Universidade Federal de Sergipe

Centro de Cincias Biolgicas e da Sade

Departamento de Morfologia
Curso de Farmcia

Tcnicas Histolgicas

Trabalho apresentado

disciplina
de
Histologia, curso de
Farmcia, 2009/1, na
Universidade Federal
de Sergipe, UFS.

Por: Antonio Marques Filho

So Cristvo
2009

SUMRIO

INTRODUO..............................................................................................................02
MICROSCOPIA.............................................................................................................03
Microscopia ptica.........................................................................................03
Microscopia Eltrica.......................................................................................05
TCNICAS HISTOLGICAS.......................................................................................08
Confeco de lminas histolgicas.................................................................08
Coleta do material...........................................................................................08
Fixao...........................................................................................................08
Incluso..........................................................................................................09
Microtomia....................................................................................................09
Montagem das lminas histolgicas..............................................................10
Tcnica de Criomicrotomia (= microtomia por congelamento).....................................10
Tcnicas de Colorao de Cortes Histolgicos..............................................................10
Tcnicas Utilizadas para Confeco de Lminas sseas...............................................13
Tcnicas histoqumicas...................................................................................................14
Tcnica da contrastao (microscopia eletrnica)..........................................................14
Tcnica de imuno-histoqumica......................................................................................15
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS...........................................................................16

INTRODUO

A Histologia o estudo da estrutura do material biolgico e das maneiras como

os seus componentes se inter-relacionam, tanto estrutural quanto
funcionalmente. O estudo da histologia se iniciou com o desenvolvimento de
microscpios simples e de tcnicas para preparo de material biolgico,
tornando-o adequado para exame.
Os primeiros histologistas descobriram muito sobre a estrutura do material
biolgico, estabelecendo a teoria celular da estrutura dos organismos vivos,
onde a clula a unidade bsica da arquitetura da maioria dos materiais
biolgicos.
A histologia nasceu com os primeiros estudiosos que se utilizaram do
microscpio: Robert. Hook, Malpighi, Graw, Ham, Fontana e outros, muito
antes que Meyer (1819) desse esse nome cincia que descreve os tecidos
animais e vegetais.
A noo de "tecido" foi, contudo, introduzida por Xavier Bichat sem que este
anatomista se tivesse utilizado do microscpio. A anatomia estuda os tecidos,
isto , as agregaes de clulas que tm a mesma forma e a mesma funo.
Uma particular especializao da histologia a citologia, considerada a cincia
das clulas. Estuda ela a clula em si, a qual constitui, em definitivo, a base
das cincias biolgicas, porque a clula o elemento fundamental de todos os
seres vivos.
Citologia e histologia no estudam somente a estrutura da clula e dos tecidos,
mas tambm as relaes entre a estrutura e a funo, e, portanto, se integram
com a fisiologia, com a fsica e com a qumica.

MICROSCOPIA
As tcnicas e os mtodos empregues no estudo da clula tm evoludo e
diversificado desde a inveno do microscpio, no sc. XVII, por Antoine
Leeuwenhoek e Robert Hook, antes mesmo, alis, de ter sido estabelecido o
conceito de clula. Foi, com efeito, atravs da explorao das potencialidades
deste recm inventado aparelho ptico que diversos naturalistas convergiram
para a concepo de que todos os seres vivos, plantas e animais, so
constitudos por unidades morfolgicas e funcionais, que designaram por
clulas.
O estudo de preparaes citolgicas ou histolgicas exige sistemas de
observao adequados, que permitem observar as estruturas. Para essa
finalidade o aparelho mais comumente usado o microscpio ptico que utiliza
a luz transmitida. J o microscpio eletrnico, que utiliza eltrons ao invs de
feixes luminosos, o aparelho mais para estudos de ultra-estrutura.
Os mtodos de ensino em Biologia Celular e dos Tecidos baseiam-se
principalmente no estudo das estruturas e processos celulares sob as
microscopias de luz (ML) e eletrnica (ME), permitindo o reconhecimento da
clula como um componente dinmico e participante do metabolismo corporal.
Basicamente, estes estudos utilizam como ferramentas, lminas com
coloraes histolgicas e histoqumicas, para o estudo microscopia de luz e
telas de cobre contrastadas por metais pesados, para o estudo microscopia
eltrica (de transmisso, de varredura, etc.).
Para se usar o microscpio com eficincia preciso que ele seja manipulado
de modo a reder o mximo de sua capacidade resolutiva, isto que produza a
imagem mais ntida possvel.

Microscopia ptica

microscopia ptica, mais propriamente designada por microscopia fotnica,

seguiu-se a inveno de outras microscopias, nomeadamente da microscopia
eletrnica, e de tcnicas complementares, como a Histologia, que permitiram
prosseguir e aprofundar o estudo da arquitetura estrutural da clula quase at
ao nvel macromolecular.
O microscpio fotnico comum, tambm designado por microscpio de cmara
clara, um sistema ptico capaz de fornecer, de um objeto, uma imagem
ampliada, permitindo a observao de detalhes invisveis a olho nu.
constitudo basicamente por dois conjuntos de lentes: o conjunto objetiva e o
conjunto ocular. A objetiva d do objeto AB uma imagem real A'B', ampliada e
invertida.

A ampliao da objetiva, Aob, dada pela frmula:

Aob = AB/AB
A ampliao uma das caractersticas pticas essenciais da objetiva. A ocular,
por sua vez, fornece de AB uma imagem virtual AB muito afastada, mas que,
atravs do cristalino, se projeta na retina do globo ocular. A ampliao da ocular
funo da distncia focal (foc) em milmetros:
Aoc = 250/foc
Entre outras, destacam-se, nos microscpios, trs caractersticas principais: a
ampliao, a abertura numrica e o poder de resoluo.
Simultaneamente, foram surgindo outras tcnicas analticas, umas que
fracionam a clula permitindo isolar por centrifugao alguns dos seus
componentes; outras que descem ao nvel molecular e perscrutam a
composio e o funcionamento da maquinaria qumica subjacente vida.

Microscpio fotnico e esquema ptico de formao de imagem

Microscopia Eltrica

O desenvolvimento concomitante da microscopia eletrnica e da melhoria nas

tcnicas de preparao dos tecidos ampliaram consideravelmente o campo de
estudo da histologia, pois o microscpio eletrnico aproximadamente 1000
vezes mais poderoso que o microscpio ptico.
Existem vrios tipos de microscpios eletrnicos. Nos reteremos a descrio do
microscpio eletrnico de transmisso (MET) e do microscpio eletrnico de
varredura (MEV).
A diferena bsica entre as duas modalidades de microscopia, consiste no fato
de na primeira, a imagem ser produzida por ftons e na segunda, por eltrons.
Da decorrem necessariamente, conseqncias, quer a nvel de concepo
fsica dos aparelhos, quer a nvel da preparao do material, quer a nvel da
natureza da imagem e ou ainda da performance da tcnica.
o Microscpio Eletrnico de Transmisso (MET)
O alto poder de resoluo do microscpio eletrnico de transmisso,
juntamente com o grande aumento, permitem a obteno de imagens com uma
grande riqueza de detalhes.
As imagens no microscpio eletrnico de transmisso so formadas pela
excitao de uma tela fluorescente ou um filme fotogrfico por eltrons. Esses
eltrons so produzidos graas ao aquecimento de um filamento no vcuo.
Essas partculas so aceleradas devido a uma diferena de potencial de 60 a
100 Kv existentes entre o ctodo e o nodo. Esse feixe defletido por lentes
eletromagnticas, de maneira parecida ao que acontece com a luz no
microscpio ptico. O condensador focaliza o feixe de eltrons no plano do
objeto, e a objetiva forma sua imagem. Esta imagem ainda ampliada por uma
ou duas lentes que a projetam numa tela fluorescente ou filme fotogrfico.
A espessura dos cortes precisa estar entre 20 a 100 nm. Para isso,
desenvolveram-se mtodos especiais de microtomia, que consistem em fixar
os tecidos em aldedo glutrico e tetrxido de smio, desidratar e incluir em
resinas duras a base de Epxi, como, por exemplo, as resinas Epon e Araldite.
Os cortes so feitos em ultramicrtomos, nos quais so usados navalhas de
vidro ou diamante.

Trajeto dos eltrons (em amarelo) no microscpio eletrnico de

transmisso
Ento, simplificadamente, o funcionamento do microscpio eletrnico de
transmisso se baseia na propriedade que as estruturas tm de desviar ou
deixar passar por si os eltrons.
As estruturas que desviam os eltrons so chamadas de eltrons densas e
aparecem escuras na imagem, j que os eltrons no chegam at a tela
fluorescente. J as estruturas que so atravessadas pelos eltrons (eltron
lcidas) aparecem claras na imagem, pois os eltrons que incidiram sobre a
estrutura conseguem excitar a tela fluorescente ou o filme fotogrfico que fica
abaixo do corte.
o Microscpio Eletrnico de Varredura (MEV)
No microscpio eletrnico de varredura a imagem formada por eltrons
refletidos sobre o objeto. Entre a lente eletromagntica e o objeto, interposta
uma bobina de varredura que provoca um desvio do feixe de eltrons, de tal
modo que o mesmo vai incidir sobre o objeto ponto a ponto, numa seqncia
determinada.
O objeto no se deixa atravessar pelo feixe devido sua espessura e a uma
pelcula feita por um jato de material refletor, como ouro, por exemplo. Desse
modo, o feixe de eltrons que incide sobre o objeto (chamado feixe primrio)
sofre reflexes originando eltrons secundrios, que so captados por
detectores especiais, que geram um sinal eltrico transferido para um monitor
de vdeo, formando uma imagem tridimensional da superfcie da estrutura.

Trajeto dos eltrons no microscpio eletrnico de varrimento

Microscpio eletrnico de varrimento

TCNICAS HISTOLGICAS
A correta observao do material biolgico, em microscopia ptica, implica uma
srie de procedimentos tcnicos prvios, que a seguir se descrevem
sumariamente. Estes procedimentos, designam-se genericamente por tcnicas
histolgicas.
A tcnica histolgica visa preparao dos tecidos destinados ao estudado
microscopia de luz. O exame ao microscpio feito geralmente por luz
transmitida, o que significa que a luz deve atravessar o objeto a ser examinado.
Assim, necessria a obteno de fragmentos dos tecidos que sero
coletados em lminas muito finas e transparentes.
Muitas so as tcnicas utilizadas em histologia. Algumas tcnicas
freqentemente so utilizadas em rotinas de laboratrios que proporcionam a
visualizao das microestruturas dos tecidos.
o Confeco de Lminas Histolgicas
Para a anlise sob microscopia ptica necessria a confeco de lminas
delgadas dos tecidos que formam os rgos. Estas lminas podem ser
permanentes ou provisrias.
o Coleta do Material
Partes de rgos so retiradas com o auxlio de um bisturi, pina ou lmina de
barbear. No indicada a extrao de pores grandes, uma vez que o
objetivo final a obteno de uma camada fina que possa ser analisada em um
microscpio ptico.
o Fixao do material
Esta etapa consiste na utilizao de procedimentos fsicos ou qumicos para
imobilizar as substncias constituintes das clulas e dos tecidos, fornecendo
maior resistncia para suportar as demais etapas. Alm disso, os fixadores
retardam os efeitos pos-mortem do tecido, mantendo sua arquitetura normal.
Os agentes fixadores mais utilizados so o formol tamponado e o lquido de
Bouin. Ambos fixam as protenas evitando sua degradao.
O formol, por ser mais acessvel e de uso simples, o fixador mais utilizado
nas tcnicas histolgicas. Contudo, seus resultados geralmente no so
satisfatrios. Por essa razo recomendada a dissoluo de formol em tampo
fosfatado (Junqueira e Junqueira, 1983).
O tempo de fixao depender do tamanho do fragmento do tecido, podendo
variar entre 06 e 24h. recomendado que, sempre que possvel, no
ultrapasse a 3 mm de espessura.

o Incluso
Este procedimento consiste na impregnao do tecido com uma substncia de
consistncia firme que permita, posteriormente, seccion-lo em camadas
delgadas. Pelo fcil manuseio e bons resultados, a parafina a mais utilizada
neste procedimento. Como ela no miscvel em gua, a primeira etapa da
incluso compreende a desidratao, quando ocorre a retirada da gua dos
tecidos e a sua substituio por lcool.
A diafanizao a etapa seguinte, com a substituio do lcool, agora
presente nos tecidos, por xilol. Finalmente, na impregnao, ltima etapa, o
xilol substitudo por parafina fundida a 60 em pequenos blocos. Neste
momento a catalogao do bloco importante para a posterior identificao da
pea.
o Microtomia
Esta etapa consiste, basicamente, em utilizar um micrtomo para obter cortes
sucessivos, delgados e uniformes, a partir dos blocos de parafina com as
peas includas. Este aparelho formado por uma lmina (fixa ou descartvel)
de ao, afiada, e um brao ao qual se prende o bloco e que se desloca
verticalmente.

Micrtomo (tipo rotativo) e operao de corte

difcil obter cortes abaixo de 3 a 4 micrmetros de espessura dos materiais

includos em parafina. De um modo geral, so obtidos cortes entre 5 e 7
micrmetros.

o Montagem das lminas histolgicas

As fitas obtidas a partir do micrtomo so transferidas para um banho-maria,
com o auxlio de uma pina, para serem distendidas (Fig. 1 B). A gua deve
estar entre 3 e 8 abaixo do ponto de fuso da parafina utilizada.
Nesta etapa, so retiradas as dobras e evitadas as bolhas abaixo da fita. Aps
a distenso, os cortes so separados individualmente ou em grupos, conforme
a convenincia, utilizando se lminas de vidro previamente limpas com
detergente, estocadas em lcool 80% e previamente secas. Antes da utilizao
das lminas, necessrio revestir suas superfcies com uma fina camada de
albumina para facilitar a adeso da pea.
Os cortes obtidos podem ser transferidos, inicialmente, para uma estufa onde
ficam alguns minutos (no mais que dez minutos) para posteriormente serem
colocados em um suporte inclinado. Finalmente, os cortes devem ser
depositados em uma estufa a 60 para secagem entre uma e 24 horas.

Tcnica de Criomicrotomia (= Microtomia por Congelamento)

A tcnica descrita acima, sem dvida, a mais utilizada. Contudo, em alguns

casos, esta tcnica contra-indicada, como, por exemplo, no estudo da
distribuio dos lipdios, em tcnicas histoqumicas avanadas ou quando so
necessrios cortes urgentes, como em exames patolgicos. Nestes casos, os
tecidos so endurecidos atravs do congelamento. Os aparelhos utilizados
para os cortes podem ser de dois tipos: micrtomos de congelamento ou
criostatos (Junqueira e Junqueira, 1983).
O criostato um aparelho mais aperfeioado que o anterior. Permite a
obteno de cortes muito mais finos de tecidos no fixados (at dois
micrmetros), facilitando a visualizao das clulas (Junqueira e Junqueira,
1983).

Tcnicas de Colorao de Cortes Histolgicos

A colorao consiste numa etapa muito importante para a visualizao das

estruturas do tecido. Normalmente so utilizados corantes hidrossolveis,
sendo necessrio, deste modo, a remoo da parafina da pea que foi
preparada nas etapas descritas anteriormente e que permanece na lmina de
vidro.
Existem muitos tipos de corantes, mas de um modo geral podem ser
agrupados em trs classes distintas (Gartner e Hiatt, 1999):
o Corantes que diferenciam os componentes cidos e bsicos das clulas;
o Corantes especializados que diferenciam os componentes fibrosos da
matriz extracelular;
o Sais metlicos que precipitam nos tecidos.
10

Os corantes mais utilizados nos procedimentos histolgicos so a Hematoxilina

e a Eosina (HE).
A Hematoxilina uma base que cora, preferencialmente, componentes cidos
das clulas em um tom azulado escuro. Como os componentes cidos mais
abundantes so o DNA e o RNA, tanto o ncleo, quanto certas partes do
citoplasma, se tornam azulados. Esses componentes so chamados de
basfilos.
A Eosina, ao contrrio, um cido que cora as estruturas bsicas da clula de
rosa. Estas estruturas so abundantes no citoplasma e so chamadas de
acidfilas (Gartner e Hiatt, 1999).
Outros corantes so tambm utilizados em procedimentos de rotina em
laboratrios, tais como (Gartner e Hiatt, 1999):
o Tricrmico de Masson - cora o ncleo de azul escuro, o citoplasma, a
queratina e o msculo de vermelho e o mucignio e o colgeno de azul
claro;
o Orcena - cora as fibras elsticas de marrom;
o Weigert - cora as fibras elsticas de azul;
o Prata - cora as fibras reticulares de preto;
o Hematoxilina frrica - cora as estriaes dos msculos, os ncleos e os
eritrcitos de preto;
o cido peridico reativo de Schiff cora as molculas ricas em glicognio
e carboidrato de magenta;
o Wright e Giemsa - especializado em clulas sangneas, cora de rosa os
eritrcitos e os grnulos eosinfilos, de prpura o ncleo dos leuccitos
e grnulos basfilos e de azul o citoplasma dos moncitos e dos
linfcitos.
Para corar peas includas em parafina necessria a retirada da parafina e a
hidratao da pea.
Este procedimento realizado a partir de uma seqncia de banhos em xilol,
lcool e gua, inversamente ao procedimento executado na etapa de incluso.
Aps a hidratao, os cortes so corados de acordo com o procedimento mais
apropriado para a anlise que ser realizada posteriormente.
Aqui sero abordadas as etapas do mtodo da hematoxilina-eosina, por ser o
mais utilizado e por ter um resultado final satisfatrio.

11

o Tcnica da hematoxilina-eosina (HE)

a) Material necessrio para a soluo de Hematoxilina de Harris (Junqueira e
Junqueira, 1983):
- Hematoxilina ______________________ 2,5g
- lcool 100% _____________________ 25ml
- Almen de amnio ou potssio ______ 50g
- gua destilada ___________________ 500ml
- xido vermelho de mercrio _______ 1,25g
- cido actico _____________________ 20ml
Inicialmente, a Hematoxilina deve ser dissolvida no lcool e o almen na gua
destilada (previamente aquecida). Posteriormente, as duas solues devem ser
misturadas e aquecidas at a fervura.
O xido de mercrio adicionado soluo que deve ser resfriada,
mergulhando-se o frasco em gua fria. O cido actico ento colocado na
soluo fria para finalmente ser filtrada. O prazo de envelhecimento desta
soluo entre dois e trs meses. A partir desta data o corante perde suas
propriedades e no reage adequadamente com o tecido.
b) Material necessrio para a Eosina (Junqueira e Junqueira, 1983):
- Eosina solvel em gua _______________ 1g
- gua destilada ___________________ 100ml
c) Procedimentos para a colorao:
Embora as etapas possam ser definidas, o tempo em cada fase depende da
qualidade e da idade das solues dos corantes. Deste modo, poder ser
observada nas etapas abaixo uma variao muito grande em relao ao tempo
que pode ser ajustado durante o procedimento no laboratrio.
De acordo com Junqueira e Junqueira (1983), as etapas so:
1) desparafinar e hidratar os cortes;
2) corar em hematoxilina entre 5 e 15min;
3) lavar em gua corrente por 10min;
4) corar em eosina entre 1 e 10min;
5) lavar em gua e desidratar em lcool 70% rapidamente;
6) diafanizar e montar em resina.

12

d) Montagem Final da Lmina:

Este processo consiste em depositar uma gota de resina lquida sobre o corte
que est aderido lmina de vidro e cobri-lo com uma lamnula. Nesta etapa
deve-se evitar as bolhas de ar que se formam na resina durante a colocao da
lamnula. Finalmente a lmina catalogada.
A resina depois de seca garantir uma lmina permanente que poder durar
anos.

Tcnicas Utilizadas para Confeco de Lminas sseas

Para a confeco de lminas sseas so utilizadas duas tcnicas: a primeira

consiste no desgaste do osso atravs do polimento com lixa.
o Confeco de lminas sseas por desgaste
Inicialmente, retirado um fragmento do osso a ser analisado. Esse fragmento
colado com blsamo do Canad sobre uma superfcie de madeira plana. Em
um bloco de madeira colada uma lixa de granulometria grossa para o
primeiro polimento.
O polimento final feito com uma lixa mais fina, com movimentos firmes e no
mesmo sentido, at que se tenha obtido uma camada de osso delgada. O osso
retirado da madeira com xilol e aderido superfcie da lmina de vidro. Sobre
ele colocada uma lamnula e fixada com resina (Amaral et al. 1994; Timm,
1996 a, b).
o Confeco de lminas sseas por descalcificao
A segunda tcnica implica na descalcificao do osso.
Este procedimento tem por objetivo retirar o fosfato de clcio do tecido sseo
para que possa ser seccionado posteriormente. A descalcificao pode ser feita
atravs da imerso em cidos ou compostos quelantes.
Os quelantes capturam os ons metlicos (entre os quais o clcio), removendoos dos tecidos com um mnimo de alterao. Embora de ao mais lenta,
agridem menos o tecido, e so mais utilizados nos procedimentos histolgicos.
Aps a fixao, o material lavado para retirar o excesso de fixador e
transferido para um descalcificador. No recomendado utilizar fragmentos
maiores do que 3 mm de dimetro. Devem-se usar, no mnimo, 40 vezes o
volume do tecido, agitando o frasco vrias vezes ao dia e trocando o
descalcificador a cada 2 ou 3 dias.
Os tecidos descalcificados no devem ser transferidos diretamente ao lcool
70%, e sim, lavados em gua corrente por algumas horas.
Para a confeco das lminas histolgicas de ossos descalcificados seguemse as etapas rotineiras citadas anteriormente.
13

Tcnicas Histoqumicas

A histoqumica uma tcnica histolgica que tem por objetivo a identificao da

natureza qumica de constituintes celulares.
Consiste na colorao especfica desses constituintes, recorrendo
basicamente a substncias que, reagindo com os componentes celulares, do
origem a produtos corados.
Esta tcnica contrasta com a colorao histolgica comum, acima referida, na
medida em que esta ltima se baseia na absoro, pelas estruturas, de
substncias coradas (os corantes), enquanto que na histoqumica, as cores so
propriedades de produtos que se formam in sito.
Um dos exemplos clssicos o mtodo de Feulgen que se destina a identificar
o DNA.
O princpio da reao baseia-se no fato de que o DNA, aps hidrlise cida
moderada, quando tratado pelo reagente de Schiff , dar lugar formao de
um produto que se cora em vermelho arroxeado.
So processos de colorao que conferem especificidade, pois expem os
grupamentos e radicais qumicos que compem as estruturas, para que os
mesmos sejam especificamente evidenciados pelos corantes histoqumicos.
Ex: carboidratos, cidos nuclicos, aminocidos, ons, lipdeos, etc.
- Localizao de cidos nuclicos: mtodo de Feulgen.
- Localizao de carboidratos: tcnica do PAS (Periodic Acid-Schiff).

Tcnica da Contrastao (Microscopia Eletrnica)

A microscopia eletrnica expe estruturas que ao selecionar a passagem de

eltrons pelas mesmas, tornam-se eltron-densas ou eltron-lcidas.
So duas as substncias contrastantes mais usualmente aplicadas para a
microscopia eletrnica: o acetato de uranila e o citrato de chumbo.

14

Tcnica de Imuno-Histoqumica (IHC)

As tcnicas de imuno-histoqumica (IHQ) detectam molculas (antgenos)

teciduais, sendo de grande valor nos diagnsticos antomo-patolgicos e na
investigao cientfica. O mecanismo bsico o reconhecimento do antgeno
por um anticorpo (Ac primrio) associado a diversos tipos de processos de
visualizao.
Atualmente h disponibilidade de grande nmero de anticorpos para uso em
tecidos fixados em formol e includos em blocos parafina, permitindo o estudo
de blocos arquivados por longos perodos.
A tcnica de IHQ mais usada a indireta, associada ao complexo avidinabiotina-enzima. O complexo formado pela ligao de uma molcula de
(strept) avidina com vrias de biotina associadas a uma enzima (peroxidase ou
fosfatase alcalina), que tem como funo a converso de um cromgeno
incolor em um produto final que pode conferir diversas cores aos antgenos
teciduais marcados. As cores mais comuns so a castanha (peroxidase+
diaminobenzidina-DAB) e a vermelha (fosfatase alcalina + fast red).
o Indicaes:
Em diversos casos necessrio utilizar o exame imuno-histoqumico,
procedimento sensvel de deteco molecular que pode auxiliar no diagnstico
de doenas inflamatrias, infecciosas e neoplasias, ou ainda fornecer dados
mais precisos e individualizados sobre o melhor tratamento e provvel
evoluo do cncer.
A imuno-histoqumica pode auxiliar em diversas situaes, tais como:
- Diagnstico de tumores indiferenciados;
- Diagnstico diferencial entre tumores e estados reacionais;
- Diagnstico de diversas doenas infecciosas;
- Determinao de fatores preditivos de neoplasias;
- Determinao de fatores prognsticos de neoplasias;
- Determinao / sugesto de stio primrio de adenocarcinoma;
- Determinao de tipo / subtipo de linfomas e leucemias.

15

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
JUNQUEIRA, L. C.; CARNEIRO, J. Histologia bsica. 8 ed. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 1995.
JUNQUEIRA, Luis Carlos U.; JUNQUEIRA, Luiza Maria M. S. Tcnicas
bsicas de citologia e histologia. So Paulo: Santos, 1983.
STEVENS, Alan; LOWE, James. Histologia. So Paulo: Manole, 1995.
BECAK, Willy. JORGE PAULETE. Tcnicas de citologia e histologia. Rio de
Janeiro: Livros Tcnicos e Cientficos, 1976.

16