08/08/2014

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Parasitologia - tcnicas
Prof Janio Lopes
www.bioconcursos.com
Mtodos
Direto:
i. Encontrar o parasita
em um dos seus
estgios evolutivos, na
amostra do paciente
ii. Multiplicao do
parasita por meio de
cultura, in vitro ou
in vivo.,
possibilitando a
demonstrao do
mesmo.
Indireto:
I. Reaes imunolgicas
para pesquisa, in
vitro de anticorpos
contra o parasita
(antgenos)
II. Reaes intradermicas,
pesquisando a
resposta imune
(adaptativa) do prprio
paciente.

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Indiretos
Reaes imunolgicas
Elisa
Imunofluorescncia
Fixao de complemento
Aglutinao
Hemaglutinao
Atomatizado
Elisa
Nefelometria
Turbidimetria
Reaes intradermicas
PPD (tuberculina)
Montenegro (Leishmania)
til para a forma cutnea e
mucocutnea e insatisfatria
para a forma visceral.
Toxoplasmina
Shistosomina


D
i
r
e
t
o
s

Amostras:
Fecais (EPF, MIF ou EPF 3 amostras)
5 a 10 g fezes formadas em frasco de boca larga, limpo e
seco.
Pesquisa de trofozotos necessita de fezes liquefeitas.
Transporte
sob refrigerao (5 a 10 C) at 3 dia
Sem refrigerao em at 2 horas aps a coleta.
Conservantes:
MIF (mercuriocromo, iodo e formaldedo)
Formalina 5%
Formol 10%
Corantes:
Lugol, hematoxilina frrica, Romanowsky (gota espessa)


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A
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o
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c
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s

Exames e mtodos
EXAMES
Macroscpicos:
consistncia, odor,
elementos anormais (muco,
sangue) vermes adultos.
Microscpicos visualiza:
Ovos ou larvas de
helmintos
Cistos, trofozotos ou
oocistos de protozorios.
Qualitativo ou quantitativo
(Stoll e Kato-Katz)
MTODOS
Sedimentao espontnea:
Hoffman, Pons e Janer
(Lutz).
Permite o encontro de
ovos, larvas (Helmintos) e
cistos (protozorio)
gua de torneira
Shistosoma mansoni
No o ideal pra pesquisa de
cistos
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HPJ
Clice de
sedimentao
Gase e peneira
(fina)
Basto de vidro
gua de
torneira
30 a 60 minutos
Exame direto ( fresco):
2 ou trs gotas de salina em lmina
Com a ponta de uma palito tocar vrios pontos das fezes.
Fazer o esfregao e examinar
Baixa sensibilidade
til para pesquisa de trofozotos de protozorios em fezes
diarricas recm- emitidas.
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Sedimentao por centrifugao
De BLAGG
Eter sufrico
1500 rpm por 1 minuto
RITCHIE
Formol-ter
Material colhido em formol 10%
Centrifugao-flutuao:
FAUST
Sulfato de zinco 33% (densidade 1,200)
Diluir (H2O), centrifugar e descartar o sobrenadante (3 a 5x). A 1800 rpm por 3
ou 2500 rpm por 1.
Acrescentar o sulfato de zinco e centrifugar.
Analisar a pelcula superficial
Analisado imediatamente pois o zinco pode deformar a forma parasitria.
Em 1938 foi descrito como mtodo para concentrao de ovos, larvas e cistos.
Flutuao:
WILLIS
Soluo saturada de acar e sal (NaCl)
Diluir na soluo e encher o frasco at a
tampa.
Colocar uma lmina e deixar em repouso
por 5
Virar a lmina rapidamente e analisar no
microscpio
Termohidrotropismo:
Baermann-Moraes
Rugai (prpria lata)
Envolver as fezes em gase e colocar no funil
gua a 45C em contato com as fezes
Pesquisa de larvas de (Strongyloides
stercoralis)
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Mtodo da Fita adesiva (swab anal)
GRAHAM
Tubo de ensaio com fita adesiva voltada
para fora.
Encostar o lado adesivo na regio
perianal
Coleta ao amanhecer antes da higiene do
paciente.
Indicada para pesquisa de ovos de
Enterobius vermicularis.

Gota espessa
Pesquisa de hematozorios
Amostra deve ser colhida no
intervalo entre as crises de febre,
exceto na suspeita de Plasmodium
faciparum que no pique da febre.
2 ou 3 gotas pra fazer o esfregao
(gota espessa), desemoglobinar com
H20 ou usar um corante aquoso.
Corante hematolgico


Mtodos quantitativos
Stoll
Frasco de Stoll, erlenmeyer com
duas graduaes (56 e 60 ml)
Completar at a marca de 56ml
com NaOH.
Completar com fezes at chegar
na marca do 60ml (1/15)
Colocar perolas de vidro , fechar
o frasco e agitar vigorosamente.
Deixar em repouso por 12 a 16
horas, ou no.
Retirar 0,15ml, colocar em
lmina e lamnula contar os ovos
e multiplicar por 100.
O resultado ser liberado por g
de fezes

Kato Katz
Soluo verde malaquita
Conserva e clarifica as formas
Lamina de papel celofane
Tela ou malha (metlica ou nylon)
Transferir o material para um
carto plstico com orifcio de
6mm (42mg) e lmina.
Cobrir a lmina com o papel
celofane e comprimir
N de ovos encontrados X 23 =
Quantidade de ovos por grama de
fezes.