-638
o TSH.635-637 Como se discutió anteriormente, en el estado sin
ligando, el ECD de hFSHR ejerce una supuesta influencia inhibitoria
sobre el TMD manteniendo el receptor en un estado inactivo. Tras la
unión del agonista o cuando se introducen mutaciones en Ser273 (en
la región bisagra),641 los EL anclados de los TMD se liberan de esta
influencia inhibitoria, lo que permite que los TMD alcancen una
conformación activa.10 La patogenia del SHO asociado con estas
CAM se ha explicado por la interacción promiscua de baja afinidad de
hCG o TSH, con el ECD de un FSHR mutante en un entorno de una
región serpentina de FSHR parcialmente "desbloqueada", lo que lleva
a un reclutamiento folicular excesivo.635 La capacidad de hFSHR
CAM Asp567Asn para activarse por hCG y TSH también ha sido
confirmada en modelos animales.633
La rareza de las CAM hFSHR de origen natural probablemente se
deba a varias razones, entre ellas (1) la estabilidad relativa de la TMD
de la hFSHR en el estado inactivo en comparación con la hLHCGR642
(de hecho, la producción basal de AMPc en las CAM hFSHR es
bastante modesta, y la exposición a dosis submáximas de hFSH
generalmente da como resultado una respuesta robusta de
AMPc306,631,635-637); (2) la mayor refractariedad del hFSHR a la
actividad constitutiva inducida por mutación en comparación con el
hLHCGR643; (3) la falta de fenotipos claramente definidos, tanto en
machos como en hembras, lo que dificulta la identificación de las CAM
hFSHR de origen natural; y (4) las mutaciones en hFSHR que conducen
a la actividad constitutiva podrían sesgar la actividad hacia la
producción de AMPc, la producción de trifosfato de inositol o la
activación de vías mediadas por ÿ-arrestina, como la señalización de
MAPK-ERK, lo que complica su identificación a menos que se analicen
todos estos criterios de valoración.
Polimorfismos de la gonadotropina
genes receptores
Al menos 300 SNPs del LHCGR y 2000 del FSHR
han sido identificados (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP/
snp_ref.cgi?locusId=3973 y http://www.ncbi.nlm.nih.gov/
SNP/snp_ref.cgi?locusId=2492).644-648 Sin embargo, sólo unos
pocos tienen relevancia clínica. Solo tres SNP del LHCGR ocurren en
los exones. Una inserción en marco de seis nucleótidos/
La deleción entre los codones 18 y 19 del exón 1 (18insLQ) da como
resultado la expresión de dos variantes de hLHCGR que se diferencian
por la presencia o ausencia de un par Leu-Gln cerca del NH2-
terminal del receptor maduro; en sujetos homocigotos, esta variante
se ha asociado con cáncer de mama de aparición temprana y
supervivencia corta sin enfermedad en mujeres.649-651 Esta variante
del receptor tiene una alta prevalencia en caucásicos644 y, cuando se
expresa in vitro, mostró niveles más altos de expresión de PM
sensibilidad que la variante LHCGR no LQ.650
Dos SNP frecuentes adicionales en el exón 10 del LHCGR
el gen codifica para Asn o Ser en los codones 291 y 312 en la región
bisagra de su dominio extracelular. Dado que la prevalencia de la
variante 312Asn/Ser es alta en pacientes masculinos infértiles, su
presencia se ha asociado con daño espermatogénico.652 La presencia
de Asn o Ser en cualquiera de estas posiciones no parece cambiar la
expresión de PM de hLHCGR,653 lo cual es interesante dado que el
codón 291 es un sitio de glicosilación cuando Asn está presente en
esta posición.
Solo cinco de los SNP de FSHR son exónicos. Todos están
ubicados en el exón 10, pero solo cuatro provocan un cambio de codificación.
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 55
(Ala307Thr, Arg524Ser, Ala665Thr y Ser680Asn). Los más comunes
y mejor estudiados son Ala307Thr y Ser680Asn (ver Fig. 2.5), que se
expresan en un fuerte desequilibrio de ligamiento, y las variantes
alélicas más comunes Thr307/
Asn680 y Ala307/Ser680 se distribuyen casi por igual entre las
caucásicas,646,647 pero su incidencia es mucho menor en mujeres
de origen hispano.654 Los polimorfismos Ala307Thr y Ser680Asn
parecen estar asociados con una menor respuesta a la hFSH exógena
cuando se emplean en protocolos de hiperestimulación ovárica
controlada, y por lo tanto, tienen un valor predictivo para determinar la
dosis óptima de FSH que se utilizará en protocolos de hiperestimulación
ovárica controlada (mujeres que albergan la variante Ala307/Ser680
que requieren dosis más altas de FSH569,647). La variante Ser680
también se ha asociado con un volumen testicular más bajo en
poblaciones seleccionadas del norte de Europa.655 Los estudios in
vitro han demostrado que la variante Ser680 exhibe una cinética de
transducción de señales alterada, un aumento en el reclutamiento de
ÿ-arrestina, una internalización estimulada por agonistas y una
disminución de la fosforilación de CREB. , transcripción de genes
dependientes de CREB y activación de PKA nuclear.656
El polimorfismo A –29G>A en la región promotora central del FSHR se
ha asociado con una reducción de la actividad transcripcional del gen
del receptor en mujeres con el genotipo –29A/A, así como con
amenorrea primaria o secundaria y mala respuesta a FSH exógena
debido a su efecto sobre la expresión de la FSHR.569 La frecuencia
del alelo menor oscila entre el 50 % y el 70 % en el este de Asia y
Europa, respectivamente, y es menor en las mujeres hispanas.654
Receptores homólogos
Como se describió anteriormente, los GPHR se caracterizan por la
presencia de un gran ECD NH2-terminal que contiene varios LRR, que
sirve como sitio de unión al ligando. La familia GPHR ahora se incluye
en la familia de receptores acoplados a proteína G (LGR) que contienen
LRR, que se ha ampliado para incluir varios LGR agrupados en tipo A,
B y C. Los LGR tipo A incluyen los GPHR; El tipo B incluye los LGR 4
a 6, cuyos ligandos son R-espondinas; y el tipo C incluye LGR7 y 8,
con los péptidos relacionados con la insulina H2 relaxina y el péptido
similar a la insulina 3 o INSL3 como ligandos afines.277 Estos últimos
LGR también se conocen como receptores peptídicos de la familia de
la relaxina (RXFP1 y RXFP2, respectivamente).657,658 Los LGR
participan en diversos procesos fisiológicos, incluidos la reproducción,
el metabolismo óseo, la función cardiorrenal, el crecimiento celular y la
diferenciación de células madre.659-664
Gonadotropina de bajo peso molecular
Agonistas y antagonistas de los receptores
• La intervención farmacológica ha explotado la perturbación de GPCR TMD.
• El desarrollo de terapias para aplicaciones de fertilidad puede explotar
el GPHR TMD.
• Las terapias activas por vía oral de molécula pequeña basadas en GPHR pueden
algún día reemplazará la terapia con gonadotropina y, por el contrario,
bloqueará los efectos adversos de las mutaciones de GPHR.
Aunque la naturaleza de los cambios conformacionales en el
7TMD de los receptores de gonadotropina después de la unión del
ligando aún se desconoce, la importancia de la TMD en el receptor
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56 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
la activación se destaca por la actividad constitutiva desencadenada por
mutaciones en este dominio, así como por analogía con otros GPCR
bien conocidos para los cuales se han caracterizado los mecanismos de
activación,323,325,326,328,330,665 a pesar de las diferencias
significativas en la ubicación del bolsillo de unión del ligando entre los
receptores para pequeños ligandos y los receptores de gonadotropina.
Además, el descubrimiento de una serie de compuestos de bajo peso
molecular (LMW) con un peso molecular de corte de 900 MW (lo que se
asocia con una buena biodisponibilidad oral), y que interactúan con el
TMD de los receptores de gonadotropina como positivo (PAM) o
moduladores alostéricos negativos (NAM), también han proporcionado
pistas importantes sobre los mecanismos que favorecen la activación
del receptor de gonadotropina. El interés en estos compuestos se refleja
en el hecho de que hasta la fecha hay más de 170 moléculas LMW
conocidas que se dirigen a GPHR.
La unión de estos compuestos de LMW contrasta con los ligandos
afines, que se unen al dominio extracelular del receptor.
Durante mucho tiempo ha sido un objetivo reemplazar las hormonas
proteicas de gonadotropina con pequeñas moléculas orgánicas de BPM
que estimularían los receptores de gonadotropina o modularían la
actividad de los agonistas, y que se pueden administrar por vía oral. La
reducción de la flexibilidad molecular, medida por el número de enlaces
giratorios, y la baja área de superficie polar o el recuento total de enlaces
de hidrógeno (suma de donantes y aceptores) también son indicadores
importantes de una buena biodisponibilidad oral, independientemente
del peso molecular.666 A pesar de esto predictores de buena
biodisponibilidad oral, se ha logrado un aumento en la actividad de
moléculas pequeñas con la preparación de análogos diméricos
bivalentes; este enfoque ha funcionado con otras moléculas pequeñas
de FSHR.667 Esto puede reflejar la naturaleza única de FSHR, que
parece menos flexible que LHCGR y es menos susceptible a mutaciones
activadoras. Un aumento neto en la actividad puede deberse a una
disminución en el tiempo de inactividad que tenga un efecto mayor que
la pérdida del potencial de biodisponibilidad.
Reemplazar las hormonas gonadotropinas con moléculas pequeñas
activas por vía oral requerirá la identificación de PAM de molécula
pequeña de LHCGR y FSHR con actividades agonistas. Además, es
fundamental que estos activen las vías de PKA y PKB de manera
sensible (eficacia nanomolar in vitro) y específica (cruce mínimo con
TSHR ) . . Por lo tanto, es probable que interactúen con los TMD para
estabilizar los confórmeros activos de FSHR. Los agonistas de FSHR
resultarán útiles para la inducción del crecimiento y la maduración
folicular, para la recuperación de ovocitos o la concepción del ciclo
natural.
Esfuerzos recientes han dado como resultado prometedores agonistas
de FSHR674-676 y agonistas de LHCGR que pueden ser útiles para el
tratamiento de testículos no descendidos o la inducción de la ovulación.
Org 43553, por ejemplo,677 exhibió una vida media circulatoria más
corta que la hCG, estimuló la producción de testosterona en las células
primarias de Leydig y fue capaz de inducir la ovulación en ratones y
ratas hembra después de una administración oral de dosis única sin
provocar SHO en modelos de roedores. 678,679 Los ligandos diméricos
basados en el Org original 43533 también son agonistas alostéricos de
LHCGR efectivos.680 En este sentido, los agonistas alostéricos de
LHCGR pueden administrarse para inducir la producción de andrógenos
en las células de la teca en los casos en que se produce de forma natural
un nivel insuficiente de andrógenos, y dado que es un sustrato para la
producción de estrógenos cuando la FSH induce la aromatasa, un
agonista de FSH puro frente a andrógenos tecales insuficientes puede
no producir ovocitos de alta calidad.680 Otro objetivo es identificar
moléculas pequeñas que inhiben la acción de las gonadotropinas y que
pueden utilizarse como anticonceptivos no esteroideos (bloquean la
ovulación o bloquean el desarrollo folicular). Curiosamente, las
sustituciones de sustituyentes pueden convertir agonistas PAM de
molécula pequeña de FSHR en NAM.668,681 Tomados al pie de la letra,
esos resultados sugieren que los bolsillos de unión ortostérica y alostérica
en los TMD son espacialmente similares. Por ejemplo, se modificó un
agonista de tiazolidinona FSHR PAM para que perdiera la actividad
agonista de FSHR mientras ganaba la capacidad de bloquear la actividad
de cAMP y aromatasa inducida por FSH.668
Uno de los primeros informes de un antagonista no peptídico
selectivo de la FSHR se informó hace 15 años.682 Este compuesto,
identificado mediante estrategias de detección de alto rendimiento, era
un inhibidor bastante débil (micromolar bajo), probablemente porque era
un modulador alostérico de la unión , no un inhibidor competitivo. Este
antagonista también inhibió el AMPc inducido por FSH en células CHO
que expresan FSHR, la progesterona inducida por FSH en células
suprarrenales que expresan FSHR y la producción de estrógenos
inducida por FSH en células de la granulosa de rata. Otro antagonista
de FSHR se informó unos años más tarde.681 En contraste con el
compuesto anterior, este antagonista de molécula pequeña de FSHR no
inhibió la unión de FSH a su receptor. Sin embargo, bloqueó la
producción de cAMP inducida por FSH utilizando FSHR humano en
células CHO, pero con una inhibición de cAMP 54 veces menos potente
en una línea celular de granulosa de rata. El compuesto también fue
eficaz para inhibir el crecimiento de folículos y la ovulación en un cultivo
de ratón ex vivo. Curiosamente, recientemente se ha demostrado que
este antagonista de molécula pequeña de FSHR tiene una potencia
aumentada in vitro cuando se fabrica como una molécula pequeña
bivalente.667 La química médica guiada por la actividad estructural
adicional realizada con estos antagonistas puede proporcionar una potencia aún mayor.683
Recientemente se identificó un FSHR NAM (ADX61623).562 Esta
pequeña molécula bloquea la producción de AMPc y progesterona en
células de la granulosa de rata, sin bloquear la producción de estradiol,
lo que demuestra que el FSHR muestra una señalización sesgada como
se describió anteriormente. Esta molécula exhibió cierta inhibición débil
del receptor de LH además de su actividad inhibidora de FSHR, pero no
tiene actividad del receptor de TSH. No fue completamente eficaz para
suprimir el desarrollo de folículos inducido por FSH y la producción de
ovocitos, probablemente debido a que no bloqueó la producción de
estradiol. Posteriormente se descubrió otro FSHR NAM, que bloquea el
AMPc inducido por FSH, así como las dos vías esteroidogénicas
inducidas por FSH (progesterona y estrógeno) . por supuesto, un
anticonceptivo no esteroideo, este último un objetivo buscado durante
mucho tiempo por muchas mujeres.
Vale la pena mencionar una dicotomía entre FSHR y LHCGR. No
hay antagonistas de molécula pequeña de LHCGR que se hayan
desarrollado y divulgado públicamente.
Bien puede ser que la flexibilidad del LHCGR aún permita el compromiso
de las proteínas G y la posterior activación de la adenilato ciclasa,
incluso cuando se unen moléculas pequeñas.
Por otro lado, el FSHR, que parece menos flexible y, por lo tanto, más
estable a las mutaciones que podrían causar una activación
independiente del ligando, parece haber engendrado un mayor número
de candidatos a inhibidores de moléculas pequeñas que el LHCGR.
Algunas de estas NAM de FSHR se cruzan con LHR, aunque con una
potencia reducida.332
Al igual que con otros GPCR, 415 moléculas pequeñas permeables
a la membrana también se han empleado experimentalmente como
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57

chaperonas farmacológicas para rescatar la función de los Lapthorn AJ, Harris DC, Littlejohn A, et al: Estructura cristalina de la gonadotropina
coriónica humana. Naturaleza 369:455–461, 1994.
receptores de gonadotropina mal plegados. Este es el caso de
Nagirnaja L, Rull K, Uuskula L, et al: Genómica y genética de la gonadotropina
Org42599, que rescató los LHCGR mutantes Ser616Tyr y genes de la subunidad beta: FSHB único y loci LHB/CGB duplicado. Mol Cell
Ala593Pro mal plegados que conducían a LCH,589 , así como Endocrinol 329:4–16, 2010.
Org41841, que rescató la función del mutante FSHR685 de Puett D, Wu CB, Narayan P: El lazo que une: diseño de gonadotropinas coriónicas
Ala189Val con pérdida completa de función in vitro. Estos humanas monocatenarias biológicamente activas y un complejo receptor de
gonadotropina mediante ingeniería de proteínas. Biol Reprod 58:1337–1342, 1998.
moduladores alostéricos pueden emplearse potencialmente en el
Richards JS, Pangas SA: El ovario: biología básica e implicaciones clínicas.
ámbito clínico para tratar la HCL, en particular la variante de tipo J Clin Invest 120:963–972, 2010.
II, que se asocia con fenotipos clínicos leves, así como para Ulloa-Aguirre A, Crepieux P, Poupon A, et al: Nuevas vías en la gonadotropina
mejorar la calidad del esperma en hombres portadores de FSHR mutantes señalización del receptor y agonismo sesgado. Rev Endocr Metab Trastorno
mal plegados.
12:259–274, 2011.
Ulloa-Aguirre A, Reiter E, Bousfield G, et al: Actividad constitutiva en
Principales referencias receptores de gonadotropinas. Adv Pharmacol 70:37–80, 2014.
Ascoli M, Fanelli F, Segaloff DL: El receptor de lutropina/coriogonadotropina. Ulloa-Aguirre A, Zariñán T: El receptor de folitropina: combinación de estructura y
Una perspectiva de 2002. Endocr Rev 23:141–174, 2002. función. Mol Pharmacol 90(5):596–608, 2016.
Bruser A, Schulz A, Rothemund S, et al: El mecanismo de activación de los receptores Ulloa-Aguirre A, Zarinan T, Dias JA, et al: Mutaciones en receptores acoplados a
de hormonas glicoproteicas con implicaciones en la causa y la terapia de proteína G que afectan el tráfico de receptores y la función reproductiva. Mol Cell
enfermedades endocrinas. J Biol Chem 291:508–520, 2016. Endocrinol 382:411–423, 2014.
Davis JS, Kumar TR, May JV, et al: Variantes de glicosilación de la hormona estimulante Wu H, Lustbader JW, Liu Y, et al: Estructura de la gonadotropina coriónica humana a
del folículo de origen natural. J Glycomics Lipidomics 4:e117, 2014. una resolución de 2,6 Angstrom del análisis MAD de la proteína selenometionilo.
Fox KM, Dias JA, Van Roey P: Estructura tridimensional de la hormona estimulante del Estructura 2:545–558, 1994.
folículo humano. Mol Endocrinol 15:378–389, 2001.
Jiang X, Dias JA, He X: Biología estructural de las hormonas glicoproteicas y sus
receptores: información sobre la señalización. Mol Cell Endocrinol 382:424–451, Referencias
2014.
Vea una lista completa de referencias en ExpertConsult.com
Hearn MTW, Gomme PT: Arquitectura molecular y procesos de biorreconocimiento de
la superfamilia de proteínas de nudo de cistina: parte I. Las hormonas glicoproteicas.
J Mol Recognit 13:223–278, 2000.
Machine Translated by Google
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57.e1
Referencias
1. Hearn MTW, Gomme PT: Arquitectura molecular y procesos de biorreconocimiento
de la superfamilia de proteínas de nudo de cistina: Parte I. Las hormonas de proteínas
glico. J Mol Recognit 13:223–278, 2000.
2. Fiddes JC, Goodman HM: El ADNc para la subunidad beta de la gonadotropina
coriónica humana sugiere la evolución de un gen mediante la lectura en la región 3'
no traducida. Naturaleza 286:684–687, 1980.
3. Talmadge K, Vamvakopoulos NC, Fiddes JC: Evolución de los genes para las
subunidades beta de la gonadotropina coriónica humana y la hormona luteinizante.
Naturaleza 307: 37–40, 1984.
4. Nakav S, Jablonka-Shariff A, Kaner S, et al: El gen LH beta de varios mamíferos
incorpora una secuencia similar a un péptido carboxilo terminal que revela un papel
crítico para los oligosacáridos de mucina en la evolución de lutropina a gonadotropina
coriónica en el animal fila. J Biol Chem
280:16676–16684, 2005.
5. Lapthorn AJ, Harris DC, Littlejohn A, et al: Estructura cristalina de la gonadotropina
coriónica humana. Naturaleza 369:455–461, 1994.
6. Wu H, Lustbader JW, Liu Y, et al: Estructura de la gonadotropina coriónica humana
a una resolución de 2,6 Angstrom a partir del análisis loco de la proteína
selenometionilo. Estructura 2:545–558, 1994.
7. Tegoni M, Spinelli S, Verhoeyen M, et al: Estructura cristalina de un complejo ternario
entre la gonadotropina coriónica humana (hCG) y dos fragmentos Fv específicos
para las subunidades alfa y beta. J Mol Biol 289:
1375–1385, 1999.
8. Fox KM, Dias JA, Van Roey P: estructura tridimensional de la hormona estimulante
del folículo humano. Mol Endocrinol 15:378–389, 2001.
9. Fan QR, Hendrickson WA: Estructura de la hormona folículo estimulante humana en
complejo con su receptor. Naturaleza 433:269–277, 2005.
10. Jiang X, Liu H, Chen X, et al: Estructura de la hormona estimulante del folículo en
complejo con todo el ectodominio de su receptor. Proc Natl Acad Sci USA 109:12491–
12496, 2012.
11. DeBeer T, VanZuylen C, Leeflang BR, et al: Estudios de RMN de la subunidad alfa
libre de la gonadotropina coriónica humana: influencias estructurales de la N-
glicosilación y la subunidad beta en la conformación de la subunidad alfa. Eur J
Biochem 241:229–242, 1996.
12. Erbel PJA, Karimi-Nejad Y, De Beer T, et al: Estructura de la solución de la subunidad
alfa de la gonadotropina coriónica humana. Eur J Bioquímica
260:490–498, 1999.
13. Heikoop JC, Grootenhuis PDJ, Blaauw M, et al: Expresión de una coriogonadotropina
monocatenaria bioactiva en Dictyostelium discoideum.
Eur J Biochem 256:359–363, 1998.
14. Erbel PJA, Haseley SR, Kamerling JP, et al: Estudios sobre la relevancia del glucano
en Asn-52 de la subunidad alfa de la gonadotropina coriónica humana en el dímero
alfa-beta. Biochem J 364:485–495, 2002.
15. Ulloa-Aguirre A, Maldonado A, Damian-Matsumura P, et al: Regulación endocrina de
la glicosilación de gonadotropina. Arch Med Res 32:520–532, 2001.
16. Dias JA: ¿Existe algún papel fisiológico para la heterogeneidad de los oligosacáridos
de gonadotropina en humanos? II. Un punto de vista bioquímico. zumbido reprod
16:825–830, 2001.
17. Fares F: El papel de los oligosacáridos ligados a O y ligados a N en la estructura-
función de las hormonas glicoproteicas: desarrollo de agonistas y antagonistas.
Biochim Biophys Acta 1760:560–567, 2006.
18. Campo S, Ambao V, Creus S, et al: Complejidad de carbohidratos y proporciones de
isoformas de FSH en suero en el hombre: estudios basados en lectina.
Mol Cell Endocrinol 260:197–204, 2007.
19. Cole LA, Khanlian SA: hCG hiperglucosilada: una variante con funciones biológicas
separadas de la hCG normal. Mol Cell Endocrinol 260:228–236, 2007.
20. Handschuh K, Guibourdenche J, Tsatsaris V, et al: La gonadotropina coriónica humana
producida por el trofoblasto invasivo pero no por el trofoblasto velloso promueve la
invasión celular y está regulada negativamente por el receptor gamma activado por
el proliferador de peroxisomas. Endocrinología 148:5011–5019, 2007.
21. Bousfield GR, Dias JA: Síntesis y secreción de gonadotropinas, incluidos los correlatos
estructura-función. Rev Endocr Metab Trastorno
12:289–302, 2011.
22. Dalpathado DS, Irungu J, Go EP, et al: Glicómica comparativa de la hormona
estimulante del folículo de glicoproteína: análisis de glicopéptidos de aislados de dos
especies de mamíferos. Bioquímica 45:8665–8673, 2006.
23. Bousfield GR, Butnev VY, Gotschall RR, et al: Características estructurales de las
gonadotropinas de mamíferos. Mol Cell Endocrinol 125:3–19, 1996.
24. Weisshaar G, Hiyama J, Renwick AGC, et al: Investigaciones de RMN de los
oligosacáridos unidos a N en sitios de glicosilación individuales de lutropina humana.
Eur J Biochem 195:257–268, 1991.
25. Baenziger JU: glicosiltransferasas específicas de proteínas: cómo y por qué
hazlo. FASEB J 8:1019–1025, 1994.
26. Mi Y, Fiete D, Baenziger JU: La ablación de GalNAc-4-sulfotransferasa-1 mejora la
reproducción al alterar las estructuras de carbohidratos de la hormona luteinizante
en ratones. J Clin Invest 118:1815–1824, 2008.
27. Green ED, Baenziger JU: Oligosacáridos ligados a asparagina en lutropina, folitropina
y tirotropina. 1. Elucidación estructural de los oligosacáridos sulfatados y sialilados
en hormonas glicoproteicas hipofisarias bovinas, ovinas y humanas. J Biol Chem
263:25–35, 1988.
28. Green ED, Baenziger JU: Oligosacáridos ligados a asparagina en lutropina, folitropina
y tirotropina. 2. Distribuciones de oligosacáridos sulfatados y sialilados en hormonas
glicoproteicas de hipófisis bovina, ovina y humana. J Biol Chem 263:36–44, 1988.
29. Bousfield GR, Butnev VY, Walton WJ, et al: N-glicosilación de todo o nada en
subunidades beta de la hormona estimulante del folículo de primates. Mol Cell
Endocrinol 260:40–48, 2007.
30. Liu CL, Bowers LD: Caracterización espectrométrica de masas de la subunidad beta
de la gonadotropina coriónica humana. J Mass Spect 32:33–42, 1997.
31. Toll H, Berger P, Hofmann A, et al: patrones de glicosilación de gonadotropina
coriónica humana revelados por cromatografía líquida, espectrometría de masas y
bioinformática. Electroforesis 27:2734–2746, 2006.
32. Valmu L, Alfthan H, Hotakainen K, et al: Análisis de glucano específico del sitio de la
subunidad beta de la gonadotropina coriónica humana de tumores malignos y
embarazo mediante cromatografía líquida-espectrometría de masas por electropulverización.
Glicobiología 16:1207–1218, 2006.
33. Darling RJ, Ruddon RW, Perini F, et al: Las mutaciones del nudo de cistina afectan el
plegamiento de la subunidad alfa de la hormona glicoproteica: secreción diferencial
y ensamblaje de intermediarios parcialmente plegados. J Biol Chem
275:15413–15421, 2000.
34. Darling RJ, Wilken JA, Miller-Lindbolm AK, et al: contribuciones funcionales de los
residuos de no cisteína dentro de los nudos de cistina de las subunidades de
gonadotropina coriónica humana. J Biol Chem 276:10692–10699, 2001.
35. Darling RJ, Wilken JA, Ruddon RW, et al: Vía de plegamiento intracelular de la
subunidad alfa de la hormona glicoproteica que contiene nudos de cistina.
Bioquímica 40:577–585, 2001.
36. Wilken JA, Bedows E: Reordenamiento del enlace Disuffide durante la formación del
nudo de cistina de la subunidad beta de la gonadotropina coriónica in vivo. Bioquímica
43: 5109–5118 , 2004.
37. Wilken JA, Bedows E: Un nuevo determinante de cuatro aminoácidos define la libertad
conformacional dentro de las subunidades beta de gonadotropina coriónica.
Bioquímica 46:4417–4424, 2007.
38. Xing YN, Williams C, Campbell RK, et al: Enhebrado de un bucle de proteína glicosilada
a través de un orificio de proteína: implicaciones para la combinación de subunidades
de gonadotropina coriónica humana. Proteína Sci 10:226–235, 2001.
39. Xing YN, Myers RV, Cao DH, et al: Ensamblaje de hormonas glicoproteicas en el
retículo endoplásmico: I. El extremo glicosilado del bucle 2 de la subunidad alfa
humana se pasa a través de un orificio de la subunidad beta. J Biol Chem 279:35426–
35436, 2004.
40. Xing YN, Myers RV, Cao DH, et al: Ensamblaje de hormonas glicoproteicas en el
retículo endoplásmico: II. Múltiples funciones de un interruptor de disulfuro de
subunidad beta sensible a redox. J Biol Chem 279:35437–35448, 2004.
41. Xing YN, Myers RV, Cao DH, et al: Ensamblaje de hormonas glicoproteicas en el
retículo endoplásmico: III. El cinturón de seguridad y su lugar de enganche determinan
la vía de montaje. J Biol Chem 279:35449–35457, 2004.
42. Xing YN, Myers RV, Cao DH, et al: Ensamblaje de hormonas glicoproteicas en el
retículo endoplásmico: IV. Probable mecanismo de acoplamiento de subunidades y
finalización del montaje. J Biol Chem 279:35458–35468, 2004.
43. Singh V, Merz WE: La formación de enlaces disulfuro no es necesaria para la
asociación de subunidades de gonadotropina coriónica humana: estudios con
ditiotreitol en células JEG-3. J Biol Chem 275:11765–11770, 2000.
44. Roig J, Krause JM, Berger P, et al: Plegamiento dependiente del tiempo de epítopos
inmunológicos de la subunidad beta de la gonadotropina coriónica humana.
Mol Cell Endocrinol 260:12–22, 2007.
45. Merz WE, Krause JM, Roig J, et al: Las subunidades de gonadotropina coriónica
humana no ensambladas y los homodímeros {alfa}{alfa} utilizan un procesamiento
rápido en la vía secretora en contraste con la {alfa}{beta}-
heterodímeros. Endocrinología 148(12):5831–5841, 2007.
46. Krause JM, Berger P, Roig J, et al: Maduración rápida de la subunidad alfa libre de
hormona glicoproteica (GPHalpha) y homodímeros de GPHalpha alfa. Mol Endocrinol
21:2551–2564, 2007.
47. Bernard MP, Lin W, Kholodovych V, et al: La lutropina humana (hLH) y la
coriogonadotropina (CG) se ensamblan por diferentes vías: un modelo de ensamblaje
de hLH. J Biol Chem 289:14360–14369, 2014.
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57.e2 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
48. Peng KC, Puett D, Brewer JM: Formación de homodímeros por las subunidades
individuales de lutropina bovina según lo determinado por el equilibrio de sedimentación.
J Mol Endocrinol 18:259–265, 1997.
49. Butler SA, Laidler P, Porter JR, et al: La subunidad beta de la gonadotropina coriónica
humana existe como un homodímero. J Mol Endocrinol
22:185–192, 1999.
50. Berger P, Gruschwitz M, Spoettl G, et al: gonadotropina coriónica humana (hCG) en el
tracto reproductivo masculino. Mol Cell Endocrinol 260:190–196, 2007.
51. Nemansky M, Moy E, Lyons CD, et al: Las células del estroma endometrial humano
generan una subunidad alfa no combinada de la gonadotropina coriónica humana,
que puede actuar en sinergia con la progesterona para inducir la decidualización. J
Clin Endocrinol Metab 83:575–581, 1998.
52. Hsu SY, Nakabayashi K, Bhalla A: Evolución de los genes de subunidades de
hormonas glicoproteicas en metazoos bilaterales: identificación de dos nuevos genes
de la familia de subunidades hormonales de glicoproteínas humanas, GPA2 y GPB5.
Mol Endocrinol 16:1538–1551, 2002.
53. Nakabayashi K, Matsumi H, Bhalla A, et al: Thyrostimulin, un heterodímero de dos
nuevas subunidades de la hormona glicoproteica humana, activa el receptor de la
hormona estimulante de la tiroides. J Clin Invest 109:1445–1452, 2002.
54. Alvarez E, Cahoreau C, Combarnous Y: Análisis de estructura comparativa de
moléculas que contienen nudos de cistina con ocho anillos de aminoacilo que incluyen
subunidades alfa y beta de hormonas glicoproteicas (GPH) y moléculas A2 (GPA2) y
B5 (GPB5) relacionadas con GPH. Reprod Biol Endocrinol 7:90, 2009.
55. Dos Santos S, Bardet C, Bertrand S, et al: Distintos patrones de expresión de la
hormona glicoproteica-alfa2 y -beta5 en un cordado basal sugieren funciones de
desarrollo independientes. Endocrinología 150:3815–3822, 2009.
56. Sun SC, Hsu PJ, Wu FJ, et al: La tiroestimulina, pero no la hormona estimulante de la
tiroides (TSH), actúa como un regulador paracrino para activar el receptor de TSH en
el ovario de los mamíferos. J Biol Chem 285:3758–3765, 2010.
57. Huang WL, Li Z, Lin TY, et al: La señalización de tiroestimulina-TSHR promueve la
proliferación de células de cáncer de ovario NIH:OVCAR-3 a través de la regulación
trans de la vía EGFR. Representante científico 6:27471, 2016.
58. Bassett JH, van der Spek A, Logan JG, et al: Thyrostimulin regula la formación de
hueso osteoblástico durante el desarrollo esquelético temprano.
Endocrinología 156:3098–3113, 2015.
59. Szkudlinski MW, Teh NG, Grossmann M, et al: Ingeniería de análogos superactivos de
la hormona glicoproteica humana. Nat Biotechnol 14:
1257–1263, 1996.
60. Shao K, Purohit S, Bahl OP: Efecto de la modificación de todas las regiones del bucle
en las subunidades alfa y beta de la coriogonadotropina humana en su actividad de
transducción de señales. Mol Cell Endocrinol 122:173–182, 1996.
61. Thotakura NR, Blithe DL: Hormonas glicoproteicas: glicobiología de las gonadotropinas,
tirotropina y subunidad alfa libre. Glicobiología 5:3–10, 1995.
62. Krystek SR, Dias JA, Andersen TT: Identificación de un sitio de contacto de subunidad
de la subunidad alfa de folitropina. Pept Res 5:165–168, 1992.
63. Liu C, Roth KE, Shepard BAL, et al: Mutagénesis de alanina dirigida al sitio de Phe(33),
Arg(35) y Arg(42)-Ser(43)-Lys(44) en la gonadotropina alfa humana -subunidad. J
Biol Chem 268:21613–21617, 1993.
64. Xia HY, Chen F, Puett D: Una región en la subunidad alfa de la hormona glicoproteica
humana importante en la formación de holoproteínas y la unión al receptor.
Endocrinología 134:1768–1770, 1994.
65. Chen F, Wang Y, Puett D: La región carboxi-terminal de la subunidad alfa de la
hormona glicoproteica: contribuciones a la unión al receptor y la señalización en la
gonadotropina coriónica humana. Mol Endocrinol 6:914–919, 1992.
66. Yoo JK, Zeng HW, Ji IH, et al: Los aminoácidos COOH-terminales de la subunidad alfa
desempeñan funciones comunes y diferentes en la coriogonadotropina y la folitropina
humanas. J Biol Chem 268:13034–13042, 1993.
67. Matzuk MM, Hsueh AJW, Lapolt P, et al: El papel biológico de la extensión carboxilo
terminal de la subunidad beta de gonadotropina coriónica humana. Endocrinología
126:376–383, 1990.
68. Chen F, Wang Y, Puett D: Papel del ácido aspártico-99 invariante de la
coriogonadotropina-beta humana en la actividad biológica y de unión al receptor. J
Biol Chem 266:19357–19361, 1991.
69. Morbeck DE, Roche PC, Keutmann HT, et al: Un sitio de unión al receptor identificado
en la región 81-95 de la subunidad beta de la hormona luteinizante humana (LH) y la
gonadotropina coriónica (hCG). Mol Cell Endocrinol
97:173–181, 1993.
70. Roth KE, Liu C, Shepard BA, et al: Los aminoácidos flanqueantes de la región 33-53
de la subunidad beta de folitropina humana están involucrados en el ensamblaje del
heterodímero de folitropina. Endocrinología 132:2571–2577, 1993.
71. Huang JN, Chen F, Puett D: Mutantes de eliminación amino carboxilo-terminal de
coriogonadotropina-beta humana. J Biol Chem 268:9311–9315, 1993.
72. Huang JN, Puett D: Sobre el papel de la glutamina invariable en la posición 54 en la
subunidad beta de la coriogonadotropina humana. Mol Cell Biochem
136:183–186, 1994.
73. Xia HY, Fernandez LM, Puett D: Reemplazo de la tirosina invariable en la región cagy
de la subunidad beta de gonadotropina coriónica humana.
Mol Cell Endocrinol 92:R1–R5, 1993.
74. Xia HY, Puett D: Identificación de residuos de aminoácidos conservados en la
subunidad beta de la coriogonadotropina humana importante en la formación de
holoproteínas. J Biol Chem 269:17944–17953, 1994.
75. Hu SB, Johnson L, Roche PC, et al: Un determinante funcional en la hormona
luteinizante humana y la gonadotropina coriónica: efecto diferencial de las mutaciones
sobre beta-GLN-S4. Endocrinología 138:1627–1633, 1997.
76. Eldeiry S, Kaetzel D, Kennedy G, et al: Mutagénesis dirigida al sitio de la subunidad
beta de la gonadotropina coriónica humana: bioactividad de una hormona heteróloga,
des-(122-145)-beta humana alfa bovina. Mol Endocrinol 3:1523–1528, 1989.
77. Campbell RK, Bergert ER, Wang YH, et al: Las proteínas quiméricas pueden exceder
la suma de sus partes: implicaciones para la evolución y el diseño de proteínas. Nat
Biotechnol 15:439–443, 1997.
78. Dias JA, Zhang YQ, Liu XX: Propiedades funcionales y de unión al receptor de la
folitropina humana quimérica preparada mediante un intercambio entre un pequeño
bucle de intercisteína hidrófilo de folitropina humana y lutropina humana. J Biol Chem
269:25289–25294, 1994.
79. Slaughter S, Wang YH, Myers RV, et al: El extremo N de la subunidad beta de lutropina
facilita la combinación de subunidades al compensar los efectos inhibidores de los
residuos necesarios para la actividad de la LH. Mol Cell Endocrinol
112:21–25, 1995.
80. Han Y, Bernard MP, Moyle WR: los residuos beta de hCG 94-96 alteran la actividad de
la LH sin que parezca que hacen contactos clave con los receptores. Mol Cell
Endocrinol 124:151–161, 1996.
81. Grossmann M, Szkudlinski MW, Wong R, et al: La sustitución de la región del cinturón
de seguridad de la subunidad beta de la hormona estimulante de la tiroides (TSH)
con las regiones correspondientes de coriogonadotropina o folitropina confiere
actividad luteotrópica pero no folitrópica a la TSH quimérica . J Biol Chem 272:15532–
15540, 1997.
82. Cosowsky L, Lin W, Han Y, et al: Influencia de las interacciones de las subunidades en
la especificidad de la lutropina: implicaciones para los estudios de la función de la
hormona glicoproteica. J Biol Chem 272:3309–3314, 1997.
83. Wang YH, Bernard MP, Moyle WR: Los análogos bifuncionales de hCG adoptan
diferentes conformaciones en los complejos de receptores de LH y FSH. Mol Cell
Endocrinol 170:67–77, 2000.
84. Narayan P, Wu CB, Puett D: expresión funcional de gonadotropina coriónica humana
en yugo en células de insecto infectadas con baculovirus. Mol Endocrinol 9:1720–
1726, 1995.
85. Sugahara T, Pixley MR, Minami S, et al: Biosíntesis de una cadena peptídica única
biológicamente activa que contiene las subunidades alfa comunes humanas y las
subunidades beta de gonadotropina coriónica en tándem. Proc Natl Acad Sci USA
92:2041–2045, 1995.
86. García-Campayo V, Sato A, Hirsch B, et al: Diseño de análogos de lutropina
recombinantes biológicamente activos estables. Nat Biotechnol 15:663–667, 1997.
87. Sugahara T, Sato A, Kudo M, et al: Expresión de genes de fusión biológicamente
activos que codifican la subunidad alfa común y la subunidad beta de la hormona
estimulante del folículo. Papel de una secuencia enlazadora. J Biol Chem 271:10445–
10448, 1996.
88. Narayan P, Gray J, Puett D: Un análogo de gonadotropina coriónica humana de cadena
sencilla biológicamente activo con propiedades de unión al receptor alteradas.
Endocrinología 141:67–71, 2000.
89. Ben-Menahem D: variantes de cadena única de las hormonas glicoproteicas y sus
receptores como herramientas para estudiar la activación del receptor y para el
diseño de análogos. J Neuroendocrinol 16:171–177, 2004.
90. Setlur SR, Dighe RR: gonadotropina coriónica humana de cadena única, hCG alfa
beta: efectos de mutaciones en la subunidad alfa sobre la estructura y la bioactividad.
Glicoconj J 24:97–106, 2007.
91. BenMenahem D, Kudo M, Pixley MB, et al: La acción biológica de la coriogonadotropina
monocatenaria no depende de los enlaces disulfuro individuales de la subunidad
beta. J Biol Chem 272:6827–6830, 1997.
92. Sato A, Perlas E, BenMenahem D, et al: El nudo de cistina de la subunidad alfa de
gonadotropina es fundamental para el comportamiento intracelular pero no para la
actividad biológica in vitro. J Biol Chem 272:18098–18103, 1997.
93. Jablonka-Shariff A, Kumar TR, Eklund J, et al: Los análogos de gonadotropina de
triple dominio de cadena única con mutaciones del enlace disulfuro en la subunidad
alfa provocan actividades duales de folitropina y lutropina in vivo. Mol Endocrinol
20:1437–1446, 2006.
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57.e3
94. Heikoop JC, van BeuningendeVaan M, van den Boogaart P, et al: Evaluación del
truncamiento de subunidades y la naturaleza del espaciador para las gonadotropinas
humanas de cadena sencilla. Eur J Biochem 245:656–662, 1997.
95. Heikoop JC, van den Boogaart P, Mulders JWM, et al: Diseño basado en estructuras
e ingeniería de proteínas de enlaces disulfuro entre subunidades en gonadotropinas.
Nat Biotechnol 15:658–662, 1997.
96. Heikoop JC, van den Boogaart P, De Leeuw R, et al: Coriogonadotropina humana
parcialmente desglicosilada, estabilizada por enlaces disulfuro entre subunidades,
muestra bioactividad completa. Eur J Biochem 253:354–356, 1998.
97. Einstein M, Lin W, Macdonald GJ, et al: Restauración parcial de la actividad de
lutropina mediante un enlace disulfuro entre subunidades: implicaciones para la estructura/ 121. Berger P, Kranewitter W, Madersbacher S, et al: Producción eutópica de gonadotropina
estudios de funciones Exp Biol Med 226:581–590, 2001.
98. Bernard MP, Lin W, Myers R, et al: Análogos de gonadotropina bifuncionales
reticulados con eficacia reducida. Mol Cell Endocrinol 233:25–31, 2005.
99. Arnold CJ, Liu C, Lindau-Shepard B, et al: El extremo C de la subunidad alfa de la
folitropina humana colabora con una soga de cistina de la subunidad beta y un bucle
de la subunidad alfa para ensamblar un dominio de unión al receptor competente
para la transducción de señales. Bioquímica 37:1762–1768, 1998.
100. Roy S, Setlur S, Gadkari RA, et al: La fusión traduccional de dos subunidades beta
de gonadotropina coriónica humana da como resultado la producción de un nuevo
antagonista de la hormona. Endocrinología 148:3977–3986, 2007.
101. Vardhana PA, Julius MA, Pollak SV, et al: Un antagonista único de la gonadotropina
coriónica humana suprime el síndrome de hiperestimulación ovárica en ratas.
Endocrinología 150:3807–3814, 2009.
102. Kanda M, Jablonka-Shariff A, Sato A, et al: Fusión genética de un gen de la subunidad
alfa a la hormona estimulante del folículo y genes de la subunidad beta de
gonadotropina coriónica: producción de una proteína bifuncional.
Mol Endocrinol 13:1873–1881, 1999.
103. García-Campayo V, Boime I: Actividades independientes de FSH y LH confinadas
estructuralmente en un solo polipéptido: modificación selectiva de las potencias
relativas de las hormonas. Endocrinología 142:5203–5211, 2001.
104. Jablonka-Shariff A, Comstock A, Colgin M, et al: Construcción y expresión de una
gonadotropina quimérica de triple dominio de cadena única ovina: enlace en tándem
de los genes que codifican las subunidades alfa, FSH beta y LH beta. Biol Reprod
131–132, 2007.
105. García-Campayo V, Jablonka-Shariff A, Boime I: un análogo de gonadotropina
bifuncional de cadena única se secreta a partir de células de ovario de hámster
chino como dos especies bioactivas distintas. J Biol Chem 279:44286–
44293, 2004.
106. García-Campayo V, Kumar TR, Boime I: La tirotropina, la folitropina y la gonadotropina
coriónica expresadas como una sola unidad multifuncional revelan una notable
permisividad en las interacciones receptor-ligando. Endocrinología
143:3773–3778, 2002.
107. García-Campayo V, Boime I, Ma XP, et al: Un análogo de hormona glicoproteína de
tetradominio de cadena única provoca múltiples actividades hormonales in vivo. Biol
Reprod 72:301–308, 2005.
108. Wu CB, Narayan P, Puett D: Ingeniería de proteínas de un nuevo complejo hormonal-
receptor constitutivamente activo. J Biol Chem 271:31638–31642, 1996.
109. Puett D, Wu CB, Narayan P: El lazo que une: diseño de gonadotropinas coriónicas
humanas monocatenarias biológicamente activas y un complejo receptor de
gonadotropinas utilizando ingeniería de proteínas. Biol Reprod 58:1337–1342, 1998.
110. Narayan P, Wu CB, Puett D: Ingeniería genética de gonadotropinas monocatenarias
y proteínas de fusión de hormonas y receptores. Métodos 21:59–66, 2000.
111. Meehan TP, Harmon BG, Overcast ME, et al: Defectos gonadales y alteraciones
hormonales en ratones transgénicos que expresan un complejo receptor de
gonadotropina coriónica humana-lutropina de cadena única. J Mol Endocrinol
34:489–503, 2005.
112. Narayan P, Gray J, Puett D: Complejos en yugo de coriogo nadotropina humana y el
receptor de lutropina: evidencia de que las subunidades monoméricas individuales
están inactivas. Mol Endocrinol 16:2733–2745, 2002.
113. Henke A, Gromoll J: Nuevos conocimientos sobre la evolución de la gonadotropina
coriónica. Mol Cell Endocrinol 291:11–19, 2008.
114. Nagirnaja L, Rull K, Uuskula L, et al: Genomics and genetics of gonadotropin beta-
subunit genes: Unique FSHB and duplicated LHB/
locus CGB. Mol Cell Endocrinol 329:4–16, 2010.
115. Sherman GB, Wolfe MW, Farmerie TA, et al: Un solo gen codifica las subunidades
beta de la hormona luteinizante equina y la gonadotropina coriónica. Mol Endocrinol
6:951–959, 1992.
116. Policastro PF, Danielsmcqueen S, Carle G, et al: Un mapa del grupo de genes hCG
beta-LH-beta. J Biol Chem 261:5907–5916, 1986.
117. Talmadge K, Boorstein WR, Vamvakopoulos NC, et al: Solo 3 de los 7 genes de la
subunidad beta de la gonadotropina coriónica humana pueden expresarse en la
placenta. Ácidos nucleicos Res 12:8415–8436, 1984.
118. Gharib SD, Wierman ME, Shupnik MA, et al: Molecular-biology of
las gonadotropinas hipofisarias. Endocr Rev 11:177–199, 1990.
119. Rull K, Laan M: Expresión de la subunidad beta de los genes HCG durante el
embarazo normal y fallido. Hum Reprod 20:3360–3368, 2005.
120. Dirnhofer S, Hermann M, Hittmair A, et al: Expression of the human chorionic
gonadotropin-beta gene cluster in human pituitaries and alternativo use of exon 1. J
Clin Endocrinol Metab 81:4212–4217, 1996.
coriónica humana-beta (hCG-BETA) y hormona luteinizante-beta (hLH-BETA) en el
testículo humano. FEBS Lett 343:229–233, 1994.
122. Giovangrandi Y, Parfait B, Asheuer M, et al: Análisis del grupo de genes CGB/LHB
humanos en tumores de mama mediante ensayos de RT-PCR cuantitativa en tiempo
real. Cancer Lett 168:93–100, 2001.
123. Strauss BL, Pittman R, Pixley MR, et al: Expresión de la subunidad beta de
gonadotropina coriónica en ratones transgénicos. J Biol Chem 269: 4968–
4973, 1994.
124. Nishimura R, Shin J, Ji I, et al: Una sustitución de un solo aminoácido en una
subunidad alfa ectópica de una coriogonadotropina de carcinoma humano. J Biol
Chem 261:10475–10477, 1986.
125. Huhtaniemi IT, Themmen APN: Mutaciones en la gonadotropina humana y en los
genes del receptor de gonadotropina. Endocrino 26:207–217, 2005.
126. Themmen APN: una actualización de la fisiopatología de las mutaciones y
polimorfismos de la subunidad de trofina gonadotrópica humana y del gen del receptor.
Reproducción 130:263–274, 2005.
127. Weiss J, Axelrod L, Whitcomb RW, et al: Hipogonadismo causado por una sustitución
de un solo aminoácido en la subunidad beta de la hormona luteinizante.
N Engl J Med 326:179–183, 1992.
128. Valdes-Socin H, Salvi R, Daly AF, et al: Informe breve: hipogonadismo en un paciente
con una mutación en el gen de la subunidad beta de la hormona luteinizante. N Engl
J Med 351:2619–2625, 2004.
129. Lofrano-Porto A, Barra GB, Giacomini LA, et al: Mutación beta de la hormona
luteinizante e hipogonadismo en hombres y mujeres. N Inglés J Med
357:897–904, 2007.
130. Achard C, Courtillot C, Lahuna O, et al: Espermatogénesis normal en un hombre con
hormona luteinizante mutante. N Engl J Med 361:1856–1863, 2009.
131. Basciani S, Watanabe M, Mariani S, et al: Hipogonadismo en un paciente con dos
nuevas mutaciones del gen de la subunidad beta de la hormona luteinizante
expresado en una forma heterocigota compuesta. J Clin Endocrinol Metab 97:3031–
3038, 2012.
132. Potorac I, Rivero-Muller A, Trehan A, et al: Una región vital para el tráfico de hormonas
glicoproteicas humanas revelada por una mutación LHB. J Endocrinol 231(3):197–
207, 2016.
133. Nagirnaja L, Venclovas C, Rull K, et al: Análisis estructural y funcional de mutaciones
sin sentido raras en la subunidad beta de gonadotropina coriónica humana. Mol
Hum Reprod 18(8):379–390, 2012.
134. Rull K, Nagirnaja L, Ulander VM, et al: Las variantes del gen beta de gonadotropina
coriónica están asociadas con aborto espontáneo recurrente en dos poblaciones
europeas. J Clin Endocrinol Metab 93:4697–4706, 2008.
135. Matthews CH, Borgato S, Beckpeccoz P, et al: Amenorrea primaria e infertilidad
debido a una mutación en la subunidad beta de la hormona estimulante del folículo.
Nat Genet 5:83–86, 1993.
136. Phillip M, Arbelle JE, Segev Y, et al: Hipogonadismo masculino debido a una mutación
en el gen de la subunidad beta de la hormona estimulante del folículo.
N Engl J Med 338:1729–1732, 1998.
137. Layman LC, Lee EJ, Peak DB, et al: Pubertad retrasada e hipogonadismo causados
por mutaciones en el gen de la subunidad beta de la hormona folículo estimulante.
N Engl J Med 337:607–611, 1997.
138. Berger K, Souza H, Brito VN, et al: Características clínicas y hormonales de la
deficiencia selectiva de la hormona estimulante del folículo (FSH) debido a
mutaciones del gen de la subunidad beta de FSH en ambos sexos. Fertil Steril
83:466–470, 2005.
139. Layman LC, Porto ALA, Xie J, et al: mutaciones del gen FSH beta en una mujer con
desarrollo mamario parcial y un hermano varón con pubertad normal y azoospermia.
J Clin Endocrinol Metab 87:3702–3707, 2002.
140. Kottler ML, Chou YY, Chabre O, et al: Una nueva mutación FSHbeta en una mujer de
29 años con amenorrea primaria y deficiencia aislada de FSH: caracterización
funcional y respuesta ovárica a la FSH recombinante humana. Eur J Endocrinol
162:633–641, 2010.
141. Lindstedt G, Nystrom E, Matthews C, et al: Deficiencia de folitropina (FSH) en un
hombre infértil debido a la mutación del gen FSH beta. Un síndrome de
Machine Translated by Google
57.e4 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
pubertad y virilización normales pero testículos subdesarrollados con azoospermia,
FSH baja pero lutropina alta y concentraciones séricas de testosterona normales.
Clin Chem Lab Med 36:663–665, 1998.
142. Simsek E, Montenegro LR, Binay C, et al: Características clínicas y hormonales de
un adolescente masculino con deficiencia congénita aislada de la hormona
estimulante del folículo. Horm Res Pediatr 85:207–212, 2016.
143. Keir G, Winchester BG, Clayton P: Síndromes de glicoproteínas deficientes en
carbohidratos: errores congénitos de la glicosilación de proteínas. Ann Clin Bioquímica
36:20–36, 1999.
144. Manna PR, Joshi L, Reinhold VN, et al: Síntesis, purificación y caracterización
estructural y funcional de la forma recombinante de una variante genética común
de la hormona luteinizante humana. Hum Mol Genet 11:301–315, 2002.
145. Wide L, Eriksson K, Sluss PM, et al: La variante genética común de la hormona
luteinizante tiene una vida media sérica más prolongada que el tipo salvaje en
mujeres heterocigóticas. J Clin Endocrinol Metab 95:383–389, 2010.
146. Du JW, Xu KY, Fang LY, et al: Asociación entre mutaciones de la subunidad beta
de la hormona luteinizante y la infertilidad femenina. Representante médico Mol
5:473–476, 2012.
147. Punab AM, Grigorova M, Punab M, et al: Los portadores de la variante de la hormona
luteinizante (V-LH) entre 1593 hombres bálticos tienen una LH sérica
significativamente más alta. Andrología 3:512–519, 2015.
148. Ramanujam LN, Liao WX, Roy AC, et al: Asociación de variantes moleculares de la
hormona luteinizante con infertilidad masculina. zumbido reprod
15:925–928, 2000.
149. Takahashi K, Kurioka H, Ozaki T, et al: Mayor prevalencia de la variante de la
subunidad beta de la hormona luteinizante en pacientes japoneses con infertilidad.
Hum Reprod 13:3338–3344, 1998.
150. Liu N, Ma Y, Wang S, et al: Asociación de las variantes genéticas de la hormona
luteinizante, el receptor de la hormona luteinizante y el síndrome de ovario
poliquístico. Reprod Biol Endocrinol 10:36, 2012.
151. Kim NK, Nam YS, Ko JJ, et al: La mutación del gen del exón 3 de la subunidad beta
de la hormona luteinizante (Gly102Ser) es rara en mujeres coreanas con
endometriosis y síndrome de ovario poliquístico. Fertil Steril 75:1238–1239, 2001.
152. Miller-Lindholm AK, Bedows E, Bartels CF, et al: Una variante genética natural en el
gen 5 de la gonadotropina coriónica humana-beta es ineficiente en el ensamblaje.
Endocrinología 140:3496–3506, 1999.
153. Rull K, Christiansen OB, Nagirnaja L, et al: Un efecto modesto pero significativo de
los polimorfismos del promotor del gen CGB5 en la modulación del riesgo de
aborto espontáneo recurrente. Fertil Steril 99:1930–1936.e1936, 2013.
154. Grigorova M, Punab M, Ausmees K, et al: El polimorfismo del promotor de FSHB
dentro del elemento conservado evolutivamente está asociado con el nivel de FSH
en suero en los hombres. Hum Reprod 23:2160–2166, 2008.
155. Grigorova M, Punab M, Poolamets O, et al: Aumento de la prevalencia del alelo -211
T del polimorfismo del promotor de la subunidad beta de la hormona estimulante
del folículo (FSH) y FSH sérica más baja en hombres infértiles. J Clin Endocrinol
Metab 95:100–108, 2010.
156. Benson CA, Kurz TL, Thackray VG: Un SNP promotor de FSHB humano asociado
con niveles bajos de FSH en hombres altera la unión de LHX3 y la transcripción
de FSHB basal. Endocrinología 154:3016–3021, 2013.
157. Roa J, Navarro VM, Tena-Sempere M: Kisspeptins en biología reproductiva:
conocimiento de consenso y desarrollos recientes. biol reprod
85:650–660, 2011.
158. Roa J, Aguilar E, Dieguez C, et al: Nuevas fronteras en la fisiología kisspeptina/
GPR54 como guardianes fundamentales de la función reproductiva. Frente
Neuroendocrinol 29:48–69, 2008.
159. Ferris HA, Shupnik MA: Mecanismos para la regulación pulsátil de los genes de la
subunidad de gonadotropina por GNRH1. Biol Reprod 74:993–998, 2006.
160. Thompson IR, Kaiser UB: Regulación diferencial dependiente de la frecuencia del
pulso de GnRH de la expresión génica de LH y FSH. Mol Cell Endocrinol
385:28–35, 2014.
161. Garcia-Galiano D, Pinilla L, Tena-Sempere M: Sex steroids and the control of the
Kiss1 system: roles de desarrollo y principales acciones regulatorias. J
Neuroendocrinol 24:22–33, 2012.
162. Navarro VM, Tena-Sempere M: Kisspeptins y el control neuroendocrino de la
reproducción. Frente Biosci (Schol Ed) 3: 267–275, 2011.
163. Tena-Sempere M: Funciones de las kisspeptinas en el control de la función
gonadotrópica hipotalámica: enfoque en la diferenciación sexual y el inicio de la
pubertad. Endoc Dev 17:52–62, 2010.
164. Haisenleder DJ, Ferris HA, Shupnik MA: El componente de calcio de la transcripción
del gen de la subunidad de la hormona luteinizante estimulada por la hormona
liberadora de gonadotropina está mediado por la proteína quinasa tipo II
dependiente de calcio/calmodulina. Endocrinología 144:2409–2416, 2003.
165. Thackray VG, Mellon PL, Coss D: Hormonas en sinergia: regulación de los genes
de gonadotropina pituitaria. Mol Cell Endocrinol 314:192–203, 2010.
166. Liu F, Austin DA, Mellon PL, et al: GnRH activa ERK1/2 que conduce a la inducción
de la expresión de proteína c-fos y LHbeta en células LbetaT2. Mol Endocrinol
16:419–434, 2002.
167. Roberson MS, Misra-Press A, Laurance ME, et al: Un papel para la proteína
quinasa activada por mitógeno en la mediación de la activación del promotor de la
subunidad alfa de la hormona glicoproteica por la hormona liberadora de gonadotropina.
Mol Cell Biol 15:3531–3539, 1995.
168. Liu F, Usui I, Evans LG, et al: Participación de las proteínas G (q/11) y G (s) en la
señalización mediada por el receptor de la hormona liberadora de gonadotropina
en células L beta T2. J Biol Chem 277:32099–32108, 2002.
169. Tsutsumi R, Mistry D, Webster NJ: Respuestas de señalización a la hormona
liberadora de gonadotropina pulsátil en células gonadotrópicas LbetaT2.
J Biol Chem 285:20262–20272, 2010.
170. Choi SG, Jia J, Pfeffer RL, et al: Las proteínas G y la señalización autocrina regulan
diferencialmente la expresión de la subunidad de gonadotropina en el gonadotropo
hipofisario. J Biol Chem 287:21550–21560, 2012.
171. Thompson IR, Ciccone NA, Xu S, et al: La estimulación dependiente de la
frecuencia del pulso de GnRH de la transcripción de FSHbeta está mediada por
la activación de PKA y CREB. Mol Endocrinol 27:606–618, 2013.
172. Bernard DJ, Fortin J, Wang Y, et al: Mecanismos de síntesis de FSH: lo que
sabemos, lo que no sabemos y por qué debería importarle. estéril fértil
93:2465–2485, 2010.
173. Burger LL, Haisenleder DJ, Dalkin AC, et al: Regulación de la transcripción del gen
de la subunidad de gonadotropina. J Mol Endocrinol 33:559–584, 2004.
174. Ciccone NA, Kaiser UB: La biología de la regulación gonadotropa. Curr Opin
Endocrinol Diabetes Obes 16:321–327, 2009.
175. Jorgensen JS, Quirk CC, Nilson JH: Los códigos combinatorios múltiples y
superpuestos organizan la respuesta hormonal y dictan la expresión específica de
la célula de los genes que codifican la hormona luteinizante. Endocri Rev.
25:521–542, 2004.
176. Melamed P, Kadir MNA, Wijeweera A, et al: La transcripción de los genes de la
subunidad beta de la gonadotropina implica una conversación cruzada entre los
factores de transcripción y los co-reguladores que median las acciones de las
hormonas reguladoras. Mol Cell Endocrinol 252:167–183, 2006.
177. Salisbury TB, Binder AK, Nilson JH: Bienvenida a la beta-catenina a la red
transcripcional de la hormona liberadora de gonadotropina en los gonadotropos.
Mol Endocrinol 22:1295–1303, 2008.
178. Bernard DJ, Tran S: Mecanismos de síntesis de FSH estimulada por activina: la
historia de un cerdo y un ZORRO. Biol Reprod 88:78, 2013.
179. Thackray VG: Cuentos de zorros: regulación de la expresión del gen de
gonadotropina por factores de transcripción forkhead. Mol Cell Endocrinol 385:62–
70, 2014.
180. Salisbury TB, Binder AK, Grammer JC, et al: La actividad máxima del gen de la
subunidad beta de la hormona luteinizante requiere beta-catenina. Mol Endocrinol
21:963–971, 2007.
181. Wang Q, Chikina M, Zaslavsky E, et al: la beta-catenina regula la expresión del gen
FSHbeta inducida por GnRH. Mol Endocrinol 27:224–237, 2013.
182. Arriola DJ, Mayo SL, Skarra DV, et al: El factor de transcripción FOXO1 inhibe la
expresión del gen beta de la hormona luteinizante en células tropo gonadotróficas
hipofisarias. J Biol Chem 287:33424–33435, 2012.
183. Skarra DV, Arriola DJ, Benson CA, et al: Forkhead box O1 es un represor de la
transcripción de Fshb basal e inducida por GnRH en gonadotropos. Mol Endocrinol
27:1825–1839, 2013.
184. Boerboom D, Kumar V, Boyer A, et al: la estabilización de beta-catenina en
gonadotropos afecta la síntesis de FSH en ratones macho in vivo. Endocrinología
156:323–333, 2015.
185. Weiss J, Guendner MJ, Halvorson LM, et al: Activación transcripcional del gen de la
subunidad beta de la hormona estimulante del folículo por activina.
Endocrinología 136:1885–1891, 1995.
186. Corpuz PS, Lindaman LL, Mellon PL, et al: FoxL2 es necesario para la inducción de
activina de los genes de la subunidad beta de la hormona estimulante del folículo
humano y de ratón. Mol Endocrinol 24:1037–1051, 2010.
187. Lamba P, Fortin J, Tran S, et al: Un papel novedoso para el factor de transcripción
forkhead FOXL2 en la transcripción de la subunidad beta de la hormona estimulante
del folículo regulada por activina A. Mol Endocrinol 23:1001–1013, 2009.
188. Justice NJ, Blount AL, Pelosi E, et al: Deterioro de la expresión de FSHbeta en las
pituitarias de animales mutantes Foxl2. Mol Endocrinol 25:1404–1415, 2011.
189. Tran S, Zhou X, Lafleur C, et al: Deterioro de la fertilidad y síntesis de FSH en
ratones knockout Foxl2 específicos para gonadotropos. Mol Endocrinol
27:407–421, 2013.
190. Coss D, Mellon PL, Thackray VG: A FoxL in the Smad house: regulación activa de
FSH. Tendencias Endocrinol Metab 21:562–568, 2010.
Machine Translated by Google
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57.e5
191. Fortin J, Boehm U, Deng CX, et al: La síntesis de la hormona estimulante del folículo y
la fertilidad dependen de SMAD4 y FOXL2. FASEBJ
28:3396–3410, 2014.
192. Roybal LL, Hambarchyan A, Meadows JD, et al: Funciones de los elementos de unión,
dominios FOXL2 e interacciones con cJUN y SMAD en la regulación de FSHbeta. Mol
Endocrinol 28:1640–1655, 2014.
193. Tran S, Lamba P, Wang Y, et al: SMAD y FOXL2 regulan sinérgicamente la transcripción
de FSHbeta murina a través de un elemento promotor proximal conservado. Mol
Endocrinol 25:1170–1183, 2011.
194. Ghosh D, Sachdev S, Hannick M, et al: Coordinar la regulación de la expresión activada
por 5'-adenosina monofosfato (AMPc) basal y cíclica de la gonadotropina alfa coriónica
humana por Ets-2 y la proteína de unión al elemento sensible a AMPc. Mol Endocrinol
19:1049–1066, 2005.
195. LiCalsi C, Christophe S, Steger DJ, et al: Los miembros de la familia AP-2 regulan la
expresión basal e inducida por AMPc de la gonadotropina coriónica humana.
Ácidos nucleicos Res 28:1036–1043, 2000.
196. Jameson JL, Hollenberg AN: Regulación de la expresión génica de gonadotropina
coriónica. Endocr Rev 14:203–221, 1993.
197. Steger DJ, Buscher M, Hecht JH, et al: Control coordinado de los genes de la subunidad
alfa y la subunidad beta de la gonadotropina coriónica humana por la proteína de
unión a elementos específicos del trofoblasto. Mol Endocrinol
7:1579–1588, 1993.
198. Johnson W, Jameson JL: Los elementos reguladores AP-2 (proteína activadora 2) y
Sp1 (factor promotor selectivo 1) desempeñan papeles distintos en el control de la
actividad basal y la capacidad de respuesta del 3',5'-monofosfato de adenosina cíclica
del coriónico humano promotor de gonadotropina-beta. Mol Endocrinol
13:1963–1975, 1999.
199. Bousfield GR, Butnev VY, Butnev VY, et al: La hormona estimulante del folículo humano
hipoglucosilada (hFSH(21/18)) es mucho más activa in vitro que la hFSH totalmente
glicosilada (hFSH(24)). Mol Cell Endocrinol
382:989–997, 2014.
200. Wide L, Lee JY, Rasmussen C: Se produce un cambio en las isoformas de la
gonadotropina coriónica humana alrededor de la semana 13 de gestación.
J Clin Endocrinol Metab 78:1419–1423, 1994.
201. Kovalevskaya G, Genbacev O, Fisher SJ, et al: Origen del trofoblasto de las isoformas
de hCG: los citotrofoblastos son la fuente principal de hCG similar al coriocarcinoma.
Mol Cell Endocrinol 194:147–155, 2002.
202. Birken S, Kovalevskaya G, O'Connor J: Medición inmunoquímica de isoformas
tempranas de embarazo de hCG: posibles aplicaciones a la investigación de fertilidad,
diagnóstico prenatal y cáncer. Arch Med Res 32:635–643, 2001.
203. Kelly LS, Birken S, Puett D: Determinación de gonadotropina coriónica humana
hiperglucosilada producida por neoplasias trofoblásticas gestacionales malignas y
tumores de células germinales masculinas mediante un inmunoensayo basado en
lectina y resonancia de plasmón de superficie. Mol Cell Endocrinol 260:33–39, 2007.
204. Birken S, McChesney R, Yershova O, et al: Patrones de LH beta cf entre mujeres en
salud y enfermedad. Mol Cell Endocrinol 260:172–182, 2007.
205. Loreti N, Fresno C, Barrera D, et al: La estructura de glucano en la FSH humana
recombinante afecta la actividad endocrina y la expresión génica global en las células
de la granulosa humana. Mol Cell Endocrinol 366:68–80, 2013.
206. Cole LA: Funciones biológicas de hCG y moléculas relacionadas con hCG.
Reprod Biol Endocrinol 8:102, 2010.
207. Elliott MM, Kardana A, Lustbader JW, et al: Carbohidratos y estructura peptídica de las
subunidades alfa y beta de la gonadotropina coriónica humana del embarazo y
coriocarcinoma normales y aberrantes.
Endocrino 7:15–32, 1997.
208. Birken S, Yershova O, Myers RV, et al: Análisis de las isoformas de o-glicano del
núcleo de 2 o-glucano de coriogo nadotropina humana. Mol Cell Endocrinol 204:21–
30, 2003.
209. Birken S: Medición específica de isoformas de gonadotropina coriónica humana
hiperglucosilada que contienen azúcar del núcleo 2 ligado a o mediante el anticuerpo
b152. Tumor Biol 26:131–141, 2005.
210. Cole LA, Shahabi S, Oz UA, et al: Inmunoensayo de gonadotropina coriónica humana
hiperglucosilada (antígeno trofoblástico invasivo): una nueva base para la detección
del síndrome de Down gestacional. Clin Chem 45:2109–2119, 1999.
211. Cole LA, Khanlian SA, Riley JM, et al: HCG hiperglucosilada en implantación gestacional
y en coriocarcinoma y tumorigénesis de malignidad de células germinales testiculares.
J Reprod Med 51:919–928, 2006.
212. Guibourdenche J, Handschuh K, Tsatsaris V, et al: La hCG hiperglucosilada es un
marcador de la invasión temprana del trofoblasto humano. J Clin Endocrinol Metab
95:E240–E244, 2010.
213. Kovalevskaya G, Kakuma T, Schlatterer J, et al: expresión de HCG hiperglucosilada en
el embarazo: origen celular y aplicaciones clínicas.
Mol Cell Endocrinol 260:237–243, 2007.
214. de Medeiros SF, Norman RJ: Heterogeneidad del núcleo de la proteína coriogonadotropina
humana y las ramas de azúcar: conocimientos básicos y clínicos. Hum Reprod
Actualización 15:69–95, 2009.
215. Davis JS, Kumar TR, May JV, et al: variantes de glicosilación de la hormona estimulante
del folículo de origen natural. J Glycomics Lipidomics
4:e117, 2014.
216. Walton WJ, Nguyen VT, Butnev VY, et al: La caracterización de las isoformas de FSH
humana revela una subunidad beta no glicosilada además de la subunidad beta
glicosilada convencional. J Clin Endocrinol Metab
86:3675–3685, 2001.
217. Wang H, Butnev V, Bousfield GR, et al: Un transgén FSHB humano que codifica el
mutante doble de N-glicosilación (Asn(7Delta) Asn(24Delta))
La subunidad FSHbeta no logra rescatar ratones nulos para Fshb. Mol Cell Endocrinol
426:113–124, 2016.
218. Jiang C, Hou X, Wang C, et al: La hFSH hipoglucosilada tiene mayor bioactividad que
la hFSH recombinante totalmente glicosilada en células de la granulosa humana. J
Clin Endocrinol Metab 100:E852–E860, 2015.
219. Wang H, May J, Butnev V, et al: Evaluación de bioactividades in vivo de glicoformas de
FSH humana recombinantes hipo (FSH21/18) y completamente (FSH24) glicosiladas
en ratones nulos para Fshb. Mol Cell Endocrinol 437:224–236, 2016.
220. Lloyd JM, Childs GV: Almacenamiento y liberación diferencial de hormona luteinizante
y hormona liberadora de folículos de gonadotropos individuales separados por
elutriación centrífuga. Endocrinología 122:1282–1290, 1988.
221. Jablonka-Shariff A, Boime I: La hormona luteinizante y la hormona estimulante del
folículo exhiben diferentes patrones de secreción de células renales caninas cultivadas
de Madin-Darby. Biol Reprod 70:649–655, 2004.
222. McNeilly AS, Crawford JL, Taragnat C, et al: La secreción diferencial de FSH y LH:
regulación a través de genes, retroalimentación y empaquetamiento.
Reprod Suplemento 61:463–476, 2003.
223. Muyan M, Ryzmkiewicz DM, Boime I: Secreción de lutropina y folitropina de células
GH3 transfectadas: evidencia de vías secretoras separadas. Mol Endocrinol 8:1789–
1797, 1994.
224. Farnworth PG: Revisión de la secreción de gonadotrofinas. ¿De cuántas maneras
puede la FSH dejar una gonadotropa? J Endocrinol 145:387–395, 1995.
225. Jablonka-Shariff A, Pearl CA, Comstock A, et al: Una secuencia carboxilo terminal en la
subunidad beta de lutropina contribuye a la clasificación de la lutropina en la vía
regulada. J Biol Chem 283:11485–11492, 2008.
226. Pearl CA, Jablonka-Shariff A, Boime I: Desvío de un análogo de la hormona estimulante
del folículo a la vía secretora regulada. Endocrinología
151:388–393, 2010.
227. Jablonka-Shariff A, Boime I: Un nuevo heptapéptido carboxilo-terminal inicia la secreción
regulada de LH de subdominios únicos de la sala de emergencias. PLoS ONE
8:e65002, 2013.
228. Wang H, Larson M, Jablonka-Shariff A, et al: Redirigir el tráfico intracelular y el patrón
de secreción de FSH mejora drásticamente la función ovárica en ratones. Proc Natl
Acad Sci USA 111:5735–5740, 2014.
229. Pearl CA, Boime I: La sulfatación de LH no afecta el tráfico intracelular. Mol Cell
Endocrinol 309:76–81, 2009.
230. Muyan M, Boime I: Secreción de gonadotropina coriónica de trofoblastos humanos.
Placenta 18:237–241, 1997.
231. Jablonka-Shariff A, Boime I: señal de tráfico secretora codificada en la región carboxilo
terminal de la subunidad CGbeta. Mol Endocrinol
23:316–323, 2009.
232. Jablonka-Shariff A, Garcia-Campayo V, Boime I: La evolución de lutropina a
gonadotropina coriónica genera una señal de enrutamiento específica para la
liberación apical in vivo. J Biol Chem 277:879–882, 2002.
233. Banerjee P, Fazleabas AT: acciones extragonadales de gonadotropina coriónica.
Rev. Endocr Metab Disord 12:323–332, 2011.
234. Fournier T, Guibourdenche J, Evain-Brion D: Revisión: hCG: diferentes fuentes de
producción, diferentes glicoformas y funciones. Placenta
36 (Suplemento 1): S60–S65, 2015.
235. Birken S, Maydelman Y, Gawinowicz MA, et al: Aislamiento y caracterización de la
gonadotropina coriónica hipofisaria humana. Endocrinología
137:1402–1411, 1996.
236. Zenzmaier C, Gerth R, Gruschwitz M, et al: niveles reducidos de hCG alfa libre grande
y genuina en hombres que presentan un análisis de semen anormal.
Reprod Biol Endocrinol 9:114, 2011.
237. Mitchell H, Seckl MJ: Discrepancias entre los inmunoensayos disponibles comercialmente
en la detección de hCG derivada de tumores. Mol Cell Endocrinol 260:310–313, 2007.
238. Cole LA: variantes de HCG, los factores de crecimiento que impulsan las neoplasias
malignas humanas. Am J Cancer Res 2:22–35, 2012.
Machine Translated by Google
57.e6 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
239. Iles RK: Expresión ectópica de hCG beta por cáncer epitelial: comportamiento maligno,
metástasis e inhibición de la apoptosis de células tumorales. Mol Cell Endocrinol 260:264–
270, 2007.
240. Iles RK, Delves PJ, Butler SA: ¿La hCG o la hCGbeta desempeñan un papel en
biología de las células cancerosas? Mol Cell Endocrinol 329:62–70, 2010.
241. Lenhard M, Tsvilina A, Schumacher L, et al: gonadotropina coriónica humana y su relación
con el grado, el estadio y la supervivencia del paciente en el cáncer de ovario. BMC
Cáncer 12:2, 2012.
242. Lempiainen A, Hotakainen K, Blomqvist C, et al: gonadotropina coriónica humana
hiperglucosilada en suero de pacientes con cáncer testicular.
Clin Chem 58(7):1123–1129, 2012.
243. Bieche I, Lazar V, Nogues C, et al: Valor pronóstico de las transcripciones del gen beta de
la gonadotropina coriónica en el carcinoma de mama humano.
Clin Cancer Res 4:671–676, 1998.
244. Casadesus G, Webber KM, Atwood CS, et al: La hormona luteinizante modula la cognición
y la deposición de amiloide en ratones transgénicos APP con Alzheimer. Biochim Biophys
Acta 1762:447–452, 2006.
245. Casadesus G, Milliken EL, Webber KM, et al: Los aumentos en la hormona luteinizante
están asociados con disminuciones en el rendimiento cognitivo.
Mol Cell Endocrinol 269:107–111, 2007.
246. Webber KM, Casadesus G, Atwood CS, et al: Gonadotropinas: una etiología cohesiva
basada en el género de la enfermedad de Alzheimer. Mol Cell Endocrinol
260:271–275, 2007.
247. Verdile G, Yeap BB, Clarnette RM, et al: Los niveles de hormona luteinizante se
correlacionan positivamente con los niveles de proteína beta amiloide en plasma en
hombres de edad avanzada. J Alzheimers Dis 14:201–208, 2008.
248. Blair JA, Bhatta S, McGee H, et al: Hormona luteinizante: evidencia de acción directa en el
SNC. Horm Behav 76:57–62, 2015.
249. Rao CV: Participación de la hormona luteinizante en el desarrollo de la enfermedad de
Alzheimer en mujeres de edad avanzada. Reprod Sci 24(3):355–368, 2017.
250. Verdile G, Asih PR, Barron AM, et al: El impacto de la hormona luteinizante y la testosterona
en la acumulación de beta amiloide (Abeta): estudios clínicos en animales y humanos.
Horm Behav 76:81–90, 2015.
251. Bowen RL, Verdile G, Liu T, et al: hormona luteinizante, un regulador reproductivo que
modula el procesamiento de la proteína precursora beta-amiloide y la deposición de beta-
amiloide. J Biol Chem 279:20539–20545, 2004.
252. Saberi S, Du YP, Christie M, et al: La gonadotropina coriónica humana aumenta la escisión
beta de la proteína precursora de amiloide en las células SH-SY5Y.
Cell Mol Neurobiol 33:747–751, 2013.
253. Lin J, Li X, Yuan F, et al: La ablación genética del receptor de la hormona luteinizante
mejora la patología amiloide en un modelo de ratón con enfermedad de Alzheimer. J
Neuropathol Exp Neurol 69:253–261, 2010.
254. Pandian R, Cole LA, Palomaki GE: Antígeno trofoblástico invasivo del suero materno del
segundo trimestre: un marcador para la detección del síndrome de Down.
Clin Chem 50:1433–1435, 2004.
255. Bahado-Singh RO, Oz U, Shahabi S, et al: Comparación de la concentración urinaria de
gonadotropina coriónica humana hiperglucosilada con la triple pantalla sérica para la
detección del síndrome de Down en embarazos de alto riesgo. Am J Obstet Gynecol
183:1114–1118, 2000.
256. Sturgeon CM, Ellis AR: Estandarización de FSH, LH y hCG: posición actual y perspectivas
futuras. Mol Cell Endocrinol 260:301–309, 2007.
257. Fares FA, Suganuma N, Nishimori K, et al: Diseño de un agonista de folitropina de acción
prolongada mediante la fusión de la secuencia c-terminal de la subunidad beta de
gonadotropina coriónica con la subunidad beta de folitropina. Proc Natl Acad Sci USA
89:4304–4308, 1992.
258. Lapolt PS, Nishimori K, Fares FA, et al: Estimulación mejorada de la maduración del folículo
y el potencial ovulatorio mediante agonistas de la hormona estimulante del folículo de
acción prolongada con péptidos carboxilo terminales extendidos. Endocrinología
131:2514–2520, 1992.
259. Bouloux PMG, Handelsman DJ, Jockenhovel F, et al: Primera exposición humana a FSH-
CTP en machos hipogonadales hipogonadotróficos. Hum Reprod 16:1592–1597, 2001.
260. Duijkers IJM, Klipping C, Boerrigter PJ, et al: Farmacocinética de dosis única y efectos
sobre el crecimiento folicular y las hormonas séricas de una preparación de FSH
recombinante de acción prolongada (FSH-CTP) en mujeres sanas con supresión
pituitaria. Hum Reprod 17:1987–1993, 2002.
261. Perlman S, van den Hazel B, Christiansen J, et al: La glicosilación de una extensión N-
terminal prolonga la vida media y aumenta la actividad in vivo de la hormona estimulante
del folículo. J Clin Endocrinol Metab
88:3227–3235, 2003.
262. Janssens JP, Russo J, Irma RD, et al: gonadotropina coriónica humana (hCG) y prevención
del cáncer de mama. Mol Cell Endocrinol 269:93–98, 2007.
263. Rulli SB, Huhtaniemi I: ¿Qué nos han enseñado los ratones transgénicos que sobreexpresan
gonadotropina sobre la función gonadal? Reproducción
130:283–291, 2005.
264. Eliminado en revisión.
265. Leuschner C, Enright FM, Gawronska B, et al: Los conjugados de péptidos líticos disruptores
de membrana destruyen células de cáncer de mama independientes y dependientes de
hormonas in vitro e in vivo. Breast Cancer Res Treat 78:17–27, 2003.
266. Gawronska B, Leuschner C, Enright FM, et al: Efectos de un péptido lítico conjugado con
beta hCG en el cáncer de ovario: estudios in vitro e in vivo.
Gynecol Oncol 85:45–52, 2002.
267. Hansel W, Leuschner C, Enright F: Los conjugados de péptidos líticos y LHRH o PCG se
dirigen y causan necrosis de cánceres de próstata y metástasis. Mol Cell Endocrinol
269:26–33, 2007.
268. Rivero-Muller A, Vuorenoja S, Tuominen M, et al: Uso del conjugado de hecate
gonadotropina coriónica beta en la terapia del receptor de la hormona luteinizante que
expresa tumores de células somáticas gonadales. Mol Cell Endocrinol
269:17–25, 2007.
269. Fredriksson R, Lagerstrom MC, Lundin LG, et al: Los receptores acoplados a proteína G
en el genoma humano forman cinco familias principales. El análisis filogenético, grupos
paralogon, y las huellas dactilares. Mol Pharmacol 63:1256–
1272, 2003.
270. Ascoli M, Fanelli F, Segaloff DL: El receptor de lutropina/coriogonadotropina: una
perspectiva de 2002. Endocr Rev 23:141–174, 2002.
271. Ulloa-Aguirre A, Zarinan T: El receptor de folitropina: estructura coincidente
y función Mol Pharmacol 2016.
272. Dias JA, Cohen BD, Lindau-Shepard B, et al: biología molecular, estructural y celular de la
folitropina y el receptor de la folitropina. Vitamin Horm
64:249–322, 2002.
273. Kleinau G, Krause G: tirotropina y receptores de hormonas glicoproteínas homólogas:
aspectos estructurales y funcionales de los mecanismos de señalización extracelular.
Endocr Rev 30:133–151, 2009.
274. Vassart G, Pardo L, Costagliola S: Una disección molecular de los receptores de hormonas
glicoproteicas. Trends Biochem Sci 29:119–126, 2004.
275. Costagliola S, Urizar E, Mendive F, et al: Especificidad y promiscuidad de los receptores
de gonadotropina. Reproducción 130:275–281, 2005.
276. Bogerd J: Determinantes selectivos de ligandos en receptores de gonadotropina.
Mol Cell Endocrinol 260-262:144–152, 2007.
277. Petrie EJ, Lagaida S, Sethi A, et al: En una clase propia: RXFP1 y RXFP2 son miembros
únicos de la familia LGR. Front Endocrinol (Lausana) 6:137, 2015.
278. Mueller S, Jaeschke H, Gunther R, et al: La región bisagra: un componente receptor
importante para la función GPHR. Tendencias Endocrinol Metab
21:111–122, 2009.
279. Alvarez CA, Narayan P, Huang J, et al: Caracterización de una región del dominio
extracelular del receptor de lutropina cerca de la hélice transmembrana 1 que es
importante en la señalización mediada por ligando. Endocrinología
140:1775–1782, 1999.
280. Bruser A, Schulz A, Rothemund S, et al: El mecanismo de activación de los receptores de
hormonas glicoproteicas con implicaciones en la causa y la terapia de enfermedades
endocrinas. J Biol Chem 291:508–520, 2016.
281. Troppmann B, Kleinau G, Krause G, et al: Plasticidad estructural y funcional del receptor
de la hormona luteinizante/coriogonadotrofina.
Hum Reprod Actualización 19:583–602, 2013.
282. Jiang X, Dreano M, Buckler DR, et al: Predicciones estructurales para la región de unión a
ligandos de los receptores de hormonas glicoproteicas y la naturaleza de las interacciones
hormona-receptor. Estructura 3:1341–1353, 1995.
283. Schmidt A, MacColl R, Lindau-Shepard B, et al: Cambio conformacional inducido por
hormonas del dominio de unión a hormona soluble purificado del receptor de folitropina
en complejo con folitropina de cadena sencilla. J Biol Chem 276:23373–23381, 2001.
284. Agrawal G, Dighe RR: Participación crítica de la región bisagra del receptor de la hormona
estimulante del folículo en la activación del receptor.
J Biol Chem 284:2636–2647, 2009.
285. Bruysters M, Verhoef-Post M, Themmen AP: Asp330 y Tyr331 en la región rica en cisteína
C-terminal del receptor de la hormona luteinizante son residuos clave en la activación del
receptor inducida por hormonas. J Biol Chem
283:25821–25828, 2008.
286. Costagliola S, Panneels V, Bonomi M, et al: Se requiere sulfatación de tirosina para el
reconocimiento de agonistas por parte de los receptores de hormonas glicoproteicas. EMBÚ J
21:504–513, 2002.
287. Majumdar R, Railkar R, Dighe RR: conocimientos sobre la modulación diferencial de la
función del receptor por región bisagra utilizando nuevos anticuerpos agonistas del
receptor de lutropina y del receptor de tirotropina agonista inverso. FEBS Lett 586:810–
817, 2012.
Machine Translated by Google
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57.e7
288. Fan QR, Hendrickson WA: Ensamblaje y caracterización estructural de un auténtico
complejo entre la hormona folículo estimulante humana y un ectodominio de unión a
hormonas de su receptor. Mol Cell Endocrinol
260:73–82, 2007.
289. Jiang X, Dias JA, He X: biología estructural de las hormonas glicoproteicas y sus
receptores: información sobre la señalización. Mol Cell Endocrinol
382:424–451, 2014.
290. Chen CR, Chazenbalk GD, McLachlan SM, et al: Evidencia de que el extremo C de la
subunidad A suprime la actividad constitutiva del receptor de tirotropina.
Endocrinología 144:3821–3827, 2003.
291. Vlaeminck-Guillem V, Ho SC, Rodien P, et al: La activación de la vía cAMP por el
receptor de TSH implica el cambio del ectodominio de un agonista inverso atado a
un agonista. Mol Endocrinol 16:736–746, 2002.
292. Zhang M, Tong KP, Fremont V, et al: El dominio extracelular suprime la actividad
constitutiva del dominio transmembrana del receptor de TSH humano: implicaciones
para la interacción hormona-receptor y el diseño antagonista. Endocrinología
141:3514–3517, 2000.
293. Grzesik P, Kreuchwig A, Rutz C, et al: Las diferencias en la activación de señales por
LH y hCG están mediadas por la región bisagra extracelular del receptor LH/CG.
Front Endocrinol (Lausana) 6:140, 2015.
294. Bonomi M, Busnelli M, Persani L, et al: diferencias estructurales en la región bisagra
de los receptores de hormonas glicoproteicas: evidencia de los residuos de tirosina
sulfatados. Mol Endocrinol 20:3351–3363, 2006.
295. Casarini L, Lispi M, Longobardi S, et al: La acción de LH y hCG en el mismo receptor
da como resultado una señalización intracelular cuantitativa y cualitativamente
diferente. PLoS ONE 7:e46682, 2012.
296. Jonas KC, Fanelli F, Huhtaniemi IT, et al: El análisis de una sola molécula de los
oligómeros del receptor acoplado a proteína G funcionalmente asimétrico (GPCR)
revela diversos ensamblajes espaciales y estructurales. J Biol Chem
290:3875–3892, 2015.
297. Grzesik P, Teichmann A, Furkert J, et al: diferencias entre la activación del receptor
mediada por lutropina y la coriogonadotropina. FEBRERO J 281:1479–1492, 2014.
298. Sanders J, Miguel RN, Bolton J, et al: interacciones moleculares entre el receptor de
TSH y un autoanticuerpo monoclonal estimulante de la tiroides.
Tiroides 17:699–706, 2007.
299. Sanders J, Chirgadze DY, Sanders P, et al: Estructura cristalina del receptor de TSH
en complejo con un autoanticuerpo estimulante de la tiroides.
Tiroides 17:395–410, 2007.
300. Sanders P, Young S, Sanders J, et al: Estructura cristalina del receptor de TSH
(TSHR) unido a un autoanticuerpo TSHR de tipo bloqueante. J Mol Endocrinol 46:81–
99, 2011.
301. Kumar P, Sait SF, Sharma A, et al: Síndrome de hiperestimulación ovárica.
J Hum Reprod Sci 4:70–75, 2011.
302. De Leener A, Caltabiano G, Erkan S, et al: Identificación de la primera mutación de la
línea germinal en el dominio extracelular del receptor de folitropina responsable del
síndrome de hiperestimulación ovárica espontánea. Hum Mutat 29:91–98, 2008.
303. Dupakuntla M, Mahale SD: Accesibilidad de los bucles extracelulares del receptor de
la hormona estimulante del folículo y su papel en la interacción hormona-receptor.
Mol Cell Endocrinol 315:131–137, 2010.
304. Fan QR, Hendrickson WA: Biología estructural de las hormonas glicoproteicas y sus
receptores. Endocrino 26:179–188, 2005.
305. Banerjee AA, Dupakuntla M, Pathak BR, et al: Los residuos específicos del receptor
de FSH L501 e I505 en el bucle extracelular 2 son esenciales para su función. J Mol
Endocrinol 54:193–204, 2015.
306. Casas-Gonzalez P, Scaglia HE, Perez-Solis MA, et al: función testicular normal sin
hormona estimulante del folículo detectable. Una nueva mutación en el gen del
receptor de la hormona estimulante del folículo que conduce a una actividad
constitutiva aparente y una desensibilización e internalización inducidas por agonistas
deterioradas. Mol Cell Endocrinol 364:71–82, 2012.
307. Ji I, Ji TH: Funciones diferenciales del exoloop 1 del receptor de la hormona
estimulante del folículo humano en la unión de hormonas y la activación del
receptor. J Biol Chem 270:15970–15973, 1995.
308. Ryu K, Gilchrist RL, Tung CS, et al: La unión de la hormona de alta afinidad al
exodominio N-terminal extracelular del receptor de la hormona estimulante del
folículo está modulada críticamente por exoloop 3. J Biol Chem
273:28953–28958, 1998.
309. Ryu K, Lee H, Kim S, et al: Modulación de la unión a hormonas de alta afinidad. La
unión de la coriogonadotropina humana al exodominio del receptor está influenciada
por el exoloop 2 del receptor. J Biol Chem
273:6285–6291, 1998.
310. Banerjee AA, Mahale SD: Papel de los bucles extracelulares e intracelulares del
receptor de la hormona estimulante del folículo en su función. Front Endocrinol
(Lausana) 6:110, 2015.
311. Dupakuntla M, Pathak B, Roy BS, et al: El bucle extracelular 2 en el receptor de FSH
es crucial para la activación del receptor mediada por ligando. Mol Cell Endocrinol
362:60–68, 2012.
312. Touraine P, Beau I, Gougeon A, et al: Nuevas mutaciones inactivantes naturales del
receptor de la hormona estimulante del folículo: correlaciones entre la función del
receptor y el fenotipo. Mol Endocrinol 13:1844–1854, 1999.
313. Sohn J, Ryu K, Sievert G, et al: la hormona estimulante del folículo interactúa con
exoloop 3 del receptor. J Biol Chem 277:50165–50175, 2002.
314. Kleinau G, Claus M, Jaeschke H, et al: Los contactos entre el bucle extracelular dos y
la hélice transmembrana seis determinan la actividad basal del receptor de la
hormona estimulante de la tiroides. J Biol Chem 282:518–525, 2007.
315. Wolf S, Grunewald S: Secuencia, estructura y evolución de la unión de ligandos de los
receptores acoplados a proteínas G similares a la rodopsina: un análisis filogenético
basado en la estructura cristalina. PLoS UNO 10:e0123533, 2015.
316. Ulloa-Aguirre A, Reiter E, Bousfield G, et al: Actividad constitutiva en los receptores de
gonadotropina. Adv Pharmacol 70:37–80, 2014.
317. Cohen BD, Bariteau JT, Magenis LM, et al: Regulación de la residencia en la superficie
celular del receptor de folitropina por la vía de la ubiquitina-proteasoma.
Endocrinología 144:4393–4402, 2003.
318. Cohen BD, Nechamen CA, Dias JA: El receptor de folitropina humana (FSHR)
interactúa con la proteína adaptadora 14-3-3tau. Mol Cell Endocrinol
220:1–7, 2004.
319. Dias JA, Mahale SD, Nechamen CA, et al: roles emergentes para la proteína
adaptadora del receptor de FSH APPL1 y superposición de un dominio de interacción
putativo 14-3-3tau con un sitio de interacción de proteína G canónica. Mol Cell
Endocrinol 329:17–25, 2010.
320. Timossi C, Maldonado D, Vizcaino A, et al: Los determinantes estructurales en el
segundo bucle intracelular del receptor de la hormona estimulante del folículo
humano están involucrados en la activación de la proteína G (s). Mol Cell Endocrinol
189:157–168, 2002.
321. Timossi C, Ortiz-Elizondo C, Pineda DB, et al: Significado funcional del motivo BBXXB
invertido presente en los dominios citoplasmáticos del receptor de la hormona
estimulante del folículo humano. Mol Cell Endocrinol
223:17–26, 2004.
322. Schulz A, Schoneberg T, Paschke R, et al: Papel del tercer bucle intracelular para la
activación de los receptores de gonadotropina. Mol Endocrinol
13:181–190, 1999.
323. Scheerer P, Park JH, Hildebrand PW, et al: estructura cristalina de la opsina en su
conformación de interacción con la proteína G. Naturaleza 455:497–502, 2008.
324. Rasmussen SGF, Choi HJ, Fung JJ, et al: Estructura de un estado activo estabilizado
con nanocuerpos del adrenoceptor beta (2). Naturaleza 469:175–180, 2011.
325. Rasmussen SGF, DeVree BT, Zou YZ, et al: estructura cristalina del complejo beta (2)
receptor adrenérgico-proteína Gs. Naturaleza 477:549–U311, 2011.
326. Venkatakrishnan AJ, Deupi X, Lebon G, et al: firmas moleculares de receptores
acoplados a proteína G. Naturaleza 494:185–194, 2013.
327. Ballesteros JA, Weinstein H: Análisis y refinamiento de criterios para predecir la
estructura y orientaciones relativas de dominios helicoidales transmembrana. Biophys
J 62:107–109, 1992.
328. Deupi X, Standfuss J: conocimientos estructurales sobre la activación inducida por
agonistas de los receptores acoplados a proteína G. Curr Opin Struct Biol 21:541–
551, 2011.
329. Sansuk K, Deupi X, Torrecillas IR, et al: Una visión estructural de la reorientación de
los dominios transmembrana 3 y 5 durante la activación del receptor acoplado a
proteínas AG de la familia. Mol Pharmacol 79:262–269, 2011.
330. Standfuss J, Edwards PC, D'Antona A, et al: La base estructural de la activación
inducida por agonistas en la rodopsina constitutivamente activa. Naturaleza
471:656–660, 2011.
331. Nygaard R, Zou Y, Dror RO, et al: El proceso dinámico de beta(2)-
Activación de receptores adrenérgicos. Celda 152:532–542, 2013.
332. Ayoub MA, Yvinec R, Jegot G, et al: La elaboración de perfiles de moduladores
alostéricos negativos de FSHR en LH/CGR revela un antagonismo sesgado con
implicaciones en la esteroidogénesis. Mol Cell Endocrinol 2016.
333. Landomiel F, Gallay N, Jegot G, et al: señalización sesgada en la acción de la hormona
estimulante del folículo. Mol Cell Endocrinol 382:452–459, 2014.
334. Munshi UM, Clouser CL, Peegel H, et al: Evidencia de que la palmitoilación de los
residuos de cisteína del extremo carboxilo del receptor de la hormona luteinizante
humana regula el procesamiento postendocítico. Mol Endocrinol 19:749–758, 2005.
335. Uribe A, Zarinan T, Perez-Solis MA, et al: Funciones funcionales y estructurales de los
residuos de cisteína conservados en el dominio carboxilo terminal del receptor de la
hormona estimulante del folículo en células 293 de riñón embrionario humano. Biol
Reprod 78:869–882, 2008.
Machine Translated by Google
57.e8 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
336. Melo-Nava B, Casas-Gonzalez P, Perez-Solis MA, et al: Papel de los residuos de
cisteína en el extremo carboxilo del receptor de la hormona estimulante del folículo en
el tráfico intracelular y el procesamiento postendocítico. Front Cell Dev Biol 4:76, 2016.
337. Duvernay MT, Zhou F, Wu G: un motivo conservado para el transporte de receptores
acoplados a proteína G desde el retículo endoplásmico a la superficie celular. J Biol
Chem 279:30741–30750, 2004.
338. Kara E, Crepieux P, Gauthier C, et al: Un grupo de fosforilación de cinco residuos de
serina y treonina en el extremo C del receptor de la hormona estimulante del folículo
es importante para la desensibilización, pero no para la activación de ERK mediada
por beta-arrestina. Mol Endocrinol 20:3014–3026, 2006.
339. Lazari MF, Liu X, Nakamura K, et al: Papel de las quinasas receptoras acopladas a
proteínas G en la fosforilación inducida por agonistas y la internalización del receptor
de folitropina. Mol Endocrinol 13:866–878, 1999.
340. Troispoux C, Guillou F, Elalouf JM, et al: Participación de las quinasas receptoras
acopladas a proteínas G y arrestinas en la desensibilización a la acción de la hormona
estimulante del folículo. Mol Endocrinol 13:1599–1614, 1999.
341. Krishnamurthy H, Kishi H, Shi M, et al: tráfico postendocitótico del complejo receptor de
la hormona estimulante del folículo (FSH)-FSH.
Mol Endocrinol 17:2162–2176, 2003.
342. Galet C, Hirakawa T, Ascoli M: El tráfico postendocitótico del receptor de lutropina
humano está mediado por un motivo transferible que consiste en la cisteína C-terminal
y una leucina aguas arriba. Mol Endocrinol
18:434–446, 2004.
343. Galet C, Min L, Narayanan R, et al: Identificación de un motivo transferible de dos
aminoácidos (GT) presente en la cola C-terminal del receptor de lutropina humano que
redirige los receptores acoplados a proteína G internalizados de una degradación a
una vía de reciclaje. Mol Endocrinol 17:411–422, 2003.
344. Chauvigne F, Tingaud-Sequeira A, Agulleiro MJ, et al: El análisis funcional y evolutivo
de los receptores de gonadotropina de peces planos revela divergencia a nivel de
clado y linaje de la familia de receptores de glicoproteínas de teleósteos.
Biol Reprod 82:1088–1102, 2010.
345. Dufau ML, Tsai-Morris CH: El receptor de la hormona luteinizante. En Payne AH, Hardy
MP, editores: The Leydig cell in health and disease, Totowa, NJ, 2007, Humana Press,
págs. 227–252.
346. George JW, Dille EA, Heckert LL: Conceptos actuales de la regulación del gen del
receptor de la hormona estimulante del folículo. Biol Reprod 84:7–17, 2011.
347. Hermann BP, Heckert LL: El silenciamiento de Fshr ocurre a través de un sitio
hipersensible conservado en el primer intrón. Mol Endocrinol 19:2112–2131, 2005.
348. Hermann BP, Heckert LL: Regulación transcripcional del receptor de FSH: nuevas
perspectivas. Mol Cell Endocrinol 260-262:100–108, 2007.
349. Hermann BP, Hornbaker K, Rice DA, et al: La regulación in vivo del receptor de la
hormona estimulante del folículo por los factores de transcripción aguas arriba del
factor estimulador 1 y el factor estimulador aguas arriba 2 es específica de la célula.
Endocrinología 149:5297–5306, 2008.
350. Viswanathan P, Wood MA, Walker WH: la hormona estimulante del folículo (FSH)
bloquea transitoriamente la transcripción del receptor de FSH al aumentar el inhibidor
de la unión/diferenciación del ácido desoxirribonucleico-2 y disminuir la expresión del
factor estimulante aguas arriba en células de Sertoli de rata. Endocrinología 150:3783–
3791, 2009.
351. Scobey MJ, Fix CA, Walker WH: el represor transcripcional Id2 es inducido por la
hormona estimulante del folículo y el AMPc. J Biol Chem
279:16064–16070, 2004.
352. Wood MA, Walker WH: La actividad de unión al ADN del factor de transcripción USF1/2
se induce durante la diferenciación de células de Sertoli de rata. biol reprod
80:24–33, 2009.
353. Gromoll J, Dankbar B, Gudermann T: Caracterización de la región flanqueante 5' del
gen del receptor de la hormona estimulante del folículo humano. Mol Cell Endocrinol
102:93–102, 1994.
354. Levallet J, Koskimies P, Rahman N, et al: El promotor del receptor de la hormona
estimulante del folículo murino: caracterización funcional y regulación por el factor de
transcripción factor esteroidogénico 1. Mol Endocrinol
15:80–92, 2001.
355. Perez-Solis MA, Macias H, Acosta-MontesdeOca A, et al: Clonación molecular y análisis
funcional del promotor del gen del receptor de FSH del ratón volcán (Neotomodon
alstoni alstoni). Endocrino
37:98–105, 2010.
356. Sairam MR, Subbarayan VS: Caracterización de la región flanqueante 5' y los posibles
elementos de control del gen del receptor de folitropina ovina.
Mol Reprod Dev 48:480–487, 1997.
357. Hermann BP, Hornbaker KI, Maran RR, et al: Se requieren elementos reguladores
distales para la expresión de Fshr, in vivo. Mol Cell Endocrinol 260-
262:49–58, 2007.
358. Dufau ML, Liao M, Zhang Y: Participación de las vías de señalización en la desrepresión
de la transcripción del receptor de la hormona luteinizante. Mol Cell Endocrinol
314:221–227, 2010.
359. El-Hefnawy T, Krawczyk Z, Nikula H, et al: Regulación de la función del promotor del
receptor de la hormona luteinizante murina por elementos que actúan en cis y trans
en células tumorales de Leydig de ratón. Mol Cell Endocrinol
119:207–217, 1996.
360. Geng Y, Tsai-Morris CH, Zhang Y, et al: El promotor del gen del receptor de la hormona
luteinizante humana: activación por Sp1 y Sp3 y regulación inhibitoria. Biochem
Biophys Res Commun 263:366–371, 1999.
361. Zhang Y, Dufau ML: Represión del promotor del gen del receptor de la hormona
luteinizante por diafonía entre EAR3/COUP-TFI, Sp1/Sp3 y TFIIB. Mol Cell Biol
23:6958–6972, 2003.
362. Zhang Y, Fatima N, Dufau ML: Los cambios coordinados en la metilación del ADN y las
modificaciones de las histonas regulan el silenciamiento/desrepresión de la
transcripción del gen del receptor de la hormona luteinizante. Mol Cell Biol 25:7929–
7939, 2005.
363. Zhang Y, Liao M, Dufau ML: Desbloqueo de la represión del gen del receptor de la
hormona luteinizante humana mediante la liberación de fosfatasa específica de células
inducida por tricostatina A. J Biol Chem 283:24039–24046, 2008.
364. Liao M, Zhang Y, Kang JH, et al: Función coactivadora del cofactor 4 positivo (PC4) en
la transcripción del gen del receptor de la hormona luteinizante (LHR) dirigido por Sp1.
J Biol Chem 286:7681–7691, 2011.
365. Liao M, Zhang Y, Dufau ML: Desrepresión inducida por la proteína quinasa Calpha de
la transcripción del gen del receptor de la hormona luteinizante humana a través de la
liberación mediada por ERK del complejo represor HDAC1/Sin3A de los sitios Sp1.
Mol Endocrinol 22:1449–1463, 2008.
366. Simoni M, Gromoll J, Nieschlag E: El receptor de la hormona estimulante del folículo:
bioquímica, biología molecular, fisiología y fisiopatología. Endocr Rev 18:739–773,
1997.
367. LaPolt PS, Tilly JL, Aihara T, et al: Regulación ascendente y descendente inducida por
gonadotropina de la expresión del gen del receptor de la hormona estimulante del
folículo ovárico (FSH) en ratas inmaduras: efectos de la gonadotropina sérica de
yegua preñada, gonadotropina coriónica humana, y FSH recombinante.
Endocrinología 130:1289–1295, 1992.
368. Rannikki AS, Zhang FP, Huhtaniemi IT: Ontogenia de la expresión del gen del receptor
de la hormona estimulante del folículo en los testículos y ovarios de rata. Mol Cell
Endocrinol 107:199–208, 1995.
369. Houde A, Lambert A, Saumande J, et al: Estructura del ADN complementario del
receptor de la hormona estimulante del folículo bovino y expresión en tejidos bovinos.
Mol Reprod Dev 39:127–135, 1994.
370. Gromoll J, Dankbar B, Sharma RS, et al: Clonación molecular del receptor de la hormona
estimulante del folículo testicular del primate no humano Macaca fascicularis e
identificación de múltiples transcritos en el testículo. Biochem Biophys Res Commun
196:1066–1072, 1993.
371. Khan H, Yarney TA, Sairam MR: Clonación de transcritos de ARNm empalmados
alternativamente que codifican variantes del receptor de folitropina testicular ovino que
carecen de los dominios de acoplamiento de la proteína G. Biochem Biophys Res Comunes
190:888–894, 1993.
372. Rajapaksha WR, Robertson L, O'Shaughnessy PJ: Expresión de transcritos alternativos
de ARNm del receptor de hormona estimulante del folículo en células de la granulosa
bovina durante la luteinización in vivo e in vitro. Mol Cell Endocrinol 120:25–30, 1996.
373. Babu PS, Danilovich N, Sairam MR: Empalme del gen del receptor inducido por
hormonas: expresión mejorada del motivo del receptor de la hormona estimulante del
folículo del factor de crecimiento tipo I en el ovario de ratón en desarrollo como un
nuevo paradigma en la regulación del crecimiento. Endocrinología 142:381–389, 2001.
374. Neubauer K, Jewgenow K, Fickel J: receptor de la hormona estimulante del folículo en
félidos: variación dentro y entre especies. Teriogenología 66:1737–1742, 2006.
375. Tena-Sempere M, Manna PR, Huhtaniemi I: Clonación molecular del ácido
desoxirribonucleico complementario del receptor de la hormona estimulante del folículo
de ratón: expresión funcional de variantes empalmadas alternativamente e inactivación
del receptor por una transición C566T en el exón 7 de la secuencia codificante. Biol
Reprod 60:1515–1527, 1999.
376. Sairam MR, Jiang LG, Yarney TA, et al: El empalme alternativo convierte el gen del
receptor de folitropina acoplado a proteína G en un receptor de factor de crecimiento
tipo I: implicaciones para las acciones pleiotrópicas de la hormona.
Mol Reprod Dev 48:471–479, 1997.
377. Gromoll J, Gudermann T, Nieschlag E: Clonación molecular de una isoforma truncada
del receptor de la hormona estimulante del folículo humano. Biochem Biophys Res
Commun 188:1077–1083, 1992.
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57.e9
378. Gerasimova T, Thanasoula MN, Zattas D, et al: Identificación y caracterización in vitro de
variantes del receptor de la hormona estimulante del folículo (FSH) asociadas con una
respuesta ovárica anormal a la FSH. J Clin Endocrinol Metab 95:529–536, 2010.
379. Karakaya C, Guzeloglu-Kayisli O, Hobbs RJ, et al: La omisión alternativa del exón 2 o 3
del receptor de la hormona estimulante del folículo (FSHR) afecta la respuesta ovárica a
la FSH. Mol Hum Reprod 20:630–643, 2014.
380. Kelton CA, Cheng SV, Nugent NP, et al: La clonación del receptor de la hormona
estimulante del folículo humano y su expresión en células COS-7, CHO e Y-1. Mol Cell
Endocrinol 89:141–151, 1992.
381. Robinson LJ, Tourkova I, Wang Y, et al: isoformas del receptor de FSH y transcripción de
genes dependientes de FSH en monocitos y osteoclastos humanos.
Biochem Biophys Res Commun 394:12–17, 2010.
382. Song GJ, Park YS, Lee YS, et al: Variantes empalmadas alternativamente del gen del
receptor de la hormona estimulante del folículo en los testículos de hombres infértiles.
Fertil Steril 77:499–504, 2002.
383. Zhou J, Huang Y, Li L, et al: Identificación de dos nuevos transcritos de ARNm empalmados
alternativamente del receptor de la hormona estimulante del folículo humano. Mol Reprod
Dev 80:916–923, 2013.
384. Sairam MR, Babu PS: La historia de la diversidad de receptores de folitropina: ¿una receta
para ajustar las respuestas gonadales? Mol Cell Endocrinol 260-262:163–171, 2007.
385. Babu PS, Jiang L, Sairam AM, et al: Características estructurales y expresión de un
receptor tipo I del factor de crecimiento empalmado alternativamente para la señalización
de folitropina en el ovario en desarrollo. Mol Cell Biol Res Commun 2:21–27, 1999.
386. Babu PS, Krishnamurthy H, Chedrese PJ, et al: Activación de vías de quinasa reguladas
extracelulares en células de la granulosa ovárica por el nuevo receptor de la hormona
estimulante del folículo tipo 1 del factor de crecimiento. Papel en la señalización hormonal
y la proliferación celular. J Biol Chem 275:27615–
27626, 2000.
387. Sairam MR, Jiang LG, Yarney TA, et al: transducción de señales de folitropina: el empalme
alternativo del gen del receptor de FSH produce una forma negativa dominante de
receptor que inhibe la acción de la hormona. Biochem Biophys Res Commun 226:717–
722, 1996.
388. Sullivan RR, Faris BR, Eborn D, et al: expresión folicular de variantes del receptor de la
hormona estimulante del folículo en la oveja. Reprod Biol Endocrinol
11:113, 2013.
389. Minegishi T, Nakamura K, Takakura Y, et al: Clonación y secuenciación del ADNc del
receptor de LH/hCG humano. Biochem Biophys Res Comunes
172:1049–1054, 1990.
390. McFarland KC, Sprengel R, Phillips HS, et al: Lutropin-choriogonad otropin receptor: un
miembro inusual de la familia de receptores acoplados a proteínas G. Ciencia 245:494–
499, 1989.
391. Bacich DJ, Rohan RM, Norman RJ, et al: Caracterización y abundancia relativa del ácido
ribonucleico mensajero del receptor de la hormona luteinizante empalmado
alternativamente en el ovario ovino. Endocrinología 135:735–744, 1994.
392. Kawate N, Okuda K: Expresión coordinada de variantes de empalme para el ARN
mensajero del receptor de la hormona luteinizante durante el desarrollo de cuerpos
lúteos bovinos. Mol Reprod Dev 51:66–75, 1998.
393. Saint-Dizier M, Chopineau M, Dupont J, et al: Expresión y actividad de unión de la hormona
luteinizante/receptores de gonadotropina coriónica en el cuerpo lúteo primario durante
el embarazo temprano en la yegua. Biol Reprod 69:1743–1749, 2003.
394. Igarashi S, Minegishi T, Nakamura K, et al: expresión funcional de la hormona luteinizante
humana recombinante/receptor de coriogonadotropina humana. Biochem Biophys Res
Commun 201:248–256, 1994.
395. Madhra M, Gay E, Fraser HM, et al: empalme alternativo del receptor de LH lúteo humano
durante la luteolisis y el reconocimiento materno del embarazo. Mol Hum Reprod 10:599–
603, 2004.
396. Nishimori K, Dunkel L, Hsueh AJ, et al: Expresión de la hormona luteinizante y el ácido
ribonucleico mensajero del receptor de gonadotropina coriónica en cuerpos lúteos
humanos durante el ciclo menstrual y el embarazo. J Clin Endocrinol Metab 80:1444–
1448, 1995.
397. Minegishi T, Nakamura K, Yamashita S, et al: El efecto de la variante de empalme del
receptor de la hormona luteinizante humana (LH) en la expresión del receptor de
gonadotropina. Mol Cell Endocrinol 260-
262:117–125, 2007.
398. Nakamura K, Yamashita S, Omori Y, et al: Una variante de empalme del receptor de la
hormona luteinizante humana (LH) modula la expresión del receptor de LH humano de
tipo salvaje. Mol Endocrinol 18:1461–1470, 2004.
399. Yamashita S, Nakamura K, Omori Y, et al: Asociación del receptor de folitropina humana
(FSH) con variante de empalme de lutropina humana/
El receptor de coriogonadotropina controla negativamente la expresión del receptor de
FSH humano. Mol Endocrinol 19:2099–2111, 2005.
400. Kossack N, Simoni M, Richter-Unruh A, et al: Las mutaciones en un nuevo exón críptico
del gen del receptor de la hormona luteinizante/gonadotropina coriónica causan
pseudohermafroditismo masculino. PLoS Med 5:e88, 2008.
401. Kossack N, Troppmann B, Richter-Unruh A, et al: La transcripción aberrante del gen
LHCGR causada por una mutación en el exón 6A conduce a la hipoplasia de células de
Leydig tipo II. Mol Cell Endocrinol 366:59–67, 2013.
402. Menon B, Franzo-Romain M, Damanpour S, et al: La regulación negativa del ARNm del
receptor de la hormona luteinizante está mediada por la inducción dependiente de ERK
de la proteína de unión al ARN. Mol Endocrinol 25:282–290, 2011.
403. Gulappa T, Menon B, Menon KM: Se requiere la hipusinación del factor de iniciación
eucariótico 5A a través de la vía cAMP-PKA-ERK1/2 para la regulación a la baja inducida
por ligando de la expresión del ARNm del receptor de LH en el ovario. Mol Cell Endocrinol
413:90–95, 2015.
404. Menon KM, Menon B: Estructura, función y regulación de los receptores de gonadotropina
- una perspectiva. Mol Cell Endocrinol 356:88–97, 2012.
405. Menon B, Sinden J, Menon KM: la asociación del ARNm del receptor de la hormona
luteinizante (LHR) con su proteína de unión conduce a la decapitación y degradación del
ARNm en los cuerpos p. Biochim Biophys Acta
1833:1173–1179, 2013.
406. Menon B, Sinden J, Franzo-Romain M, et al: Regulación de la proteína de unión al ARNm
del receptor de LH por miR-122 en ovarios de rata. Endocrinología
154:4826–4834, 2013.
407. Menon B, Gulappa T, Menon KM: miR-122 regula la expresión del receptor de lh al activar
la proteína de unión al elemento de respuesta de esteroles en los ovarios de rata.
Endocrinología 156:3370–3380, 2015.
408. Troppmann B, Kossack N, Nordhoff V, et al: MicroRNA miR-513a-3p actúa como un co-
regulador de la expresión génica del receptor de hormona luteinizante/gonadotropina
coriónica en células de la granulosa humana. Mol Cell Endocrinol
390:65–72, 2014.
409. Kitahara Y, Nakamura K, Kogure K, et al: Papel del microARN-136-3p en la expresión del
ARNm del receptor de gonadotropina coriónica humana-hormona luteinizante en ovarios
de rata. Biol Reprod 89:114, 2013.
410. Inoue K, Nakamura K, Abe K, et al: Efecto del factor de crecimiento transformante beta en
la expresión del receptor de la hormona luteinizante en células de granulosa de rata
cultivadas. Biol Reprod 67:610–615, 2002.
411. Tano M, Minegishi T, Nakamura K, et al: regulación transcripcional y postranscripcional
del receptor de FSH en células de la granulosa de rata por AMP cíclico y activina. J
Endocrinol 153:465–473, 1997.
412. Du X, Li Q, Pan Z, et al: El receptor de andrógenos y el eje miRNA-126* controla la
expresión del receptor de la hormona estimulante del folículo en células de la granulosa
de ovario porcino. Reproducción 152:161–169, 2016.
413. Broadley SA, Hartl FU: El papel de las chaperonas moleculares en las enfermedades de
plegamiento humano. FEBS Lett 583:2647–2653, 2009.
414. Ulloa-Aguirre A, Conn PM: Orientación de receptores acoplados a proteína G a la
membrana plasmática en salud y enfermedad. Frente Biosci 14:973–994, 2009.
415. Ulloa-Aguirre A, Janovick JA, Brothers SP, et al: rescate farmacológico de proteínas
conformacionalmente defectuosas: implicaciones para el tratamiento de enfermedades
humanas. Tráfico 5:821–837, 2004.
416. Hartl FU, Bracher A, Hayer-Hartl M: chaperonas moleculares en el plegamiento de
proteínas y la proteostasis. Naturaleza 475:324–332, 2011.
417. Hutt DM, Powers ET, Balch WE: El límite de proteostasis en enfermedades de plegamiento
incorrecto del tráfico de membranas. FEBS Lett 583:2639–2646, 2009.
418. Ron D, Walter P: Integración de la señal en la respuesta de la proteína desplegada del
retículo endoplásmico. Nat Rev Mol Cell Biol 8:519–529, 2007.
419. Brooks DA: Introducción: chaperonas moleculares de la sala de emergencias: su papel en
el plegamiento de proteínas y enfermedades genéticas. Semin Cell Dev Biol 10:441–
442, 1999.
420. Hartl FU, Hayer-Hartl M: chaperonas moleculares en el citosol: desde la cadena naciente
hasta la proteína plegada. Ciencia 295:1852–1858, 2002.
421. Morello JP, Petaja-Repo UE, Bichet DG, et al: chaperonas farmacológicas: un nuevo giro
en el plegamiento del receptor. Tendencias Pharmacol Sci
21:466–469, 2000.
422. Chevet E, Cameron PH, Pelletier MF, et al: El retículo endoplásmico: integración del
plegamiento de proteínas, control de calidad, señalización y degradación.
Curr Opin Struct Biol 11:120–124, 2001.
423. Klausner RD, Sitia R: Degradación de proteínas en el retículo endoplásmico.
Celda 62:611–614, 1990.
424. Schubert U, Anton LC, Gibbs J, et al: Degradación rápida de una gran fracción de proteínas
recién sintetizadas por proteasomas. Naturaleza
404:770–774, 2000.
425. Werner ED, Brodsky JL, McCracken AA: Degradación de proteínas asociadas al retículo
endoplásmico dependiente de proteasoma: una ruta no convencional hacia un destino
familiar. Proc Natl Acad Sci USA 93:13797–13801, 1996.
Machine Translated by Google
57.e10 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
426. Helenius A, Aebi M: Funciones de los glucanos ligados a N en el retículo endoplásmico.
Annu Rev Biochem 73:1019–1049, 2004.
427. Davis D, Liu X, Segaloff DL: Identificación de los sitios de glicosilación ligada a N en el
receptor de la hormona estimulante del folículo (FSH) y evaluación de su papel en la
función del receptor de FSH. Mol Endocrinol
9:159–170, 1995.
428. Clouser CL, Menon KM: La glicosilación ligada a N facilita el procesamiento y la
expresión en la superficie celular del receptor de la hormona luteinizante de rata. Mol
Cell Endocrinol 235:11–19, 2005.
429. Mizrachi D, Segaloff DL: Los receptores hormonales de glicoproteína mal plegados
ubicados intracelularmente se asocian con diferentes proteínas acompañantes que
sus receptores de tipo salvaje afines. Mol Endocrinol 18:1768–1777, 2004.
430. Rozell TG, Davis DP, Chai Y, et al: Asociación de precursores del receptor de
gonadotropina con la chaperona de plegamiento de proteínas calnexina. Endocrinología
139:1588–1593, 1998.
431. Gething MJ: Papel y regulación de la chaperona ER BiP. Semin Cell Dev Biol 10:465–
472, 1999.
432. Siffroi-Fernandez S, Giraud A, Lanet J, et al: Asociación del receptor de tirotropina con
calnexina, calreticulina y BiP. Efectos sobre la maduración del receptor. Eur J
Biochem 269:4930–4937, 2002.
433. Zarinan T, Perez-Solis MA, Maya-Nunez G, et al: Efectos negativos dominantes de los
mutantes deficientes en la expresión del receptor de la hormona estimulante del
folículo humano en la expresión de la superficie celular del receptor de tipo salvaje.
Rescate de la expresión defectuosa del receptor dependiente de la oligomerización
mediante el uso de señuelos afines. Mol Cell Endocrinol 321:112–122, 2010.
434. Tao YX, Johnson NB, Segaloff DL: Autoasociación constitutiva y dependiente de
agonistas del receptor de lutropina humana de la superficie celular. J Biol Chem
279:5904–5914, 2004.
435. Nechamen CA, Dias JA: Las mutaciones puntuales en el resultado del receptor de
folitropina en la retención de ER. Mol Cell Endocrinol 201:123–131, 2003.
436. Thomas RM, Nechamen CA, Mazurkiewicz JE, et al: El receptor de la hormona
estimulante del folículo forma oligómeros y muestra evidencia de procesamiento
proteolítico carboxilo terminal. Endocrinología 148:1987–1995, 2007.
437. Lindau-Shepard B, Brumberg HA, Peterson AJ, et al: inmunoneutralización reversible
del receptor de folitropina humana. J Reprod inmunol
49:1–19, 2001.
438. Ulloa-Aguirre A, Dias JA, Bousfield G, et al: Trafficking of the folitropin receptor.
Métodos Enzymol 521:17–45, 2013.
439. Blanpain C, Wittamer V, Vanderwinden JM, et al: La palmitoilación de CCR5 es
fundamental para el tráfico de receptores y la activación eficiente de las vías de
señalización intracelular. J Biol Chem 276:23795–23804, 2001.
440. Tanaka K, Nagayama Y, Nishihara E, et al: Palmitoilación del receptor de tirotropina
humano: tráfico intracelular más lento del mutante defectuoso de palmitoilación.
Endocrinología 139:803–806, 1998.
441. Resh MD: palmitoilación de ligandos, receptores y señalización intracelular
moléculas. Ciencia STKE 2006:re14, 2006.
442. Fukushima Y, Saitoh T, Anai M, et al: La palmitoilación del receptor canino de histamina
H2 ocurre en Cys(305) y es importante para la orientación de la superficie celular.
Biochim Biophys Acta 1539:181–191, 2001.
443. Percherancier Y, Planchenault T, Valenzuela-Fernandez A, et al: control dependiente
de la mitoilación de Pal de la degradación, la vida útil y la expresión de la membrana
del receptor CCR5. J Biol Chem 276:31936–31944, 2001.
444. Kawate N, Menon KM: Palmitoilación de receptores de hormona luteinizante/
coriogonadotropina humana en células transfectadas. La abolición de la juguetelación
de palmi por mutación de los residuos de Cys-621 y Cys-622 en la cola citoplásmica
aumenta la internalización del receptor inducida por ligando. J Biol Chem 269:30651–
30658, 1994.
445. Marion S, Robert F, Crepieux P, et al: Las quinasas receptoras acopladas a proteína
G y las beta arrestinas se relocalizan y atenúan la respuesta cíclica de 3',5'-adenosina
monofosfato a la hormona estimulante del folículo en células primarias de Sertoli de
rata. Biol Reprod 66:70–76, 2002.
446. Reiter E, Lefkowitz RJ: GRK y beta-arrestinas: roles en el silenciamiento, tráfico y
señalización de receptores. Tendencias Endocrinol Metab 17:159–165, 2006.
447. Piketty V, Kara E, Guillou F, et al: La hormona estimulante del folículo (FSH) activa la
fosforilación de quinasa regulada por señales extracelulares independientemente de
la internalización del receptor de FSH mediada por beta-arrestina y dinamina. Reprod
Biol Endocrinol 4:33, 2006.
448. Mukherjee S, Gurevich VV, Jones JC, et al: El factor de intercambio de nucleótidos del
factor de ribosilación de ADP ARNO promueve la liberación de beta-arrestina
necesaria para la desensibilización del receptor de la hormona luteinizante/
coriogonadotropina. Proc Natl Acad Sci USA 97:5901–5906, 2000.
449. Ahtiainen P, Rulli S, Pakarainen T, et al: Caracterización fenotípica de ratones con
acción de LH/hCG exagerada y faltante. Mol Cell Endocrinol 260-262:255–263, 2007.
450. Kumar TR: Orientación del gen de la gonadotropina e implicaciones biológicas.
Endocrino 26:227–233, 2005.
451. Pakarainen T, Ahtiainen P, Zhang FP, et al: Extragonadal LH/hCG action—todavía no
es hora de reescribir los libros de texto. Mol Cell Endocrinol
269:9–16, 2007.
452. Abel MH, Wootton AN, Wilkins V, et al: El efecto de una mutación nula en el gen del
receptor de la hormona estimulante del folículo en la reproducción del ratón.
Endocrinología 141:1795–1803, 2000.
453. Dierich A, Sairam MR, Monaco L, et al: Deterioro de la señalización de la hormona
estimulante del folículo (FSH) in vivo: la interrupción dirigida del receptor de FSH
conduce a una gametogénesis aberrante y un desequilibrio hormonal.
Proc Natl Acad Sci USA 95:13612–13617, 1998.
454. Zhang FP, Poutanen M, Wilbertz J, et al: Desarrollo sexual prenatal normal pero
posnatal detenido de ratones knockout para el receptor de la hormona luteinizante
(LuRKO). Mol Endocrinol 15:172–183, 2001.
455. Lei ZM, Mishra S, Zou W, et al: Disrupción dirigida del gen del receptor de la hormona
luteinizante/gonadotropina coriónica humana. Mol Endocrinol
15:184–200, 2001.
456. Sun L, Peng Y, Sharrow AC, et al: FSH regula directamente la masa ósea.
Celda 125:247–260, 2006.
457. Sun L, Zhang Z, Zhu LL, et al: Más pruebas de las acciones directas a favor de la
absorción de FSH. Biochem Biophys Res Commun 394:6–11, 2010.
458. Cannon JG, Kraj B, Sloan G: la hormona estimulante del folículo promueve la expresión
de RANK en monocitos humanos. Citocina 53:141–144, 2011.
459. Stilley JA, Guan R, Duffy DM, et al: La señalización a través de los receptores de FSH
en las células endoteliales de la vena umbilical humana promueve la angiogénesis.
J Clin Endocrinol Metab 99:E813–E820, 2014.
460. Planeix F, Siraj MA, Bidard FC, et al: Expresión del receptor de la hormona estimulante
del folículo endotelial en el cáncer de mama invasivo y la remodelación vascular en
la periferia del tumor. J Exp Clin Cancer Res 34:12, 2015.
461. Siraj A, Desestret V, Antoine M, et al: Expresión del receptor de la hormona estimulante
del folículo por el endotelio vascular en metástasis tumorales.
BMC Cáncer 13:246, 2013.
462. Stilley JA, Christensen DE, Dahlem KB, et al: Expresión del receptor de FSH (FSHR)
en tejidos reproductivos extragonadales humanos y la placenta en desarrollo, y el
impacto de su eliminación en el embarazo en ratones. Biol Reprod 91:74, 2014.
463. Ponikwicka-Tyszko D, Chrusciel M, Stelmaszewska J, et al: expresión funcional del
receptor de FSH en lesiones endometriósicas. J Clin Endocrinol Metab 101:2905–
2914, 2016.
464. Song Y, Wang ES, Xing LL, et al: La hormona estimulante del folículo induce la
dislipidemia posmenopáusica mediante la inhibición del metabolismo del colesterol
hepático. J Clin Endocrinol Metab 101:254–263, 2016.
465. Gao J, Tiwari-Pandey R, Samadfam R, et al: La función ovárica alterada afecta la
homeostasis esquelética independientemente de la acción de la hormona estimulante
del folículo. Endocrinología 148:2613–2621, 2007.
466. Allan CM, Kalak R, Dunstan CR, et al: La hormona estimulante del folículo aumenta la
masa ósea en ratones hembra. Proc Natl Acad Sci EE. UU.
107:22629–22634, 2010.
467. JC anterior: FSH y hueso: ¿fisiología importante o no? Tendencias Mol Med 13:1–3,
2007.
468. Seibel MJ, Dunstan CR, Zhou H, et al: Sex steroids, not FSH, influence
la masa ósea. Celda 127:1079, respuesta del autor 1080-1071, 2006.
469. Williams GR: Pérdida ósea hipogonadal: ¿esteroides sexuales o gonadotropinas?
Endocrinología 148:2610–2612, 2007.
470. Radu A, Pichon C, Camporo P, et al: Expresión del receptor de la hormona estimulante
del folículo en los vasos sanguíneos del tumor. N Engl J Med 363:1621–1630, 2010.
471. Rao CV, Lei ZM: Pasado, presente y futuro de LH no gonadal/
Acciones de hCG en biología reproductiva y medicina. Mol Cell Endocrinol
269:2–8, 2007.
472. Berndt S, Perrier d'Hauterive S, Blacher S, et al: actividad angiogénica de la
gonadotropina coriónica humana a través de la activación del receptor de LH en las
células endoteliales y epiteliales del endometrio. FASEBJ
20:2630–2632, 2006.
473. Cameo P, Szmidt M, Strakova Z, et al: La decidualización regula la expresión del
receptor de gonadotropina coriónica endometrial en el primate. Biol Reprod 75:681–
689, 2006.
474. Lacroix A, Hamet P, Boutin JM: Terapia con acetato de leuprolida en el síndrome de
Cushing dependiente de la hormona luteinizante. N Engl J Med 341:1577–
1581, 1999.
475. Bernichtein S, Alevizaki M, Huhtaniemi I: ¿Es la corteza suprarrenal un objetivo para
las gonadotropinas? Tendencias Endocrinol Metab 19:231–238, 2008.
476. Lacroix A, Ndiaye N, Tremblay J, et al: Receptores hormonales ectópicos y anormales
en el síndrome de Cushing suprarrenal. Endocr Rev 22:75–110, 2001.
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57.e11
477. Apaja PM, Aatsinki JT, Rajaniemi HJ, et al: La expresión del receptor maduro de la
hormona luteinizante en tejidos suprarrenales y urogenitales de roedores está
regulada por el desarrollo a un nivel postraduccional. Endocrinología
146:3224–3232, 2005.
478. Apaja PM, Harju KT, Aatsinki JT, et al: Identificación y caracterización estructural del
receptor de la hormona luteinizante neuronal asociado con los sistemas sensoriales.
J Biol Chem 279:1899–1906, 2004.
479. Milligan G: dimerización del receptor acoplado a proteína G: base molecular y
relevancia para la función. Biochim Biophys Acta 1768:825–835, 2007.
480. Kleinau G, Muller A, Biebermann H: Oligomerización de GPCR involucrados en la
regulación endocrina. J Mol Endocrinol 57:R59–R80, 2016.
481. Richards JS: control hormonal de la expresión génica en el ovario. Endocr Rev 15:725–
751, 1994.
482. Horvat RD, Nelson S, Clay CM, et al: El receptor de la hormona luteinizante
intrínsecamente fluorescente demuestra la agregación impulsada por hormonas.
Biochem Biophys Res Commun 255:382–385, 1999.
483. Latif R, Graves P, Davies TF: Oligomerización del receptor de tirotropina humano:
hTSHR marcado con proteína fluorescente revela complejos postraduccionales. J
Biol Chem 276:45217–45224, 2001.
484. Mazurkiewicz JE, Herrick-Davis K, Barroso M, et al: Los análisis de una sola molécula
del receptor de folitropina marcado con proteína fluorescente totalmente funcional
revelan homodimerización y heterodimerización específica con el receptor de
lutropina. Biol Reprod 92:100, 2015.
485. Jiang X, Fischer D, Chen X, et al: Evidencia del receptor de la hormona estimulante
del folículo como un trímero funcional. J Biol Chem 289:14273–14282, 2014.
486. Guan R, Wu X, Feng X, et al: Determinantes estructurales subyacentes a la dimerización
constitutiva de los receptores de folitropina humanos desocupados.
Señal celular 22:247–256, 2010.
487. Sairam MR, Bhargavi GN: Un papel para la glicosilación de la subunidad alfa en la
transducción de señales biológicas en hormonas glicoproteicas. Ciencias
229:65–67, 1985.
488. Sairam MR: papel de los carbohidratos en la transducción de señales de hormonas
glicoproteicas. FASEB J 3:1915–1926, 1989.
489. Meher BR, Dixit A, Bousfield GR, et al: Efectos de glicosilación en la dinámica de
interacción FSH-FSHR: un estudio de caso de diferentes coformas gly de FSH
mediante simulaciones de dinámica molecular. PLoS UNO 10:e0137897, 2015.
490. Guan R, Feng X, Wu X, et al: Los estudios de transferencia de energía por resonancia
de bioluminiscencia revelan una dimerización constitutiva del receptor de lutropina
humano y una falta de correlación entre la activación del receptor y la propensión a
la dimerización. J Biol Chem 284:7483–7494, 2009.
491. Zhang M, Feng X, Guan R, et al: Un mutante inactivo de la superficie celular del
receptor de lutropina humano (hLHR) atenúa la señalización de receptores de tipo
salvaje o constitutivamente activos mediante heterodimerización. señal celular
21:1663–1671, 2009.
492. Ji I, Lee C, Jeoung M, et al: La transactivación de los receptores mutantes de la
hormona estimulante del folículo genera selectivamente solo una de dos señales
hormonales. Mol Endocrinol 18:968–978, 2004.
493. Urizar E, Montanelli L, Loy T, et al: Receptores de hormonas glicoproteicas: vínculo
entre la homodimerización del receptor y la cooperatividad negativa.
EMBO J 24:1954–1964, 2005.
494. Ji I, Lee C, Song Y, et al: Cis- y trans-activación de receptores de hormonas: el receptor
de LH. Mol Endocrinol 16:1299–1308, 2002.
495. Rivero-Muller A, Chou YY, Ji I, et al: Rescate de la función defectuosa del receptor
acoplado a proteína G in vivo mediante cooperación intermolecular. Proc Natl Acad
Sci USA 107:2319–2324, 2010.
496. Lee C, Ji I, Ryu K, et al: Dos receptores de hormona luteinizante heterocigotos
defectuosos pueden rescatar la acción de la hormona. J Biol Chem 277:15795–
15800, 2002.
497. Feng X, Zhang M, Guan R, et al: La heterodimerización entre los receptores de
lutropina y folitropina se asocia con una atenuación de la señalización dependiente
de hormonas. Endocrinología 154:3925–3930, 2013.
498. Ulloa-Aguirre A, Zarinan T, Pasapera AM, et al: Múltiples facetas de la función del
receptor de la hormona estimulante del folículo. Endocrino 32:251–263, 2007.
499. Arey BJ, Stevis PE, Deecher DC, et al: Inducción del acoplamiento promiscuo de
proteína G del receptor de la hormona estimulante del folículo (FSH): un mecanismo
novedoso para transducir acciones pleiotrópicas de isoformas de FSH.
Mol Endocrinol 11:517–526, 1997.
500. Quintana J, Hipkin RW, Sanchez-Yague J, et al: La folitropina (FSH) y un éster de
forbol estimulan la fosforilación del receptor de FSH en células intactas. J Biol Chem
269:8772–8779, 1994.
501. Zeleznik AJ, Saxena D, Little-Ihrig L: La proteína quinasa B es obligatoria para la
diferenciación de células de la granulosa inducida por la hormona estimulante del folículo.
Endocrinología 144:3985–3994, 2003.
502. Lin YF, Tseng MJ, Hsu HL, et al: Una nueva vía de señalización de G alfa h/fosfolipasa
C-delta1 inducida por hormona estimulante del folículo que media la entrada de Ca2+
en células de sertoli de rata. Mol Endocrinol 20:2514–2527, 2006.
503. Wayne CM, Fan HY, Cheng X, et al: La hormona estimulante del folículo induce
múltiples cascadas de señalización: evidencia de que la activación del oncogén del
sarcoma de Rous, RAS y el receptor del factor de crecimiento epidérmico son
fundamentales para la diferenciación de las células de la granulosa. Mol Endocrinol
21:1940–1957, 2007.
504. Marion S, Kara E, Crepieux P, et al: El receptor quinasa 2 acoplado a proteína G y las
beta-arrestinas se reclutan para el receptor de FSH en células de Sertoli primarias
de rata estimuladas. J Endocrinol 190:341–350, 2006.
505. Nechamen CA, Thomas RM, Dias JA: APPL1, APPL2, Akt2 y FOXO1a interactúan con
FSHR en un posible complejo de señalización.
Mol Cell Endocrinol 260-262:93–99, 2007.
506. Thomas RM, Nechamen CA, Mazurkiewicz JE, et al: La proteína adaptadora APPL1
vincula el receptor de FSH con la producción de inositol 1,4,5-trifosfato y está
implicada en la movilización intracelular de Ca(2+).
Endocrinología 152:1691–1701, 2011.
507. Gonzalez-Robayna IJ, Falender AE, Ochsner S, et al: La hormona estimulante del
folículo (FSH) estimula la fosforilación y activación de la proteína quinasa B (PKB/
Akt) y la quinasa inducida por glucocorticoides y suero (Sgk): evidencia de A
Señalización independiente de quinasa por FSH en células de la granulosa.
Mol Endocrinol 14:1283–1300, 2000.
508. Richards JS, Pangas SA: Nuevos conocimientos sobre la función ovárica. Handb Exp
Pharmacol 3–27, 2010.
509. Ulloa-Aguirre A, Crepieux P, Poupon A, et al: Nuevas vías en la señalización del
receptor de gonadotropina y el agonismo sesgado. Rev. Endocr Metab Disord 12:259–
274, 2011.
510. Donadeu FX, Ascoli M: Los efectos diferenciales de los receptores de gonadotropina
sobre la expresión de aromatasa en cultivos primarios de células inmaduras de la
granulosa de rata dependen en gran medida de la densidad de los receptores
expresados y de la activación de la cascada de fosfato de inositol.
Endocrinología 146:3907–3916, 2005.
511. Musnier A, Heitzler D, Boulo T, et al: regulación del desarrollo de la quinasa p70 S6
por un receptor acoplado a proteína G modelado dinámicamente en células primarias.
Cell Mol Life Sci 66:3487–3503, 2009.
512. Herndon MK, Law NC, Donaubauer EM, et al: Forkhead box O miembro FOXO1 regula
la mayoría de los genes sensibles a la hormona estimulante del folículo en las células
de la granulosa ovárica. Mol Cell Endocrinol 434:116–126, 2016.
513. Baumgarten SC, Convissar SM, Fierro MA, et al: la señalización de IGF1R es necesaria
para la activación de AKT inducida por FSH y la diferenciación de las células del
cúmulo granuloso humano. J Clin Endocrinol Metab 99:2995–3004, 2014.
514. Hunzicker-Dunn ME, Lopez-Biladeau B, Law NC, et al: PKA y GAB2 juegan un papel
central en la vía de señalización de FSH a PI3K y AKT en las células de la granulosa
ovárica. Proc Natl Acad Sci USA 109:E2979–
E2988, 2012.
515. Law NC, Hunzicker-Dunn ME: sustrato del receptor de insulina 1, el centro que vincula
la hormona estimulante del folículo con la activación de la fosfatidilinositol 3-quinasa.
J Biol Chem 291:4547–4560, 2016.
516. Choi JH, Chen CL, Poon SL, et al: Expresión del receptor del factor de crecimiento
epidérmico estimulado por gonadotropina en células epiteliales de la superficie del
ovario humano: participación de la proteína de intercambio dependiente de AMP
cíclico activada por la vía cAMP. Endocr Relat Cancer 16:179–188, 2009.
517. Nechamen CA, Thomas RM, Cohen BD, et al: El receptor de la hormona estimulante
del folículo humano (FSH) interactúa con la proteína adaptadora APPL1 en las
células HEK 293: participación potencial de la vía PI3K en la señalización de FSH.
Biol Reprod 71:629–636, 2004.
518. Cunningham MA, Zhu Q, Unterman TG, et al: La hormona estimulante del folículo
promueve la exclusión nuclear del factor de transcripción de cabeza de horquilla
FoxO1a a través de la fosfatidilinositol 3-quinasa en células de la granulosa porcina.
Endocrinología 144:5585–5594, 2003.
519. Donaubauer EM, Law NC, Hunzicker-Dunn ME: Regulación dependiente de la hormona
estimulante del folículo (FSH) de la fosforilación de quinasa regulada extracelular
(ERK) por MAP quinasa fosfatasa MKP3. J Biol Chem 291:19701–19712, 2016.
520. Donaubauer EM, Hunzicker-Dunn ME: La fosforilación dependiente de la quinasa
regulada por señales extracelulares (ERK) de la proteína 1 de unión a la caja Y
(YB-1) mejora la expresión génica en las células de la granulosa en respuesta a la
hormona estimulante del folículo (FSH). J Biol Chem 291:12145–12160, 2016.
521. Crepieux P, Marion S, Martinat N, et al: La señalización dependiente de ERK está
modulada de forma específica por etapa por FSH, durante la maduración primaria de
las células de Sertoli. Oncogen 20:4696–4709, 2001.
522. Cottom J, Salvador LM, Maizels ET, et al: la hormona estimulante del folículo activa la
quinasa regulada por señales extracelulares pero no extracelular
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57.e12 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
Quinasa quinasa regulada por señal a través de una fosfotirosina fosfatasa de 100 kDa.
J Biol Chem 278:7167–7179, 2003.
523. Gudermann T, Birnbaumer M, Birnbaumer L: Evidencia del acoplamiento dual del receptor
de la hormona luteinizante murina con la descomposición de la adenilil ciclasa y la
fosfoinositida y la movilización de Ca2+ . Estudios con el receptor de la hormona
luteinizante murina clonado expresado en células L. J Biol Chem 267:4479–4488, 1992.
524. Gudermann T, Nichols C, Levy FO, et al: Movilización de Ca2+ por el receptor de LH
expresado en ovocitos de Xenopus independiente de la formación de monofosfato de
adenosina 3',5'-cíclico: evidencia de activación paralela de dos vías de señalización. Mol
Endocrinol 6:272–278, 1992.
525. Conti M, Hsieh M, Zamah AM, et al: Nuevos mecanismos de señalización en el ovario
durante la maduración y la ovulación de los ovocitos. Mol Cell Endocrinol
356:65–73, 2012.
526. Hernandez-Gonzalez I, Gonzalez-Robayna I, Shimada M, et al: Los perfiles de expresión
génica de los complejos de ovocitos de células del cúmulo durante la ovulación revelan
que las células del cúmulo expresan genes relacionados con la inmunidad y las
neuronas: ¿esto amplía su función en el proceso de ovulación? Mol Endocrinol
20:1300–1321, 2006.
527. Hsieh M, Lee D, Panigone S, et al: La activación dependiente de la hormona luteinizante
de la red del factor de crecimiento epidérmico es esencial para la ovulación. Mol Cell
Biol 27:1914–1924, 2007.
528. Nautiyal J, Steel JH, Rosell MM, et al: La proteína 140 que interactúa con el receptor del
cofactor del receptor nuclear es un regulador positivo de la expresión de anfiregulina y
la expansión del complejo de células del cúmulo-ovocitos en el ovario de ratón.
Endocrinología 151:2923–2932, 2010.
529. Fan HY, Liu Z, Mullany LK, et al: Consecuencias de la activación de RAS y MAPK en el
ovario: lo bueno, lo malo y lo feo. Mol Cell Endocrinol 356:74–79, 2012.
530. Fan HY, Liu Z, Shimada M, et al: MAPK3/1 (ERK1/2) en las células de la granulosa ovárica
son esenciales para la fertilidad femenina. Ciencia 324:938–941, 2009.
531. Andric N, Ascoli M: La cascada de quinasa-1/2 regulada extracelularmente activada por el
receptor de la hormona luteinizante estimula la liberación de epirregulina de las células
de la granulosa. Endocrinología 149:5549–5556, 2008.
532. Hsieh M, Thao K, Conti M: disección genética de la señalización del receptor del factor de
crecimiento epidérmico durante la maduración de ovocitos inducida por la hormona
luteinizante. PLoS ONE 6:e21574, 2011.
533. Norris RP, Freudzon M, Mehlmann LM, et al: La hormona luteinizante provoca la
fosforilación dependiente de MAP quinasa y el cierre de las uniones comunicantes de
conexina 43 en los folículos ováricos de ratón: uno de los dos caminos hacia la
reanudación meiótica. Desarrollo 135:3229–3238, 2008.
534. Norris RP, Freudzon M, Nikolaev VO, et al: La actividad de la cinasa del receptor del factor
de crecimiento epidérmico es necesaria para el cierre de la unión comunicante y para
parte de la disminución del GMPc del folículo ovárico en respuesta a la LH.
Reproducción 140:655–662, 2010.
535. Norris RP, Ratzan WJ, Freudzon M, et al: El GMP cíclico de las células somáticas
circundantes regula el AMP cíclico y la meiosis en el ovocito de ratón. Desarrollo
136:1869–1878, 2009.
536. Vaccari S, Weeks JL, 2nd, Hsieh M, et al: La señalización de GMP cíclica está involucrada
en la maduración meiótica dependiente de la hormona luteinizante de los ovocitos de
ratón. Biol Reprod 81:595–604, 2009.
537. Matzkin ME, Yamashita S, Ascoli M: La vía ERK1/2 regula la síntesis de testosterona
mediante la regulación coordinada de la expresión de genes esteroidogénicos en las
células de Leydig. Mol Cell Endocrinol 370:130–137, 2013.
538. Yamashita S, Tai P, Charron J, et al: La vía MEK/ERK de células de Leydig es fundamental
para mantener una población funcional de células de Leydig adultas y para la fertilidad.
Mol Endocrinol 25:1211–1222, 2011.
539. Fan HY, Liu Z, Johnson PF, et al: CCAAT/proteínas de unión potenciadoras (C/EBP)-alfa
y beta son esenciales para la ovulación, la luteinización y la expresión de genes diana
clave. Mol Endocrinol 25:253–268, 2011.
540. Fan HY, O'Connor A, Shitanaka M, et al: Beta-catenina (CTNNB1) promueve el desarrollo
folicular preovulatorio pero reprime la ovulación y la luteinización mediadas por LH. Mol
Endocrinol 24:1529–1542, 2010.
541. Davis JS, Weakland LL, West LA, et al: La hormona luteinizante estimula la formación de
trifosfato de inositol y AMP cíclico en células de la granulosa de rata. Evidencia de que
la fosfolipasa C generó segundos mensajeros en la acción de la hormona luteinizante.
Biochem J 238:597–604, 1986.
542. Davis JS, West LA, Weakland LL, et al: La gonadotropina coriónica humana activa el
sistema de señalización intracelular de inositol 1,4,5-trisfosfato-Ca2+ en células luteales
bovinas. FEBS Lett 208:287–291, 1986.
543. Veldhuis JD: Mecanismos que favorecen la acción hormonal en el ovario: papel de los
iones de calcio según lo evaluado por el intercambio de calcio en estado estacionario en
células de granulosa porcina cultivadas. Endocrinología 120:445–449, 1987.
544. Breen SM, Andric N, Ping T, et al: La ovulación implica la activación dependiente de la
hormona luteinizante de G(q/11) en las células de la granulosa. Mol Endocrinol 27:1483–
1491, 2013.
545. Mehlmann LM, Kalinowski RR, Ross LF, et al: La reanudación meiótica en respuesta a la
hormona luteinizante es independiente de una proteína G de la familia Gi o del calcio en
el ovocito de ratón. Dev Biol 299:345–355, 2006.
546. Andric N, Ascoli M: Las mutaciones del receptor de lutropina/coriogonadotropina que no
activan la cascada de fosfoinositida permiten que la hCG induzca la expresión de
aromatasa en células inmaduras de la granulosa de rata. Mol Cell Endocrinol 285:62–
72, 2008.
547. Jagarlamudi K, Reddy P, Adhikari D, et al: modelos de ratón genéticamente modificados
para insuficiencia ovárica prematura (POF). Mol Cell Endocrinol
315:1–10, 2010.
548. Zheng W, Gorre N, Shen Y, et al: La señalización de fosfatidilinositol 3-quinasa materna
es crucial para la activación del genoma embrionario y la embriogénesis previa a la
implantación. Representante de EMBO 11: 890–895, 2010.
549. Zheng W, Nagaraju G, Liu Z, et al: funciones funcionales de la señalización de
fosfatidilinositol 3-quinasas (PI3K) en el ovario de mamífero. Mol Cell Endocrinol 356:24–
30, 2012.
550. Palaniappan M, Menon KM: La gonadotropina coriónica humana estimula la proliferación
de células intersticiales de la teca y las proteínas reguladoras del ciclo celular mediante
una activación dependiente de cAMP de la vía de señalización de AKT/mTORC1.
Mol Endocrinol 24:1782–1793, 2010.
551. Palaniappan M, Menon KM: La activación de la señalización de mTORC1 mediada por
hormona luteinizante/gonadotropina coriónica humana es necesaria para la síntesis de
andrógenos por parte de las células intersticiales de la teca. Mol Endocrinol
26:1732–1742, 2012.
552. Richards JS, Russell DL, Ochsner S, et al: Nuevas vías de señalización que controlan el
desarrollo folicular ovárico, la ovulación y la luteinización.
Recent Prog Horm Res 57:195–220, 2002.
553. Menon KM, Munshi UM, Clouser CL, et al: Regulación de la hormona luteinizante/expresión
del receptor de gonadotropina coriónica humana: una perspectiva. Biol Reprod 70:861–
866, 2004.
554. Luttrell LM, Maudsley S, Bohn LM: Cumpliendo la promesa de “sesgo”
Agonismo del receptor acoplado a proteína G. Mol Pharmacol 88:579–588, 2015.
555. Reiter E, Ahn S, Shukla AK, et al: mecanismo molecular del agonismo sesgado por beta
arrestina en los siete receptores transmembrana. Annu Rev Pharmacol Toxicol 52:179–
197, 2012.
556. Shenoy SK, Drake MT, Nelson CD, et al: activación de ERK1/2 independiente de proteína
G y dependiente de beta-arrestina por el receptor adrenérgico beta2.
J Biol Chem 281:1261–1273, 2006.
557. Wei H, Ahn S, Shenoy SK, et al: Beta-arrestina independiente 2 y vías mediadas por
proteína G para la activación de angiotensina II de quinasas 1 y 2 reguladas por señales
extracelulares. Proc Natl Acad Sci USA 100: 10782–
10787, 2003.
558. Timossi CM, Barrios de Tomasi J, Zambrano E, et al: Una variante de la hormona
estimulante del folículo humano (FSH) básicamente cargada de forma natural inhibe la
aromatización de andrógenos inducida por FSH y la actividad de la enzima activadora
del plasminógeno de tipo tisular in vitro. Neuroendocrinología
67:153–163, 1998.
559. Timossi CM, Barrios-de-Tomasi J, Gonzalez-Suarez R, et al: Efectos diferenciales de las
variantes de carga de la hormona estimulante del folículo humano.
J Endocrinol 165:193–205, 2000.
560. Arey BJ, Lopez FJ: ¿Las isoformas de gonadotropina circulantes son agonistas sesgados
de origen natural? Implicaciones básicas y terapéuticas. Rev. Endocr Metab Disord
12:275–288, 2011.
561. Arey BJ, Yanofsky SD, Claudia Perez M, et al: Diferentes actividades farmacológicas de
los análogos de tiazolidinona en el receptor de FSH. Biochem Biophys Res Commun
368:723–728, 2008.
562. Dias JA, Bonnet B, Weaver BA, et al: Un modulador alostérico negativo demuestra un
antagonismo sesgado del receptor de la hormona estimulante del folículo. Mol Cell
Endocrinol 333:143–150, 2011.
563. Wehbi V, Tranchant T, Durand G, et al: La LH equina parcialmente desglicosilada activa
preferentemente la señalización dependiente de beta-arrestina en el receptor de la
hormona estimulante del folículo. Mol Endocrinol 24:561–573, 2010.
564. Butnev VY, Singh V, Nguyen VT, et al: La LH beta equina truncada y la LH alfa equina
desglicosilada con asparagina (56) se combinan para producir un potente antagonista
de la FSH. J Endocrinol 172:545–555, 2002.
565. Aittomaki K, Lucena JL, Pakarinen P, et al: La mutación en el gen del receptor de la
hormona estimulante del folículo causa insuficiencia ovárica hipergonadotrópica
hereditaria. Celda 82:959–968, 1995.
566. Tranchant T, Durand G, Gauthier C, et al: Señalización preferencial de beta-arrestina a
baja densidad de receptores revelada por caracterización funcional
Machine Translated by Google
CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57.e13
de la mutación A189 V del receptor de FSH humano. Mol Cell Endocrinol
331:109–118, 2011.
567. Uchida S, Uchida H, Maruyama T, et al: Análisis molecular de un receptor de FSH
mutado detectado en una paciente con síndrome de hiperestimulación ovárica
espontánea. PLoS ONE 8:e75478, 2013.
568. Arnhold IJ, Lofrano-Porto A, Latronico AC: Las mutaciones inactivantes de la subunidad
beta de la hormona luteinizante o el receptor de la hormona luteinizante causan
oligoamenorrea e infertilidad en las mujeres. Horm Res 71:75–82,
2009.
569. Desai SS, Roy BS, Mahale SD: Mutaciones y polimorfismos en el receptor de FSH:
implicaciones funcionales en la reproducción humana. Reproducción
146:R235–R248, 2013.
570. Huhtaniemi I, Alevizaki M: Mutaciones a lo largo del eje gonadal hipotálamo-pituitario
que afectan la reproducción masculina. Reprod Biomed en línea
15:622–632, 2007.
571. Segaloff D: Enfermedades asociadas con mutaciones de los receptores de lutropina
humana. En Tao YX, editor: Progress in molecular biology and translational science,
Estados Unidos, 2009, Academic Press, págs. 97–114.
572. Ulloa-Aguirre A, Zarinan T, Dias JA, et al: Mutaciones en receptores acoplados a
proteína G que afectan el tráfico de receptores y la función reproductiva. Mol Cell
Endocrinol 382:411–423, 2014.
573. Tapanainen JS, Aittomaki K, Min J, et al: Los hombres homocigotos para una mutación
inactivadora del gen del receptor de la hormona estimulante del folículo (FSH)
presentan una supresión variable de la espermatogénesis y la fertilidad. Nat Genet
15:205–206, 1997.
574. Beau I, Touraine P, Meduri G, et al: Un nuevo fenotipo relacionado con la pérdida
parcial de mutaciones funcionales del receptor de la hormona estimulante del folículo.
J Clin Invest 102:1352–1359, 1998.
575. Aittomaki K, Herva R, Stenman UH, et al: Características clínicas de la insuficiencia
ovárica primaria causada por una mutación puntual en el gen del receptor de la
hormona estimulante del folículo. J Clin Endocrinol Metab 81:3722–3726, 1996.
576. Latronico AC, Chai Y, Arnhold IJ, et al: Una microdeleción homocigota en la hélice 7
del receptor de la hormona luteinizante asociada con la resistencia testicular y ovárica
familiar se debe tanto a la disminución de la expresión en la superficie celular como
a la alteración de la activación del efector por parte del receptor de la superficie celular.
Mol Endocrinol 12:442–450, 1998.
577. Martens JW, Verhoef-Post M, Abelin N, et al: Una mutación homocigota en el receptor
de la hormona luteinizante causa hipoplasia parcial de células de Leydig: correlación
entre la actividad del receptor y el fenotipo. Mol Endocrinol
12:775–784, 1998.
578. Richter-Unruh A, Martens JW, Verhoef-Post M, et al: Leydig cell hypoplasia: casos con
nuevas mutaciones, nuevos polimorfismos y casos sin mutaciones en el gen del
receptor de la hormona luteinizante. Clin Endocrinol (Oxf) 56:103–112, 2002.
579. Charmandari E, Guan R, Zhang M, et al: Las mutaciones de ectodominio mal plegadas
del receptor de lutropina aumentan la eficacia de la estimulación hormonal. Mol
Endocrinol 30:62–76, 2016.
580. Gromoll J, Schulz A, Borta H, et al: La mutación homocigótica dentro del motivo
conservado Ala-Phe-Asn-Gly-Thr del exón 7 del receptor de LH causa
pseudohermafroditismo masculino. Eur J Endocrinol 147:597–608,
2002.
581. Martens JW, Lumbroso S, Verhoef-Post M, et al: Receptores mutantes de la hormona
luteinizante en un paciente heterocigoto compuesto con hipoplasia completa de
células de Leydig: el procesamiento anormal causa deficiencia de señalización.
J Clin Endocrinol Metab 87:2506–2513, 2002.
582. Toledo SP, Brunner HG, Kraaij R, et al: Una mutación inactivante del receptor de la
hormona luteinizante causa amenorrea en una mujer 46,XX.
J Clin Endocrinol Metab 81:3850–3854, 1996.
583. Vezzoli V, Duminuco P, Vottero A, et al: Una nueva variante en el péptido señal del
receptor de la hormona luteinizante humana (LHCGR) afecta la biogénesis del
receptor y causa hipoplasia de células de Leydig. Hum Mol Genet 24:6003–6012,
2015.
584. Wu SM, Hallermeier KM, Laue L, et al: Inactivación de la hormona luteinizante/receptor
de gonadotropina coriónica por una mutación de inserción en la hipoplasia de células
de Leydig. Mol Endocrinol 12:1651–1660, 1998.
585. Kremer H, Kraaij R, Toledo SP, et al: Pseudohermafroditismo masculino debido a una
mutación sin sentido homocigótica del gen del receptor de la hormona luteinizante.
Nat Genet 9:160–164, 1995.
586. Laue LL, Wu SM, Kudo M, et al: mutaciones heterocigóticas compuestas del gen del
receptor de la hormona luteinizante en la hipoplasia de células de Leydig.
Mol Endocrinol 10:987–997, 1996.
587. Latronico AC, Anasti J, Arnhold IJ, et al: Informe breve: resistencia testicular y ovárica
a la hormona luteinizante causada por mutaciones inactivantes del gen del receptor
de la hormona luteinizante. N Inglés J Med
334:507–512, 1996.
588. Rivero-Muller A, Potorac I, Pintiaux A, et al: Una nueva mutación inactivante del
receptor de gonadotrofina coriónica/LH con tráfico de membrana deteriorado que
conduce a hipoplasia de células de Leydig tipo 1. Eur J Endocrinol 172:K27–K36,
2015.
589. Newton CL, Whay AM, McArdle CA, et al: Rescate de la expresión y señalización de
mutantes del receptor acoplado a la proteína G de la hormona luteinizante humana
con un agonista de molécula pequeña de unión alostérica. Proc Natl Acad Sci USA
108:7172–7176, 2011.
590. Gromoll J, Eiholzer U, Nieschlag E, et al: Hipogonadismo masculino causado por la
eliminación homocigota del exón 10 del receptor de la hormona luteinizante (LH):
acción diferencial de la gonadotropina coriónica humana y la LH.
J Clin Endocrinol Metab 85:2281–2286, 2000.
591. Muller T, Gromoll J, Simoni M: La ausencia del exón 10 del receptor de la hormona
luteinizante humana (LH) afecta la LH, pero no la acción de la gonadotropina coriónica
humana. J Clin Endocrinol Metab 88:2242–2249, 2003.
592. Muller T, Simoni M, Pekel E, et al: El ARNm de la subunidad beta de la gonadotropina
coriónica, pero no el ARNm de la subunidad beta de la hormona luteinizante, se
expresa en la hipófisis del tití común (Callithrix jacchus).
J Mol Endocrinol 32:115–128, 2004.
593. Zhang FP, Rannikko AS, Manna PR, et al: Clonación y expresión funcional del ácido
desoxirribonucleico complementario del receptor de la hormona luteinizante del
testículo del mono tití: ausencia de secuencias que codifican el exón 10 en otras
especies. Endocrinología
138:2481–2490, 1997.
594. Rosenthal SM, Grumbach MM, Kaplan SL: Precocidad sexual familiar independiente
de gonadotropina con Leydig prematuro y maduración de células germinales
(testotoxicosis familiar): efectos de un potente agonista del factor liberador de
hormona luteinizante y tratamiento con acetato de medroxiprogesterona en cuatro
casos. J Clin Endocrinol Metab 57:571–579, 1983.
595. Schedewie HK, Reiter EO, Beitins IZ, et al: Testicular leydig cell hyperplasia as a cause
of familiar sexual precocity. J Clin Endocrinol Metab 52:271–278, 1981.
596. Laue L, Chan WY, Hsueh AJ, et al: Heterogeneidad genética de mutaciones
activadoras constitutivas del receptor de la hormona luteinizante humana en la
pubertad precoz familiar limitada a los hombres. Proc Natl Acad Sci EE. UU.
92:1906–1910, 1995.
597. Laue L, Wu SM, Kudo M, et al: Heterogeneidad de las mutaciones activadoras del
receptor de la hormona luteinizante humana en la pubertad precoz limitada a los
hombres. Biochem Mol Med 58:192–198, 1996.
598. Gromoll J, Partsch CJ, Simoni M, et al: Una mutación en el primer dominio
transmembrana del receptor de lutropina provoca la pubertad precoz masculina. J
Clin Endocrinol Metab 83:476–480, 1998.
599. Evans BA, Bowen DJ, Smith PJ, et al: Una nueva mutación puntual en el gen del
receptor de la hormona luteinizante en la pubertad precoz limitada masculina familiar
y esporádica: el genotipo no siempre se correlaciona con el fenotipo.
J Med Genet 33:143–147, 1996.
600. Hai L, McGee SR, Rabideau AC, et al: La infertilidad en ratones hembra con una
mutación de ganancia de función en el receptor de la hormona luteinizante se debe
a ciclos estrales irregulares, anovulación, alteraciones hormonales y ovarios
poliquísticos. Biol Reprod 93:16, 2015.
601. McGee SR, Narayan P: Pubertad precoz e hiperplasia de células de Leydig en ratones
macho con una mutación de ganancia de función en el gen del receptor de LH.
Endocrinología 154:3900–3913, 2013.
602. Shenker A, Laue L, Kosugi S, et al: Una mutación de activación constitutiva del receptor
de la hormona luteinizante en la pubertad precoz masculina familiar.
Naturaleza 365:652–654, 1993.
603. Yano K, Hidaka A, Saji M, et al: Un caso esporádico de pubertad precoz limitada al
varón tiene la misma mutación puntual de activación constitutiva en el gen del
receptor de la hormona luteinizante/coriogonadotropina que los casos familiares.
J Clin Endocrinol Metab 79:1818–1823, 1994.
604. Yano K, Kohn LD, Saji M, et al: Un caso de pubertad precoz limitada a hombres
causada por una mutación puntual en el segundo dominio transmembrana del gen
del receptor de coriogonadotropina de la hormona luteinizante.
Biochem Biophys Res Commun 220:1036–1042, 1996.
605. Cocco S, Meloni A, Marini MG, et al: Una mutación de sentido erróneo (T577I) en el
gen del receptor de la hormona luteinizante asociado con la pubertad precoz familiar
limitada al varón. Hum Mutat 7:164–166, 1996.
606. Kosugi S, Van Dop C, Geffner ME, et al: Caracterización de mutaciones heterogéneas
que causan la activación constitutiva del receptor de la hormona luteinizante en la
pubertad precoz masculina familiar. Hum Mol Genet
4:183–188, 1995.
607. Ignacak M, Hilczer M, Zarzycki J, et al: Sustitución de M398T en la segunda hélice
transmembrana del receptor de LH en un paciente con pubertad precoz familiar
limitada a hombres. Endocr J 47:595–599, 2000.
608. Kraaij R, Post M, Kremer H, et al: Una mutación sin sentido en el segundo segmento
transmembrana del receptor de la hormona luteinizante causa
Machine Translated by Google
57.e14 PARTE 1 Endocrinología de la reproducción
pubertad precoz familiar limitada al varón. J Clin Endocrinol Metab
80:3168–3172, 1995.
609. Latronico AC, Abell AN, Arnhold IJ, et al: Una mutación activa constitutivamente única
en la tercera hélice transmembrana del receptor de la hormona luteinizante causa
pubertad precoz esporádica masculina independiente de la gonadotropina. J Clin
Endocrinol Metab 83:2435–2440, 1998.
610. Shinozaki H, Butnev V, Tao YX, et al: Desensibilización de la señalización del receptor
acoplado a Gs por mutantes constitutivamente activos de la lutropina humana/
receptor de coriogonadotropina. J Clin Endocrinol Metab 88:1194–1204, 2003.
611. Hebrant A, van Staveren WC, Maenhaut C, et al: Hipertiroidismo genético:
hipertiroidismo debido a mutaciones activadoras de TSHR. Eur J Endocrinol 164:1–
9, 2011.
612. Kreuchwig A, Kleinau G, Krause G: Recurso de investigación: nuevos conocimientos
estructurales cierran brechas en los análisis de receptores de hormonas glicoproteicas.
Mol Endocrinol 27:1357–1363, 2013.
613. Kreuchwig A, Kleinau G, Kreuchwig F, et al: Recurso de investigación: actualización y
extensión de una aplicación web de receptores de hormonas glicoproteicas.
Mol Endocrinol 25:707–712, 2011.
614. Worth CL, Kreuchwig A, Kleinau G, et al: GPCR-SSFE: una base de datos completa
de predicciones de plantillas de receptores acoplados a proteínas G y modelos de
homología. BMC Bioinformática 12:185, 2011.
615. Latronico AC, Segaloff DL: Conocimientos aprendidos de L457(3.43)R, un mutante
activador del receptor de lutropina humana. Mol Cell Endocrinol
260-262:287–293, 2007.
616. Ascoli M: Potenciales señales mitogénicas de células de Leydig generadas por los
mutantes constitutivamente activos y de tipo salvaje del receptor de lutropina/coriogo
nadotropina (LHR). Mol Cell Endocrinol 260-262:244–248, 2007.
617. Hirakawa T, Ascoli M: Una mutación somática constitutivamente activa del receptor de
lutropina humana que se encuentra en los tumores de células de Leydig activa las
mismas familias de proteínas G que las mutaciones de la línea germinal asociadas
con la hiperplasia de células de Leydig. Endocrinología 144:3872–3878, 2003.
618. Hirakawa T, Galet C, Ascoli M: Células MA-10 transfectadas con el receptor de
lutropina/coriogonadotropina humana (hLHR): un nuevo paradigma experimental
para estudiar las propiedades funcionales de la hLHR.
Endocrinología 143:1026–1035, 2002.
619. Canto P, Soderlund D, Ramon G, et al: Análisis mutacional del gen del receptor de la
hormona luteinizante en dos individuos con tumores de células de Leydig. Am J Med
Genet 108:148–152, 2002.
620. Liu G, Duranteau L, Carel JC, et al: tumores de células de Leydig causados por una
mutación activadora del gen que codifica el receptor de la hormona luteinizante. N
Engl J Med 341:1731–1736, 1999.
621. Richter-Unruh A, Wessels HT, Menken U, et al: Precocidad sexual masculina
independiente de LH en un niño de 3,5 años causado por una mutación activadora
somática del receptor de LH en un tumor de células de Leydig. J Clin Endocrinol
Metab 87:1052–1056, 2002.
622. Kotlar TJ, Young RH, Albanese C, et al: Una mutación en el receptor de la hormona
estimulante del folículo ocurre con frecuencia en los tumores de cordón sexual de
ovario humano. J Clin Endocrinol Metab 82:1020–1026, 1997.
623. Meduri G, Touraine P, Beau I, et al: Retraso en la pubertad y amenorrea primaria
asociada con una nueva mutación del receptor de la hormona estimulante del folículo
humano: estudios clínicos, histológicos y moleculares. J Clin Endocrinol Metab
88:3491–3498, 2003.
624. Doherty E, Pakarinen P, Tiitinen A, et al: Una nueva mutación en el receptor de FSH
que inhibe la transducción de señales y causa insuficiencia ovárica primaria. J Clin
Endocrinol Metab 87:1151–1155, 2002.
625. Nakamura Y, Maekawa R, Yamagata Y, et al: Una nueva mutación en el exón 8 del
receptor de la hormona estimulante del folículo en una mujer con amenorrea primaria.
Gynecol Endocrinol 24:708–712, 2008.
626. Achrekar SK, Modi DN, Meherji PK, et al: Variantes del gen del receptor de la hormona
estimulante del folículo en mujeres con amenorrea primaria y secundaria. J Assist
Reprod Genet 27:317–326, 2010.
627. Allen LA, Achermann JC, Pakarinen P, et al: Una nueva mutación de pérdida de
función en el exón 10 del gen del receptor de FSH que causa hipogonadismo trófico
hipergonado: características clínicas y moleculares. Hum Reprod 18:251–256, 2003.
628. Gromoll J, Simoni M, Nordhoff V, et al: Consecuencias funcionales y clínicas de las
mutaciones en el receptor de FSH. Mol Cell Endocrinol
125:177–182, 1996.
629. Bramble MS, Goldstein EH, Lipson A, et al: Una nueva mutación del receptor de la
hormona estimulante del folículo que causa insuficiencia ovárica primaria: una
aplicación de fertilidad de la secuenciación del exoma completo. Hum Reprod 2016.
630. Rannikko A, Pakarinen P, Manna PR, et al: Caracterización funcional del receptor de
FSH humano con una mutación inactivante Ala189Val.
Mol Hum Reprod 8:311–317, 2002.
631. Gromoll J, Simoni M, Nieschlag E: Una mutación activadora del receptor de la hormona
estimulante del folículo sustenta de forma autónoma la génesis del espermatozoide
en un hombre hipofisectomizado. J Clin Endocrinol Metab
81:1367–1370, 1996.
632. Allan CM, Garcia A, Spaliviero J, et al: Mantenimiento de la espermatogénesis por el
receptor de FSH humano activado (Asp567Gly) durante la regresión testicular debido
a la abstinencia hormonal. Biol Reprod 74:938–944, 2006.
633. Allan CM, Lim P, Robson M, et al: El mutante transgénico D567G pero no la
sobreexpresión del receptor de FSH humano de tipo salvaje proporciona señalización
de células de Sertoli de hormona glicoproteica promiscua e independiente de FSH.
Am J Physiol Endocrinol Metab 296:E1022–E1028, 2009.
634. Haywood M, Tymchenko N, Spaliviero J, et al: Un receptor activado de la hormona
folículo estimulante (FSH) humana estimula la actividad similar a la FSH en ratones
transgénicos con deficiencia de gonadotropina. Mol Endocrinol 16:2582–2591, 2002.
635. De Leener A, Montanelli L, Van Durme J, et al: La presencia y ausencia de mutaciones
en el receptor de la hormona estimulante del folículo proporciona información sobre
la fisiopatología del síndrome de hiperestimulación ovárica espontánea.
J Clin Endocrinol Metab 91:555–562, 2006.
636. Montanelli L, Delbaere A, Di Carlo C, et al: Una mutación en el receptor de la hormona
estimulante del folículo como causa del síndrome de hiperestimulación ovárica
espontánea familiar. J Clin Endocrinol Metab 89:1255–1258, 2004.
637. Smits G, Olatunbosun O, Delbaere A, et al: Síndrome de hiperestimulación ovárica
debido a una mutación en el receptor de la hormona estimulante del folículo.
N Engl J Med 349:760–766, 2003.
638. Vasseur C, Rodien P, Beau I, et al: Una mutación sensible a la gonadotropina coriónica
en el receptor de la hormona estimulante del folículo como causa del síndrome de
hiperestimulación ovárica espontánea gestacional familiar.
N Engl J Med 349:753–759, 2003.
639. Nappi RG, Di Naro E, D'Aries AP, et al: Embarazo natural en mujer hipotiroidea
complicada por síndrome de hiperestimulación ovárica espontánea. Am J Obstet
Gynecol 178:610–611, 1998.
640. Taher BM, Ghariabeh RA, Jarrah NS, et al: Síndrome de hiperestimulación ovárica
espontánea causado por hipotiroidismo en un adulto. Eur J Obstet Gynecol Reprod
Biol 112:107–109, 2004.
641. Nakabayashi K, Kudo M, Kobilka B, et al: Activación del receptor de la hormona
luteinizante después de la sustitución de Ser-277 con residuos hidrofóbicos selectivos
en la región bisagra del ectodominio. J Biol Chem
275:30264–30271, 2000.
642. Kudo M, Osuga Y, Kobilka BK, et al: Las regiones transmembrana V y VI del receptor
de la hormona luteinizante humana son necesarias para la activación constitutiva por
una mutación en el tercer bucle intracelular. J Biol Chem 271:22470–22478, 1996.
643. Zhang M, Tao YX, Ryan GL, et al: diferencias intrínsecas en la respuesta del receptor
de lutropina humana frente al receptor de folitropina humana para activar mutaciones.
J Biol Chem 282:25527–25539, 2007.
644. Casarini L, Pignatti E, Simoni M: Efectos de los polimorfismos en los genes del
receptor de gonadotropina y gonadotropina en la función reproductiva. Rev. Endocr
Metab Disord 12:303–321, 2011.
645. Casarini L, Santi D, Marino M: Impacto de los polimorfismos genéticos de las
gonadotropinas y sus receptores en el éxito reproductivo humano.
Reproducción 150:R175–R184, 2015.
646. Desai SS, Achrekar SK, Paranjape SR, et al: Asociación de combinaciones alélicas de
polimorfismos del gen FSHR con respuesta ovárica.
Reprod Biomed en línea 27:400–406, 2013.
647. Simoni M, Casarini L: Mecanismos en endocrinología: genética de la acción de FSH:
una visión de 2014 y más allá. Eur J Endocrinol 170:R91–R107, 2014.
648. Laan M, Grigorova M, Huhtaniemi IT: Farmacogenética de la acción de la hormona
estimulante del folículo. Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes
19:220–227, 2012.
649. Piersma D, Themmen AP, Look MP, et al: las variantes de los genes GnRH y LHR
predicen resultados adversos en pacientes premenopáusicas con cáncer de mama.
Cáncer de mama Res 9:R51, 2007.
650. Piersma D, Berns EM, Verhoef-Post M, et al: Un polimorfismo común hace que la
proteína del receptor de la hormona luteinizante sea más activa al mejorar la función
del péptido señal y predice resultados adversos en pacientes con cáncer de mama.
J Clin Endocrinol Metab 91:1470–1476, 2006.
651. Powell BL, Piersma D, Kevenaar ME, et al: Señalización de la hormona luteinizante y
cáncer de mama: polimorfismos y edad de inicio. J Clin Endocrinol Metab 88:1653–
1657, 2003.
652. Simoni M, Tuttelmann F, Michel C, et al: Polimorfismos del gen del receptor de la
hormona luteinizante/gonadotropina coriónica: asociación con testículos mal
descendidos e infertilidad masculina. Farmacogenética Genómica
18:193–200, 2008.
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CAPÍTULO 2 Hormonas gonadotropinas y sus receptores 57.e15
653. Piersma D, Verhoef-Post M, Look MP, et al: variaciones polimórficas en el exón 10 del
receptor de la hormona luteinizante: consecuencias funcionales y asociaciones con el
cáncer de mama. Mol Cell Endocrinol 276:63–70, 2007.
654. García G, Zariñán T, Rodríguez-Valentín R, et al: Frecuencia de los polimorfismos de un
solo nucleótido (SNPS) 919G>A, 2039A>G y -29 (G/A) en el receptor de la hormona
estimulante del folículo ( FSHR) en mujeres mestizas mexicanas. Fertil Steril 102:e64,
2014.
655. Grigorova M, Punab M, Poolamets O, et al: Estudio en hombres bálticos de 1790: el
polimorfismo FSHR Asn680Ser afecta el volumen total de los testículos. Andrología
1:293–300, 2013.
656. Tranchant T, Durand G, Piketty V, et al: N680S SNP del receptor humano de FSH afecta
la FSH basal y el nivel de estradiol en mujeres y modifica la translocación nuclear de
PKA y la transcripción de genes dependientes de CREB in vitro. Hum Reprod 27
(suplemento 1): i45–i46, 2012.
657. Kong RC, Shilling PJ, Lobb DK, et al: Receptores de membrana: estructura y función de
los receptores peptídicos de la familia de la relaxina. Mol Cell Endocrinol
320:1–15, 2010.
658. Hsu SY: Nuevos conocimientos sobre la evolución del sistema de señalización relaxina-
LGR. Tendencias Endocrinol Metab 14:303–309, 2003.
659. Bathgate RA, Halls ML, van der Westhuizen ET, et al: Relaxin family peptides and their
receptors. PhysiolRev 93:405–480, 2013.
660. de Lau W, Barker N, Low TY, et al: Los homólogos de Lgr5 se asocian con los receptores
Wnt y median la señalización de R-spondin. Naturaleza 476:293–297, 2011.
661. Feng S, Ferlin A, Truong A, et al: señalización INSL3/RXFP2 en el descenso testicular.
Ann NY Acad Sci 1160:197–204, 2009.
662. Ferlin A, Pepe A, Gianesello L, et al: Nuevos roles para INSL3 en adultos.
Ann NY Acad Sci 1160:215–218, 2009.
663. Glinka A, Dolde C, Kirsch N, et al: LGR4 y LGR5 son receptores de espondina R que
median la señalización de Wnt/beta-catenina y Wnt/PCP. Representante de EMBO
12:1055–1061, 2011.
664. Ivell R, Bathgate RA: Biología reproductiva del factor similar a la relaxina (RLF/INSL3).
Biol Reprod 67:699–705, 2002.
665. Staus DP, Strachan RT, Manglik A, et al: Los nanocuerpos alostéricos revelan el rango
dinámico y los diversos mecanismos de activación del receptor acoplado a proteína G.
Naturaleza 535:448–452, 2016.
666. Veber DF, Johnson SR, Cheng HY, et al: Propiedades moleculares que influyen en la
biodisponibilidad oral de los candidatos a fármacos. J Med Chem
45:2615–2623, 2002.
667. Bonger KM, Hoogendoorn S, van Koppen CJ, et al: Síntesis y evaluación farmacológica
de antagonistas diméricos del receptor de la hormona estimulante del folículo.
ChemMedChem 4:2098–2102, 2009.
668. Arey BJ: moduladores alostéricos de receptores de hormonas glicoproteicas:
descubrimiento y potencial terapéutico. Endocrino 34:1–10, 2008.
669. Guo T: agonistas y antagonistas de molécula pequeña para los receptores de LH y FSH.
Opinión de expertos Ther Pat 15:1555–1564, 2005.
670. Guo T, Adang AE, Dolle RE, et al: Agonistas del receptor de FSH de biarilo de molécula
pequeña. Parte 1: descubrimiento de plomo a través de síntesis combinatoria codificada.
Bioorg Med Chem Lett 14:1713–1716, 2004.
671. Guo T, Adang AE, Dong G, et al: Agonistas del receptor de FSH de biarilo de molécula
pequeña. Parte 2: optimización de leads a través de síntesis paralela. Bioorg Med Chem
Lett 14:1717–1720, 2004.
672. Maclean D, Holden F, Davis AM, et al: Agonistas del receptor de la hormona estimulante
del folículo de una biblioteca de tiazolidinona codificada. J Comb Chem 6:196–206,
2004.
673. Palmer SS, McKenna S, Arkinstall S: descubrimiento de nuevas moléculas para el
tratamiento futuro de la infertilidad. Reprod Biomed Online 10 (Suplemento 3): 45–54,
2005.
674. Nataraja SG, Yu HN, Palmer SS: Descubrimiento y desarrollo de moduladores alostéricos
de molécula pequeña de receptores de hormonas glicoproteicas.
Front Endocrinol (Lausana) 6:142, 2015.
675. Sriraman V, Denis D, de Matos D, et al: Investigación de un derivado de tiazolidinona
como modulador alostérico del receptor de la hormona estimulante del folículo:
evidencia de su capacidad para apoyar el desarrollo folicular y la ovulación. Biochem
Pharmacol 89:266–275, 2014.
676. Yu HN, Richardson TE, Nataraja S, et al: Descubrimiento de benzamidas sustituidas
como moduladores alostéricos del receptor de la hormona estimulante del folículo.
Bioorg Med Chem Lett 24:2168–2172, 2014.
677. Heitman LH, Oosterom J, Bonger KM, et al: [3H]Org 43553, el primer radioligando
agonista y alostérico de bajo peso molecular para el receptor de la hormona luteinizante
humana. Mol Pharmacol 73:518–524, 2008.
678. van de Lagemaat R, Raafs BC, van Koppen C, et al: Prevención de la aparición del
síndrome de hiperestimulación ovárica (OHSS) en la rata después de la inducción de la
ovulación con un agonista de bajo peso molecular del receptor de LH en comparación
con hCG y rec- LH. Endocrinología 152:4350–
4357, 2011.
679. van de Lagemaat R, Timmers CM, Kelder J, et al: Inducción de la ovulación por un potente
agonista de bajo peso molecular activo por vía oral (Org 43553) del receptor de la
hormona luteinizante. Hum Reprod 24:640–648, 2009.
680. Bonger KM, van den Berg RJ, Knijnenburg AD, et al: Descubrimiento de agonistas
selectivos del receptor de la hormona luteinizante utilizando el método del ligando
bivalente. ChemMedChem 4:1189–1195, 2009.
681. van Straten NC, van Berkel TH, Demont DR, et al: Identificación de derivados de 6-
amino-4-feniltetrahidroquinolina sustituidos: potentes antagonistas del receptor de la
hormona estimulante del folículo. J Med Chem
48:1697–1700, 2005.
682. Arey BJ, Deecher DC, Shen ES, et al: Identificación y caracterización de un antagonista
selectivo del receptor de la hormona estimulante del folículo no peptídico. Endocrinología
143:3822–3829, 2002.
683. Manivannan E, Prasanna S: Primer informe QSAR sobre la actividad antagonista del
receptor de FSH: investigaciones cuantitativas sobre las características fisicoquímicas
y estructurales entre los derivados de 6-amino-4-feniltetrahidroquinolina. Bioorg Med
Chem Lett 15:4496–4501, 2005.
684. Dias JA, Campo B, Weaver BA, et al: Inhibición de los folículos preovulatorios inducidos
por la hormona estimulante del folículo en ratas tratadas con un modulador alostérico
negativo no esteroideo del receptor de la hormona estimulante del folículo.
Biol Reprod 90:19, 2014.
685. Janovick JA, Maya-Nunez G, Ulloa-Aguirre A, et al: Aumento de la expresión de la
membrana plasmática del receptor de la hormona estimulante del folículo humano por
una molécula pequeña de tienopir(im)idina. Mol Cell Endocrinol 298:84–88, 2009.
686. Desai SS, Achrekar SK, Sahasrabuddhe KA, et al: Caracterización funcional de dos
mutaciones naturales (Val514Ala y Ala575Val) en el receptor de la hormona estimulante
del folículo. J Clin Endocrinol Metab
100:E638–E645, 2015.