Cromatografia em Camada Delgada de

Lipídios (TLC)

Nome: Caroline Borges

Turma: BM171
Professores: Hiram Araujo e Leila Pontes
 1. INTRODUÇÃO
A cromatografia é uma técnica físico-químico muito utilizada para a separação de
misturas. A denominação é originária do grego chroma, que significa cor e, graphein,
escrever.
Existe vários tipos de cromatografia: líquida, gasosa, de troca iônica e de
afinidade. Entretanto, todos usam os mesmos princípios básicos, que se fundamentam no
fato das substâncias presentes na amostra possuírem diferentes propriedades e
composições, independentemente do tipo.
No experimento fez-se uso da cromatografia em camada fina (TLC, thin-layer
chromatography) que é um método fácil, ágil e de baixo custo de se obter um resultado
rápido quanto à composição química de um determinado composto. A amostra é
colocada sobre uma placa, um solvente ou mistura de solventes que percorre a placa
através de ação capilar, observando-se assim, as características do mesmo em relação a
um padrão.
2. OBJETIVO
O experimento teve como objetivo à observação prática de cromatografia em
camada delgada pelo método de Thin Layer Chromatography (TLC). Utilizando de
amostras lipídicas da gema de ovo, extraídas anteriormente. A utilização deste método foi
para identificação dos lipídios usando como base suas polaridades.

3. RESULTADOS
Após a corrida, é obtido o perfil lipídico da amostra de gema de ovo. Com amostra,
foi submetido também padrões de colesterol, fosfatidilcolina e triacilglicerol. Então, foi
calculado o fator de retenção (Rf) que é um cálculo matemático entre a eluição do ponto
médio da amostra e a distância da eluição da fase móvel, a unidade utilizada foi de
centímetros.
Os padrões de colesterol, fosfatidilcolina e triacilglicerol estão respectivamente nas
posições 3, 4 e 5 na tabela abaixo, o resto das posições são da amostra.

Eluição do ponto Eluição da fase

Rf
médio da amostra móvel

0 7 0/7=0
1

1,5 7 1,5/7=0,21
2
 0,5 7 0,5/7=0,07
3

0 7 0/7=0
4

1,4 7 1,4/7=0,20
5

0,35 7 0,35/7=0,05
6

Tabela 1

4. DISCUSSÃO
A metodologia utilizada é a cromatografia normal, ou seja, com a fase móvel mais
apolar que a fase estacionária. Como demonstrado anteriormente nos resultados, foi feito
um cálculo do fator de retenção que é compreendido pela distância do eluido da amostra
dividido pelo eluido da fase móvel. O eluido com maior Rf é o com mais afinidade à fase
móvel, ou seja, apolar, o eluido médio é provavelmente anfipático e o eluido de menor Rf
tem menos afinidade à fase móvel, ou seja, com mais afinidade à fase estacionária sendo
então uma substância polar.
Pelo cálculo do Rf presente na tabela 1 da discussão, os eluidos 2 e 5 com os
maiores Rf são os mais apolares, sendo assim, o eluido 2 é uma substância semelhante
ao triacilglicerol (eluido 5). Enquanto aos eluidos 1 e 4 com os menores Rf sendo então
mais polares, tendo vista também, que o eluido 5 é fosfatidilcolina, o eluido 2 será uma
substância semelhante a ela. Portanto, os eluidos 3 e 6 serão os intermediários, ou seja,
substâncias anfipáticas, tendo em vista que o eluido 3 é colesterol, o eluido será uma
substância similar.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRAFICAS
COLLINS, Carol. Introdução a métodos cromatográficos. 7o edição. Campinas, SP: Editora
da UNICAMP, 1997. Disponível no link:
https://br.librosintinta.in/biblioteca/pdf/RYvNCoJAFEafZqCgZjIXYrtRhhBMoXqByXHsgnptf
ly06Nm7i6DF4Tsc-
J4hLCch3n30_BWBRzsN_OHEZ9XjBE6MsDr0Qs96hACdFmVb11VzY2nBjofiKs_yp20j7y
3Jnqjm4NBEpjKmUqSgiQtTeUCDnrx0OOmAg2MqsdCh31HMmJQ0vYH_cZPkebbli7Ff.ht
x
https://mundoeducacao.uol.com.br/quimica/analise-cromatografica-ou-cromatografia.htm
https://www.educamaisbrasil.com.br/enem/quimica/cromatografia
https://www.infoescola.com/quimica/cromatografia/
https://www.fciencias.com/2015/03/12/cromatografia-em-camada-fina-tlc-laboratorio-
online/
http://www3.uma.pt/quimica_organica/conteudos/cromatografia.html

EXERCÍCIOS DA APOSTILA PÁGINA 87

1. A número 1 está presente nos resultados e discussão do relatório acima.

2. Os compostos utilizados na fase móvel têm uma polaridade baixa com o ácido
acético com 12,4, o hexano com 7,3 e o éter dietílico com 7,4, sendo assim, a
fase móvel será mais apolar que a sílica.
3. O princípio da revelação adotada é de coloração da placa de sílica usando a
solução de azul brilhante de Coomasie. Este método tem uma especificidade
baixa por colorir toda a placa é não somente as amostras. Quanto a sua
sensibilidade, este método tem uma sensibilidade razoável por conseguir colorir
com menor ou maior as amostras.
4. As modificações necessárias para o sistema cromatográfico para fase reversa é
alterar as polaridades da fase móvel e estacionária, tornando a fase estacionária
mais apolar que a fase móvel.
5. Os resultados seriam inversos aos atuais, sendo assim, os maiores Rf serão os
menores, os intermediários não mudariam e os menores Rf serão os maiores.

APLIACAÇÕES DE CROMATOGRAFIA NOS EXAMES DE COVID-

19

A cromatografia tem aplicações variadas no meio laboratorial, com os exames

para o COVID-19 não seria diferente. No chamado teste rápido é utilizado uma
imunocromatogrfia de afinidade em que uma parte do vírus presente na amostra de liga
os IgM e/ou IgE. Enquanto no RT-PCR, algumas etapas do processo utilizam da
cromatografia.