TRANSPORTE INTRACITOPLASMÁTICO DE VESÍCULAS:

-Transporte com direção a MP, lisossomos, CG, endossomos, RE.

-> tráfego de carboidratos, proteínas e lipídeos.

- Esse transporte é mediado por "pacotes de transporte inclusos em

membrana" -> VESÍCULAS TRANSPORTADORAS

-> brotam de uma membrana e fundem-se com outra membrana.

- Componentes de membrana e moléculas solúveis são chamadas de

CARGA

-As vesículas transportadoras tem a mesma orientação na membrana, ou

seja, a composição é semelhante à membrana pois elas são derivadas da
membrana.

2 GRANDES VIAS DEFINIDAS:

-Via BIOSSINTÉTIC-SECRETORA -> para fora da célula:

RE -> CG -> MP->

-> Lisossomos

- Via ENDOCÍTICA -> para dentro da célula:

MP -> endossomos -> Lisossomos

Por um processo de passagem transmembrana, a proteína entra no RE,

sofre transformações e depois sofre modificações no CG, mas como ela faz
esse transporte?

Tudo que chega do exterior da célula para dentro faz parte do transporte
intracitoplasmático de vesículas.
6 -> existem sítios de reconhecimento na membrana receptora -> sinais de
orientação

Tipos de Vesículas:

- Vesículas COPII: envolvidas com o transporte de substâncias do RE para

o CG

- Vesículas COPI: envolvidas no transporte do CG para o RE (fluxo

retrógrado)

- Vesículas de Clatrina: envolvida com a MP e CG para lisossomos e

endossomos.

VESÍCULAS DE CLATRINA:

Proteína: clatrina -> dividida em 3 partes chamados trisquélion;

-Estruturam-se na forma de GAIOLAS POLIÉDRICAS ao redor da

vesícula, reveste a estrutura da vesícula e é responsável apenas pelo
endereçamento e direcionamento do transporte

Seleção do material a ser transportado:

- Seleção do material através de proteínas transmembrana RECEPTORAS

DE CARGA, identificam a sequência sinal presente na proteína a ser
transportada, garantindo a especificidade do que será transportado.

-Uma determinada proteína (carga) tem uma sequência sinal reconhecida

pelo receptor e esse receptor externamente está ligado à proteína de
revestimento.

-A fusão da membrana para a formação da vesícula é feita pela proteína

DINAMINA, responsável pelo estrangulamento na membrana e liberação
da vesícula. A dinamina é uma proteína motora que atua, com gasto
energético, quebrando essa conexão da membrana e liberando a vesícula
contendo a carga. A dinamina precisa ser fosforilada para poder atuar e as
enzimas GTPases recrutadoras de Revestimento são responsáveis pela
fosforilação das dinaminas e são ativadas quando o receptor se liga com a
carga.

Revestimento, Seleção, Liberação -> destino?

Existe alta seletividade no reconhecimento da membrana alvo, exemplo:

toda vesícula que parte do RE vai se fundir primeiramente no CG, o que
garante isso é o RECONHECIMENTO DA MEMBRANA ALVO nas
vesículas através de marcadores na superfície que identificam origem e tipo
de carga. Na membrana alvo existem receptores complementares. As
proteínas envolvidas são: proteínas Rab e Proteínas SNARE.

PROTEÍNAS Rab:

-Direcionam as vesículas à locais específicos através de um gasto

energético envolvendo uma GTPase.

-Existem diferentes tipos de proteínas Rab que estão envolvidas com os

diferentes compartimentos internos da célula.

- A partir do momento que a vesícula é liberada existe uma proteína rab e

um receptor complementar na membrana alvo, esse receptor age como uma
proteína motora que traz a vesícula em direção à essa membrana.

- Uma vez que a vesícula tenha sido ancorada à membrana alvo ela
descarrega sua carga num processo de fusão das membranas, que envolve a
aproximação das duas e energia necessária para o processo acontecer e é aí
que as Proteínas SNARES estão envolvidas.
PROTEÍNAS SNAREs (Soluble NSF Attachment REceptor):

- Na vesícula é chamada de v-SNARE

- Quando há um receptor da proteína Rab ela se ancora ao complementar

das v-SNARE, chamado t-SNARE presentes na membrana alvo. O
entrelaçamento entre essas moléculas gera energia suficiente para que haja
a fusão da vesícula com a membrana alvo e a liberação da carga.

- Quando há a aproximação das estruturas a própria estrutura molecular da

v e t-snare gera energia no entrelaçamento que é suficiente para fazer a
fusão. a energia é liberada pelo entrelaçar das hélices.

- Após a fusão o complexo é desmontado;

-Existem proteínas citoplasmáticas que fazem essa quebra com gasto de

energia: NSF. ficam disponíveis para depois outras vesículas serem
formadas e continuar o processo.

-O vírus do HIV possui estruturas que mimetizam esse reconhecimento e

conseguem o livre acesso.

RE PARA (ou vice-versa) O CG:

-Vesículas de COPII: RE para o CG

-Vesículas de COPI: CG para o RE (fluxo retrógrado)

-As cargas movem-se para o próximo compartimento da via

-As cargas perdidas são recolhidas e levadas ao compartimento anterior

1° passo:
-Proteínas que são destinadas ao CG são empacotadas em vesículas de
transporte revestida de COPII

- Imaginando que nesse processo uma determinada proteína residente do

RE tenha estado no meio sem querer e acabou sendo selecionada e
destinada pra outro local

2° passo:

- Vesículas de regiões do RE sem ribossomos saem por regiões específicas

chamados sítios de saída e vesículas que brotam do RE podem
eventualmente fundir-se entre si e na verdade o CG nada mais é que o
agrupamento de vesículas que saíram do RE através do processo chamado
de Fusão Homotípica. O CG é uma organela transitória, na realidade.

Fluxo: RE -> CG

- As proteínas residentes que escapam precisam ser recuperadas e para isso

existe um Fluxo Retrógrado que envolve um empacotamento de proteínas
no CG que são revestidas por COPI e devolvem as proteínas de volta para o
RE.

- Existem Sinais de Recuperação do RE

- As proteínas residentes do RE possuem uma sequência específica

chamada sequência KDEL:

Lys (K) - Asp (D) - Glu (E) - Leu (L)

- Essa sequência serve para quando ela chega no CG encontre um receptor

específico para que ela seja empacotada de volta para o RE.

Quando a célula percebe uma vesícula sendo destinada para um outro

compartimento com uma molécula equivocada ela avisa o CG, como se
fosse uma "blitz" que reconhece a molécula equivocada para que ela volte
ao local correto, no caso o RE.

VIA BIOSSINTÉTICA-SECRETORA: matérias para fora da célula

- Transporte a partir da rede TRANS GOLGI:

1-DIRECIONAMENTO AOS LISOSSOMOS MEDIADO POR

SINAL

2-DIRECIONAMENTO PARA VESÍCULAS SECRETORAS

MEDIADO POR SINAL (PARA SECREÇÃO REGULADA)

3-VIA SCRETORA CONSTITUTIVA

-Desvio de Rota: CG -> Lisossomos

- As enzimas lisossômicas (hidrolases ácidas) são produzidas no RER,

destinadas ao CG e posteriormente aos lisossomos através de um Sinal de
Classificação que leva essa via a acontecer.

-Sinais de endereçamento: em sua maioria envolviam sequências curtas de

aminoácidos

no caso do CG para o Lisossomo é feita por carboidrato, a manose-6-

fosfato (M6P).

-Existe uma enzima que adiciona na hidrolase ácida os resíduos de

carboidrato (a M6P), uma proteína do CG.

-Proteína transmembrana do CG que é receptor da M6P (revestido por

clatrina) que faz com que isso leve ao chamado "endossomo inicial".
-Quando essa vesícula de transporte contendo essa hidrolase ácida se funde
ou chega a uma determinada estrutura, essas moléculas que não estão ativas
(só são ativas mediante um compartimento com baixo pH), assim também
há no revestimento dessas vesículas uma bomba que realiza o transporte de
H+ contra um gradiente de concentração levando a diminuição do pH que
libera a hidrolase ácida do receptor que é depois liberado para voltar ao RE
para realizar esse processo novamente.

-O fosfato presente na acoplagem da M6P pode ser removido por uma

fosfatase ácida garantindo com que essas enzimas estejam completamente
ativas para fazer a degradação.

VIA PADRÃO: não requer nenhum tipo de sinalização

VIA SECRETORA REGULADA: requer sinalização (estoque ->

sinalização)

-Processamento proteolítico:

forma precursora inativa -> processamento no interior das vesículas

(insulina, por exemplo)

EXOCITOSE:

-Transporte do CG para fora da célula

ENDOCITOSE:

Vias que levam para dentro da célula - Superfície aos lisossomos ->
Vesícula Endocítica

-Fagocitose: grandes partículas sólidas: microrganismos, células mortas ->

através dos fagossomos
-Pinocitose: incorporação de moléculas líquidas (fluidos e pequenos
solutos) -> vesículas pinocíticas

A fagocitose serve como fonte de alimentação para muitos protozoários e

tem função de defesa para muitos animais (através de macrófagos e
neutrófilos do Sistema Imunológico).

É um processo que precisa de receptores para iniciar o processo:

anticorpos, oligossacarídeos ou lipídeos da membrana.

A pinocitose também é mediada por receptores.

Ex: maior parte do colesterol utilizado pelas células, no sangue ele é

transportado em partículas lipoproteicas (lipoproteínas de baixa densidade -
LDL) e na membrana possuem receptores de LDL no mesmo molde que os
receptores já vistos anteriormente.

A exocitose e a endocitose:

-Responsável pela manutenção do tamanho constante das membranas

-Ciclo endocítico-exocítico

Como as vesículas são transportadas?

- São transportadas através do citoesqueleto pelas proteínas citoplasmáticas

motoras.