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Labor - Laboratório de Patologia e Analises Clinicas Código:

ITA 00X
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POP - PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO 1
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1. SITUAÇÃO DE REVISÃO:

Versã Data Descrição resumida da alteração da versão


o
1 11/10/2022 Implantação do documento

2. OBJETIVO:
Determinar o tipo sanguíneo (Sistema ABO e fator Rh).

3. CAMPO DE APLICAÇÃO:
Área Técnica, hematologia

4. REFERÊNCIA:
Https://www.biomedicinapadrao.com.br/2019/07/antigeno-rhd-du-d-fraco-d-parcial-e.html?m=1
Https://www.tiraojaleco.com.br/2018/05/fenotipagem-abo-e-rh-pratica.html
Https://slideplayer.com.br/amp/4302975/

5. TERMINOLOGIA, DEFINIÇÃO E SÍMBOLO:


SF – Solução Fisiológica
SH-5% - Suspensão de Hemácias A 5%
RN – Recém Nascido
S5% - Suspensão A 5%

6. DESCRIÇÃO:

6.1. Princípio do método:


Lavagem das Hemácias
 Homogeneizar o sangue
 Identificar o tubo como o nome do paciente, data, código e hora da coleta.
 Preparar 5 tubos e identificá-los com caneta piloto, (A, B, AB, D e C) respectivamente
 Preparar um tubo com 1ml de sangue para 9ml de solução salina para S-5%,
 Dar uma leve homogeneizar
 Levar a centrifuga por 2 minutos a 2500rpm
 Retirar o sobrenadante sem encostar no precipitado de hemácias (repetir este
processo 3X) caso seja RN a lavagem deve ser feita de 5 a 8x em casos específicos
como amostra sanguínea de cordão umbilical lavar até 10x.
 Homogeneizar a pápula de hemácia do tubo

Preparo Solução de Hemácias 5%

Nome: Maristela Teixeira Berta Nome: Keila Siqueira


Cargo: Gestora da Qualidade Autorização Cargo: Diretor
Elaboração e
Data: 11/10/2022 Liberação Data: 11/10/2022
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 A partir do sedimento de hemácias lavadas obtido preparar a S-5% adicione com


uma pipeta ao tubo 50 microlitros de hemácias lavadas e pipetar 950 microlitros de
SF 0,9% .

Pesquisa Sistema ABO


 Em seguida pipetar 50 microlitros da SH-5% em cada tubo após isso pingar uma
gota de cada reagente em seus respectivos tubos (anti-A tubo A, anti-B tubo B, anti-
D tubo D, Controle Rh no tubo C)
 Os tubos A, B e AB levar a centrifuga por 15seg a 3400rpm
 Fazer a interpretação do sistema ABO
 Observando se a presença ou não de aglutinação
 O controle Rh após 30min de banho-maria levar a centrifuga por 15 seg a 3400 rpm
 Realizar a leitura com elevação dos tubos contra a luz
 Se aglutinar (+) se ficar homogêneo (-)
 No caso de (-) fazer o D fraco

Pesquisa de D fraco
 O tubo D deve ser levado em banho-maria a 37° por 30min
 Centrifugar por 15seg a 3400rpm
 Preparar um tubo D com o precipitado de hemácias e acrescentar 5ml de solução
salina para lavagem, homogeneizar. Centrifugar a 3400rpm por 15 seg. Repetir
esse processo por 3 vezes, desprezando o sobrenadante após cada centrifugação.
 Pingar 1 gota do Anti-G Policlonal
 Centrifugar 15 segundos a 3400rpm
 Realizar a leitura com elevação do tubo contra a luz.

6.2. Principais aplicações clínicas:


Transfusão sanguínea

6.3. Amostra:
Sangue total

6.4. Materiais, reagentes e insumos:


 EPIs (luva, jaleco)
 Tubos de coleta (tampa roxa EDTA)
 Tubos de vidro
 Estante pra tubo
 Caneta Piloto marcação dos tubos
 Ponteiras
 Soro fisiológico a 0,9% (solução salina)
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 Anti soros (anti-A, anti-B, anti-D)


 Controle Rh
 Anti-G Policlonal ou Soro de Coombs
6.5. Equipamentos:
 Centrifuga
 Banho-maria
 Cronometro
 Pipetas automáticas

6.6. CIQ e CEQ:


PNCQ – Controle Externo
Dupla análise entre analistas clínicos – Controle interno

6.7. Interpretação:

Sistema ABO

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Fator Rh e D fraco

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Controle Rh
A interpretação do controle deve ser feita baseado na bula do reagente utilizado.

Obs.: A presença de aglutinação nos tubos de hemácias teste e presença de hemólise


nos
tubos de soro teste indicam reações positivas. Hemácias suspensas, após leitura do
botão
de hemácias, correspondem a resultado negativo. Discrepâncias entre a classificação
direta e reversa devem ser resolvidas antes da interpretação do grupo sanguíneo da
amostra teste. Não deverão ser liberados antes da realização de testes adicionais
necessários, incluindo-se testes com lecitinas antiA1 e anti-H.

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7. Anexos:

Reagentes

Sistema ABO

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Banho-maria

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