FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA

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PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA

GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

EXPERIENCIA CURRICULAR:
BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR

2023-2

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PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA

PRÁCTICA N° 5. DETERMINACIÓN DE GLUCOSA PRE Y POST PRANDIAL

I. OBJETIVOS
Evaluar la concentración de glucosa en la sangre pre y postprandial, por el método de
Glucosa oxidasa.

II. MATERIALES
Jeringas descartables de 5 ml, Algodón, Alcohol medicinal, Lancetas (POR MESA)
Tubos BD Vacutainer sin anticoagulante
Vasos de precipitado, Tubos de ensayo, gradillas, pipetas graduadas,
Micropipetas 1 POR MESA
Baño María, centrífuga, espectrofotómetro, glucómetro
Kit para Glucosa Wiener Lab.:
Reactivo A: Solución conteniendo glucosaoxidasa, peroxidasa, aminofenazona,
hidroxibenzoato y buffer fosfato pH: 7
Estándar: solución de glucosa 1g/l. (100 mg/dl)

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

Determinación de glucosa sanguínea

La técnica empleada en la determinación de la glucosa en sangre es una técnica
enzimática, basada en la siguiente reacción:
GOD
Glucosa + O2 + H2O ácido glucónico + H2O2

2H2O2 + 4-AF + 4-Hidroxibenzoato POD Quinonimina roja

1) Extracción de muestras: previa limpieza de la zona con alcohol, se extraerá 5 cc de sangre

de la flexura del codo con jeringa hipodérmica de 5 cc y aguja N° 20 en dos momentos:

▪ La primera extracción se realizará con la persona en ayuno de 4 a 8 horas.

▪ La segunda se realizará después de la ingesta alimenticia, una hora después como

máximo.

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2) Una vez obtenidas las muestras, colocarlas en tubos de ensayo y dejarlas reposar durante
10 minutos.
3) Terminado el reposo, contrapesar los tubos conteniendo las muestras y centrifugarlos a
3000 RPM durante 10 minutos.
4) Finalizado el centrifugado separar el suero para trabajar la determinación.
5) Rotular previamente los tubos de ensayo y preparar el siguiente sistema agregando lo que
se indica:
COMPONENTES (en ml) TUBOS DE ENSAYO

B S Dpre (1) Dpos (2)

Estándar -- 10 ul -- --

Muestra 1 (suero prepandial) -- -- 10 ul --

Muestra 2 (suero postprandial) -- -- -- 10 ul

Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

Incubar 5 minutos a todos los tubos de ensayo en baño maría a 37 °C

Observar los resultados en cada uno de los tubos (considerar cambio de color).

Leer en espectrofotómetro a 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco. Anotar
los resultados.

6) Cálculos de los resultados:

Cálculo del factor:
100 mg/dl
F=
S

Cálculo de la concentración de glucosa. (de cada una de las muestras).

Glucosa (mg/dl) = D x F
7) Interpretación de los resultados.
Valores Referenciales:

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● Suero o Plasma (adultos): 74 – 106 mg/dl.

IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.

V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)

VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011