Número:

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO LAB - POP- 19

CURSO: BIOMEDICINA Aprovação:
Coordenação de
DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Laboratórios
Revisão:
ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI DATA: 14/06/2017 00

1. AULA PRÁTICA

• Contagem de Leucócitos em Câmara de Neubauer

2. OBJETIVO

• Realizar a contagem global e específica dos leucócitos, representados pela leucometria e

pelo estudo quantitativo.

3. DISCIPLINA

• Hematologia Clínica

4. MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO

4.1. Amostra

• Sangue total obtido livre de hemólise em tubo de coleta contendo EDTA

4.2. Materiais Utilizados

QUANTIDADE DESCRIÇÃO DA VIDRARIAS E EQUIPAMENTOS

5 • Tubo de ensaio para coleta à vácuo (EDTA)
5 • Seringas com agulha (5 mL)
1 • Garrote para coleta
1 • Algodão (pacote)
5 pares • Luvas
5 • Bandagem de Proteção pós Coleta
1 • Pipeta de 100µL
1 • Pipeta de 20µL
10 • Ponteiras para pipetas de 100µL
10 • Ponteiras para pipetas de 20µL
5 • Microscópios
1 • Câmara de Neubauer

QUANTIDADE REAGENTES/INSUMOS
1 • Frasco de Álcool 70%
1 • Líquido de Turck

1
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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO LAB - POP- 19
CURSO: BIOMEDICINA Aprovação:
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DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Laboratórios
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ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI DATA: 14/06/2017 00

OBS: A quantidade material listada abaixo é estimada para apenas um grupo de alunos. A quantidade de
grupos, por aula, deve ser definida pelo professor no momento do agendamento da aula prática. Sugerido
03 - 06 alunos por grupo.

4.3. Procedimento Técnico

• Colher 5 mL de sangue por punção venosa (Tubo com EDTA);

• Pipetar 400µL do líquido diluidor (Turck) em um tubo de ensaio.
• Com a pipeta transferir 20µL de sangue. Limpar a parede externa da ponteira com auxílio de
papel absorvente.
• Transferir os 0,02 ml de sangue para o tubo com o líquido diluidor, lavando com ele o
interior da ponteira por aspiração e expulsão do líquido. A diluição é de 1:21
• Agitar suavemente por inversão para uma correta homogeneização.
• Com uma pipeta preencher os retículos da câmara de contagem, evitando excesso de líquido
e bolhas de ar sob a lamínula aderida firmemente à câmara.
• Deixar repousar por dois minutos para sedimentação dos glóbulos.
• Focalizar a preparação com pequeno aumento no microscópio para localizar o retículo e
observar a distribuição uniforme dos leucócitos. Observar então, com aumento de 100X ou
400X, conforme necessidade.
• Fazer a contagem de todas as hemácias encontradas nos quadros marcados “L” na figura
relativa ao retículo de Neubauer, ou seja, 4mm².
• Sistematizar a contagem segundo a figura abaixo. Contar os elementos em negro.

L L

L L
Cálculo

• Leucócitos por µl de sangue = Lc x 21 x 10 Leucócitos/mm³ = ? de leucócitos X 50

4

2
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ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI DATA: 14/06/2017 00

• Lc = número de leucócitos contados nos 4 quadrantes;

• 10 = Fator de conversão para mm³ (profundidade)
• 21 = fator de conversão da diluição;
• 4 = Fator de conversão para 1 mm³

4.4. Valores de Referência

• Adultos: 5.000 a 10.000/mm³

• RN: 10.000 a 25.000/mm³
• Crianças: Até 1 ano: 6.000 a 18.000/mm³
4 a 7 anos: 6.000 a 15.000/mm³
8 a 12 anos: 4.500 a 13.500/mm³

5. EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO/ PARAMENTOS

• Luva de Procedimento
• Jaleco
• Calçado fechado

6. REFERÊNCIAS

• CARVALHO, William de Freitas. Técnicas Médicas de Hematologia e Imuno-

Hematologia. 8ª Edição, Belo Horizonte: Coopmed Editora, 2008.

• MOURA, Roberto de Almeita, et al. Técnicas de Labortório. 3ª Edição, São Paulo: Editora
Atheneu, 2008.

7. OBSERVAÇÕES