Anna Clara Rios Moço

Pedro Henrique Guedes

INTRODUÇÃO
 Cultura de tecidos é um processo, por meio do qual
fragmentos vegetais ou suas partes (explantes) são isolados
dos organismos a partir destes, sendo assepticamente
cultivados em meio de cultura apropriado sob condições
adequadas.

 Esse termo é genérico

referindo-se a cultura de
células, tecidos, órgãos
embriões e plântulas.

http://portuguese.alibaba.com/product-free/tissue-culture-plants-120013164.html
Cultura de tecidos vegetais
 Essas técnicas consistem em selecionar explantes, desinfectá-los e cultivá-
los em meio nutritivo mantido sob condições assépticas, sendo a
multiplicação dos propágulos feita através de sucessivos subcultivos em meio
próprio.

 Os brotos desenvolvidos em um meio são transferidos a outro para

formação das raízes, obtendo-se, assim, plantas inteiras.

http://ruisoares65.pbworks.com/w/page/24325063/Cultura%20de%20Tecidos
 Cultivo
 Essas plantas são cultivadas em laboratório em substrato de aclimatação e,
consequentemente, levadas à casa de vegetação antes de serem transferidas
para o campo definitivamente.

http://www.seti.pr.gov.br/modules/galeria/detalhe.php?foto=98&evento=5
Princípio da Cultura de Tecidos
 A cultura se baseia na teoria da totipotência onde os seres vivos tem
a capacidade de regenerar organismos inteiros, idênticos à matriz
doadora, a partir de células únicas.

http://invitroplanta.blogspot.com.br/2012/07/micropropagacao.html
Fontes de explantes
a) Cultura de meristema:

Consiste no estabelecimento do domo meristemático apical sem os

primórdios foliares. A brotação apical tipicamente cresce, originando
um único broto.

b) Cultura de ápices caulinares:

É o estabelecimento in vitro a partir de brotações apicais maiores do que

aquelas utilizadas para iniciar a cultura de meristema, tendo alguns
primórdios foliares. Essas brotações apicais podem produzir múltiplas
brotações.
Fontes de explantes
c) Cultura de segmentos nodais:

Os segmentos nodais são constituídos de gemas laterais isoladas,

segmentos de caule com uma ou múltiplas gemas. Cada gema desenvolve
para formar uma única brotação.

d) Cultura de embriões:

É iniciada a partir de embriões zigóticos extraídos de sementes. Os

embriões germinam originando brotos.
Técnicas de cultura de tecidos
 Micropropagação

A micropropagação é a propagação fiel de um genótipo selecionado por meio

das técnicas da cultura in vitro.

http://www.producaovegetal.com.br/index.php/estrutura_fisica/detalhe/7 http://agroevento.com/agenda/vi-curso-cultura-tecidos-plantas/
Técnicas de cultura de tecidos
 Microenxertia:

Técnica que consiste em

microenxertar, em condições
assépticas, um ápice caulinar,
retirado de uma planta matriz,
sobre um porta enxerto
estabelecido in vitro.
http://agroevento.com/agenda/8-curso-micropropagacao-plantas/
 Outras Técnicas...
Existem várias outras técnicas de culturas de tecidos utilizadas na agricultura,
são elas:

 Cultura de raízes;

 Conservação in vitro de recursos genéticos de plantas;

 Polinização e fertilização in vitro;

 Cultura de embriões;

 Cultura de ovários;

 Protoplasto;

 Indução de mutações in vitro.

 Aplicações das técnicas de cultura de
tecidos vegetais para o melhoramento
 As principais aplicações das técnicas de cultura de tecidos vegetais podem ser
sumarizadas nas seguintes:

a) Cultura de meristemas:

Técnica mais antiga para a propagação clonal massal e para a obtenção de

plantas livres de virus, principalmente quando combinada com a técnica de
termoterapia. Esta técnica é relativamente simples e aplicável a um grande
número de espécies

b) Avaliação rápida de suscetibilidade:

A cultura de células, tecidos e órgãos pode ser empregada para a

avaliação de suscetibilidade/tolerância à várias moléstias ou estresses
abióticos.
 Aplicações das técnicas de cultura de
tecidos vegetais para o melhoramento
c) Indução de florescimento precoce:

Esta técnica é empregada para reduzir o longo período de juvenilidade que

ocorre principalmente nas plantas perenes, permitindo uma redução
substancial de tempo nos programas de melhoramento genético.

d) Variação somaclonal:

O ambiente da cultura in vitro pode induzir variabilidade nas culturas

este fenômeno foi denominado de variação somaclonal. A variabilidade
gerada desta maneira pode ser importante para o melhoramento genético.
PROBLEMAS NA CULTURA IN VITRO
O cultivo in vitro como qualquer outro processo é
sensível a alguns problemas de ordem ambiental ou
biológico

DECLÍNIO DO VIGOR

OXIDAÇÃO

NECROSES

HIPERHIDRICIDADE
 PROBLEMAS NA CULTURA IN VITRO
DECLÍNIO DE VIGOR
 As plantas desenvolvem o
metabolismo de acordo com os
estímulos recebidos = problemas
são refletidos na fisiologia do
explante.
 Baixa taxa de desenvolvimento =
declínio de vigor
 Produção de substâncias fenólicas
 Habituação – citocina: doses normais
não respondem ao estímulo
 Maturidade
 Erros no balanço nutricial do meio de
http://www.scielo.br/img/revistas/rceres/v59n3/a01fig1.jpg
cultura
 Culturas que não são repicadas ->
diminuição na taxa de formação de
brotos
 PROBLEMAS NA CULTURA IN VITRO
NECROSE
 Necrose: morte de uma parte do organismo vivo -> perda
total ou parcial da cultura.
1. Necrose apical em brotações:
a) Deficiência de cálcio
b) Substâncias de crescimento
c) Intervalo de subculturas
d) Gases tóxicos
2. Diminuindo a necrose:
http://www.bonde.com.br/img/bondenews/2012/02/img_1_32_1138.jpg
a) Nitrato de cálcio e boro
b) Redução de gases = chama de cor azul
c) Aumento da disponibilidade de oxigênio
 PROBLEMAS NA CULTURA IN VITRO
OXIDAÇÃO
 A oxidação é a reação do oxigênio com íons metálicos (+) dos outros
compostos do meio de cultivo: explantes podem liberar exsudatos que
escurecem o meio ocasionados por liberação de fenóis dos ferimentos.

 Cisteína, o carvão ativado, PVP, ácido ascórbico e ácido cítrico:

controle no processo de oxidação.

 O ágar usado para geleificação pode conter compostos que apresentam

alta capacidade de oxidação.

http://culturadetecidos.com/wp-content/uploads/2011/12/n3a06f01.jpg
 PROBLEMAS NO CULTIVO IN VITRO
HIPERHIDRICIDADE
A hiperhidricidade é definida como o estado fisiológico que a planta
apresenta elevado teor de água no interior das células e tecidos com
aspecto translúcido.

OCORRÊNCIA ф Cultura de brotos e nós

ф Massa de calos de plantas lenhosas
ф Culturas que se desenvolvem rapidamente
ф Altas temperaturas
FATORES QUE ф Baixa irradiância luminosa
INFLUENCIAM ф Culturas no escuro
ф Condições contínuas de alta umidade relativa

ф Utilização da técnica de duas fases (meio líquido e sólido) no meio

DIMINUIÇÃO DA de cultura.
HIPERHIDRICIDADE ф Aumento da concentração de ágar no meio semi-sólido.
ф Controle da concentração de sacarose.
PROBLEMAS NO CULTIVO IN VITRO
HIPERHIDRICIDADE

http://www.scielo.br/img/revistas/rbpm/v11n2/a11fig04.gif
 PROBLEMAS NO CULTIVO IN VITRO
ACLIMATIZAÇÃO DE PLANTAS
 Aclimatização: processos para a
passagem da planta que está in vitro;
adaptação climática; artificial.

 Aclimatação:processo no qual as plantas

tomam ajustados a um novo clima ou
situação, como resultado de um
processo essencialmente natural.

 Maioria não sobrevive quando

transferidas das condições in vitro para
o ambiente externo.
1. Baixa capacidade fotossintética
2. Desidratação
3. Absorção de nutrientes http://www.lfdgv.ufsc.br/apostilaculturade
4. Doenças tecidos_arquivos/image033.jpg
 PROBLEMAS NO CULTIVO IN VITRO
ENRAIZAMENTO

Enraizamento in vitro: A
vantagem é o melhor controle das
condições em que se trabalha e, com
isso, a obtenção de um alto
percentual de enraizamento.
A desvantagem é que as raízes
formadas nem sempre são eficientes
na absorção de água e de nutrientes,
O enraizamento define o no momento da passagem das
resultado final da mudas para o substrato.
microropagação, é a etapa
onde ocorre a formação de
raízes adventícias nas partes Enraizamento ex vitro: A
aéreas. principal vantagem do enraizamento
é o menor custo financeiro. As
estacas brotadas, ao invés de serem
inoculadas em meios de cultura com
reguladores propícios ao
enraizamento, são enraizadas fora
das condições assépticas dos frascos
de cultura, já fazendo parte da etapa
seguinte, a aclimatização.
ESPÉCIES E TECNOLOGIAS
EMPREGADAS
Dendezeiro: primeiro projeto no qual plântulas originadas a
partir de embriogênese somática

Coniferas: primeiro projeto com poliembriogênese somática

desenvolvidas e patenteadas pela Universidade da Cailfornia-Davis

Eucaliptos: organogênese, embriogênese somática (USA, Europa).

Microestacas (Brasil)
ESPÉCIES E TECNOLOGIAS
EMPREGADAS
Brassica sp: resgate de embriões resultantes de
cruzamentos incompatíveis, ativação de embriogênese
somática e encapsulamento para a obtenção de sementes
sintéticas. Sakata Seed Co., Japão.

Cacau e café: embriogênese somática para a

propagação massal de variedades melhoradas
e resistentes a moléstias (EUA e Costa Rica).

Tomateiro: variantes somiclonais e

transformação genética para coloração e
conservação.
Obrigado!