2.

Relativamente ao alelo responsável pela doença, é correto afirmar-se que é

(A) autossómico dominante.
(B) heterossómico, ligado ao cromossoma X.
(C) autossómico recessivo.
(D) heterossómico, ligado ao cromossoma Y.
3. Relativamente ao genótipo do Alberto, é correto afirmar-se que
(A) é homozigótico dominante.
(B) é heterozigótico.
(C) é homozigótico recessivo.
(D) não há dados suficientes para determinar o seu genótipo.
4. O casal, Carolina e António, prepara-se para ter um filho e está preocupado com a possibili-
dade deste vir a manifestar a doença. A probabilidade da Carolina transmitir o alelo responsável
pela doença ao filho é de e a probabilidade deste apresentar a doença é de ,
caso o pai seja heterozigótico.
(A) 50% ... 100% (C) 50% ... 50%
(B) 0% ... 100% (D) 0% ... 50%
5. De acordo com a árvore genealógica construída na questão 1, mencione o genótipo da mãe da
Maria Albertina.
Na sua resposta indique o significado das letras utilizadas.
6. Carlos prepara-se para constituir família. A sua futura mulher, Mariana, não manifesta a sín-
drome de despigmentação e surdez.
Calcule a probabilidade de os seus descendentes serem afetados pela doença.
7. Tendo em conta o sistema ABO, sabe-se que Galileu é do grupo sanguíneo O positivo, Sofia do
grupo AB negativo e Carlos do grupo A negativo.
7.1. Determine a probabilidade da Carolina pertencer ao grupo sanguíneo que apresenta aglu-
tininas anti-A e anti-Rh.
7.2. No caso de Carlos necessitar de uma transfusão, explique se algum dos progenitores
poderia doar sangue sem risco de incompatibilidade.
8. Indique uma característica, presente na análise de uma árvore genealógica de uma família com
uma doença genética, que resulta da expressão de um alelo recessivo.

GRUPO III

Os membros da família Enterobacteriaceae incluem bactérias presentes no intestino do ser

humano e de outros animais, bem como importantes agentes causadores de doenças. Bactérias
portadoras de sistemas de eliminação de múltiplos antimicrobianos (MDR) são capazes de sobrevi-
ver em nichos ecológicos adversos. Bactérias Escherichia coli e Enterobacter cloacae isoladas de
carcaças de frangos saudáveis foram investigadas quanto à presença de MDR. Foi realizada a
amplificação, por PCR, dos genes que codificam AcrA e AcrB, componentes de um sistema MDR. A
diversidade de cada espécie foi verificada por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE) de
DNA submetido à endonuclease Xba I. Uma questão importante é o facto de diferentes modelos e
mecanismos de resistência antimicrobiana estarem presentes num pequeno número de estirpes
não patogénicas e isoladas de uma mesma origem. Contudo, estas estirpes não patogénicas
podem constituir uma fonte de genes de resistência para outros microrganismos, entre eles estirpes
patogénicas.
 Métodos e procedimentos
1) Cinco estirpes de E. coli e cinco de E. cloacae foram isoladas de carcaças de frangos clini-
camente saudáveis.
2) Os isolados apresentavam fenótipos distintos de multirresistência a antimicrobianos.
3) Todas as estirpes foram armazenadas a -80 ºC em meio de cultura adequado, com 20% de
glicerol.
4) Para cada linhagem foram preparadas placas com 108 unidades formadoras de colónias/mL
(UFC/mL) cultivadas em meio nutritivo. Para a hidrólise do DNA, as amostras foram tratadas
com 50 unidades da enzima de restrição Xba I.
5) Os fragmentos de DNA foram separados e o gel de agarose corado com brometo de etídio,
para posterior visualização com luz ultravioleta.
6) Os ensaios foram realizados duas vezes, com três réplicas em cada ensaio.

Os resultados da resistência aos diferentes antimicrobianos encontram-se expressos na

tabela 1.

Tabela 1 Concentração mínima inibitória de diferentes antimicrobianos em diferentes estirpes de Escherichia coli e
Enterobacter cloacae.
Antimicrobiano (µg/mL)
Estirpes
S APR NA CFR CEC CL FR F SP TE C SXT
E. coli 1 30 50
E. coli 2 20 20 50 70 500 200 30 2000
E. coli 4 250 800 20 80 30 1500
E. coli 5 450 20 20
E. coli 6 60 1400 20 40 2,5 1800
E. cloacae 3 30 900
E. cloacae 7 30 30 700
E. cloacae 8 30 10 10 20 400 2,5
E. cloacae 9 30 1000
E. cloacae 10 20 10 5

S: espectinomicina; APR: apramicina; NA: ácido nalidíxico; CFR: cefadroxil; CEC: cefaclor; CL: cefalexina;
FR: furazolidona; F: nitrofurantoína; SP: espiramicina; TE: tetraciclina; C: cloranfenicol; SXT: sulfametoxazol/
trimetoprima
Moreira M.A., Rodrigues P.P., Tomaz R.S., de Moraes C.A. (2019). Multidrug efflux systems in Escherichia coli and
Enterobacter cloacae obtained from wholesome broiler carcasses. Braz J. Microbiol. 40(2):241-7. DOI: 10.1590/S1517-
83822009000200007.

1. Selecione a opção que valida as afirmações relativas a esta experiência.

I. A estirpe E.coli 2 é a que apresenta maior resistência aos antimicrobianos.
II. As estirpes foram armazenadas em condições abióticas distintas, dada a sua especifici-
dade fenotípica.
III. A realização de réplicas dos procedimentos permitiu aumentar a fiabilidade dos resultados.

(A) I é verdadeira; II e III são falsas.

(B) II e III são verdadeiras; I é falsa.
(C) II é verdadeira; I e III são falsas.
(D) I e III são verdadeiras; II é falsa.
2. A enzima Xba I constitui uma
(A) enzima de restrição, permitindo a formação de extremidades coesivas.
(B) ligase de DNA, permitindo a ligação de fragmentos de DNA.
(C) enzima de restrição, cortando apenas ligações por pontes de hidrogénio.
(D) ligase de DNA, formando ligações covalentes que dão origem a uma molécula estável.
3. Na técnica de PCR, a uma determinada sequência de é adicionado um primer que
iniciará o processo de .
(A) DNA ... transcrição
(B) RNA ... replicação
(C) DNA ... replicação
(D) RNA ... transcrição
4. Na técnica de PCR é utilizada uma DNA polimerase resistente a elevadas temperaturas, o que
permite
(A) evitar a desnaturação da enzima.
(B) a polimerização de ribonucleótidos.
(C) a despolimerização em cadeia da enzima.
(D) a desnaturação da enzima.
5. Ordene as afirmações identificadas pelas letras de A a E, de modo a obter uma sequência cor-
reta relativa às etapas da técnica de PCR usada na análise dos genes AcrA e AcrB.
A. Ligação de primers a sequências específicas de DNA.
B. Extração de mostras de DNA de diferentes espécies de bactérias.
C. Separação dos fragmentos de DNA por ação de um campo elétrico.
D. Fragmentação do DNA por ação da enzima Xba I.
E. Polimerização de novas cadeias de DNA por ação de uma polimerase termoestável.
6. Em muitos plasmídeos é utilizado um gene de resistência a antibióticos.
Explique a importância de os plasmídeos apresentarem diferentes genes de resistência a anti-
bióticos na produção de organismos geneticamente modificados.
7. Em engenharia genética, a técnica de cDNA permitiu a inserção de genes eucarióticos em pro-
cariontes, como a bactéria E. coli, para a produção de proteínas eucarióticas funcionais.
Explique a importância desta técnica, considerando a estrutura dos genes nos seres eucarion-
tes e nos seres procariontes.

FIM