ATIVIDADE TEÓRICO-PRÁTICA

Curso: CIÊNCIAS E TECNOLOGIAS

Disciplina: BIOLOGIA E GEOLOGIA
Ano: 11º Turma: ___
Data: _________________ Ano Letivo: ________

BIOLOGIA MOLECULAR E EVOLUÇÃO DOS SERES VIVOS

 OBJETIVOS:
 Compreender a importância dos dados moleculares como uma ferramenta auxiliar no estudo das relações
filogenéticas entre os seres vivos. A análise molecular pode confirmar ou refutar os dados sugeridos pela análise anatómica, ou
fornecer pistas para os casos em que a filogenia de um determinado grupo de seres vivos não está bem definida.

 PRÉ-REQUESITOS:
 Processo da síntese proteica (papel do DNA e do RNA)
 Mutação genica
 Cladograma1

 ALGUNS CONCEITOS IMPORTANTES:

 O estudo das relações evolutivas entre os seres vivos avançou muito após a descoberta do papel do DNA na
determinação da hereditariedade. Os avanços na área da bioquímica permitiram compreender quais eram os mecanismos
responsáveis pelas modificações de características ao longo das gerações. Essas características, interpretadas como adaptações ao
ambiente, foram a chave para a ideia de selecção natural proposta por Charles Darwin.

 Assim como a morfologia de um organismo, as suas moléculas também são características hereditárias. E a evolução
dos seres vivos não seria possível se o material genético herdado de seus ancestrais não sofresse alterações.
Designa-se Evolução Molecular à área de estudos que procura determinar os processos envolvidos nas alterações das moléculas
encontradas nos seres vivos e estabelecer padrões para essas alterações ao longo do tempo.
O estudo comparativo de DNA, RNA e proteínas pode fornecer indícios sobre relações filogenéticas entre grupos de seres vivos. Para
isso, moléculas retiradas de seres vivos de grupos diferentes são sequenciadas e comparadas.

 Sabemos que mutações no material genético podem ocorrer por vários processos e que podem ser transmitidas às
próximas gerações se as células da linha germinativa as transportarem. As mutações podem ocorrer de diversas maneiras, como por
exemplo, perda ou substituição de nucleótidos do DNA, podendo, ou não, afectar a forma/função da proteína codificada.

 Na presente actividade vamos analisar os casos em que a alteração da sequência original de aminoácidos não modifica
a forma e a função da proteína. Um exemplo é a hormona insulina, proteína composta de 51 aminoácidos, cuja principal função é a
redução do nível de glicose no sangue. A insulina está presente em todos os mamíferos e noutros vertebrados (nos invertebrados,
foram identificados hormonas estruturalmente muito semelhantes à insulina, embora não se tenha definido sua função em alguns
grupos).

1
Um CLADOGRAMA (clado=ramo) é um diagrama que representa a história evolutiva dos grupos de seres vivos e onde estão assinalados os pontos de divergência
entre as espécies, sendo o comprimento dos traços/ramos proporcional ao tempo decorrido entre cada divergência. Os nomes dos seres vivos estão representados
no fim dos traços/ramos.

1
A insulina foi a primeira proteína em que se determinou a sequência de aminoácidos. A comparação entre a insulina de diferentes
mamíferos mostrou que algumas regiões da molécula são idênticas em todas as espécies, enquanto outras regiões apresentam
variação. Essas variações, no entanto, não comprometem a função da proteína – uma prova disso é que insulina extraída de porcos
ou coelhos era administrada a seres humanos com diabetes (do tipo insulina-dependente) com baixa ocorrência de rejeição pelos
pacientes.
 As diferenças entre as sequências de aminoácidos da insulina de mamíferos estão restritas a três posições da cadeia.
Os cientistas concluíram que mudanças de aminoácidos nessas três posições não afectam a estrutura e o funcionamento da insulina,
isto é, são funcionalmente neutras. Da mesma forma, concluiu-se que as regiões da molécula de insulina que não apresentam
variações na sequência de aminoácidos são justamente aquelas que determinam a forma tridimensional da proteína e garantem a
sua função.
O mesmo padrão foi encontrado no estudo comparativo de outras moléculas, como o citocromo c, enzima da cadeia respiratória.
Portanto, a variabilidade que pode ser encontrada na estrutura de uma molécula não corresponde necessariamente a uma
variabilidade de funções.
Como as substituições neutras não afectam a função da molécula, elas não representam ameaça à sobrevivência do organismo e
não são excluídas por selecção natural. As substituições de nucleotídos (no DNA ou RNA) e de aminoácidos (nas proteínas) são
portanto determinadas por uma taxa natural de mutações que ocorre nas moléculas ao longo do tempo. Os cientistas utilizam esse
ritmo constante de mutação numa molécula como um relógio molecular.

 VAMOS IMAGINAR …
 Que a proteína “x” está presente em todos os vertebrados.
 Foi feita uma análise comparativa da proteína “x” entre todos os vertebrados.
 O número de diferenças na sequência de aminoácidos entre peixes e anfíbios pode ser relacionado com o período da
história da Terra em que anfíbios divergiram do grupo dos peixes (informação determinada pelo estudo de fósseis e pela
comparação de anfíbios e peixes actuais).
 Fazendo essa mesma relação com os outros grupos de vertebrados, podemos calcular a taxa de mutação da proteína
“x” ao longo do tempo evolutivo, determinar qual é a sequência ancestral da proteína “x” e quais são as características das
moléculas que dela derivaram. Se a taxa de mutação calculada for constante, teremos o relógio molecular da proteína “x”, que
servirá como mais uma ferramenta no processo de estimar quando determinados eventos ocorreram na história evolutiva da Terra.

 APLICANDO:
 Vamos considerar que duas espécies de mamíferos possuem um número relativamente pequeno de diferenças na
sequência de aminoácidos da hemoglobina.
 A hemoglubina possui uma taxa constante de mutação.
 Então podemos deduzir que essas espécies divergiram a partir de um ancestral comum num período recente da escala
evolutiva. Se a formação dessas duas espécies, a partir de um ancestral comum, tivesse ocorrido há mais tempo, um número maior
de mutações teria aparecido nos seus genes e as diferenças de aminoácidos da hemoglobina de cada espécie seriam maiores.
 É importante ressaltar que cada proteína apresenta uma taxa de mutação diferente e, em alguns casos, regiões
distintas da mesma molécula possuem ritmos diferentes de mutação.

Assim, podemos perguntar….

Porquê utilizar moléculas para o estudo da evolução dos seres vivos, quando a comparação da morfologia e a análise do registo
fóssil podem fornecer boas hipóteses? Quanto mais características forem utilizadas na dedução das relações filogenéticas entre
grupos de seres vivos – comparações morfológicas, dados moleculares, análise dos fósseis – mais fiável será a hipótese elaborada.

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 ATIVIDADE TEÓRICO-PRÁTICA
Curso:
CIÊNCIAS E TECNOLOGIAS
Disciplina:
BIOLOGIA E GEOLOGIA
Ano:
11º Turma: ___
Data:
_________________ Avaliação: __________

Nome:___________________________________ Professor: _______________________

BIOLOGIA MOLECULAR E EVOLUÇÃO DOS SERES VIVOS

1. Compare as sequências de aminoácidos da proteína “EVOLUCINA”, extraída de cinco animais de espécies

diferentes.

2. Conte o número de diferenças entre as sequências e anote os valores obtidos na tabela seguinte.

PROTEÍNA “EVOLUCINA”
ATENÇÃO: O nome e a sequência de aminoácidos da proteína “Evolucina” são fictícios!

Espécie A
TIR VAL GLU LIS ALA LEU GLU ALA PRO LEU VAL TRE TIR ILE LIS ASP GLU TRE SER LIS

Espécie B
ASP VAL GLU LIS ALA LEU GLU ALA PRO LEU VAL TRE TIR ILE LIS ASP GLU TRE SER LIS

Espécie C
ASP VAL GLU LIS ALA LEU GLU ALA PRO LEU VAL TRE TIR ILE LIS LIS GLU TRE SER LIS

Espécie D
ASP VAL GLU LIS ALA LEU GLU ALA PRO LEU VAL ALA TIR ILE LIS LIS GLU TRE SER LIS

Espécie E
ASP VAL GLU LIS ALA GLU GLU ALA PRO LEU VAL ALA TIR ILE LIS LIS GLU TRE SER LIS

Espécie F
ASP VAL ALA LIS ALA GLU GLU ALA GLU LEU VAL ALA TIR ILE LIS LIS GLU TRE LIS ILE

Nomenclatura dos aa:

Leu = Leucina;Val = Valina; Lis = Lisina; Ser = Serina; Ala = Alanina; Glu = Glutamato (Ácido glutâmico); Ile = Isoleucina; Tir = Tirosina;
Tre = Treonina; Pro = Prolina; Asp = Aspartato (Ácido aspártico)

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3. Complete os espaços em branco da tabela com o número de diferenças na sequência de aminoácidos das proteínas dos animais
listados.
Espécie E
Espécie D
Espécie C
Espécie B
Espécie A
Espécie F Espécie E Espécie D Espécie C Espécie B

4. Com base nos dados da tabela, construa um cladograma que represente o grau de semelhança entre os seis animais. Cada passo
do cladograma deve destacar o número de diferenças entre os organismos.

Proteína “Evolucina” – sequência primitiva

5. Responda às questões que se seguem:

5.1 No estudo das relações evolutivas entre dois organismos, verifica-se que os dados moleculares, anatómicos e o registo fóssil
apontam para um mesmo modelo de relações evolutivas. Podemos confiar nesse modelo? Justifique a sua resposta.

5.2 Utilizando os dados moleculares disponíveis, compare o parentesco evolutivo entre as espécies.

5.3 A galinha e o peru são aves que possuem exactamente a mesma sequência de aminoácidos na proteína citocromo c (112
aminoácidos), uma enzima essencial ao processo da respiração aeróbia. Proponha uma explicação para o facto de duas espécies
diferentes possuírem proteínas idênticas.

5.4 O bolor do pão (Neurospora sp.) e o fermento usado na fermentação para se fazer o pão e bebidas alcoólicas (Saccharomyces
sp) são fungos e possuem 40 aa diferentes na sequência do citocromo -c. O que sugerem esses dados relativamente às relações
evolutivas entre as duas espécies de fungos? (Compare com o exemplo da galinha e do peru).

5.5 Imagine que a proteína “Evolucina” é um fragmento de hemoglobina. De acordo com os resultados obtidos, animais de grupos
distintos apresentam diferenças na sequência de aminoácidos. Sabendo que a sequência de aminoácidos determina a “forma

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espacial” da proteína e que a forma determina a sua função, elabore uma explicação para o facto de a hemoglobina exercer a
mesma função em todos os animais referidos na actividade, apesar de não possuírem sequências de aminoácidos idênticas.

5.6 Considere a hemoglobina humana. Uma determinada mutação provoca a substituição de apenas um aminoácido da cadeia
polipeptídica e essa alteração específica determina mudança na forma da proteína, a qual deixa de exercer sua função. Indivíduos
portadores desta hemoglobina anómala desenvolvem uma doença chamada anemia falciforme. Elabore uma explicação para o facto
de a hemoglobina não exercer a mesma função apesar de possuir apenas uma alteração específica na sequência de aminoácidos.