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Introdução:
Minhocas (Lumbricidae) compreende a maior parte da fauna SOU biomassa e de contribuir
substancialmente com a ciclagem de nutrientes nos ecossistemas terrestres. Minhocas são
também uma importante fonte alimentar para muitos vertebrados "espécie (1). Por isso,
contaminastes ocupados por minhocas SOU entram na cadeia alimentar (2).
Hidrofóbicas arganic contaminastes (HOCs) são ocupados por minhocas (i) através da possível
difusão a partir do sol, solução através da membrana externa ar (ii) através da reabsorção af
campounds SOU material de passar o tubo digestivo (3). O Reativo tem importância das duas
vias para as diferentes espécies e compostos fuily ainda não é compreendido (4) ... reabsorção
no tracto digestivo é pequena, a absorção de HOCs por earthwOlIDs de solo pode ser descrita
pela teoria da partição no equilíbrio (5, 6). Segundo esta teoria, de acumulação de HOCs não se
correlacionam estreitamente com o coeficiente partitíon octanol-água (Kow), porque o potencial
de bioacumulação hidrofóbicas é compensada pela sua forte absorção de matéria orgânica (5).
No entanto, esta teoria sofre de algumas falhas, pois a aceitação de uma HOCs em minhocas
depende do comportamento de minhocas, a composição da matéria orgânica do solo, e sobre o
tempo de permanência dos HOCs nos solos (4). A absorção significativa através da flora
intestinal pode causar maiores concentrações nas minhocas do que seria de esperar da teoria da
partição no equilíbrio (4).
Nos últimos anos foram apresentadas provas que apenas uma parte do total HOC
concentração nos solos e sedimentos está disponível para a compartimentarão entre o solo e o ar
sedimentos fase sólida solução e uma posterior absorção por parte do biota ar degradação
bacteriana (7, 8). O tamanho desta piscina depende de propriedades físicas e químicas do solo
(9, 10). Ela diminui com o aumento do tempo de permanência (“ envelhecimento ") dos
compostos no solo ar sedimentos (11.13) os compostos difere entre classes. Especial, HAP sob
mais fortemente do que para solos e sedimentos PCB (8, 14, 15). Um método direto para avaliar
a biodisponível porções é a determinação da concentração HOC Trações no solo, água
intersticial. No entanto, HOC concentração em solução muitas vezes não são detectáveis. Por
isso, nonexhaustive extrações com solventes leves foram sugeridos para avaliar bioavauable
piscinas (1. "?", 16). Estes estudos demonstraram que é possível prever a biodisponibilidade de
maneira diferente com idades compreendidas entre os HAP e pesticidas para as minhocas e
bactérias por organismos solventes em água MD .. 1: dade.
Até agora, os estudos sobre biodisponibilidade de porções ofHOCs têm sido conduzidas com
laboratório-perfurantes e, posteriormente, com idades compreendidas entre os solos (12, 13, 16).
informações em biovauability no campo, solos contaminados é inexistente. Por isso, nós
seleccionados 25 solos urbanos \ VI um vasto leque de propriedades, que não foram
adicionalmente perfurantes com P SMA e PCB, para conduzir um experimento com a captação
de espécies Lumbricus terrestris no laboratório.
Os objetivos do nosso estudo foram: (i) para avaliar a relação entre os diferentes PAH e
PCB piscinas em solos e PAH e PCB concentrações em minhocas e (ii) para avaliar se o
equilíbrio particionamento que pode ser aplicada para descrever a captação ofPAHs e PCB ¬
campo de solos contaminados por minhocas.
Parte Experimental "
Solos. Foram selecionados 25 urbanos ou peri-urbana. Com um vasto leque de PAH e PCB
concentrações. Vinte e quatro amostrados, setes estão localizados na cidade de Bayreuth
(northem Bavária, Alemanha, 76000 habitantes) ou na área rural em torno de até 7 km de
distância do centro da cidade. Um site (RI) foram amostrados a uma distância de 10 metros de
uma estrada principal perto de Rosenheim no sul da Baviera. SOU foram colhidas amostras
FRAM Ó a 5 cm de profundidade, ar seco, peneirado <2 mm, e armazenadas em AI container
fechado. Uso do solo e SOU prapenies são apresentados no quadro 1.
A aceitação das Minhocas (Lumbricus terrestris L.) foram adquiridos a partir de Mosella
Angelkoder GmbH (Platten, Alemanha). Para ajustar um homogeneamente baixa PAH e PCB
concentração, minhocas foram mantidos por quatro semanas em um solo com baixa PAJ-J: PCB
e de concentrações (200, ug LZO HAP kg-1 e 1,1, ugLl2 PCB kg-1) e alimentados com cevada
trigo e palha antes da captação experiência. Para a captação da experiência, nós observamos as
aparentemente saudáveis com um peso de minhocas 3.5-4.0 g por pessoa e uma bem
desenvolvida clitellum. As minhocas eram lavadas com água e mantida por 48 h no filtro de
papel molhado para permitir que o tubo digestivo de vazio (17).
Na Experiência 1 nós avaliados PAH e PCB absorção por parte do earthwarms como uma
função do tempo de exposição. Temos mantido em earthwarms três solos (A2, R2, 13) para 5,
10,20, e de 30 d.
Aproximadamente 600 g de solo foram ajustados ao teor de água of 35% no 1 - L vidro
navio. Três minhocas foram transferidas para cada navio. E três repetições de cada vez e cada
exposição do solo foram produzidos. Os navios foram armazenados a 18 ± 2 ° C no escuro. Ate
15 d as minhocas do 20-d e 30-d tempo passos foram alimentados com aproximadamente 5 g de
palha de cevada por navio. Ate o dado momento o intervalo de minhocas foram removidas,
lavados com água, mantido por 48 h no filtro de papel molhado, lavado com água de novo,
congelados com nitrogênio líquido, e liofilizado. Durante a captação do experimento, o peso das
minhocas permaneceu quase constante (3,8 ± 0,2 g por pessoa, antes e após 3,9 ± 0,3 g eÀ '.
Posure). A mortalidade foi inferior a 5%.
Com base nos resultados da primeira experiência, nós selecionamos no Experimento 2
um tempo de exposição de 15 DTO avaliamos o relacionamento dum próximo equilíbrio entre o
solo e a minhoca concentração nos 25 solos. Para cada um dos 25 solos, três repetições com três
minhocas foram produzidos. Nenhum anúncio ditional alimentação das minhocas foi necessário.
O peso médio das minhocas só diminuiu ligeiramente de 4,0 == 0,5 g por indivíduo perante a
3,8 ± 0,4 g.
Para determinar a concentração total de PAH e PCB, amostras do solo foram extraídos
com hexano-acetona 2:1 em um acelerado Solvente Extrator (DionexASE 200, Dionex Co.,
Sunnyvale, Califórnia). CeUs foram fiUed extração com solvente, pressurizado a 14 MPa, e
aquecido a 120 ° C durante 6 minorias pressão e temperatura foram detidos por um tempo
estático extração de 5 min e, em seguida, ceUs foram lavados com solvente frio (60% do
volume Ceu) e purgado com Ar por 150 S. A extração, e RIBS, varias etapas foram realizadas
duas vezes para cada amostra, e os extratos foram combinados.
As minhocas secas congelar-se-ão e foram transferidas para 70 - mL nos tubos de vidro
com Teflon-alinhada. P SMA e PCB foram extraídas ofhexane com 40 ml de diclorometano
(2:1) a 65 ° C durante 24 h seguidos com 30 ml de hexano diclorometano (2:1) a 20 ° C por 2 h.
Os extratos foram completados com anidro NaZS04 ' .
Solos e minhoca extraídos foram evaporados a 1 mL e purificado por extração fase
sólida com 2 g de óxido de alumínio (5% desativado, parte superior) e de 2 g de sílica (5%
desativado, parte inferior). PAH e PCB foram seqüencialmente fluídos com 15 ml de hexano, 5
ml de hexano-dicloro-metano 9:1, e 20 ml de hexano-dicloro-metano 4:1. O eluates foram
combinados e evaporada a cerca de 500, antes da medição. Para determinar as concentrações
PCB, extraídos foram adicionalmente purificado com um ácido-base-coluna preenchida com
sílica (de cima para borrom) 0,5 g of22% HZS04-modificado sílica, 2,5 g de 44% HZS04-
modificado sílica, 0,5 gofactivated sílica, e 2,5 gof33% NaOH-sílica modificada. Bifenilos poli-
clorados foram adicionadas na coluna com 60 ml de hexano e evaporada a 200, UL antes da
injeção no cromatográfico.
Nós solventes utilizados elevado grau de pureza (ofHPLC ou análise de resíduos grade)
obtido a partir de Promoch, Alemanha). Ali, pelo menos, outros foram chernicals de "pró
ânàlysi" grau. Poli-hidrocarbonetos aromáticos e PCB normas foram comprados a partir de
Promochem e DT. Ehrenstorfer (Augsburg, Alemanha). Ali navios utilizados para a análise
foram abastecidos com tolueno .. e acetona e baken a 300 ° C. Nós decorreu uma análise em
branco com cada lote de 15 amostras de cada processo de extração (ASE, minhocas, metanol-
água, NaOH). Para reduzir a influência foi possível verificar a contaminação de fundo, estamos
PAH e PCB concentrações corrigidas por subtração. A média dos esboços analíticos. Ali foram
observados em análises no solo duplicado. Se as diferenças entre as duas análises foram acima
de 10% para o surn das operações de concentração ou acima de 25% para o composto individual
concentrações, a análise foi repetida para uma terceira vez. O coeficiente de variação das
concentrações em minhocas foi <15% entre as repetições da captação dos experimentos. As
recuperações médias e desvios padrão internos variaram de 83 ± 10% a 95 ± 6% (ASE), 85 ±
12% para 93 ± 8% (extração de minhocas), 68 ± 10% para 92 ± 13% (metanol extração de
água), e de 40 ± 17% para 77 ± 15% (NaOH extração).
Carbono orgânico do solo (OC) e concentrações de N total foram medidos com um
analisador de CNS (Elementar Vario EL, El ¬ ementar Analysensysteme GmbH, Hanau, na
Alemanha). O pH foi determinado em 1 M KCI em um solo: solução ratio 1:2.5 com um copo
de elétrons.
O teor de água das minhocas foram determinadas através da gravidade. Foram em
média 830 ± 10 g kg-I (n = 135). O teor de lipídios das minhocas foram determinadas em
triplicado como residual peso de um extrato hexano-diclorometano evaporado até à secura. O
nível médio de 12,0 g de lipídios kg de peso fresco ou estava em bom estado de acordo com
dados da literatura para L. rubellus (6, 19).
Equilíbrio de particionamento modelo. HOCs a absorção de minhocas a partir do solo é
descrita por compartimentos ambos são considerados uptake'andelimination a seguir uma
primeira ordem cinética. Hidrofóbicas compostos orgânicos, deverá ser repartido entre os poros
do solo waterand solo equilíbrio em fase sólida. Que denota a captação constante do solo (d-I).
k2 a eliminação taxa constante (CT1), Cworm é a concentração em HOC minhoca lipídeo em
uma base de peso fresco (mg HOC kg-llipid), assumindo uma média teor de água de 830 g kg-l
e contem um lipídeo de 12 g kg-1 massa fresca, e Csoil é a HOC normalizou a concentração de
carbono orgânico do solo em uma base de peso seco (mg kg HOC - Eu OC). O crescimento das
minhocas e os PAHs captação e PCB do solo ingerido é negligenciada, porque a contribuição
destes últimos para captação total deve ser inferior a 5% em OC conteúdo de cerca de 40 g kg-1
e de uma Kow <7 da maior parte dos compostos ( 3).
Cworm é a concentração inicial HOC em minhocas mantidas e, "armazenando solo".
Pelo equilíbrio dCworm / dt = O, resultando em uma simples separação dos compostos entre o
solo e minhocas: Análise de dados. As análises estatísticas foram conduzidas com o software
STATISTlCA para Windows 5.1 (StatSoft ofEurope, Hamburgo, Alemanha). Distribuição
normal dos dados foi testada com o Kolmogorov-Smirnov (Lilliefors prob ¬ habilidades).
Foram feitas análises de regressão linear usando o método qui-quadrado. Porque PAH e PCB
concentrações em minhocas e ali solo extractos foram log-normalmente distribuído, nós log-
linear transformou-las antes da regressão das análises. Equações não-lineares foram equipados
com um módulo "Nonlinear Estirnation" usando o quase-Newton estimação e qui-quadrados.
Resultados e Discussão:
Agradecimentos:
Nós estamos endividados para o Bayreuther lnstitut für Terrestrische Okosystemforschung
(BITOK) para fornecer o extrator acelerado Solvente (ASE). Este estudo foi financiado pela
Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG Ze 154/38-1, -3), o que estamos gratos acusar.