Isoeletrofocalizao: tambm conhecida por eletroforese de focalizao isoeltrica.

Nesse tipo de eletroforese as protenas so fracionadas de acordo com o seu pI ao

longo de um gradiente de pH varivel entre 5 e 14 que se forma durante a composio
do gel. Este gradiente estabelecido por um conjunto de anflitos carregados
isoeletricamente que permite identificar cerca de 80 tipos diferentes de hemoglobinas
variantes. A IEF apresenta algumas vantagens sobre outros procedimentos
eletroforticos e cromatogrficos. As vantagens em relao s eletroforeses se devem
ao fato das excelentes resolues obtidas para separar hemoglobinas variantes cujo pI
difere entre 0,02 a 0,001. As vantagens sobre os procedimentos cromatogrficos se
revelam pela quantidade de amostras requeridas 10 a 50m l na IEF, enquanto na
cromatografia lquida de alta presso (ou HPLC) so necessrios 200 a 300m l, e
principalmente por permitir a anlise de vrias amostras por vez (20 a 100 amostras).
So essas razes que influenciaram o uso IEF no "screening" para Hb S em sangue de
recm-nascidos. O fracionamento das hemoglobinas A, F, S, D e C por IEF tem alto nvel
de resoluo, permitindo inclusive a diferenciao entre as Hb S e Hb D (figura 6.44).
Devido ao alto custo operacional, seu uso tem sido restrito pesquisa laboratorial de
fraes variantes, e em "screening" de hemoglobinas onde o elevado nmero de
anlises por eletroforese oferece uma relao custo-benefcio compensadora.