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Biorreatores de imersão temporária: manipulação e funcionamento

Dr. Deivid Almeida da Costa


E-mail: costa.deivid@gmail.com
MICROPROPAGAÇÃO DE PLANTAS

O cultivo em larga-escala de plantas através da micropropagação, tem sido realizado de


maneira rotineira em laboratórios de pesquisa e biofábricas.

Como todo processo de produção em larga-escala, a viabilidade econômica esbarra nos


custos de produção, que incluem os gastos com mão de obra, materiais, reagentes e
manutenção.

Em um processo viável de produção, é importante reduzir custos. Nesse contexto a Biorreatores de


automação e incremento na produção, são fundamentais. imersão temporária:
manipulação e funcionamento

Dr. Deivid Almeida da Costa

Fonte: http://www.paranasistemas.com.br
USO DE FRASCOS X USO DE BIT
Durante o cultivo in vitro de plantas, os nutrientes do meio de cultura são exauridos ao longo de
algumas semanas, e assim necessitam de serem substituídos

15 dias Multipl. + 15 • Menor contato do meio de


21 dias dias enraiz. = 30 dias cultura com o material
Estabel.
vegetal
- Menos absorção
- Mais ressecamento

• Menor difusão de
nutrientes e metabólitos
- Mais oxidação

20 dias Multipl. + 10 dias


enraiz. = 30 dias
• Mais contato do meio de
cultura com o material
vegetal

• Mais difusão de nutrientes


e metabólitos

• Maior renovação de gases


USO DE FRASCOS X USO DE BIT

Durante o cultivo in vitro de plantas, os nutrientes do meio de cultura são exauridos ao longo de
algumas semanas, e assim necessitam de serem substituídos

Necessária a manipulação de
explantes para troca de meio
+ Tempo
+ Mão de obra

Não necessita de manipulação de


explantes para troca de meio
- Tempo
- Mão de obra
USO DE FRASCOS X USO DE BIT

Partindo de 50 explantes que passam da fase de estabelecimento


para produzir 100.000 mudas de cana-de-açúcar, aclimatizadas

Semi-sólido ≈ 174 dias

BIT ≈ 100 dias

Menores custos
Menos Entrega mais rápida
VANTAGENS subcultivos Aumenta a Capacidade de produção in vitro
Aumenta a confiabilidade na previsão de entrega
BIORREATORES
O biorreator é ambiente estéril, com capacidade de capitalizar meio liquido com entrada e/ou saída de ar e
meio no sistema.

Roberts and Street (1959) Richez (1965) Renovação


Steward and Shatz (1955) do meio liquido em um
sistema de Fluxo continuo
Meio liquido utilizando frasco sistema de dois frascos
de nutriente em cultura de
de cultura em rotação com comunicação
raízes

Heeler (1965) Demonstrou que


submersão temporária dos explantes em Tisserat and Vandercook (1985), primeiro
meio líquido, sem renovar o meio, tem o sistema de imersão temporária. Bombeamento
direto do meio de cultura, esvaziamento por
mesmo efeito de uma real renovação.
drenagem.
(primeiro conceito de imersão temporária)
BIORREATORES
O biorreator é ambiente estéril, com capacidade de capitalizar meio liquido com entrada e/ou saída de ar e
meio no sistema.

Teisson e Alvard (1993), RITA®


Aitken-Christie J, Davies HE (1988), sistema
semi-automatizado (adição e remoção
automatizada do meio por bombeamento)

Fonte: http://www.vitropic.fr/rita
Tipos de BIT

Espécie Explant Tipo de BIT Regime de Referências


imersão
Heliconia Vitroplanta Imersão Temporária 15 min. / 1-4h Rodrigues et al, 2006
Abacaxi (Ananas Vitroplanta B.I.B. ® 15 min / 2 h Scheidt et al, 2008.
comosus L.,) (Soccol et al, 2008)

Curcuma zedoaria Gemas aéreas de Modified Nalgene® 15 min / dia Stanly et al, 2010
vitroplantas polysulfone filtration
Artemisia judaica Vitroplantas airlift 3 min / 3 h Liu et al, 2004
Bioreactor (bolhas)
Fragmentos de folhas RITA® 5 min / 4h Hanhineva et al, 2005
de casa de vegetação

Batata Gema axilar L-L (Liquid Lab™ 1 balanço/ 2 min. Kämäräinen-


Rocker) Karppinen et al,
2010.
Imersão temporária
Scheidt, et al, 2008
Abacaxi (Ananas comosus L.,)
Imersão temporária
Scheidt, et al, 2008
Abacaxi (Ananas comosus L.,)

http://www.tecnallab.com.br
Imersão temporária
Rodrigues et al, 2006.
Helicônia (H.champneiana)

http://www.ptsinternational.com
Imersão temporária (Modified Nalgene® polysulfone filtration)
Stanly et al, 2010
Curcuma zedoaria

Thermo Scientific™ Nalgene™


Polysulfone Reusable Bottle Top Filters

150 U$
Airlift Bioreactor (bolhas)
Liu et al, 2004
Artemisia judaica

Yu et al, 2008
L-L (Liquid Lab™ Rocker)
Kämäräinen-Karppinen et al, 2010
Batata (microtuberização)

Jain et al, 2008.

23.000 U$ Estante
RITA®
Hanhineva et al, 2005
Morango

http://www.cirad.fr
Box-in-bag temporary immersion bioreactor
Ducos et al, 2010
Embriões de Café
RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?
RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Antes devemos responder as seguintes perguntas:

Qual o tipo de cultivo?

Qual o tamanho dos expantes?

Qual o Tamanho final das vitroplantas?

Qual a exigência no controle do microambiente?

Qual o volume a ser produzido?


RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Qual o tipo de cultivo?

Embriogênese ou Organogênese?

Fonte: Beckman Institute for Advanced Science and Technology

Tamanho dos embriões globulares < 5mm

Pequenos explantes podem passar pelas mangueiras de biorreatores sem malha/filtro

Pequenos explantes podem ficar submersos permanentemente em biorreatores sem drenagem


RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Qual o tamanho dos expantes?

Explantes grandes precisam de espaço

Uso de BIT pequeno em explantes grandes exige mais BITs/Explantes


RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Qual o Tamanho final das vitroplantas?


RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Qual a exigência no controle do microambiente?

• BITs que não drenam totalmente o meio


Precisa de controle de umidade?
• Muitas plantas – Mais umidade

• Transparência dos BITS


Quantidade de luz?
• formato

Vai usar substrato/suporte?


Cultivo fotoautotrófico?
Precisa remover as plantas para outra etapa in vitro?
RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?
Exemplos de Biorreatores e preços estimados.

http://www.biorreatoresralm.com.br

http://www.biorreatoresralm.com.br
R$ 125,00 (Sem o recipiente de meio e mangueiras)
BIO-PRO- P
Preço varia com a quantidade
7.000,00 R$
http://www.tecnallab.com.br
SETIS™ Biorreator
RITA ®

http://www.cirad.fr
http://www.vitropic.fr/rita

800 R$ Unidade
BIT cubano/Brasileiro

42,00 R$ (Par montado)


Adaptações / produção própria
Adaptações / produção própria
Adaptações / produção própria

8.000,00 R$ (o molde)

Molde de injeção termoplástico, para tampa rosqueada, com duas cavidades formando um anel
externo rosqueável e anel interno de contenção. Com dois tubos centrais para conexão de
mangueiras de silicone. A tampa deve manter o máximo de vedação, suportanto pelo menos 4
bar de pressão.

Deivid Almeida da Costa 0,35 R$


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA

1- Estante

2- Compressor

3- Tubos e conexões

4- Filtros e Secadores de ar

5- Reguladores de pressão

6- Válvulas solenoides

7- Controladores programáveis
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações

(176x92x40) 200,00 R$ http://www.tokstok.com.br 300,00 R$


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações

http://www.tecnallab.com.br
http://biorreatoresralm.com.br http://fitoclone.com.br
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
2- compressor
• Compressor isento de óleo

• Pistão e Parafuso

• Potencia depende do Nº de BITs


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
2- compressor
Durante o processo de compressão, o ar
• Compressor isento de óleo comprimido pode ser contaminado pelo óleo
lubrificante do compressor e por partículas
• Pistão e Parafuso solidas provenientes do desgaste das peças
móveis.
• Potencia depende do Nº de BITs
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
2- compressor
• Compressor isento de óleo

• Pistão e Parafuso

• Potencia depende do Nº de BITs

Com óleo Deslocamento teórico 110


Reservatorio 30 lts 500 l/m l/m ; Reservatório 20litros
6.000,00 R$ Preço: 600 R$

Capacidade (ar livre


Capacidade (ar livre fornecido) 7 fornecido)7 bar/ 700 l/min
2293 l/min Reservatório 370 litros
Preço: 9.200,00 R$
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
2- compressor
• Compressor isento de óleo

• Pistão e Parafuso

• Potencia depende do Nº de BITs

http://www.kaeser.com.br/Online_Services/Toolbox/Pressure_
drop/default.asp

A perda de carga em um sistema de ar comprimido é


a energia utilizada pelo ar comprimido para
atravessar um trecho de tubulação

De uma forma geral, deve-se trabalhar


com uma folga de 30-50%, na vasão.
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
3- Tubos e Conexões
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
• Usar o mínimo de curvas
• Deve-se considerar a limpeza periódica
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
3- Tubos e Conexões
Calcular pelas tabelas, ou solicitar
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
projeto de gases a um especialista
• Usar o mínimo de curvas
• Deve-se considerar a limpeza periódica
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
3- Tubos e Conexões
Calcular pelas tabelas, ou solicitar
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
projeto de gases a um especialista
• Usar o mínimo de curvas
• Deve-se considerar a limpeza periódica

Tubo de
poliuretano para ar
comprimido

Wuxi Jiunai Polyurethane Products Co.


12mm  10,00 R$ (metro)

Mangueira
trançada de
PVC
¼’  2,00 R$ (metro)
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
3- Tubos e Conexões
Calcular pelas tabelas, ou solicitar
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
projeto de gases a um especialista
• Usar o mínimo de curvas
• Deve-se considerar a limpeza periódica

Mangueira de silicone transparente

6x10mm  15,00 R$ (metro)


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
3- Tubos e Conexões
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
• Usar o mínimo de curvas
Fonte: Manual de ar comprimido, Metalplan.
• Deve-se considerar a limpeza periódica
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
3- Tubos e Conexões
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
Conexões Conexões
• Usar o mínimo de curvas metálicas Engate rápido
Necessita de Não necessita
• Deve-se considerar a limpeza periódica
braçadeira ou de braçadeira
aperto (linha
nylon)
Maior Menor
Possibilidade possibilidade
de vazamento de vazamento

X
www.plumbingsupply.com
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
3- Tubos e Conexões Cotovelo União
União Reta

• Diâmetro dependem da vazão e pressão


• Usar o mínimo de curvas
½’ R$ 9,95 ½’ R$ 7,95
• Deve-se considerar a limpeza periódica

Regulador de fluxo Tê União

Conector T em PVC (10 mm) ½’ R$ 9,99


½’ R$ 30,00

Tampão Plug Redutor 12 x 10

R$ 2,00
½’ R$ 3,00 ½’ R$ 9,00
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
4- Filtros e Secadores de ar
A redução gradual da temperatura do ar
• Remoção de agua da tubulação
comprimido ao longo da tubulação, causa
• Contaminantes na tubulação condensação.
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
4- Filtros e Secadores de ar
• Remoção de agua da tubulação
• Contaminantes na tubulação
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
4- Filtros e Secadores de ar
• Remoção de agua da tubulação
• Contaminantes na tubulação

Secador por refrigeração Secador por absorção


Titan 40 plus. Vazão: ≈ 1000 l/min Vazão: ≈ 424 l/min

R$ 818,00
R$ 3.700,00
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
4- Filtros e Secadores de ar
• Filtro esterilizador de ar
Carcaça
Polipropileno de alta densidade (autoclavável)

Membrana filtrante
Porosidade: 0,22 μm
Material: PTFE - Politetrafluoretileno

25 mm / Pressão Max. 7 bar


50 mm / Pressão Max. 4,1 bar

Vantagens e desvantagens

R$ 55,00
R$ 8,00
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
5- Reguladores de Pressão
• Pelo menos 1 regulador por ramal

Regulador de pressão de 1/2"

Filtro regulador de pressão de 1/2"

Possibilidade de
observar impurezas
no ar. Com filtro 20
micra

R$ 90,00

R$ 142,00
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
5- Reguladores de Pressão
• Pelo menos 1 regulador por ramal

Compressor
Regulador de Secador
pressão
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
5- Reguladores de Pressão
SITUAÇÃO 1
• Pelo menos 1 regulador por ramal
A pressão diminui com a distância
• Aumentar pressão e usar regulador de
fluxo (diferentes pressões nas estantes)
• Aumentar diâmetro do tubo
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
5- Reguladores de Pressão
SITUAÇÃO 1
• Pelo menos 1 regulador por ramal
A pressão diminui com a distância
• Aumentar pressão e usar regulador de
fluxo ou pressão (diferentes pressões nas
estantes)
• Aumentar diâmetro do tubo
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Válvulas Solenóides
• Depende da pressão e diâmetro da tubulação

São equipamentos utilizados para controle de injeção de gases


Não regula vazão nem pressão!!!

Deve ser ligada a um contator

R$ 170,00
Válvulas solenoides de 2 vias
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Válvulas Solenóides
• Depende da pressão e diâmetro da tubulação
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Válvulas Solenóides
• Depende da pressão e diâmetro da tubulação



MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Válvulas Solenóides
• Depende da pressão e diâmetro da tubulação



MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis e Contatores
• Vários níveis de sofisticação e controle

Controladores Programáveis: são aparelhos eletrônicos digitais que utilizam uma


memória programável para armazenar internamente instruções e para implementar
funções específicas, tais como lógica, sequenciamento, temporização, contagem e
aritmética, controlando, por meio de módulos de entradas e saídas vários tipos de
maquinas ou processos. (National Electrical Manufacturers Association)

Os Controladores vão permitir a programação dos ciclos de imersão


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis e Contatores
• Vários níveis de sofisticação e controle

Contator: é um dispositivo eletromecânico que permite, a partir de um circuito de


comando, efetuar o controle de cargas num circuito de potência.

R$ 60,00

Enviam corrente elétrica para abrir e fechar as válvulas solenóides


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis e Contatores
• Vários níveis de sofisticação e controle
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA



MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis e Contatores
• Vários níveis de sofisticação e controle

Temporizador digital

R$ 200,00
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis
• Vários níveis de sofisticação e controle

Controlador lógico Programável

R$ 450,00
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis
• Vários níveis de sofisticação e controle
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis
• Vários níveis de sofisticação e controle

Fonte: http://www.tecnallab.com.br Fonte: http://www.tecnallab.com.br


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis Sistema Cubano
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA

CUSTO APROXIMADO DE UM SISTEMA DE IMERSÃO SIMPLES*

Item Quant. Preço Total


Estantes de aço com 5 prateleiras 1 200,00
Tubos de poliuretano e mangueira 5 + 10 mts 70,00
Conectores 25 (E.R.) + 350,00
50 (PVC)
Válvulas solenoides 4 680,00
Contatores e temporizadores 4+2 840,00
Compressor de ar (100 l/m) 1 600,00
Regulador de pressão 1 100,00
Secador por absorção 1 800,00

R$ 3710,00

*Preços estimados. Não está incluso a mão de obra do eletricista, nem a iluminação da estante, nem os
recipientes dos BITs.
Biorreatores de imersão temporária: manipulação e funcionamento

OBRIGADO
Dr. Deivid Almeida da Costa

costa.deivid@gmail.com
Externo Interno
BIORREATOR FOTOAUTOTRÓFICO Estante Fotoautotrófica CETENE

Afreen et al, 2002


Zobayed et al, 2004.

Afreen et al, 2006 Zobayed et al, 2004.


Biorreatores de imersão temporária: manipulação e funcionamento

Dr. Deivid Almeida da Costa


E-mail: costa.deivid@gmail.com
MICROPROPAGAÇÃO DE PLANTAS

O cultivo em larga-escala de plantas através da micropropagação, tem sido realizado de


maneira rotineira em laboratórios de pesquisa e biofábricas.

Como todo processo de produção em larga-escala, a viabilidade econômica esbarra nos


custos de produção, que incluem os gastos com mão de obra, materiais, reagentes e
manutenção.

Em um processo viável de produção, é importante reduzir custos. Nesse contexto a Biorreatores de


automação e incremento na produção, são fundamentais. imersão temporária:
manipulação e funcionamento

Dr. Deivid Almeida da Costa

Fonte: http://www.paranasistemas.com.br
USO DE FRASCOS X USO DE BIT
Durante o cultivo in vitro de plantas, os nutrientes do meio de cultura são exauridos ao longo de
algumas semanas, e assim necessitam de serem substituídos

15 dias Multipl. + 15 • Menor contato do meio de


21 dias dias enraiz. = 30 dias cultura com o material
Estabel.
vegetal
- Menos absorção
- Mais ressecamento

• Menor difusão de
nutrientes e metabólitos
- Mais oxidação

20 dias Multipl. + 10 dias


enraiz. = 30 dias
• Mais contato do meio de
cultura com o material
vegetal

• Mais difusão de nutrientes


e metabólitos

• Maior renovação de gases


USO DE FRASCOS X USO DE BIT

Durante o cultivo in vitro de plantas, os nutrientes do meio de cultura são exauridos ao longo de
algumas semanas, e assim necessitam de serem substituídos

Necessária a manipulação de
explantes para troca de meio
+ Tempo
+ Mão de obra

Não necessita de manipulação de


explantes para troca de meio
- Tempo
- Mão de obra
USO DE FRASCOS X USO DE BIT

Partindo de 50 explantes que passam da fase de estabelecimento


para produzir 100.000 mudas de cana-de-açúcar, aclimatizadas

Semi-sólido ≈ 174 dias

BIT ≈ 100 dias

Menores custos
Menos Entrega mais rápida
VANTAGENS subcultivos Aumenta a Capacidade de produção in vitro
Aumenta a confiabilidade na previsão de entrega
BIORREATORES
O biorreator é ambiente estéril, com capacidade de capitalizar meio liquido com entrada e/ou saída de ar e
meio no sistema.

Roberts and Street (1959) Richez (1965) Renovação


Steward and Shatz (1955) do meio liquido em um
sistema de Fluxo continuo
Meio liquido utilizando frasco sistema de dois frascos
de nutriente em cultura de
de cultura em rotação com comunicação
raízes

Heeler (1965) Demonstrou que


submersão temporária dos explantes em Tisserat and Vandercook (1985), primeiro
meio líquido, sem renovar o meio, tem o sistema de imersão temporária. Bombeamento
direto do meio de cultura, esvaziamento por
mesmo efeito de uma real renovação.
drenagem.
(primeiro conceito de imersão temporária)
BIORREATORES
O biorreator é ambiente estéril, com capacidade de capitalizar meio liquido com entrada e/ou saída de ar e
meio no sistema.

Teisson e Alvard (1993), RITA®


Aitken-Christie J, Davies HE (1988), sistema
semi-automatizado (adição e remoção
automatizada do meio por bombeamento)

Fonte: http://www.vitropic.fr/rita
Tipos de BIT

Espécie Explant Tipo de BIT Regime de Referências


imersão
Heliconia Vitroplanta Imersão Temporária 15 min. / 1-4h Rodrigues et al, 2006
Abacaxi (Ananas Vitroplanta B.I.B. ® 15 min / 2 h Scheidt et al, 2008.
comosus L.,) (Soccol et al, 2008)

Curcuma zedoaria Gemas aéreas de Modified Nalgene® 15 min / dia Stanly et al, 2010
vitroplantas polysulfone filtration
Artemisia judaica Vitroplantas airlift 3 min / 3 h Liu et al, 2004
Bioreactor (bolhas)
Fragmentos de folhas RITA® 5 min / 4h Hanhineva et al, 2005
de casa de vegetação

Batata Gema axilar L-L (Liquid Lab™ 1 balanço/ 2 min. Kämäräinen-


Rocker) Karppinen et al,
2010.
Imersão temporária
Scheidt, et al, 2008
Abacaxi (Ananas comosus L.,)
Imersão temporária
Scheidt, et al, 2008
Abacaxi (Ananas comosus L.,)

http://www.tecnallab.com.br
Imersão temporária
Rodrigues et al, 2006.
Helicônia (H.champneiana)

http://www.ptsinternational.com
Imersão temporária (Modified Nalgene® polysulfone filtration)
Stanly et al, 2010
Curcuma zedoaria

Thermo Scientific™ Nalgene™


Polysulfone Reusable Bottle Top Filters

150 U$
Airlift Bioreactor (bolhas)
Liu et al, 2004
Artemisia judaica

Yu et al, 2008
L-L (Liquid Lab™ Rocker)
Kämäräinen-Karppinen et al, 2010
Batata (microtuberização)

Jain et al, 2008.

23.000 U$ Estante
RITA®
Hanhineva et al, 2005
Morango

http://www.cirad.fr
Box-in-bag temporary immersion bioreactor
Ducos et al, 2010
Embriões de Café
RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?
RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Antes devemos responder as seguintes perguntas:

Qual o tipo de cultivo?

Qual o tamanho dos expantes?

Qual o Tamanho final das vitroplantas?

Qual a exigência no controle do microambiente?

Qual o volume a ser produzido?


RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Qual o tipo de cultivo?

Embriogênese ou Organogênese?

Fonte: Beckman Institute for Advanced Science and Technology

Tamanho dos embriões globulares < 5mm

Pequenos explantes podem passar pelas mangueiras de biorreatores sem malha/filtro

Pequenos explantes podem ficar submersos permanentemente em biorreatores sem drenagem


RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Qual o tamanho dos expantes?

Explantes grandes precisam de espaço

Uso de BIT pequeno em explantes grandes exige mais BITs/Explantes


RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Qual o Tamanho final das vitroplantas?


RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?

Qual a exigência no controle do microambiente?

• BITs que não drenam totalmente o meio


Precisa de controle de umidade?
• Muitas plantas – Mais umidade

• Transparência dos BITS


Quantidade de luz?
• formato

Vai usar substrato/suporte?


Cultivo fotoautotrófico?
Precisa remover as plantas para outra etapa in vitro?
RECIPIENTES DO BIT: QUAL USAR? COMO ADQUIRIR?
Exemplos de Biorreatores e preços estimados.

http://www.biorreatoresralm.com.br

http://www.biorreatoresralm.com.br
R$ 125,00 (Sem o recipiente de meio e mangueiras)
BIO-PRO- P
Preço varia com a quantidade
7.000,00 R$
http://www.tecnallab.com.br
SETIS™ Biorreator
RITA ®

http://www.cirad.fr
http://www.vitropic.fr/rita

800 R$ Unidade
BIT cubano/Brasileiro

42,00 R$ (Par montado)


Adaptações / produção própria
Adaptações / produção própria
Adaptações / produção própria

8.000,00 R$ (o molde)

Molde de injeção termoplástico, para tampa rosqueada, com duas cavidades formando um anel
externo rosqueável e anel interno de contenção. Com dois tubos centrais para conexão de
mangueiras de silicone. A tampa deve manter o máximo de vedação, suportanto pelo menos 4
bar de pressão.

Deivid Almeida da Costa 0,35 R$


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA

1- Estante

2- Compressor

3- Tubos e conexões

4- Filtros e Secadores de ar

5- Reguladores de pressão

6- Válvulas solenoides

7- Controladores programáveis
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações

(176x92x40) 200,00 R$ http://www.tokstok.com.br 300,00 R$


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações

http://www.tecnallab.com.br
http://biorreatoresralm.com.br http://fitoclone.com.br
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1- Estante
• Dimensões dependem dos recipientes
• Mobilidade da estante
• Fiação elétrica e tubulações
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
2- compressor
• Compressor isento de óleo

• Pistão e Parafuso

• Potencia depende do Nº de BITs


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2- compressor
Durante o processo de compressão, o ar
• Compressor isento de óleo comprimido pode ser contaminado pelo óleo
lubrificante do compressor e por partículas
• Pistão e Parafuso solidas provenientes do desgaste das peças
móveis.
• Potencia depende do Nº de BITs
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2- compressor
• Compressor isento de óleo

• Pistão e Parafuso

• Potencia depende do Nº de BITs

Com óleo Deslocamento teórico 110


Reservatorio 30 lts 500 l/m l/m ; Reservatório 20litros
6.000,00 R$ Preço: 600 R$

Capacidade (ar livre


Capacidade (ar livre fornecido) 7 fornecido)7 bar/ 700 l/min
2293 l/min Reservatório 370 litros
Preço: 9.200,00 R$
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2- compressor
• Compressor isento de óleo

• Pistão e Parafuso

• Potencia depende do Nº de BITs

http://www.kaeser.com.br/Online_Services/Toolbox/Pressure_
drop/default.asp

A perda de carga em um sistema de ar comprimido é


a energia utilizada pelo ar comprimido para
atravessar um trecho de tubulação

De uma forma geral, deve-se trabalhar


com uma folga de 30-50%, na vasão.
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3- Tubos e Conexões
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
• Usar o mínimo de curvas
• Deve-se considerar a limpeza periódica
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3- Tubos e Conexões
Calcular pelas tabelas, ou solicitar
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
projeto de gases a um especialista
• Usar o mínimo de curvas
• Deve-se considerar a limpeza periódica
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
3- Tubos e Conexões
Calcular pelas tabelas, ou solicitar
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
projeto de gases a um especialista
• Usar o mínimo de curvas
• Deve-se considerar a limpeza periódica

Tubo de
poliuretano para ar
comprimido

Wuxi Jiunai Polyurethane Products Co.


12mm  10,00 R$ (metro)

Mangueira
trançada de
PVC
¼’  2,00 R$ (metro)
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3- Tubos e Conexões
Calcular pelas tabelas, ou solicitar
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
projeto de gases a um especialista
• Usar o mínimo de curvas
• Deve-se considerar a limpeza periódica

Mangueira de silicone transparente

6x10mm  15,00 R$ (metro)


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3- Tubos e Conexões
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
• Usar o mínimo de curvas
Fonte: Manual de ar comprimido, Metalplan.
• Deve-se considerar a limpeza periódica
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3- Tubos e Conexões
• Diâmetro dependem da vazão e pressão
Conexões Conexões
• Usar o mínimo de curvas metálicas Engate rápido
Necessita de Não necessita
• Deve-se considerar a limpeza periódica
braçadeira ou de braçadeira
aperto (linha
nylon)
Maior Menor
Possibilidade possibilidade
de vazamento de vazamento

X
www.plumbingsupply.com
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3- Tubos e Conexões Cotovelo União
União Reta

• Diâmetro dependem da vazão e pressão


• Usar o mínimo de curvas
½’ R$ 9,95 ½’ R$ 7,95
• Deve-se considerar a limpeza periódica

Regulador de fluxo Tê União

Conector T em PVC (10 mm) ½’ R$ 9,99


½’ R$ 30,00

Tampão Plug Redutor 12 x 10

R$ 2,00
½’ R$ 3,00 ½’ R$ 9,00
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4- Filtros e Secadores de ar
A redução gradual da temperatura do ar
• Remoção de agua da tubulação
comprimido ao longo da tubulação, causa
• Contaminantes na tubulação condensação.
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4- Filtros e Secadores de ar
• Remoção de agua da tubulação
• Contaminantes na tubulação
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4- Filtros e Secadores de ar
• Remoção de agua da tubulação
• Contaminantes na tubulação

Secador por refrigeração Secador por absorção


Titan 40 plus. Vazão: ≈ 1000 l/min Vazão: ≈ 424 l/min

R$ 818,00
R$ 3.700,00
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4- Filtros e Secadores de ar
• Filtro esterilizador de ar
Carcaça
Polipropileno de alta densidade (autoclavável)

Membrana filtrante
Porosidade: 0,22 μm
Material: PTFE - Politetrafluoretileno

25 mm / Pressão Max. 7 bar


50 mm / Pressão Max. 4,1 bar

Vantagens e desvantagens

R$ 55,00
R$ 8,00
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5- Reguladores de Pressão
• Pelo menos 1 regulador por ramal

Regulador de pressão de 1/2"

Filtro regulador de pressão de 1/2"

Possibilidade de
observar impurezas
no ar. Com filtro 20
micra

R$ 90,00

R$ 142,00
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5- Reguladores de Pressão
• Pelo menos 1 regulador por ramal

Compressor
Regulador de Secador
pressão
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5- Reguladores de Pressão
SITUAÇÃO 1
• Pelo menos 1 regulador por ramal
A pressão diminui com a distância
• Aumentar pressão e usar regulador de
fluxo (diferentes pressões nas estantes)
• Aumentar diâmetro do tubo
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
5- Reguladores de Pressão
SITUAÇÃO 1
• Pelo menos 1 regulador por ramal
A pressão diminui com a distância
• Aumentar pressão e usar regulador de
fluxo ou pressão (diferentes pressões nas
estantes)
• Aumentar diâmetro do tubo
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6- Válvulas Solenóides
• Depende da pressão e diâmetro da tubulação

São equipamentos utilizados para controle de injeção de gases


Não regula vazão nem pressão!!!

Deve ser ligada a um contator

R$ 170,00
Válvulas solenoides de 2 vias
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6- Válvulas Solenóides
• Depende da pressão e diâmetro da tubulação
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Válvulas Solenóides
• Depende da pressão e diâmetro da tubulação



MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Válvulas Solenóides
• Depende da pressão e diâmetro da tubulação



MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis e Contatores
• Vários níveis de sofisticação e controle

Controladores Programáveis: são aparelhos eletrônicos digitais que utilizam uma


memória programável para armazenar internamente instruções e para implementar
funções específicas, tais como lógica, sequenciamento, temporização, contagem e
aritmética, controlando, por meio de módulos de entradas e saídas vários tipos de
maquinas ou processos. (National Electrical Manufacturers Association)

Os Controladores vão permitir a programação dos ciclos de imersão


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis e Contatores
• Vários níveis de sofisticação e controle

Contator: é um dispositivo eletromecânico que permite, a partir de um circuito de


comando, efetuar o controle de cargas num circuito de potência.

R$ 60,00

Enviam corrente elétrica para abrir e fechar as válvulas solenóides


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis e Contatores
• Vários níveis de sofisticação e controle
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA



MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis e Contatores
• Vários níveis de sofisticação e controle

Temporizador digital

R$ 200,00
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6- Controladores Programáveis
• Vários níveis de sofisticação e controle

Controlador lógico Programável

R$ 450,00
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6- Controladores Programáveis
• Vários níveis de sofisticação e controle
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis
• Vários níveis de sofisticação e controle

Fonte: http://www.tecnallab.com.br Fonte: http://www.tecnallab.com.br


MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA
6- Controladores Programáveis Sistema Cubano
MONTAGEM DO SISTEMA DE IMERSÃO TEMPORÁRIA

CUSTO APROXIMADO DE UM SISTEMA DE IMERSÃO SIMPLES*

Item Quant. Preço Total


Estantes de aço com 5 prateleiras 1 200,00
Tubos de poliuretano e mangueira 5 + 10 mts 70,00
Conectores 25 (E.R.) + 350,00
50 (PVC)
Válvulas solenoides 4 680,00
Contatores e temporizadores 4+2 840,00
Compressor de ar (100 l/m) 1 600,00
Regulador de pressão 1 100,00
Secador por absorção 1 800,00

R$ 3710,00

*Preços estimados. Não está incluso a mão de obra do eletricista, nem a iluminação da estante, nem os
recipientes dos BITs.
Biorreatores de imersão temporária: manipulação e funcionamento

OBRIGADO
Dr. Deivid Almeida da Costa

costa.deivid@gmail.com
Externo Interno
BIORREATOR FOTOAUTOTRÓFICO Estante Fotoautotrófica CETENE

Afreen et al, 2002


Zobayed et al, 2004.

Afreen et al, 2006 Zobayed et al, 2004.

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