Departamento de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos

Engenharia Bioqumica

Cintica Microbiana

Paulo Duarte Filho

Maio/2006

Hidrlise

Glicose

Piruvato

Produtos de Fermentao
( lactato, lcoois, cidos, etc.)

8 ATP

6 ATP

30 ATP
Ciclo de Krebs

Respirao Anaerbia
(CO2, SO42- , NO3-)

CO2

O2

Respirao Aerbia

Figura 1: Esquema simplificado de processos aerbios e anaerbios

 Processos aerbios: oxignio como aceptor final de eltrons; Processos anaerbios:

Fermentativos: Utilizam produtos da degradao do substrato. Anxicos: Utilizam compostos inorgnicos.

Rendimento Energtico
Processos aerbios > Processos anaerbios

Estudo Cintico

Processo obedece ao princpio de conservao da matria

A CH b Oc + B O + D N 4H H E C H O N + F C 2O G HO O + 2 a 2

SubstratoFonte de Nitrognio

Elementos minerais: Fsforo, enxofre, cobre, ccio, etc.

Sntese Manuteno

Mtodos para avaliao de crescimento de microrganismos

Fisiologia do microrganismo!

Mtodos Diretos Determinao da concentrao celular Contagem no microscpio; Contagens com cultura; Contagem eletrnica.
No se aplicam a m.o. filamentosos

Figura 2: Contagem em Cmara de Neubauer

Figura 3: Contagem de Clulas Viveis em placas

 Determinao da biomassa microbiana Matria seca; Medidas ticas.

Figura 4: Separao de clulas por filtrao

Mtodos Indiretos

Constituintes celulares (ATP, DNA, NADH); Dosagem de elementos do meio de cultura (substrato, consumo de O2 , propriedades

reolgicas do meio de cultura, entre outros.

Processo Fermentativo
Microrganismo Nutrientes Preparo do meio Esterilizao do meio Fermentador Controles Produto Resduo

Preparo do inculo

Ar

Esterilizao do ar

Recuperao do produto

Tratamento de efluente

Figura 5: Etapas de um processo fermentativo

Obteno de uma curva de crescimento para um M.O.

Figura 6: Processo para obteno de uma curva de crescimento

Curva de crescimento
Condies favorveis ao microrganismo

Figura 7: Curva tpica de crescimento bacteriano

 Fase lag
Rearranjo do sistema enzimtico (sntese de enzimas); Traumas fsicos (choque trmico, radiao, entre outros); Traumas qumicos (produtos txicos, meio de cultura). No h variao da concentrao de biomassa no tempo, portanto:

X = cte = Xo

Xo = concentrao celular no tempo t =0

Fase intermediria
Aumento gradativo da concentrao celular

 Fase log ou exponencial

Clulas plenamente adaptadas; Velocidades de crescimento elevadas; Consumo de substrato; Interesse prtico.

Fase de reduo de velocidade

Diminuio da concentrao de substrato limitante; Acmulo de produto(s) no meio

Fase estacionria
Trmino do substrato limitante; Acmulo de produtos txicos; Concentrao celular constante em seu valor mximo.

 Fase de declnio
Reduo do crescimento celular; Consumo de material intracelular (lise).

No s para a concentrao celular se dispe de grficos, mas tambm para o consumo de substrato e formao de produto.

Biomassa

Concentrao (g/L)

Produto

Substrato Tempo de Cultivo (h)

Figura 8: Curvas de biomassa, substrato e produto

Dispondo de um conjunto de dados experimentais de X, S e P em funo do tempo tem-se:

dx ds dp x = ; s = ; p = dt dt dt

Crescimento

Consumo

Formao

No so os melhores parmetros para se avaliar o estado em que se encontram o sistema.

Velocidades especficas:
Crescimento:

1 dX = X dt
1 dS s = X dt

Consumo de substrato:

Formao de produto:

1 dP p = X dt

Distribuindo os dados da fase exponencial em coordenadas semilogartmicas, tem-se:

d ln( X ) 1 dX = = dt X dt

Como essa fase tem a distribuio de uma reta a velocidade especfica de crescimento constante e mxima.

log X log X 0i = m (t t i )
X0i = Concentrao celular no instante de incio da fase exponencial

Rearranjando a equao anterior:

X = X 0i e

m ( t ti )

Ou, re-escrevendo de outra forma, tem-se:

ln X = ln X 0i + m t

Assim, pode-se obter o tempo de duplicao da biomassa, onde X=2X0i :

ln 2 Tdup = m
Fator de converso de substrato a clulas

YX / S

X X0 = S0 S

X0= Concentrao celular inicial X= Concentrao celular no instante t S0= Concentrao inicial do substrato S= Concentrao residual do substrato no instante t.

Este parmetro importante para a determinao de X em cultivo de fungos filamentosos e em processos de tratamento de efluentes. O fator de converso pode ser obtido tambm atravs de:

YX / S

= S

Coeficiente de Manuteno

S = mS +

'X / S

Velocidade especfica de consumo de substrato para manuteno da viabilidade celular

Produtividade

XF X0 P= TF
X0= Biomassa inicial; XF= Biomassa final; TF= Tempo total de cultivo.

Exerccios
1. Candida utilis cresce em glicerol com velocidade especfica de crescimento mxima de 0,095 h-1 . Qual o tempo necessrio para esse microrganismo duplicar a sua massa na fase exponencial de crescimento de um processo batelada?

2. Qual a diferena entre respirao e fermentao? 3. Quais os principais elementos qumicos de que composta a clula? 4. Cite exemplos prticos de aplicao industrial de leveduras, bactrias e mofos. 5. Quais os principais substratos utilizados na indstria para processos fermentativos? 6. Em uma fermentao batelada a volume constante foram obtidos os seguintes dados experimentais:
T(h)

0 1

1 1.1

2 1.6

3 2.5

4 3.8

5 5.9

6 7

7 7.9

8 8.5

9 8.5

10 9.3

11 9.6

12 9.3

13 9.5

X(g/L)

Pede-se:

 Identificar as diversas fases de crescimento do microrganismo; O tempo que o microrganismo leva para duplicar a sua massa na fase exponencial de crescimento; A produtividade mxima em clulas que pode ser obtida desse processo