ROTINA DE LÍQUOR

Kit para meningite (fica na geladeira da bioquímica):

- 1 meio de cultura ágar chocolate

- 2 frascos estéreis (1 para o lab e outro para enviar para o P Norte, e de lá eles encaminham
para o Lacen)

- 2 lâminas (ambas para faze o esfregaço de gram, mas apenas 1 será corada para avaliação do
lab, mas ambas serão enviadas para o P Norte)

Laudo:

- Local da punção (se não vem informando, pode-se considerar lombar)

- Aspecto (antes e após centrifugação)

- Cor (antes e após centrifugação)

- Citometria (colocar 10uL na câmara de Newbauer sem centrifugar, e contar os leucócitos e

hemácias nos quadrantes externos - multiplicar o resultado por 2,5)

- Bioquímica (centrifugar a 1500rpm por 15 minutos, e usar o sobrenadante para fazer glicose,
cloreto e proteínas no líquor)

- Gram (ressuspender e colocar 10uL no centro da lâmina e espalhar em círculo numa área de
1cm de diâmetro, e esperar secar para fazer a coloração)

- Citologia
*Caso a contagem na câmara fique dentro do valor de referência, não precisa fazer a citometria.
Informar no laudo: “Não foi realizado a citologia devido à baixa celularidade”.

*Caso a contagem na câmara esteja alta, ressuspender o sedimento e fazer o esfregaço igual ao do
gram, mas corando com o Wright e diferenciando apenas os leucócitos em mononucleares e
polimorfonuclueares)

Coloração de Gram:
- Primeiramente fixa-se o material com fogo (passar a lâmina cerca de 3 vezes na chama)

- Depois cobre-se a lâmina com o corante violeta (usar um filtro de papel) e deixa por 1 minuto

- Sem lavar, despreza todo o violeta e cobre com lugol, deixando mais 1 minuto

- Despreza todo o lugol sem lavar, e com a lâmina na diagonal deixa o álcool-acetona escorrer
umas 2 vezes pela lâmina pra descorar

- Lavar a lâmina na diagonal com um filete de água da torneira, tirar o excesso de água e cobrir
com fucsina (filtrando com papel filtro), e aguardar de 50 a 60 segundos.

- Lavar com água, esperar secar e avaliar no microscópio na objetiva de 100x.

Observações:

- O meio de cultura já recebemos inoculado, caso não esteja a gente coloca cerca de 10 gotas
do frasco que vamos utilizar no lab.

- Pregar com fita o meio de cultura na lateral interna da jarra de anaerobiose, colocar um
algodão embebido em álcool e colocar fogo no algodão, fechando e vedando a tampa com fita.
Manter a jarra na estufa.

- Se o pedido for de apenas VDRL, não utilizar o kit para meningite. Nesse caso, entrega-se um
frasco estéril de urocultura para os enfermeiros, e depois passa o material para um tubo de
hemólise. Centrifugar e usar o sobrenadante para fazer o teste. Fazer da diluição 1:1 até 1:8.

- Como não é feito controle diário do reagente da proteína do líquor, deve-se passar um
controle antes da leitura, ou então usar o padrão do kit como se fosse uma amostra e avaliar o
resultado. Deve dar um valor de 100mg/dL, com margem de até 10% para mais ou para
menos.

- Para líquido ascítico ou pleural, como a contagem de leucócitos geralmente é maior, pode-se
fazer a contagem no aparelho de hematologia e utilizar o valor do aparelho para a citometria.
Nesse caso, fazer a citologia corando o Wright, e fazer a diferenciação de todos os leucócitos
encontrados.