Validao e

Controle de
Qualidade
Analtica
Frmacos em Produtos
para Alimentao Animal e
Medicamentos Veterinrios
C
u
I
A

o

V
A
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A

A
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C
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x
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Q
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N
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A
Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento
CGAL/SDA
9 788579 910531
ISBN 978-857991-053-1
Frmacos em Produtos para Alimentao
Animal e Medicamentos Veterinrios
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento
Secretaria de Defesa Agropecuria
Braslia - DF

Ministrio da Agricultura
Promover o desenvolvimento sustentvel
e a competitividade do agronegcio em
benefcio da sociedade brasileira
Guia de Validao e Controle de
Qualidade Analtica
2011 Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento.
Todos os direitos reservados. Permitida a reproduo desde que citada a fonte.
A responsabilidade pelos direitos autorais de textos e imagens desta obra do autor.
Tiragem: 1.100
1
a
edio - Ano 2011
Elaborao, distribuio e informaes:
MINISTRIO DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO
Secretaria de Defesa Agropecuria - SDA
Coordenao Geral de Apoio Laboratorial - CGAL
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Coordenao: Angelo de Queiroz Maurcio
Concepo e Desenvolvimento Marcelo Cludio Pereira
Consultoria e Reviso Tcnico-Cientca: Welington Ferreira de Magalhes (UFMG),
Contribuio: Luiza Cristina Albuquerque Cazarim
Apoio: Rede Nacional de Laboratrios Agropecurios
Coordenao Editoria: Assessoria de Comunicao Social
Impresso no Brasil/Printed in Brazil
Catalogao na Fonte
Biblioteca Nacional de Agricultura BINAGRI
Brasil. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento.
Guia de validao e controle de qualidade analtica : frmacos em produtos
para alimentao e medicamentos veterinrios / Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento. Secretaria de Defesa Agropecuria. Braslia :
Mapa/ACS, 2011.
72 p.
ISBN 978-85-7991-053-1
1. Alimentao animal. 2. Medicamento. 3. Controle de qualidade. 4.
Analise qumica. I. Secretaria de Defesa Agropecuria. II. Ttulo. III. Ttulo:
Frmacos em produtos para alimentao e medicamentos veterinrios.
AGRIS Q55, L70
CDU 636.084.41
SUMRIO
1. Introduo 7
2. Validao 10
3. Plano Mestre de Validao 10
4. Revalidao do Procedimento Analtico 13
5. Classifcao dos Ensaios Segundo sua Finalidade e
Parmetros Mnimos que devem ser avaliados de acordo
com a Categoria do Ensaio Analtico
14
6. Parmetros de desempenhos e Critrios de Aceitao 17
6.1 Seletividade 17
6.1.1 Procedimento de determinao da Seletividade 17
6.2 Efeito Matriz 20
6.2.1 Procedimento de determinao de Efeito Matriz 20
6.2.2 Avaliao do Efeito Matriz 22
6.2.3 Critrios de aceitao do Efeito Matriz 27
6.3 Linearidade (Curva de Calibrao) 27
6.3.1 Procedimento de determinao da Linearidade 28
6.3.2 Citrios de Aceitao da Linearidade 29
6.4 Preciso 31
6.4.1 Procedimento de Determinao da Repetitividade 32
6.4.2 Procedimento de Determinao da Reprodutibili-
dade Intermediria ou Reprodutibilidade Intralaboratorial
33
6.4.3 Critrios de aceitao da Preciso 35
6.5 Limite de Deteco 37
6.6 Limite de Quantifcao 38
6.6.1 Procedimento de Determinao do Limite de
Quantifcaco
38
6.7 Veracidade/Recuperao 38
6.7.1 Determinao da Veracidade/Recuperao 40
6.7.2 Critrios de aceitao da Veracidade/Recuperao 44
6.8 Robustez 45
6.8.1 Procedimento da determinao da Robustez 46
6.9 Estudo de Estabilidade 49
6.9.1 Estabilidade dos Analitos nas Amostras 50
6.9.2 Estabilidade dos Analitos nas Solues Padro 51
7 Incerteza de Medio 52
7.1 Determinao da Incerteza Padro Combinada e da
Incerteza Expandida
53
7.2 Reportando a Incerteza Expandida 64
8. Verifcao de Desempenho de Procedimentos Normali-
zados (Farmacopicos e Outros Aceitos Ofcialmente pelo
MAPA)
65
8.1 Aplicao e Requisitos Mnimos 65
9. Rotina Analtica: Curvas de Calibrao e Amostras de
Controle de Qualidade (ACQs)
66
10. Expresso do Resultado Final 68
11. Referncias Bibliogrfcas 70
7
1. Introduo

O objetivo deste Guia estabelecer os parmetros
de desempenho e os requisitos de aceitao mnimos que
devem ser atendidos para que um determinado procedi-
mento analtico seja considerado validado. Neste docu-
mento tambm so apresentados procedimentos mnimos
de controle da qualidade, que devem ser observados du-
rante a rotina analtica.
Desenvolvido para ser utilizado como uma refern-
cia normativa sucinta e prtica, este Guia direcionado
validao de procedimentos analticos destinados ao: con-
trole de qualidade de medicamentos veterinrios; controle
de qualidade de frmacos em produtos para alimentao
animal (utilizados como veiculo na administrao de medi-
camentos) e para a determinao de frmacos como con-
taminantes em raes (monitoramento de contaminao
8
cruzada). No entanto, considerando a abordagem abran-
gente utilizada neste Guia, nada impede que este seja apli-
cado tambm a procedimentos destinados determinao
de pureza de farmoqumicos e aos estudos de depleo de
resduos em matrizes de origem de origem animal.
Devido ao fato de ser um documento sucinto, pode
ser que o prossional que esteja trabalhando com este
Guia sinta necessidade de maiores esclarecimentos sobre
alguns tpicos abordados. Neste caso, recomendamos que
as dvidas sejam dirimidas por intermdio do Manual de
Garantia da Qualidade Analtica, que um documento
elaborado de forma mais pormenorizada e consonante
com os requisitos estabelecidos neste documento.

Elaborado para ser seguido obrigatoriamente pelos
laboratrios da Rede Nacional de Laboratrios Agropecuri-
os, que atuam na rea de Medicamentos Veterinrios e
Produtos Ans, este Guia tambm uma ferramenta til aos
9
laboratrios de controle de qualidade da indstria farmacu-
tica veterinria, uma vez que estabelece os parmetros de
desempenho e os critrios de aceitao que sero aplicados
aos procedimentos analticos pelos quais os produtos veter-
inrios sero analiticamente monitorados (anlise scal).

Alteraes nos procedimentos, parmetros e crit-
rios estabelecidos podero ser necessrios devido es-
pecicidade de determinados procedimentos analticos ou
peculiaridades do laboratrio. Nestes casos, modicaes
podero ser consideradas desde que sejam adequada-
mente justicadas, garantindo sua consistncia cientca
e conceitual com os princpios deste Guia e o no com-
prometimento da rastreabilidade, da comparabilidade e da
conabilidade dos resultados analticos gerados.
10
2. Validao
A validao de determinado procedimento analtico
objetiva demonstrar que o mesmo adequado aos obje-
tivos propostos, ou seja, que os parmetros de desempen-
ho avaliados atendem aos critrios de aceitao preconiza-
dos. Trata-se de um estudo experimental e integralmente
documentado.
A validao visa garantir a qualidade metrolgica dos
resultados analticos, conferindo-lhes rastreabilidade, com-
parabilidade e conabilidade para a tomada de decises.
3. Plano Mestre de Validao
A validao de procedimento analtico deve ser
demonstrada por intermdio de ensaios de laboratrio
com padres e amostras similares ou idnticas aos produ-
tos que sero analisados rotineiramente.
11

Para o planejamento e a execuo da validao de
um procedimento analtico deve-se, primeiramente, classi-
c-lo em uma das categorias elencadas na Tabela 1.
Em seguida, usando a Tabela 2, os parmetros mni-
mos de desempenho analtico que sero estudados devem
ser determinados, conforme a categoria atribuda ao en-
saio analtico.
O planejamento, a preparao e a execuo da
validao devem seguir protocolos detalhados, devendo o
laboratrio manter os seguintes documentos e registros:
1. Plano de estudo para a validao, o qual deve
contemplar os seguintes elementos:
a. Finalidade e mbito de aplicao;
b. Responsvel tcnico do projeto;
c. Pessoal tcnico envolvido e suas respectivas
responsabilidades;
12
d. Identicao das Unidades, equipamentos/
instrumentos utilizados;
e. Procedimento Operacional Padro (POP) de
validao aplicvel;
f. Parmetros de desempenho a serem estuda-
dos e seus respectivos critrios de aceitao;
2. Experimentos de pr-validao (desenvolvi-
mento e a otimizao de um procedimento analtico);
3. Experimento de validao;
4. Caractersticas de desempenho dos equipa-
mentos/instrumentos;
5. Qualicao dos materiais (padres, reagen-
tes, amostras, alquotas, entre outros);
6. Dados (registros) e concluso da pr-validao;
7. Dados (registros) e concluso da validao;
13
8. POP para a execuo do procedimento analti-
co na rotina;
9. Relatrio Final de Validao.
4. Revalidao do Procedimento Analtico
O procedimento analtico deve ser revalidado nos
seguintes casos:
Mudanas na composio do produto acabado, que
possam interferir na resposta do procedimento analtico;
Alteraes nos procedimentos analticos e/ou espe-
cicaes dos insumos/equipamentos/instrumentos.
14
5. Classifcao dos Ensaios segundo sua
Finalidade e Parmetros Mnimos que devem
ser avaliados de acordo com a Categoria do
Ensaio Analtico.
Nas tabelas abaixo, os ensaios fsico-qumicos fo-
ram agrupados em categorias distintas e, posteriormente,
para cada categoria so indicados os parmetros mnimos
de desempenho que devem ser avaliados durante a vali-
dao do procedimento analtico.
15
Tabela 1
Classicao dos ensaios segundo sua nalidade
Categoria Finalidade do Teste
I
Testes quali-quantitativos para a
determinao do princpio ativo em
medicamentos veterinrios, matrias
primas, produtos para alimentao
animal e matrizes de origem biolgicas.
II
Testes quali-quantitativos para a
determinao de impurezas e produtos
de degradao em medicamentos
veterinrios e matrias-primas e
ensaios limite.
III
Testes de desempenho (e.g.: dureza,
friabilidade, viscosidade).
IV
Testes de identicao para ingrediente
ativo (e.g.: identicao de substncia
por espectroscopia no infravermelho).
V
Testes quali-quantitativos para
determinao de traos de frmacos
em rao (contaminao cruzada).
16
Tabela 2
Parmetros que devem ser estudados na validao do proce-
dimento analtico, de acordo com sua nalidade e categoria
P
a
r

m
e
t
r
o
C
a
t
e
g
o
r
i
a

I
Categoria II
C
a
t
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o
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I
I
I
C
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t
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E
n
s
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i
o

L
i
m
i
t
e
Seletividade Sim Sim Sim * Sim Sim
Linearidade Sim Sim No * No Sim
Preciso Sim Sim No Sim No Sim
Limite de
Deteco
* No Sim * Sim Sim
Limite de
Quanticao
* Sim No * No Sim
Veracidade/
Recuperao
Sim Sim * * No Sim
Robustez Sim Sim Sim No No Sim
* Pode ser necessrio, dependendo da natureza do teste especco.
17
6. Parmetros de Desempenho e Critrios
de Aceitao
6.1 Seletividade
Seletividade a propriedade de um sistema de me-
dio, utilizado com um procedimento de medio especi-
cado, segundo a qual o sistema fornece valores medidos
para um ou vrios mensurandos, tal que os valores de cada
mensurando sejam independentes uns dos outros ou de
outras grandezas associadas ao fenmeno, corpo ou subs-
tncia em estudo.
6.1.1 Procedimentos de Determinao da Seletividade
Os procedimentos utilizados para demonstrar a se-
letividade vo depender do objetivo desejado da anlise.
Em geral, a vericao da seletividade do procedimento
analtico deve ser realizada a partir da comparao entre
18
os sinais (resposta instrumental) advindos da leitura da amos-
tra processada e do analito de interesse, em soluo aquosa
ou orgnica.
Para anlise qualitativa (teste de identicao)
necessrio demonstrar a capacidade de seleo entre
compostos com estruturas relacionadas, que podem es-
tar presentes. Isto deve ser conrmado pela obteno de
resultados positivos (preferivelmente em relao material
de referncia conhecido) em amostras contendo o analito,
comparativamente com resultados negativos obtidos com
amostras que no contm o analito, mas sim compostos
estruturalmente semelhantes.
Para anlise quantitativa (teor) e anlise de impure-
zas, a seletividade pode ser determinada pela comparao
dos resultados obtidos de amostras (frmaco ou medica-
mento) contaminadas com quantidades apropriadas de
impurezas ou excipientes e amostras no contaminadas,
para demonstrar que o resultado do teste no afetado
19
por esses materiais. Quando a impureza ou o padro do
produto de degradao no estiverem disponveis, pode-
-se comparar os resultados do teste das amostras conten-
do impurezas ou produtos de degradao com os resulta-
dos de um segundo procedimento bem caracterizado (por
exemplo metodologia farmacopeica ou outro procedimen-
to validado). Estas comparaes devem incluir amostras
armazenadas sob condies de estresse (por ex. luz, calor
umidade, hidrlise cida/bsica, oxidao).
Em procedimentos cromatogrcos, deve-se tomar
as precaues necessrias para garantir a resoluo, ade-
quada separao (pureza) dos picos cromatogrcos. A uti-
lizao de testes de resoluo de pico (por exemplo, com
auxilio de detector de arranjo de fotodiodos ou espectrome-
tria de massas) interessante para demonstrar que o pico
cromatogrco atribudo a um s componente.
20
6.2 Efeito Matriz
Efeito Matriz um estudo de seletividade que obje-
tiva averiguar possveis interferncias causadas pelas subs-
tncias que compem a matriz amostral gerando, basica-
mente, fenmenos de diminuio ou ampliao do sinal
instrumental ou resposta instrumental.
O estudo de efeito matriz imprescindvel quando
se deseja trabalhar com uma curva de calibrao do anali-
to em solvente, ou seja, com uma curva de calibrao no
matrizada.
6.2.1 Procedimento de determinao do Efeito Ma-
triz:
Preparar uma curva de calibrao do analito puro
em solvente (CCAS) com no mnimo 5 nveis I de concen-
trao (I 5);
21
Analisar, usando a CCAS, amostras elaboradas no
mnimo em 3 nveis de forticao. Um mnimo J de 6 r-
plicas (J 6) por nvel de forticao de:
a. Analito em solvente puro (amostra no matrizada);
b. Analito em extrato da matriz branca (amostra
matrizada).
Aps as anlises replicadas dessas forticaes, re-
alizadas usando a CCAS, proceder avaliao dos resulta-
dos das concentraes do analito obtidas nas forticaes
analisadas como indicado.
Caso o laboratrio no disponha de amostras
brancas para a obteno do extrato da matriz branca,
procedimentos alternativos podero ser usados para a
determinao do efeito matriz (e.g.: determinao da
concentrao do analito pelo mtodo de adio-padro
versus a determinao da concentrao do analito utili-
22
zando curva de calibrao em solvente puro). Entretanto,
a curva de adio-padro dever conter no mnimo cinco
nveis de concentrao e o nmero de replicatas por nvel
dever ser, no mnimo, igual a seis rplicas independentes.
Uma vez identicada a presena de efeito matriz, o
mtodo de adio-padro deve ser empregado.

6.2.2 Avaliao do Efeito Matriz
Utilizando os dados obtidos dos experimentos,
usando a CCAS, de anlise do analito em solvente e dos
extratos de matriz forticados, deve-se aplicar o teste F
(Fischer-Snedecor), de homogeneidade de varincias, para
vericar se as varincias das amostras no-matrizadas
e matrizadas podem ser consideradas estatisticamente
iguais, em cada nvel i de forticao.
Para tanto, aplica-se os seguintes clculos para
cada nvel i de concentrao (forticao) comparando-se
amostras no-matrizadas com aquelas matrizadas:
23

!

F
calc,i =
s
i 1
2
s
i 2
2
(Equao 01)
Onde:
2
1 , i
s
e
2
2 , i
s
so as varincias das replicatas das
amostras no-matrizadas e matrizadas, em cada
nvel de concentrao, com a maior varincia no
numerador.
Uma vez calculado o F, deve-se obter o valor crtico
tabelado de F
crit, ,1,2,
com
,1
= n
,1
1 5 graus de
liberdade no numerador e
,2
= n
,2
1 5 graus de li-
berdade no denominador. Adotar um nvel de signicncia
= 0,05 (5%) ou nvel de conana 1 = 0,95 (95%).

Se em um dado nvel de concentrao i o valor de
F
calc,i
for menor que o F
crit,,1,2,
as varincias desse nvel
24
de concentrao podem ser consideradas iguais, ou seja, a
matriz no tem efeito importante sobre a preciso do pro-
cedimento nesse nvel de forticao i considerado. Nes-
te caso, os desvios-padro desses dois grupos de anlises
podem ser agrupados e a igualdade das mdias dos dois
conjuntos de amostras pode ser testada com a distribuio
t de Student: comparao das mdias de concentrao do
nvel i.
Desse modo, calculam-se:
1. 1 , i x e 2 , i x = mdias das concentraes do ana-
lito em amostras com matriz (extrato matriz for-
ticado) e sem matriz (analito puro em solvente
puro), respectivamente, em cada nvel de concen-
trao (forticao);
2. s
i1
e s
i2
= desvios-padro das concentraes do
analito no i-simo nvel de forticao;
3. O valor da estatstica t
calc,i
:
25


(Equao 02)
Onde:


(Equao 03)
Sendo: n
1
e n
2 =
so os nmeros de replicatas
nas amostras 1 e 2 (no matrizada e
matrizada ou vice-versa).
O valor crtico tabelado de t
crit,,
obtido, para
cada nvel i, a partir da tabela da distribuio de Student
para ( = n
,1
+ n
,2
2) graus de liberdade e nvel de signi-
cncia = 0,05 (5%) ou nvel de conana 1 = 0,95
(95%).
Se em um dado nvel de concentrao i o valor de
F
calc,i
for maior que o F
crit,,,1,2,
as varincias no podem ser
26
consideradas estatisticamente iguais no nvel de fortica-
o i considerado. Verica-se ento o efeito de matriz com
a distribuio t de Student, usando a seguinte equao:


(Equao 04)
Neste caso, para a obteno do valor crtico tabela-
do t
crit, ,,
o nmero de graus de liberdade, para cada nvel
i, igual a:


(Equao 05)
27
6.2.3 Critrios de Aceitao do Efeito Matriz
Se o valor de t
calc,i
calculado pela Equao 02 ou
pela Equao 04, conforme o caso, for menor que o t
crit,
,,
pode-se concluir que a matriz no afeta o ensaio no
i-simo nvel de forticao.
Se o valor de t
calc,i
calculado pela Equao 02 ou
pela Equao 04, conforme o caso, for maior que o t
crit,
,,
pode-se concluir que a matriz tem um efeito estatisti-
camente signicante sobre o resultado.

Para aceitao da no existncia de efeito matriz,
no deve haver efeito matriz em nenhum nvel de concen-
trao das forticaes.
6.3 Linearidade (Curva de Calibrao)
Linearidade a capacidade de o procedimento pro-
duzir resultados diretamente proporcionais concentrao
do analito na amostra, dentro de um intervalo especicado.
28
A faixa de trabalho linear da curva de calibrao
deve, necessariamente, contemplar a faixa de concentra-
o esperada para a amostra de ensaio. Sempre que pos-
svel, o valor esperado para a amostra de ensaio deve se
situar em torno do centro da curva de calibrao.
6.3.1 Procedimento de Determinao da Linearidade
O nmero de nveis de concentrao das solues
padro de calibrao, designado por I, deve ser no mni-
mo cinco, I5.
Cada i-simo nvel de concentrao deve ter sua
soluo preparada independentemente no mnimo trs
vezes, J3. Isso resultar em um nmero total N
x
de so-
lues de calibrao independentes igual N
x
=IJ.
Cada uma das N
x
solues de calibrao deve ser
medida (injetada, apresentada) no instrumento de me-
dio analtica um nmero L de vezes. Isso resultar em
um nmero total de leituras da resposta instrumental
igual a N
y
=IxJxL=N
x
xL. Se L=1 ento N
x
=N
y
.
29
Recomenda-se que o nmero total de respostas ins-
trumentais N
y
seja igual ou superior a 30 (N
y
30)
Todas as N
y
leituras instrumentais devem ser feitas
aleatoriamente.
Os ajustes das curvas de calibrao no devem ser
forados a passar pela origem.
6.3.2 Critrios de Aceitao da Linearidade
Se os desvios-padro de repetitividade da resposta
instrumental em cada nvel de concentrao, s
yi
, da curva
de calibrao no forem estatisticamente iguais, sugerindo
heteroscedasticidade, signica que os dados da calibrao
devem ser tratados pelo mtodo dos mnimos quadrados
ponderado MMQP.
No caso de homoscedasticidade podem ser usados
ambos os mtodos dos mnimos quadrados MMQO ou
o MMQP. Observao: O MMQO um caso particular do
30
MMQP, assim no caso de homocedasticidade ambos os m-
todos levam ao mesmo resultado.
Em ambos os casos, MMQO e MMQP, os parme-
tros da reta de calibrao, o intercepto e a inclinao,
devem ser estimados, assim como suas incertezas (des-
vios padro), s
a
e s
b
, respectivamente, e a covarincia,



s
ab
2
= cov(a,b) , entre eles.
A qualidade da curva de calibrao e de sua linearida-
de ser avaliada atravs da inspeo visual do grco da reta
de calibrao e do grco de resduos gerados pela regres-
so linear. Os pontos experimentais devero estar prximos
e aleatoriamente distribudos ao redor da reta ajustada. Os
pontos no grco dos resduos devero estar aleatoriamente
distribudos ao redor do eixo x, no apresentando nenhum
comportamento regular ou tendncia funcional.

Quando o MMQO for usado, o teste t indicado na
referncia Miller e Miller 2005 sobre o coeciente de corre-
31
lao ou determinao poder ser usado para estabelecer
a adequao da curva de calibrao.
Para maiores detalhes consultar o Manual de Garantia
da Qualidade Analtica, publicado pelo MAPA/SDA/CGAL.
6.4 Preciso
Preciso a estimativa da disperso de resultados
entre ensaios independentes, repetidos de uma mesma
amostra, amostras semelhantes ou padres, em condies
denidas.
As trs maneiras de express-la so por meio da re-
petitividade, da preciso intermediria (ou reprodutibilida-
de interna ou intralaboratorial) e da reprodutibilidade.
A reprodutibilidade de um procedimento analtico
somente pode ser estimada atravs da participao de um
ensaio interlaboratorial colaborativo.
32
6.4.1 Procedimento de Determinao da Repetitividade

Para se determinar a repetitividade deve-se preparar
e analisar um conjunto de amostras constitudas de matri-
zes brancas forticadas, no mnimo em trs nveis de con-
centrao, com as substncias a analisar.
Para cada nvel, a anlise deve ser realizada em,
pelo menos, seis rplicas independentes.
Calcular a concentrao determinada para cada
amostra replicada.
Calcular as concentraes mdias, os desvios-pa-
dro de repetitividade (s
r
) e os coecientes de variao de
repetitividade (%) das amostras forticadas em cada nvel
de concentrao.
Calcular, por nvel, a concentrao mdia, o desvio-
-padro de repetitividade (s
r
) e o coeciente de variao (CV)
para as amostras forticadas em cada nvel de concentrao.
33
Caso o laboratrio no disponha de amostras bran-
cas, poder fazer uso do mtodo de adio-padro. Neste
caso, a curva de adio-padro dever ter no mnimo 5
nveis de concentrao e ser realizada, em pelo menos, seis
rplicas independentes.
6.4.2 Procedimento de Determinao da Reproduti-
bilidade Intermediria ou Reprodutibilidade Intra-
laboratorial
Para determinar a reprodutividade intermediria ou
reprodutividade intralaboratorial deve-se preparar e ana-
lisar um conjunto de amostras constitudas de matrizes
brancas forticadas, no mnimo em trs nveis de concen-
trao, com as substncias a analisar.
Para cada nvel, a anlise deve ser realizada em, pelo
menos, seis rplicas independentes.
34
Repetir estes passos pelo menos mais duas vezes em
dias diferentes, variando sempre que possvel os operado-
res, os instrumentos, as condies ambientais, lotes de re-
agentes e solventes, entre outros fatores experimentais.
Calcular a concentrao detectada para cada amos-
tra replicada.
Calcular a concentrao mdia os desvios padro
de reprodutibilidade (S
r
) e os coecientes de variao para
cada nvel de concentrao das amostras forticadas.
Caso o laboratrio no disponha de amostras bran-
cas, poder fazer uso do mtodo de adio-padro. Neste
caso, a curva de adio-padro dever ter no mnimo cinco
nveis de concentrao e ser realizada, em pelo menos, seis
rplicas independentes.
35
6.4.3 Critrios de aceitao da Preciso
Em condies de repetitividade, o coeciente de va-
riao deve tipicamente situar-se abaixo de dois teros dos
valores apresentados na Tabela 3, conforme a concentrao.
No caso de anlises repetidas de uma amostra em
condies de reprodutibilidade intralaboratorial, o coe-
ciente de variao intralaboratorial da mdia no deve
exceder aos valores especicados na Tabela 3.
Preciso estimada em Funo da Concentrao do
Analito no Produto/Matriz.
36
Tabela 3
Coeciente mximo admitido, de acordo com a concentrao
do analito
Concentrao (C) Coeciente de Variao
(%)
C < 1 mg/kg 35
1 mg/kg C < 10 mg/kg 30
10mg/kg C < 100mg/kg 20
100 mg/kg C < 1000 mg/kg 15
1000 mg/kg C < 10000 mg/
kg
10
10 mg/kg C < 100 mg/kg 7.3
100 mg/kg C < 1000 mg/kg 5,3
1000 mg/kg C < 10000 mg/
kg
3,7
10 g/kg C < 100 g/kg 2,7
100 g/kg C < 1000 g/kg 2,0

37
6.5 Limite de Deteco
Limite de Deteco do equipamento denido
como a concentrao do analito que produz um sinal de
trs vezes a razo sinal/rudo do equipamento.

Para a determinao do Limite de Deteco deve-se:
1. Diluir o padro, a critrio do analista, at um
nvel de concentrao mnima detectvel;
2. Injetar em triplicata e calcular o valor mdio;
3. Estimar a concentrao correspondente a
um sinal que equivalha a trs (3) vezes o
rudo.
38
6.6 Limite de Quantifcao
Limite de Quanticao do procedimento analtico
denido como o nvel mais baixo de concentrao no
qual foi demonstrado que os critrios de veracidade e pre-
ciso foram atendidos, desde que a relao sinal/rudo seja
superior a seis (S/R 6).
6.6.1 Procedimentos de Determinao do Limite de
Quanticao
Para estimativa do limite de quanticao dever ser
utilizadas amostras brancas forticadas, no caso de obser-
vada a presena de efeito matriz; ou padro em soluo,
no caso de demonstrada a ausncia de efeito matriz.
6.7 Veracidade/Recuperao

O vocabulrio internacional de metrologia dene a
veracidade como: grau de concordncia entre a mdia
39
de um nmero innito de valores medidos repetidos e um
valor de referncia.
A veracidade a concordncia entre a mdia de
um nmero sucientemente grande de resultados de um
ensaio e o valor de referncia aceito convencionalmente
como verdadeiro.
A veracidade est inversamente relacionada ao erro
sistemtico ou a correo ou ao fator de correo.
A recuperao mede a tendncia total do procedimen-
to analtico e, portanto, uma expresso de sua veracidade.
No se deve confundir a recuperao com a ecin-
cia de extrao ou de digesto da amostra. A recuperao
tem por objetivo corrigir o resultado da anlise dos erros
sistemticos oriundos dos efeitos de extrao ou digesto
e das perdas advindas de todas as etapas da marcha ana-
ltica, realizadas at a leitura da resposta instrumental, tais
40
como, limpeza (clean-up), diluies ou pr-concentrao,
derivatizaes, secagens, etc.
Para tanto, pode-se usar o fator de recuperao,
f
rec
, que um fator de correo, e , portanto, um fator
multiplicativo; ou usar uma correo de recuperao, C
rec
,
que uma parcela aditiva.
Recomenda-se fortemente que seja utilizado na de-
terminao analtica um Padro Interno (composto, geral-
mente com caractersticas estruturais similares ao analito,
adicionado aos padres de calibrao e amostras em con-
centraes conhecidas e constantes, para facilitar a deter-
minao do analito).
6.7.1 Determinao da Veracidade/Recuperao
A determinao da veracidade deve ser feita por in-
termdio de ensaios de recuperao utilizando-se material
de referncia certicado - MRC. Caso no haja MRC dis-
41
ponvel, a determinao da recuperao deve ser feita por
intermdio de matriz branca forticada.
Para determinar a veracidade/recuperao deve-se
analisar 6 rplicas de material de referncia certicado
MRC ou de amostra/matriz branca, antes e aps fortica-
o com os padres de calibrao, em no mnimo 3 nveis
de concentrao.
Quando a recuperao obtida a partir de fortica-
es de matriz branca, o fator de recuperao f
rec
calcu-
lado atravs da equao:


(Equao 06)
Onde:
C
f
= concentrao medida aps fortica-
o da matriz branca;
42
C
nf
= concentrao medida na matriz branca
no forticada, i.e., antes da forticao; e

C
ad
= concentrao do analito puro adicio-
nado matriz branca.
Quando a recuperao obtida a partir do uso do
MRC, o fator de recuperao calculado atravs da equao:


(Equao 07)
Onde:
C
med
= concentrao medida na anlise do
MRC;
C
MRC
= concentrao declarada no certi-
cado do MRC.
43
Dependendo se o estudo de determinao da recu-
perao foi feito com MRC ou com Matriz branca fortica-
da, a correo de recuperao C
rec
calculada atravs das
seguintes equaes, respectivamente:




C
rec
= C
nf
+C
ad
C
f
(Equao 08)


(Equao 09)

O fator de recuperao mdio, ou a correo de re-
cuperao mdia, e o coeciente de variao (CV) devem
ser calculados em cada nvel de concentrao do estudo
de veracidade/recuperao.
Sempre que na rotina analtica for utilizada curva de
calibrao em solvente (CCAS), os resultados devero ser
corrigidos pela recuperao.
44
6.7.2 Critrios de aceitao da Veracidade/Recuperao
A veracidade do procedimento medida pela Equa-
o 06 ou Equao 07 deve estar compreendida nos in-
tervalos especicados na Tabela 4 ao redor de 100%, de
acordo com as respectivas concentraes. Excepcional-
mente, valores fora das faixas podero ser aceitos desde
que devidamente justicados.
Tabela 4
Faixa de Aceitao do Fator de Veracidade/Recuperao
Concentrao (C) Intervalos (%)
C < 1 g/kg 50 a 120
1 g/kg C < 10 g/kg 70 a 110
10 g/kg C < 100g/kg 80 a 110
100 g/kg C < 1000 g/kg 80 a 110
1000 g/kg C < 10000 g/kg 80 a 110
10 mg/kg C < 100 mg/kg 90 a 107
100 mg/kg C < 1000 mg/kg 95 a 105
1000 mg/kg C < 10000 mg/kg 97 a 103
10 g/kg C < 100 g/kg 98 a 102
100 g/kg C 1000 g/kg 98 a 102
45
6.8 Robustez
O estudo da robustez de um procedimento analtico
procura avaliar o quo sensvel o resultado analtico s
variaes nas condies experimentais do procedimento
analtico.
Esse estudo deve ser realizado demonstrando a
estabilidade do procedimento sob diferentes condies
(tempo, temperatura, pH, entre outras), diferentes fabri-
cantes de insumos, colunas cromatogrcas entre outras
variaes.
Todas as possveis variaes de condies experi-
mentais, que podem ocorrer durante a rotina analtica, de-
vem estar respaldadas pelos estudos de robustez do proce-
dimento analtico e seus efeitos estimados.
46
6.8.1 Procedimento de Determinao da Robustez
As etapas do estudo de robustez so:
1. Identicar os possveis fatores que possam in-
uenciar os resultados.
2. Variar levemente cada fator em pelo menos dois
nveis (tratamentos). Essas variaes devem ser da
mesma ordem daquelas que podem ocorrer duran-
te o uso do procedimento analtico na rotina.
3. Realizar um teste de robustez utilizando a abor-
dagem clssica variando um fator de cada vez, ou
utilizando a abordagem do planejamento fatorial
completo ou fracionrio. Essa ultima abordagem
prefervel, uma vez que exige menor nmero de
experimentos sendo mais rpida, eciente e eco-
nmica.
47
4. Identicados na etapa anterior os fatores que
tm efeitos mais signicativos sobre o resultado da
medio analtica, um novo estudo mais detalhado
realizado apenas com esses fatores mais signi-
cantes de forma a estabelecer a faixa de variao
aceitvel desses fatores que no comprometa a ve-
racidade e a preciso o resultado analtico.
5. Os fatores que afetam signicativamente o re-
sultado analtico e as faixas permitidas de suas va-
riaes devem ser explicitamente identicados no
procedimento de anlise, ressaltando-se os cuida-
dos especiais com esses fatores.
Caso seja vericado atravs do estudo de robustez
que a funo resposta do procedimento analtico no
inuenciada ou fracamente inuenciada por pequenas
variaes dos fatores, as condies experimentais, o pro-
cedimento analtico classicado como: Procedimento
Analtico Robusto e adequado para as anlises de rotina.
48
Nesse caso, relatar apenas as restries de variabi-
lidade das condies experimentais que mais inuenciam
no resultado analtico, estabelecendo as suas variaes
permitidas para uso do procedimento analtico na rotina.
Caso seja vericado atravs do estudo de robustez
que a funo resposta do procedimento analtico forte-
mente inuenciada por pequenas variaes dos fatores, as
condies experimentais, o procedimento analtico poder
ser classicado em uma das seguintes classes:
1. Procedimento Analtico No Robusto e inade-
quado para as anlises de rotina.
2. Procedimento Analtico de Uso Restrito. Nes-
se caso devero ser detalhadamente relatadas as
restries de variabilidade e de controle das condi-
es experimentais que sero permitidas para uso
do procedimento analtico.
49
3. Procedimento Analtico No Robusto e inade-
quado para as anlises de rotina na faixa de varia-
o estudada dos fatores de inuncia.
6.9 Estudos de Estabilidade
A estabilidade dos analitos deve ser demonstrada
simulando as condies as quais o laboratrio submete as
amostras e os padres.
Os estudos de estabilidade podem ser realizados de
forma concorrente aos ensaios de rotina.
Admite-se um padro como estvel quando for ob-
servada uma degradao mxima de at 2%, em relao a
uma referncia recm-preparada analisada.
50
6.9.1 Estabilidade dos Analitos nas Amostras
O estudo visa a demonstrar a estabilidade dos anali-
tos nas matrizes no perodo entre o recebimento da amos-
tra e o inicio da anlise. Aplica-se s amostras de origem
animal (tecidos e urina), uma vez que para os medicamen-
tos e raes, a estabilidade do analito j deve ter sido rea-
lizada por ocasio do registro.
O perodo de tempo estudado deve ser superior ao
tempo mximo previsto de armazenamento para o incio
da anlise da amostra.
6.9.2 Estabilidade dos Analitos nas Solues Padro
A estabilidade das solues padro deve ser demons-
trada sempre que no houver alguma referncia prvia para
o seu prazo de validade.
51
A estabilidade da soluo padro deve ser estudada
nas condies e no perodo de armazenamento nos quais a
soluo padro armazenada no laboratrio.
Recomenda-se comparar a resposta instrumental ge-
rada por uma soluo padro armazenada com a resposta
instrumental gerada por uma soluo padro recm prepa-
rada (a partir de um padro dentro do prazo de validade).
O estudo deve ser realizado em todos os tipos de so-
luo padro partindo da soluo padro estoque, passan-
do pela soluo padro intermediria, at a soluo padro
de trabalho.
Caso o estudo de estabilidade seja feito em uma so-
luo diluda, essa estabilidade pode ser considerada para
solues mais concentradas, desde que ambas sejam ar-
mazenadas sob mesmas condies.
52
7. Incerteza de Medio
A incerteza de medio um parmetro no nega-
tivo que caracteriza a disperso dos valores atribudos a
um mensurando, com base nas informaes utilizadas.
A incerteza nal do resultado de uma medio, re-
sultado de uma combinao das incertezas de mltiplas
fontes, chamada de Incerteza Padro Combinada, repre-
sentada pelo smbolo
c
(y). Onde y representa o mensu-
rando, o resultado analtico.
Em qumica analtica, para a maioria dos ns, deve-
-se usar uma incerteza expandida, U. A incerteza expan-
dida d um intervalo dentro do qual se cr encontrar-se o
valor do mensurando, com um maior grau de conana.
U obtido pela multiplicao da incerteza padro combi-
nada,
c
(y), por um fator de abrangncia k. A escolha do
fator k baseada na probabilidade de abrangncia deseja-
da e no grau de liberdade efetivo da incerteza combinada.
53
Para a maioria das aplicaes a probabilidade de
abrangncia de 95%, k 2.
7.1 Determinao da Incerteza Padro Combinada e
da Incerteza Expandida
Para se calcular a incerteza deve-se utilizar a me-
todologia Top-Down, considerando apenas as fontes de
incerteza principais: a incerteza de reprodutibilidade intra-
laboratorial,
repro
, a incerteza da recuperao,
recup
, e a
incerteza de calibrao do instrumento analtico,
calib
.
Para se calcular a incerteza, proceder da seguinte
forma:
1. Medir seis rplicas de amostra de MRC ou de matriz
branca forticada em cada um dos trs nveis de con-
centrao (baixa, mdia alta) da faixa de trabalho;
54
2. Calcular os desvios padro de reprodutibilidade in-
tralaboratorial s
repro,i
=
repro,i
, das concentraes das
replicatas em cada um dos trs nveis de concentra-
o. Essa uma estimao da incerteza do TipoA;
Se o resultado nal da concentrao for corrigido
pela recuperao, ento a incerteza da medio da corre-
o de recuperao,
rec,i
=(C
rec
), ser aproximada pela in-
certeza da reprodutibilidade intralaboratorial,
rec,i
=s
repro,i
.
Se uma faixa para a correo de recuperao, C
rec
,
ou para o fator de recuperao, f
rec
, permitida e o resulta-
do no corrigido pela recuperao, ento a incerteza da
recuperao feita por uma estimao do TipoB atravs
da Equao10 ou da Equao11, respectivamente.
(Equao 10)

rec
=
c
rec max
c
rec min
2 3

55
(Equao 11)
A incerteza da calibrao do instrumento analtico,

calib
depende dos valores da prpria concentrao do ana-
lito calculada (estimada, interpolada) na curva de calibra-
o, c
analCC
, das incertezas (desvios padro) do intercepto,
s
a
, e da inclinao, s
b
, assim como da covarincia entre
elas, cov(a,b). Esses trs ltimos valores so obtidos atra-
vs do mtodo dos mnimos quadrados ordinrio, MMQO,
ou ponderado, MMQP, conforme mostrado no Guia de Va-
lidao do PNCRC. Assim,
calib
dado pela Equao 12.

(Equao 12)

rec
=
2(f
rec max
f
rec min
)
3(f
rec max
+f
rec min
)

calib
(c
analCC
) =
s
2
(RI
anos
) /k + s
2
(a) +c
analCC
s
2
2
(b) +2c
analCC
cov(a,b)
b
2

56
Usando a Equao 13 calcula-se a incerteza pa-
dro combinada da concentrao do analito na amostra
de ensaio (c
anal
)
,
combinando-se as fontes de incerteza de
amostragem, de reprodutibilidade intra-laboratorial, de re-
cuperao e da calibrao do instrumento analtico:

(Equao 13)
Onde:
c
anal
a concentrao do analito na
amostra de ensaio;
c
analCC
a concentrao do analito in-
terpolada na curva de calibrao;


(c
anal
) =
amostragem
2
+
repro
2
+ (c
rec

rec
)
2
+ (c
calib

calib
)
2
=
= (c
anal
) =
amostragem
2
+
repro
2
+ (c
rec

rec
)
2
+
c
anal
c
analCC

calib






2

57

repro
a incerteza de reprodutibilidade
obtida dos dados de participao em
ensaios colaborativos (reprodutibilidade)
ou dos dados de preciso intermediria

precint
(ou reprodutibilidade intralabora-
torial), conforme sua disponibilidade;

calib
a incerteza devida a previso da
concentrao do analito na curva de ca-
librao;

ecup
a incerteza associada estima-
o ou com a faixa permitida da recu-
perao, conforme o resultado seja cor-
rigido ou no corrigido por ela, respec-
tivamente;

amostragem
a incerteza devida ao proces-
so de amostragem que leva amostra
que chega ao laboratrio. Ela a maior
fonte de incerteza do resultado analti-
58
co, mas em geral desconhecida. Nesse
caso assumir o valor zero e reportar que
a incerteza declarada no leva em consi-
derao a incerteza de amostragem;
c
calib
= c
anal
/c
analCC
o coeciente de sen-
sibilidade para a incerteza de calibrao
obtido da equao do mesurando escri-
ta como uma funo da concentrao
do analito interpolada na curva de cali-
brao. Esse coeciente de sensibilida-
de decorre do fato de que as unidades
de concentrao da curva de calibrao
podem no ser as mesmas do resulta-
do nal, assim como da existncia de
outras medies (massas, volumes, etc)
alm da resposta instrumental do ins-
trumento de medio analtica;
59
c
rec
o coeciente de sensibilidade as-
sociado ao fator de correo da recupe-
rao FC
rec
=1/f
rec
, e nesse caso igual
concentrao do analito no corrigida
pelo fator de recuperao, c
rec
= c
anal
.
Se na equao do mensurando for usa-
do uma correo de recuperao, C
rec
,
e no o fator de correo da recupera-
o, FC
recup
, esse coeciente de sensibili-
dade ser unitrio, c
rec
=1 em unidades
de c
anal
;
RI
amos
a resposta instrumental (absor-
vncia, rea de pico, tenso eltrica,
etc) para a soluo da amostra de en-
saio injetada no instrumento analtico;
K o nmero de replicatas independen-
tes de anlise da mesma amostra de en-
saio desde a extrao/abertura/digesto
60
da amostra de ensaio at sua leitura no
instrumento analtico.
Para se calcular a Incerteza Padro Combinada Ex-
pandida deve-se utilizar a Equao 14, abaixo:





U =u(c
anal
) k
(Equao 14)
Exemplo de Clculo de Incerteza
Consideremos o exemplo da anlise do metal cd-
mio em uma dada amostra por absoro atmica. Os da-
dos da curva de calibrao (ver Exemplo A.5 do Guia EU-
RACHEM de clculo de incerteza e tambm o Guia de
Validao do PNCRC) ajustados pelo MMQP levou aos se-
guintes valores para os parmetros da reta de calibrao:
=3,427610
-3
, s
a
=4,09010
-4
, b=2,55548810
-1
kg/mg,
s
b
=1,398410
-3
kg/mg e cov(a,b)=-4,110910
-7
kg/mg.
61
A faixa para o fator de recuperao permitida para
o ensaio de 90% a 110%, ou f
recmin
=0,9 e f
recmax
=1,1.
Uma dada amostra foi analisada duas vezes K=2,
dando uma resposta instrumental mdia RI
amos
= 0,19,
com desvio padro de s(RI
amos
)=3,527110
-3
.

A concentrao do analito na curva de calibrao ,
portanto, c
analCC
=0,73009mg/kg.
A soluo de abertura da amostra passou por uma
pr-concentrao antes de sua leitura na absoro atmi-
ca, tal que 100ml da soluo de abertura foi evaporada
at atingir 10mL. Logo houve um fator de pr-concen-
trao de 10vezes. Logo a concentrao do analito na
amostra de ensaio c
anal
=0,07009mg/mol. Nesse nvel
de concentrao do analito na amostra, a incerteza de re-
produtibilidade interna do procedimento estimada em
u
repro
=s
repro
=3,6504x10
-3
mg/kg.
62
Com base nesses dados obtemos que a incer-
teza combinada da concentrao de Cd na amostra
u
c
(c
anal
)=0,005669mg/kg, conforme mostrado nos clcu-
los a seguir (notar a coerncia das unidades de medio).
Esse resultado insignicantemente (0,35%) menor que o
valor u
c
(c
anal
)=0,005689mg/kg encontrado levando em
conta todas as demais incertezas de pesagem de medio
de volume em um clculo de incerteza pela metodologia
Bottom-Up ou ISO GUM.
Calculando a concentrao do analito na amostra:



c
anal
= c
analCC

1
10
=
0,19 3,4276 10
3
2,555488 10
1
kg /mg
0,1 =
= 0,73009mg kg 0,1 = 0,073009mg kg
Usando a Equao11:

rec
=
2 (1,1 09)
3 (1,1+ 0,9)
2
=
2 0,2
3 2
2
= 0,05773
63
Usando a Equao12:
Usando a Equao 13:

calib
=
(3,527110
3
)
2
2 + (4,090 10
4
)
2
+ (0,73009)
2
...
(2,555488 10
1
)
2



=
... (1,3984 10
3
)
2
+2 0,73009 (4,1110
7
)
(2,555488 10
1
)
2



1
2
= (1,04738310
4
mg
2
kg
2
)
1
2
=1,023417mg kg


(c
anal
) = (0mg kg)
2
{
+ (3,6504 10
3
mg kg)
2
+ ...
(0,073009mg kg 0,057735)
2
+
+
0,073009mg kg
0,73009mg kg


1,0234 10
2
mg kg)
2



1
2
=
(0mg kg)
2
{
+ (3,6504 10
3
mg kg)
2
+ (4,2152 10
3
mg kg)
2
...
... + (1,0234 10
3
mg kg)
2
}
1
2
=
0mg
2
kg
2
+1,3325 10
5
mg
2
kg
2
+1,7768 10
5
mg
2
kg
2
...
{
+1,047310
6
mg
2
kg
2
}
1
2
=
3,214
{
10
5
mg
2
kg
2
}
1
2
= 0,0056692mg kg
64
7.2 Reportando a Incerteza Expandida
O resultado x deve ser expresso juntamente com a
incerteza expanda U, calculada usando um fator de abran-
gncia k=2.
Desta forma, o resultado deve ser expresso da se-
guinte forma: (Resultado): (x U) (unidades).
Periodicamente, recomenda-se que a incerteza seja
recalculada e reavaliada por intermdio do uso das ACQs.


(c
anal
) = (0mg kg)
2
{
+ (3,6504 10
3
mg kg)
2
+ ...
(0,073009mg kg 0,057735)
2
+
+
0,073009mg kg
0,73009mg kg


1,0234 10
2
mg kg)
2



1
2
=
(0mg kg)
2
{
+ (3,6504 10
3
mg kg)
2
+ (4,2152 10
3
mg kg)
2
...
... + (1,0234 10
3
mg kg)
2
}
1
2
=
0mg
2
kg
2
+1,3325 10
5
mg
2
kg
2
+1,7768 10
5
mg
2
kg
2
...
{
+1,047310
6
mg
2
kg
2
}
1
2
=
3,214
{
10
5
mg
2
kg
2
}
1
2
= 0,0056692mg kg
65
8. Verifcao de Desempenho de Proce-
dimentos Normalizados (Farmacopicos e ou-
tros ofcializados pelo Mapa)
A vericao de desempenho de um determina-
do procedimento normalizado consiste em um processo
experimental documentado que objetiva comprovar se o
procedimento avaliado opera adequadamente dentro das
condies analtica do laboratrio.
A vericao de desempenho de um procedimento
normalizado uma validao simplicada.
8.1 Aplicao e Requisitos Mnimos
A vericao de desempenho aplicvel aos proce-
dimentos normalizados desde que no seja feita nenhu-
ma alterao nos procedimentos, especicaes e tcnica
analtica descritas na norma.
Dentro deste contexto, a avaliao de desempenho
consiste em determinar basicamente:
66
I. Veracidade/recuperao;
II. Preciso.
Esses dois parmetros de desempenho avaliados
devero atender aos critrios de aceitao estabelecidos
neste Guia.
Na determinao da veracidade/recuperao e da
preciso, a curva de calibrao dever conter no mnimo
cinco nveis de concentrao. A veracidade/recuperao e
a preciso devem ser determinadas em trs nveis de con-
centrao (baixa; mdia; alta), cada nvel deve ser analisa-
do, no mnimo, em seis rplicas.
9. Rotina Analtica: Curvas de Calibrao,
Curva Adio-Padro e Amostras de Controle
de Qualidade (ACQs)
Todos os procedimentos adotados na rotina analti-
ca devero ser respaldados pelos estudos de validao do
procedimento.
67
A curva de calibrao ou a curva de adio-padro
utilizada na rotina deve conter pelo menos cinco nveis,
devendo ser elaborada conforme estudada na validao
do procedimento.
Os valores de veracidade/recuperao obtidos pe-
las ACQs devem estar dentro dos limites estabelecidos
na Tabela 4 e na Tabela 3, quando aplicvel, de acordo
com as respectivas concentraes. Caso contrrio, a corri-
da analtica dever ser invalidada.
Produtos com a concentrao j determinada ou
padres internos podem ser utilizados como ACQs.
Toda batelada analtica deve obrigatoriamente ser
adicionada de ACQs, preferencialmente, os nveis de con-
centrao das ACQs devem, periodicamente, ser alterna-
dos entre baixa, mdia e alta concentrao.
O laboratrio deve, obrigatoriamente, fazer uso de
cartas controle para monitorar as ACQs.
68
Adicionalmente, a cada seis meses, os laboratrios
devero realizar uma vericao de desempenho (internal
check samples) por intermdio de amostras rigorosamen-
te elaboradas e distribudas para serem analisadas junto
com as amostras da rotina analtica. O objetivo estabe-
lecer um controle interno e independente, ou seja, sem o
conhecimento prvio dos analistas diretamente envolvidos
nas anlises.
10. Expresso do Resultado Final
Os resultados das anlises de amostras de ensaio de
rotina oriundos de curvas de calibrao obtidas a partir de
padres de calibrao de analitos puros em soluo, ou a
partir de extrato de matriz branca forticado com o anali-
to, devem ser corrigidos pela recuperao obtidos naquela
batelada de anlises, no nvel de concentrao mais prxi-
mo do resultado da amostra analisada.
69
A correo de recuperao ou o fator de recupera-
o mdios, da batelada de anlises no nvel de concen-
trao mais prximo do resultado da amostra de ensaio,
dever sempre ser relatado no certicado ocial de ensaio,
juntamente com o resultado da medio.
O resultado nal deve ser reportado junto com a
incerteza da medio.
71
11. Referncias Bibliogrfcas
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Validao e
Controle de
Qualidade
Analtica
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para Alimentao Animal e
Medicamentos Veterinrios
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Pecuria e Abastecimento
CGAL/SDA
9 788579 910531
ISBN 978-857991-053-1