Compartimento intracelular e

transporte de membrana

-uma estratégia para segregar e organizar as reações químicas é confinar os diferentes

processos metabólicos em compartimentos delimitados por membrana

-cada compartimento contém um conjunto único de proteínas, as quais devem ser

transferidas seletivamente à partir do citosol, onde são produzidas, para o compartimento
onde são utilizadas – distribuição de proteínas

-envelope nuclear (membrana do núcleo) se comunica com o citosol pelos poros

nucleares

-RE rugoso: tem ribossomos (produzem prot. que são transferidas para o lúmen)
-RE liso: não possui ribossomos

-o complexo de golgi recebe proteínas e lipídeos do RE, modifica-os e despacha-os para

outros destinos na célula

-endossomo: pega moléculas endocitadas e recicla de volta para a membrana plasmática

-lisossomos: degradam moléculas antigas

-organelas delimitadas por membrana são mantidas em seus lugares devido a ligação com
o citoesqueleto (microtúbulos)

-as organelas delimitadas por membrana ocupa, juntas, cerca da metade de uma célula
eucariótica
-acredita-se que os primeiros percursores
das células eucarióticas tenham sido MO
simples, semelhantes a bactérias, com uma
membrana plasmática e sem membranas
internas
-envaginação da membrana plasmática

-sistema de endomembranas

-acredita-se que as mitocôndrias e os cloroplastos tenham se formado de maneira

diferente, já que se diferem por possuírem seus próprios genomas e sintetizarem parte de
suas próprias proteínas, ambos se
assemelham com bactérias

-essa semelhança faz com que acreditamos

que ambos evoluíram de bactérias
-isolados do intenso tráfego vesicular, que
conecta o interior da maioria das outras
células delimitadas por membrana

-mitocôndrias e cloroplasto

distribuição de proteínas
-as proteínas são produzidas continuamente e devem ser entregues às organelas
▪ Algumas para eventual secreção pela célula
▪ Outras para substituir proteínas de organelas que foram degradadas

-é necessário o transporte das proteínas recém-sintetizadas para suas organelas corretas

-a síntese de praticamente todas as proteínas da célula se inicia no ribossomo e no citosol

-as proteínas produzidas no citosol são despachadas para diferentes locais de acordo com
a marca especifica de localização; as proteínas que não possuem esse sinal permanecem
no citosol
-são três mecanismos
▪ Poros nucleares
▪ Translocadores proteicos
▪ Vesículas de transporte

-poros nucleares: proteínas que se movem do citosol para o núcleo;

portões seletivos que transportam ativamente macromoléculas
especificas, também permitem a difusão livre de moléculas menores

-translocadores proteicos: proteínas que se movem do citosol para o

RE, mitocondrias ou cloroplastos; a proteína transportada deve se
desnaturar/desdobrar para atravessar a membrana com auxilio do
translocador

-vesiculas de transporte: proteínas transportadas a partir do RE e de

um compartimento de endomembranas para outro; as vesículas se
desprendem da membrana de um compartimento e então se fundem
com a membrana de um segundo compartimento

SEQUÊNCIA SINAL
-o sinal de distribuição é um segmento contínuo da sequência de aminoácidos
-sequência sinal é frequentemente (mas não sempre) removida da proteína madura após
a distribuição

-são necessárias e suficientes para direcionar uma proteína para determinado local

-a remoção de uma sequência sinal de uma

proteína do RE tornou ela citosólica, e a
introdução de uma sequência-sinal de RE no
início da proteína citosólica redirecionou ela
para o reticulo
POROS NUCLEARES
-o envelope nuclear é constituído de duas membranas concêntricas
▪ Membrana nuclear interna: possui proteínas que atuam como
sítios de ligação para os cromossomos

▪ Membrana nuclear externa: contínua à membrana do RE

-formam canais por onde todas as moléculas entram ou saem do núcleo

-contem extensas regiões não estruturadas nas quais as cadeias
polipeptídicas estão bem desordenadas

-essa desordem forma uma rede delicada, que impede a

passagem de grande moléculas, mas permite, não
seletivamente, a passagem de micromoléculas hidrossolúveis
transitem livremente entre núcleo e citosol

-porém grandes moléculas (RNA e proteínas recém-sintetizadas produzidas no citosol)

também devem transitar, como faço?
▪ Devem apresentar um sinal de distribuição
▪ Sinal de localização nuclear
▪ Consiste em uma ou duas sequências curtas contento
lisinas ou arginas positivamente carregadas

-o sinal de localização nuclear é reconhecido por receptores de

importação nuclear presentes no citosol

-esse receptor ajuda a direcionar a proteína recém-sintetizada para

um poro nuclear, através das interações com as fibrilas

-o receptor de importação nuclear liga-se às sequencias curtas

repetidas de aminoácidos presentes nas proteínas nucleares,
interrompem a interação entre as sequencias, e abre uma
passagem pela malha
-a energia é fornecida pela hidrólise de GTP. Mediada por uma GTPase monomérica
chamada Ran. Essa hidrólise de GTP promove o transporte nuclear na direção apropriada

-quando o receptor de importação entra no núcleo ele se

liga à Ran-GTP, que auxilia na liberação da proteína
nuclear no núcleo

-após, o receptor é transportado ao citosol, ainda com a

Ran-GTP ligada a ele, no citosol uma proteína acessória
induz a Ran-GTP a se soltar do receptor, deixando-o livre
para se conectar à outra molécula nuclear do citosol

TRANSLOCADORES PROTEÍCOS
-mitocondria e cloroplasto são especializados na síntese de ATP
▪ São constituídos por membrana interna e externa

-as proteínas que querem entrar nesses sítios possuem sequência-sinal na região N-
terminal
-são desnaturadas (desnoveladas) a medida que é transportada

-translocador proteico: chaperonas, transporta a proteína pelas duas membranas e

enovela, uma vez que estejam no interior da organela

PROTEÍNAS NO PERIOXISSOMO
-peroxissomos degradam uma variedade de moléculas, incluindo roxinas, álcool e ácidos
graxos
-adquirem grande parte de suas proteínas através do processo seletivo a partir do citosol
-sequencia curta, apenas 3 aa, como sinal
-proteínas receptoras no citosol transporta as proteínas especificas ate os peroxissomos

-também contém um translocador de proteína, porém não há desnaturação da mesma

VESÍCULAS DE MEMBRANA
-algumas proteínas do peroxissomo chegam por meio de vesículas que brotam da
membrana do reticulo

-se fundem aos peroxissomo preexistentes

-síndrome de Zellweger
▪ Mutações que bloqueiam a importação de proteínas pelos peroxissomo
▪ Anormalidades graves no encéfalo, fígado e rim

-o RE serve como entrada para proteínas destinadas a outras organelas, bem como
destinadas ao próprio RE
▪ Proteínas destinadas ao aparelho de Golgi, lisossomos e endossomos

-uma vez no lúmen do RE serão transportadas por vesículas, de organela para organela
-dois tipos de proteínas são transportados pelo RE:
▪ Hidrossolúveis: liberação na superfície celular ou para o lúmen de uma organela
▪ Futuras proteínas transmembrânicas

-sequência-sinal de RE: segmento de 8 ou mais aa hidrofóbicos; esta envolvido também

no processo de translocação por meio da membrana

-as proteínas que entram no RE, a maioria entra antes de sua cadeia peptídica estar
totalmente sintetizada; os ribossomos que estão sintetizando essas proteínas acabam
ficando presos, formando o RE rugoso

RIBOSSOMOS
-ribossomos ligados à membrana: face citosólica, estão produzindo proteínas que serão
translocadas ao RE
-ribossomos livres: sintetizam as demais proteínas codificadas pelo DNA nuclear

-quando o ribossomo, inicialmente livre, sintetiza uma proteína com sequência-sinal de RE,
esse ribossomo é direcionado à membrana do RE, tornando-se de membrana

-essas proteínas com sequência-sinal de RE são sintetizadas à medida que são

translocadas, o que não causa adição de energia

-quando um RNAm é traduzido, forma-se um poliribossomo

*quem apresenta uma sequeência sinal de RE é o próprio ribossomo

-o ribossomo que contem a sequência-sinal de RE apresenta uma SRP, existe na

membrana do reticulo um receptor de SRP, que permite a ligação ribossomo-RE; quando a
SRP se liga ao seu receptor, ela é liberada, possibilitando a ligação entre translocador de
proteína e cadeia polipeptídica,
formando um RE ligado à
membrana
 PROTEÍNAS TRANSMEBRÂNICAS
-nem todas as proteínas produzidas pelo ribossomo ligados ao RE são transportadas para
o lúmen, chamado de proteínas transmembranicas

-são sintetizadas inicialmente igual as proteínas solúveis, porem possuem uma sequência
de parada de transferência oque interrompe essa sintetização

-a cadeia polipeptídica é liberada no interior da bicamada lipídica, já a sequencia de parada

de transferência permanece na bicamada, o que ancora a proteína à membrana

-N-terminal do lado luminal, C-terminal do lado citosólico

-proteína transmembrânica -proteína solúvel

-em proteínas de membrana de passagem múltipla, a sequencia de início de transferência

hidrofóbica, age tanto como inicio da translocação como ancoragem da membrana.
Quando a sequência de parada entra no canal de translocação, também estabiliza na
camada bilípidica
TRANSPORTE VESICULAR
-brotamento continuo e fusão

-se estende pra fora do RE em direção à membrana plasmática e de dentro da membrana

plasmática para os lisossomos

-as proteínas transportadas por esse meio sofrem diversas modificações químicas

-via endocítica: ingestão e degradação de moléculas extracelulares move materiais de

membrana plasmática, por meio dos endossomos para os lisossomos

-cada vesícula transportadora que brota de um compartimento deve somente levar

proteínas apropriadas para seu destino e fundir-se com membrana celular-alvo

-transporte do RE para o aparelho de golgi e do aparelho de golgi para outros

compartimentos do sistema de endomembranas

-a via secretória principal é: RE, golgi e membrana plasmática

-clatrina: revestimento das vesículas, é removida com a formação completa

-como uma vesícula transportadora seleciona sua carga particular?
▪ Adaptinas: fixam o revestimento de clatrina à membrana da vesícula e ajudam a
selecionar as moléculas a serem transportadas

▪ As moléculas carregam um sinal de transporte reconhecidos pelos receptores de

carga no aparelho de golgi/MP

▪ As adaptinas se ligam aos receptores de carga que se ligam às moléculas de carga

-fusao de vesículas
▪ Proteínas Rab especificas estão presentes na superfície de cada vesícula, e são
reconhecidas pelas proteínas de conexão presentes na membrana alvo

▪ As proteínas Rab servem como marcador molecular para cada tipo de membrana
▪ Esse sistema assegura a fusão da vesícula apenas com a membrana correta

▪ As SNARes das vesículas interagem

com as SNARes da membrana-alvo,
ancorando firmemente a vesícula no
seu local

▪ As SNARes também auxiliam na

liberação de carga da vesícula
VIAS SECRETÓRIAS
-o trafego vesicular não esta restrito ao interior da célula, ele se estende para a partir da
membrana plasmática

-proteínas, lipídeos e carboidratos recém-sintetizados são encaminhados a partir do RE,

via golgi, para a superfície celular (exocitose)

-proteínas de sulfeto são formadas no lúmen do RE e ajudam a estabilizar a estrutura das

proteínas que encontrarão enzimas de degradação e variações de Ph fora da célula, após
secreção ou incorporação

-muitas proteínas que entram no lúmen ou na membrana do RE são convertidas em

glicoproteínas, pela adição de oligossacarídeo = GLICOSILAÇÃO

-oligossacarídeos: protege proteina de degradação, retém proteina no RE até seu

processamento, auxilia no transporte para a organela apropriada; forma parte da camada
externa de carboidratos (glicocálice) que podem atuar no reconhecimento de uma célula
para outra

-a saída de proteínas do RE é controlada para garantir qualidade proteica

-algumas proteínas produzidas no RE são destinadas a atuar dentro da própria estrutura
▪ São mantidas no RE pela sequência sinal chamada sinal de retenção no RE

-como a saída do RE é bastante seletiva, proteínas que não se enovelam ou não se

associam corretamente são mantidas ativamente no RE por meio da proteína chaperonas

-contudo, proteínas má enoveladas

também não podem se manter no
citosol, por conta disso, as chaperonas
envolvem elas e as exportam para o
citosol, onde são degradadas

-por exemplo o anticorpo, é formado por 4 cadeias polipeptídicas que se associam a uma
molécula completa de anticorpo no RE, se ainda não houve a formação das 4 cadeias,
eles são retidos no RE até que sejam formadas, mas se caso houver a falha na
associação, esse anticorpo é degradado
-quando ocorre aglomeração de proteínas mal-enoveladas no RE, aciona o programa
chamado de resposta à proteína desenovelada (UPR)
▪ Induz produção de mais RE e consequentemente de mais chaperonas

-aparelho de golgi
▪ Face de entrada: cis, adjacente ao RE
▪ Face de saída: trans, voltada para a MP

-muitas das cadeias de oligossacarídeos adicionadas as proteínas no RE, sofrem

modificações posteriores no aparelho de golgi

-as proteínas que saem da rede trans-golgi são distribuídas de acordo com o seu destino,
para os lisossomos (endocitose) ou para a superfície celular

-exocitose
▪ Liberação de proteínas secretórias
▪ Corrente contínua de vesículas que partem do golgi e se fundem com a MP
▪ Via constitutiva: carrega proteínas solúveis para a superfície celular (secreção)
 ▪ Via regulada: presente em células especificas de regulação; a vesícula secretória
esta armazenando proteínas secretórias, recebem um estimulo extracelular
(neurotransmissores, enzimas) que adiantam o processo de exocitose

*exemplo: aumento de glicose no sangue, sinaliza para as células endócrinas produtoras

de insulina que elas devem secretar o hormônio

VIAS ENDOCÍTICAS
-captura de líquidos e moléculas grandes pelo processo de endocitose
-os metabólitos gerados pela digestão no lisossomo são transeferidos diretamente para
fora, no citosol, onde podem ser utilizados pela célula

-existe a fagocitose e a pinocitose

▪ Pinocitose: “beber” celular, ingestão de líquidos e pequenas moléculas
▪ Fagocitose: “comer” celular, ingestão de partículas grandes

-células fagocíticas
▪ Ingerem grandes proteínas (MO invasores)
▪ Limpeza de células mortas, defeituosas e restos celulares
-pinocitose mediada por receptor
▪ Fornece uma via eficiente para capturar
macromoléculas específicas do meio extracelular
▪ Quando perde o revestimento de claratrina,
consegue se fundir com o endossomo
▪ Fornece uma rota especifica no interior da célula

*colesterol alto: indivíduos herdaram um codificador de

proteína receptora de LDL defeituoso

-endossomo é a principal rede de distribuição da via endocítica, assim como a rede trans-
golgi é na via exocitica/secretória

-lisossomos: principal local de digestão intracelular