1.

1 - Sala de preparação (primeira sala)

 Ao entrar nesta sala deve-se usar álcool nas mãos, se paramentar com os
jalecos, luvas descartáveis e viseira;
 Nesta sala possui o fluxo laminar para preenchimento das caixas de
ponteiras com filtro para a realizações das reações de RT-PCR.
 Para pegar as ponteiras com filtro neste fluxo deve-se usar luvas e jaleco.
Saliva

Após se paramentar seguir os seguintes passos nas seguintes salas

Procedimento Operacional Padrão – RT – PC

1.2 - Sala de preparação (primeira sala)

 Ao entrar nesta sala deve-se higienizar as mãos com álcool a 70%

 Paramentar com jaleco, luvas descartáveis e viseira;

1 passo – Limpar as bancadas (itens em verde) da área 1.1, 1.2 e depois as

bancadas da área 2.1 com álcool e papel. Usar luva descartável branca. Após
a limpeza retirar as luvas e descartar.
Nesta sala existe uma mini centrifuga restrita somente para o uso de
reagentes.

2 passo – Verificar o fluxo laminar WS (item em azul) na sala 1.2 e esterilizar

com álcool e papel toalha. Após a esterilização do fluxo ligar a Luz Ultravioleta
por 20 minutos para uso. Este fluxo é somente usado para preparo de Mix de
qPCR dos kits Alpllex e IDT/PROMEGA e distribuição em placas ou
microtubos. Após o preparo e distribuição do Mix, a placa ou os tubos são
levadas para a próxima área coberto por papel alumínio para aplicação das
amostras. Neste mesmo fluxo observar se o descarte de ponteiras está cheio e
se há ponteiras suficientes antes de começar os procedimentos de preparo de
Mix, se o descarte estiver cheio retirar e por para descartar na sala de
esterilização.

Nesta sala também ficam os termocicladores dispostos nas bancada (item em

vermelho) que realizam as qPCR: o Step One (placa) e o Rotor Q Gene
(tubos).

3 Passo – Ir para a área 2.1 e esterilizar o fluxo laminar NB2 (item em azul) que
está sendo utilizado para inserir amostras de DNA de pacientes com suspeitas
de COVID19. Após a esterilização do fluxo ligar a Luz Ultravioleta por 20
minutos para uso. Neste mesmo fluxo observar se o descarte de ponteiras está
cheio e se há ponteiras suficientes antes de começar os procedimentos
inserção de amostras, se o descarte estiver cheio retirar e por para descartar
na sala de esterilização. Nesta sala existe uma mini centrifuga restrita somente
para o uso de amostras. Nesta seção 2.1 também estão os freezers que
acomodam as amostras de pacientes a serem testadas, casos confirmados e
negativos, os kits e seus reagentes que são preparados na sala 1.2 no fluxo
WS.

Após o preparo da placa ou dos tubos com as amostras do pacientes no fluxo

NB2 recomenda esterilizar o fluxo laminar novamente com 1 com álcool e
papel. Após a esterilização do fluxo ligar a Luz Ultravioleta por 20 minutos e
desligar.

Materiais utilizados

Jalecos descartáveis

Viseira

Álcool

Luvas descartáveis tipo branca e azul (Tamanhos P e M).

Ponteiras com filtro

Sacos plásticos para descarte

Papel laminado