Técnicas de Biologia Molecular e suas aplicações práticas/Módulo IV – Hadassa

Santos

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MÓDULO IV – Técnicas de Biologia

Molecular e suas aplicações práticas

Olá!!! Que bom que você persistiu até aqui! Chegamos ao último módulo
deste curso. Neste quarto módulo você terá a oportunidade de
aprofundar seus conhecimentos sobre as técnicas de Biologia
Molecular. Para isso, o conteúdo deste módulo foi dividido em duas
aulas: a biologia molecular (aula 1) e técnicas e aplicações práticas
(aula 2). Para que você possa compreender de forma clara e objetiva os
princípios das técnicas de análises de ácidos nucleicos, a aplicação destas
técnicas tanto no meio científico quanto para diagnósticos laboratoriais,
não deixe de assistir a videoaula e acessar todo material indicado
para uma formação mais robusta e consistente. Bom estudo!

AULA 1 – A Biologia Molecular

Material de Preparação

Nas aulas anteriores foram apresentados a transcrição gênica,

DNA ao mRNA, a tradução gênica, ou seja, do mRNA a proteína.
É importante sempre lembrar as etapas que acontecem esses

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fenômenos. Pois, assim entenderá melhor a necessidade e

importância das técnicas em Biologia Molecular.

Vamos começar? Então vamos à primeira pergunta: o que é

Biologia molecular? Biologia molecular é uma das diversas
áreas da biologia que estuda os organismos do ponto de vista
molecular. Seu foco principal é nas bases dos organismos, os
ácidos nucléicos, que são eles: DNA e RNA.

Esta área da ciência consiste em um campo que visa estudar e

compreender os diferentes tipos de processos. São eles:
replicação, transcrição, tradução do material genético. Além
disso, visa entender as regulações desses processos. Para que
assim, possa averiguar suas características e possíveis erros.

Um pesquisador descreveu que a biologia molecular é definida

como a bioquímica relacionada ao DNA e sua expressão em
proteínas (RHEINBERGER, 1997). É concentrar a investigação em
como a informação genética é armazenada, transmitida e
traduzida em fenótipos.

A biologia molecular não para por aí, ela é importante em

diferentes áreas, como por exemplo: na medicina veterinária,
medicina humana, pecuária, controle de qualidade,
agronegócio e, essencialmente, na ciência.

Para melhor entendimento vamos falar um pouquinho de cada

um citado anteriormente. Começando pela medicina

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veterinária, a biologia molecular tem sido bastante utilizada no

diagnóstico e monitoramento de doenças, como a
Leishmaniose. Na medicina humana é usada em várias áreas,
que além da pesquisa, encontram-se no diagnóstico e
monitoramento em vários tipos de patologias. Um exemplo
clássico é o teste de paternidade. Se não fosse pela biologia
molecular, identificar o pai não seria possível.

Na pecuária o estudo genético é importante para determinar a

presença de marcadores genéticos de crescimento em
rebanhos para melhoramento de fatores de interesse da
pecuária. No controle de qualidade, as técnicas para
determinação de contaminações por microrganismos em
alimentos, animais de produção e outros. A utilização no
agronegócio tem favorecido o seu crescimento mundialmente.
Desde a seleção até sua modificação genética em plantas, a
biologia molecular traz tecnologia e outras formas em muitas
carências encontradas no campo.

Na ciência, ou seja, na pesquisa científica de um modo geral, a

biologia molecular é aplicada em vastos estudos, como a
aplicação em diferentes tipos de células, diferentes organismos,
desde humanos até bactérias. Podemos dizer que a biologia
molecular é uma das ciências básicas para o desenvolvimento
da ciência.

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Leitura

Para um melhor entendimento da importância da Biologia

molecular, indico o capítulo 15 do livro Biologia Molecular
Básica, (o pdf deste livro está disponível online, só acessar no Google
e baixar o PDF). Neste capítulo você terá um melhor
conhecimento sobre o desenvolvimento da biologia molecular.

Acesse o texto “Testes para diagnóstico de Covid 19” e entenda a

importância da Biologia Molecular para o desenvolvimento e
aplicação desses testes de diagnósticos.

Assista ao vídeo Sequenciamento de DNA e entenda um pouco

mais esse processo e as diferentes possibilidades dentro da
Biologia Molecular.

No vídeo Técnicas de Biologia Molecular você verá um pouco

mais sobre a técnica PCR e as inúmeras situações em que ela
pode ser aplicada.

Estudo complementar

Para estudo complementar indico o site de Biologia onde tem

um texto que fala da BIOTECNOLOGIA. Nele você terá
informações sobre biotecnologia. Mas o que é biotecnologia?
Biotecnologia é o conjunto de procedimentos envolvendo
manipulação de organismos vivos, com bases na biologia celular,

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para fabricar ou modificar produtos. Há um vídeo sobre a base

da Biologia Molecular e que apresenta algumas técnicas deste
estudo. Ele se encontra em inglês, mas dá para traduzir
automaticamente para a língua portuguesa. Muito interessante,
vale a pena assistir.

Curiosidade

Sabe-se que a medicina moderna tem proporcionado um

conhecimento considerável da fisiopatologia dos transtornos
mentais nos níveis corporal, sistêmico, orgânico e neuroquímico
da organização biológica do corpo. Clique aqui e leia o artigo
científico onde os pesquisadores tiveram o objetivo de revisar
dados científicos já obtidos para encontrar fundamentos nos
mecanismos patológicos da depressão, que possam servir de
base para o desenvolvimento de biomarcadores moleculares e
genéticos, sendo os mais viáveis ​para uso clínico. Este
conhecimento pode ser a base para o desenvolvimento de
biomarcadores para a prática clínica em diagnóstico, prognóstico
e seleção de tratamento. Demais né?

AULA 2 – Técnicas e Aplicações Práticas

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Material de Preparação

Sabendo que os métodos de Biologia Molecular são usados

​para estudar as bases moleculares da atividade biológica.
Vamos conhecer mais alguns deles. Os métodos mais
comumente usados ​são métodos de proteínas e de ácido
nucleico. Estes métodos são usados ​para explorar as células e
até os vírus. Explorando suas características, partes e processos
químicos, e como as moléculas controlam as atividades e o
crescimento daqueles.

Com as técnicas de Biologia Molecular pode favorecer a

clonagem de DNA, transformação bacteriana, triagem celular,
cultura celular, extração de DNA, leitura e escrita de DNA,
sequenciamento de DNA, síntese de DNA, hibridização
molecular, reescrita de DNA: mutações, dentre outros. Ufa! São
muitos tipos de análises, né? E cada uma tem sua finalidade
para responder uma pergunta. Exemplo: Qual é a sequência
gênica do vírus HIV?

As técnicas mais importantes são a Reação em Cadeia da

Polimerase (PCR), Clonagem de Expressão, Eletroforese em gel,
Blotting e sondagem de macromoléculas, Arrays (array de DNA
e de proteínas), mas lembre-se, tem muito mais. Aqui
falaremos sobre a técnica que sequenciou o genoma do vírus da

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Covid-19. Porém, para ter maior informação leiam e assistam os

materiais complementares.

O processo de sequenciamento e a sua utilidade são muito

difundidos no meio acadêmico. Quando veio a pandemia da
Covid-19, a corrida científica para entender esse novo vírus e
suas particularidades, foram altas. No caso do sequenciamento
da COVID-19, os pesquisadores da USP conseguiram um feito
incrível para a ciência usando uma tecnologia nova no mercado
chamada de Nanopore.

Esta técnica é realizada de forma mais rápida e não precisa

tornar o RNA em DNA para sequenciar, podendo fazer o
sequenciamento diretamente da fita original de RNA. Legal,
né? “Assim, ocorre a passagem da fita de nucleotídeos por uma
membrana sintética com nanoporos proteicos. A membrana
possui uma carga elétrica e um nanosensor que detecta a carga
que passa pela membrana. Uma vez que a fita passa, uma base
nitrogenada, uma carga da variação de diferentes para cada
base, o sensor detecta essa configuração por vez de forma a
associar tal configuração com formas a uma base nitrogenada
específica que a gera” (ARAÚJO, 2022).

A partir da sequência, os pesquisadores, de forma geral,

puderam prever as proteínas que o vírus cria, além de
responder algumas perguntas, tais como: como o vírus se
tornou infeccioso? De onde veio o vírus? De que forma ele

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infecta os hospedeiros? Além dessas perguntas, o

sequenciamento do Sars-CoV-2 possibilitou o conhecimento
para tratamentos e até para a vacina.

Leitura

Para um melhor entendimento da importância da Biologia

molecular, indico o capítulo 16 do livro Biologia Molecular
Básica, que pode ser encontrado online, só acessar no Google e
baixar o PDF. Neste capítulo você terá um melhor conhecimento
sobre o desenvolvimento da biologia molecular.

Clique aqui e leia um artigo que traz uma explicação sobre testes
PCR e sorológicos, quais as diferenças entre os dois e como deve
ser sua aplicação.

Assista ao vídeo “Edição de genes e genomas: o que é a técnica

de CRISPR?” e entenda melhor a expressão gênica e a técnica
CRISPR e a possibilidade de manipulação dos genes e perceba
que essa técnica já vem sendo aplicada em vários organismos.
Trata-se de um tema muito interessante e atual. Assista!!!

Estudo complementar

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Para entender melhor a funcionalidade da PCR – Reação em

Cadeia da Polimerase, no vídeo Técnicas de Biologia Molecular
você verá um pouco mais sobre essa técnica e suas inúmeras
aplicações. E nessa Animação em 3D, poderá entender de forma
didática e objetiva como ocorre tal técnica. Essa técnica é a base
da biologia molecular. Vale a pena assistir!!

Também indico a você uma notícia da Fiocruz, no qual esta

instituição desenvolveu um protocolo para Sequenciar o
Coronavírus. Vale a pena a leitura!!!

Curiosidade

Sabemos que uma nova cepa da doença do Coronavírus da

Síndrome Respiratória Aguda Grave 2 (SARS-CoV-2) (COVID-19) foi
recentemente identificada como uma doença infecciosa que afeta
o sistema respiratório de humanos, certo? Por ter sido uma
pandemia, a corrida dos cientistas em busca de respostas foi em
nível altíssimo. Clique aqui e leia o artigo científico que apresenta
uma revisão sobre as principais técnicas de biologia molecular e
imunológicas para o diagnóstico da Covid-19, após a obtenção da
sequência completa do genoma. A RT-PCR foi utilizada como um
procedimento de diagnóstico primário para detectar SARS-CoV-2.
Técnica que vimos na aula 2. Vale ressaltar também a importância
da biologia molecular, não somente no seu diagnóstico, mas

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também sua importância no sequenciamento do genoma do vírus,

no qual favoreceu a produção da vacina. Demais, né?

Referência Bibliográfica

ALBERTS, B.; JOHNSON, A. & WALTER, P. Biologia Molecular da Célula. 5 ed.

Porto Alegre: Artmed Editora, 2010.
AFZAL A. Tecnologias de diagnóstico molecular para COVID-19: limitações e
desafios. J. Av. Res. 26, 149-159, 2020.
ARAÚJO. G. Novo coronavírus e seu sequenciamento genético. Instituto de
Microbiologia Paulo de GOES – UFRJ. Disponível em:
https://www.microbiologia.ufrj.br/portal/index.php/en/extensao-2/informe-da-
extensao/978-novo-coronavirus-e-o-sequenciamento-genetico. Acessado em:
30 de agosto de 2022.
CARVALHO, H. F.; COLLARES-BUZATO, C.B. Células: Uma Abordagem
Multidisciplinar. 1 ed. São Paulo: Manole, 2005.
CARROLL, A. J. F.; LEWONTIN, S. B.; WESSLER, R. C. Introdução à Genética.
Griffiths Editora Guanabara Koogan, 2009.
COOPER, G. M.; HAUSMAN, R. E. A Célula. Uma abordagem molecular. 3 ed.
Porto Alegre: Artmed, 2007.
RHEINBERGER, HANS-JÖRG. Toward a History of Epistemic Things: Synthesizing
Proteins in the Test Tube. Stanford University Press, 1997.
VERLI, H. Bioinformática: Da Biologia à Flexibilidade Molecular. Bioinformática
Estrutural UFRGS, 2014.
V'KOVSKI P, KRATZEL A, STEINER S, STALDER H, THIEL V. Coronavirus biology and
replication: implications for SARS-CoV-2. Nat Rev Microbiol, Mar;19(3):155-170,
2021.

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