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Teste de Coombs Direto e Indireto
Teste de Coombs Direto e Indireto
Antonio Altair M. Oliveira Domenico H.G.P.Barbieri Lcia Helena M. Bruneri Primavera Borelli
1. PRINCPIO Os anticorpos ditos incompletos imunes, quando em contato com hemcias que contenham o antgeno correspondente, fixam-se na membrana das mesmas, bloqueando o antgeno; no tm, entretanto, a capacidade de aglutinar estas hemcias. O soro de Coombs (soro antiglobulina humana) capaz de promover a aglutinao dessas hemcias, ditas sensibilizadas. Atravs do Teste de Coombs Direto pode-se evidenciar os anticorpos contra antgenos dos eritrcitos, isto , se in vivo h anticorpos incompletos aderidos membrana eritrocitria. 2. TCNICA a) preparar uma suspenso salina (5%) das hemcias a serem testadas; b) colocar 2 gotas desta suspenso em 1 tubo de 12 x 75 mm, adicionar soluo fisiolgica e centrifugar a 3.000 r.p.m. por um minuto; c) desprezar (com cuidado) o sobrenadante deixando o boto de hemcias no fundo do tubo; d) repetir a operao mais duas vezes. Na ltima operao, com auxlio de papel de filtro, procurar desprezar toda a soluo salina. Quando se tratar de sangue umbilical, lavar as hemcias no mnimo oito vezes; e) adicionar duas gotas de soro de Coombs; f) centrifugar baixa rotao (1.000 r.p.m) por 15 segundos; g) leitura: agitar levemente o tubo e observar se h aglutina dos eritrcitos. 3. INTERPRETAO No h aglutinao .......................... Teste de Coombs Direto NEGATIVO
3. PRECAUES Tanto para as determinaes do Fator Rh em tubo, provas de Coombs Direta e Indireta, necessrio que se tome uma srie de cuidados. a) no colocar hemcias em excesso na suspenso, pois poder haver formao de um boto muito grande, levando eventualmente, a um resultado falsamente positivo. b) o tempo de incubao no dever ser inferior a 30 minutos. c) a centrifugao final no deve exceder ao tempo e a r.p.m. preconizados, pois o boto poder aderir ao fundo do tubo, dificultando a leitura e podendo provocar um resultado falsamente positivo.