Bioquímica I

Transporte Através de Membranas

Licenciatura em Química
2008

1
 Transporte pela Membrana

*Entrada de matéria-prima para biossíntese

*Liberação de produtos do metabolismo

Membrana plasmática e de organelas

*Proteínas transportadoras, Canais e Bombas

Composição da Célula
2
 Transporte pela Membrana
Princípios Básicos do Transporte

Difusão simples

3
 Transporte pela Membrana
Princípios Básicos do Transporte

Potencial de
Membrana (Vm)

+
Gradiente químico

Potencial
(Gradiente)
eletroquímico Organismos vivos
têm controle! 4
 Transporte pela Membrana
Gases (O2, N2)

Difusão Facilitada ou
Transporte Passivo
Energia de ativação

Permeases

Especificidade estereoquímica
Interações fracas
Energia de Ligação
5
 Classificação de
Transportadores

1000 ou mais genes no humano

Organismos
- Centenas caracterizados
- Alguns com estrutura resolvida

6
 Transporte pela Membrana

TRANSPORTE PASSIVO ou
DIFUSÃO FACILITADA

7
Transporte PASSIVO pela Membrana
Aquaporinas (AQPs)

Eritrócito: 2x105 cópias na membrana 8

 Transporte PASSIVO pela Membrana
AQP-1- eritrócito
*4 monômeros de 28kDa, 6 hélices,
*formam canal de ~3Å

109 moléculas/s
• duplo sentido
Baixíssima ∆G‡ • íons não passam 9
 Transporte PASSIVO pela Membrana

GLICOSE PERMEASE (GluT1) - Eritrócito

*50.000 vezes mais rápido que não catalisado
- 45kDa, 12 hélices

10
 Transporte PASSIVO pela Membrana

GLICOSE PERMEASE (GluT1) - Eritrócito

modelo

Hélice
anfipática
11
 Transporte PASSIVO pela Membrana

CINÉTICA DO TRANSPORTE DE
GLICOSE

Analogia com reação enzimática

S = Glc fora
P = Glc dentro

k -1 k-2 k-3
Sout + T1
Sout•T1
Sin•T2
Sin + T2
k1 k2 k3

Sem transformação química

12
 Transporte PASSIVO pela Membrana

VM [Sout ] Kt- afinidade

v0 =
K t [Sout ]

[Sin ] = 0
13
 Transporte PASSIVO pela Membrana

Vin= Vout

Reversibilidade

Sem Acúmulo de
glicose 14
 Transporte PASSIVO pela Membrana

Defeito no transporte de glicose causa diabetes – GluT4

15
Transporte PASSIVO pela Membrana
TROCADOR DE Cl- e HCO3- eritrócito

Permeabilidade maior
1 milhão de vezes para
o HCO3-

Simultaneidade
Sentido

16
 Transporte pela Membrana

Classes Gerais dos

Sistemas de
Transporte

Transporte único

Co-transporte Contra-transporte

Transporte duplo 17
 Transporte PASSIVO pela Membrana

Características autênticas do Transporte Passivo:

* Alta velocidade – sentido gradiente

* Não tem acúmulo de um soluto acima do
equilíbrio
* Especificidade
- estereoespecificidade
Glicose Permease
Kt D - glicose = 1,5mM
D - galactose = 50mM

18
Transporte pela Membrana

TRANSPORTE ATIVO

19
 Transporte ATIVO pela Membrana

* Sentido quase sempre contra gradiente eletroquímico

* Tem acúmulo de um soluto acima do equilíbrio
* Endergônico (desfavorável energeticamente)
* Acoplado a processo exergônico (fonte de energia)
- luz, ATP, Redox

20
 Transporte ATIVO pela Membrana

Primário Secundário

21
Transporte ATIVO pela Membrana

22
 Transporte ATIVO pela Membrana

Estrutura das subunidade dos três tipos de ATPases

23
 Transporte ATIVO Primário
Na+, K+ ATPase

* Integral (50kDa e 110kDa)

* Mantém Célula: ↓Na+ e ↑K +
* hidrolisa ATP
* 2K+ dentro e 3Na+ fora

Processo Eletrogênico
24
 Transporte ATIVO Primário

Mecanismo da
Na+, K+
ATPase

Consome
25% da
Energia do
homem em
repouso

Inibida por
olbaína (seta
25
envenenada)
 Transporte ATIVO Primário

Bomba Ca2+ATPase
(envia Ca2+ para Ret Sarcoplasmático
no músculo)

* Integral (100kDa)
* Quebra ATP
* Citossol: ↓Ca+

80% das proteínas

da membrana do
retículo
sarcoplasmático na 26
cél muscular
 Transporte ATIVO Primário
Bomba Ca2+ATPase (envia Ca2+ para Ret Sarcoplasmático - músculo)

mecanismo

Mudança conformacional 27
 Transporte ATIVO Primário
ATPase do tipo F
* Papel central na reação de produção de energia (ATP)
* Impulsionam H+ para mais concentrado hidrolisando ATP
* REVERSIBILIDADE

28
Produz energia (ATP)
 Transporte ATIVO Secundário

Transportador de LACTOSE em Bactérias

100 x [lactose]extracelular Simporte

29
 Transporte ATIVO Secundário
Transportador Transepitelial de GLICOSE no intestino

[↑]

30
[glicose]cel = até 9000x [glicose]intest
Ionóforos (antibióticos e venenosos)

Colapsam os gradientes iônicos

• Valinomicina – K+
• Monensina – Na+

Gramicidina A – Na+

31
32
 Transporte por Canais Iônicos Seletivos
Determinam a Permeabilidade específica
Regulam a Concentração Citossólica
Regulam o Potencial de Membrana

Características:
1) Velocidade do fluxo 107 a 108 íons/canal/s
2) Não é saturável
3) Dependentes de sinais
* ligantes
* voltagem
33
 Transporte por Canais Iônicos
Canal de K+ da bactéria Streptomyces lividans

* K+ (1.3Å) passa 10000vezes mais que Na+(0.9Å)

* 4 subunidades idênticas

34
 Transporte por Canais Iônicos
Canal de K+ da bactéria Streptomyces lividans

AA negativos
“Estabilização” é a
base da
seletividade

H2O

35
 Transporte por Canais Iônicos
Canal Neuronal de Na+ (dependente de voltagem)

Único polipeptídeo
(1.840aa)

* Neurônios, Miócitos (mem plasm)

* Sensores de sinais elétricos

• Alta especificidade p/ Na+

• 107 íons/s

Mecanismo de inativação
bola-e-corrente 36
 Transporte por Canais Iônicos

Canal Neuronal de Na+

(dependente de voltagem)

Mecanismo de fechamento
e abertura

Inibida por
tetrodotoxina
(peixe-bola) 37
 Transporte por Canais Iônicos
Receptor nicotínico da ACETILCOLINA (dependente de ligante)

neurotransmissor

* Essencial para sinal elétrico do

neurônio para fibra muscular 38
* Sinaliza contração muscular
 Transporte por Canais Iônicos
Receptor nicotínico de ACETILCOLINA (dependente de ligante)

Passagem
específica de
Na+, Ca2+, K+

Leu
(hidrofóbico)

grupos polares Torção das

hélices M2

Despolariza
membrana e
desencadeia Inibida por
contração 39
curare
 Transporte

Resumo dos
Tipos de
Transporte

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