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Palavras-chave
Curcumina; Cúrcuma; Filme bioativo; Antioxidante; Propriedades mecânicas
1 . Introdução
É possível fazer filmes comestíveis a partir de biopolímeros como polissacarídeos e proteínas extraídas de matéria-prima vegetal ou animal. Em
geral, esses biopolímeros constituem uma barreira fraca ao vapor de água; além disso, em comparação com as embalagens sintéticas, apresentam
resistência mecânica e alongamento insatisfatórios. Para tornar os filmes de proteína e amido mecanicamente mais fortes, alguns autores
incorporaram fibras de diferentes origens vegetais (cânhamo, juta , linho, bagaço, algodão, sisal, fibras de trigo, etc. ) , 2013 , Satyanarayana et al.,
2009). Os resultados nem sempre são favoráveis: os polímeros podem ser termodinamicamente incompatíveis, culminando na separação de fases (
Grinberg & Tolstoguzov, 1997 ). Para contornar esse problema, pesquisadores prepararam filmes biodegradáveis a partir de misturas naturais
(carboidratos, proteínas, lipídios e fibras) obtidas na forma de farinha a partir de matérias-primas de origem vegetal como cereais, tubérculos e
rizomas ( Andrade-Mahecha et al., 2012 , Dias et al., 2010 , Gontard et al., 1993 , Tapia-Blácido et al., 2007 , Tapia-Blácido et al., 2005 , Tapia-Blácido
et al., 2011). Uma tendência recente é a utilização de resíduos industriais para obtenção de misturas naturais de biopolímeros como farinha, o que
pode proporcionar ao mercado de embalagens um produto competitivo.
A Curcuma longa L. pertence à família Zingiberaceae, comumente conhecida como cúrcuma. Consiste em uma erva perene rhizomatus com rizomas
primários e secundários; e sua forma varia de esférica a levemente cônica, hemisférica ou cilíndrica (Jyothi, Moorthy, & Vimla, 2003). Esta erva é
amarelo brilhante porque contém curcumina, um composto difenólico, que exerce ação anti-inflamatória e é um potencial candidato para tratar
fibrose cística, Alzheimer, doenças da malária e câncer (Maheshwari et al., 2006,Yallapu et al., 2012). A cúrcuma também contém os curcuminóides
desmetoxicurcumina e bisdemetoxicurcumina (Joshi, Jain e Sharma, 2009).
Pode-se extrair a oleorresina de cúrcuma de rizomas secos por extração Soxhlet, sonicação e extração líquido-líquido usando acetona, metanol,
etanol e isopropanol como solventes orgânicos. Também é possível obter essa resina por extração com fluido supercrítico com CO 2 ( Braga et al.,
2003 , Braga et al., 2006 , Euterpio et al., 2011 , Joshi et al., 2009 ). A oleorresina de cúrcuma geralmente contém 30-45 g/100 g de curcuminóides e
15-20 g/100 g de óleo volátil. Pois essa extração gera um resíduo que consiste predominantemente de amido e fibras e pode apresentar teores
residuais de curcuminoides com propriedades antioxidantes ( Braga et al., 2003 ,Braga et al., 2006 , Kuttigounder et al., 2011 ), propomos que este
resíduo seja utilizado para desenvolver um filme biodegradável. O filme de cúrcuma resultante pode ser um material de embalagem ativo, a
presença de curcuminoides confere ao filme um caráter antioxidante. Portanto, este estudo teve como objetivo desenvolver filmes de cúrcuma a
partir de resíduo de extração de solvente de corante de cúrcuma usando a metodologia de superfície de resposta e análise multi-resposta, para
obter a formulação que proporcionaria o filme de farinha de cúrcuma com ótimas propriedades mecânicas e baixa permeabilidade ao vapor de
água, e avaliar a propriedade antioxidante desses filmes.
2 . material e métodos
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2.1 . Materiais
O pó de cúrcuma ( Curcuma longa L) foi fornecido pela indústria “Flores e Ervas” (Campinas, Brasil). A farinha de cúrcuma foi obtida por moagem e
peneiramento (0,075 mm) do resíduo de extração do corante de cúrcuma soxhlet. A extração seguiu o método proposto por Braga e Meireles (2007)
, utilizando etanol/isopropanol (1:1) (Synth - São Paulo, Brasil).
O sorbitol, utilizado como plastificante, foi adquirido da Sigma–Aldrich (São Paulo, Brasil).
(1)
Onde:
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AA = atividade antioxidante;
Para analisar a atividade antioxidante por HPLC (Modelo: CTO-10ASVP, Shimadzu), 20 μL do sobrenadante (filme/metanol) foi utilizado nas
seguintes condições: coluna C-18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μm), forno temperatura = 40 °C, detector = arranjo LED (420 nm), loop = 20 L, fluxo = 1,0
mL.min −1 . A fase móvel consistiu em 450 mL/L de acetonitrila em 550 mL/L de solução aquosa de 10 mL/L de ácido acético. O programa de
gradiente foi o seguinte: 0–12 min, 45 mL/L de acetonitrila; 12–32 min, 450–1000 mL/L de acetonitrila; 32–40 min, 1000 mL/L de acetonitrila.
A curcumina padrão, desmetoxicurcumina e bisdemetoxicurcumina foram obtidas da Fluka Analytical, Suíça (98%). Todos os outros produtos
químicos e reagentes foram adquiridos da E-Merck e eram de grau analítico. As soluções de metanol padrão de curcuminóides foram preparadas
de fresco, para construir a curva de calibração. Para obter essa curva, cinco soluções de cada tipo de curcuminoide foram preparadas em diferentes
concentrações (curcumina: de 0,002 a 0,035 g L −1 ; bisdemetoxicurcumina: de 0,0002 a 0,035 g L −1 ; e demetoxicurcumina: de 0,008 a 0,242 g L − 1 )
e analisados em triplicado. As curvas de calibração foram estabelecidas traçando as áreas dos picos versus a concentração de cada analito.
(2)
onde M t é o peso no tempo t e M o corresponde ao peso de sólido seco, determinado após secagem durante a noite a 105°C (antes da exposição a
95% RH).
Tabela 1 . Propriedades mecânicas, solubilidade em água, teor de umidade, permeabilidade ao vapor de água e opacidade do filme de farinha de
cúrcuma plastificado com sorbitol de acordo com o planejamento fatorial completo 2 2 desenhos compostos centrais. >).
1 80 (-1) 7 (-1) 5,7 ± 1,4 0,7 ± 0,3 527,1 ± 15,2 39,3 ± 1,9 0,178 ± 0,004 9,1 ± 0,4 20,9 ± 0,1
2 80 (-1) 9 (+1) 15,5 ± 0,5 0,8 ± 0,1 1811,6 ± 39,6 42,4 ± 9,4 0,400 ± 0,07 8,9 ± 0,2 15,0 ± 0,2
3 90 (+1) 7 (-1) 11,5 ± 2,9 0,7 ± 0,2 1362,4 ± 15,6 45,5 ± 0,5 0,186 ± 0,20 8,9 ± 0,1 11,4 ± 0,5
4 90 (+1) 9 (+1) 19,5 ± 2,8 1,2 ± 0,1 1857,1 ± 99,8 38,9 ± 1,9 0,220 ± 0,03 8,7 ± 0,1 14,4 ± 3,0
5 78 (-1,414) 8 (0) 6,3 ± 2,4 1,2 ± 0,1 601,5 ± 92 44,7 ± 2,8 0,594 ± 0,02 11,0 ± 0,1 21,3 ± 1,1
6 92 (+1,414) 8 (0) 13,7 ± 2,6 2,0 ± 0,4 973,0 ± 94,8 45,7 ± 0,8 0,304 ± 0,06 10,8 ± 0,1 6,9 ± 0,2
7 85 (0) 6,59 (-1,414) 2,8 ± 0,3 0,6 ± 0,1 462,1 ± 27,2 44,7 ± 5,4 0,100 ± 0,04 8,5 ± 0,1 22,5 ± 0,1
8 85 (0) 9,41 (+1,414) 13,4 ± 3,1 0,6 ± 0,2 2053,0 ± 284 37,8 ± 5,4 0,190 ± 0,10 7,6 ± 0,2 15,3 ± 0,4
9 85 (0) 8 (0) 17,4 ± 4,8 1,7 ± 0,2 1367,0 ± 121 36,9 ± 0,2 0,214 ± 0,11 9,0 ± 0,2 11,8 ± 1,1
10 85 (0) 8 (0) 18,0 ± 3,7 1,6 ± 0,2 1511,0 ± 133 35,5 ± 0,1 0,216 ± 0,05 9,0 ± 0,1 11,8 ± 0,2
11 85 (0) 8 (0) 16,9 ± 1,4 1,6 ± 0,2 1491,1 ± 201 37,7 ± 0,2 0,216 ± 0,007 9,0 ± 0,1 12,1 ± 0,1
uma
T (°C).
b
Valores de variáveis independentes (os valores entre colchetes são as variáveis codificadas).
c
Resistência à tração (TS), alongamento à ruptura ( E ), módulo de Young (YM), solubilidade ( S ), permeabilidade ao vapor de água (WVP), teor de umidade (M),
opacidade (OP).
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uma
Resistência à tração (TS), alongamento na ruptura ( E ), permeabilidade ao vapor de água (WVP) e solubilidade em água ( S ) de filmes de farinha de cúrcuma.
b
Desvio relativo (RD): [(valor experimental − valor previsto)/valor experimental]/100.
Uma análise de variância (ANOVA), um teste de comparação múltipla e todas as análises estatísticas foram realizadas usando o software Statistica
6.0. Os dados foram ajustados a uma equação de segunda ordem (equação (3) ) em função das variáveis independentes.
(3)
onde b n eram coeficientes de regressão constantes, Yi eram as variáveis dependentes (resistência à tração (TS), alongamento na ruptura (E), módulo
de Young (YM), solubilidade (S), teor de umidade (MC), WVP e opacidade (OP ); e X 1 e X 2 foram as variáveis independentes codificadas
(temperatura de aquecimento e pH, respectivamente).
Após a obtenção dos resultados de resposta de superfície, as condições do processo foram otimizadas por análise de resposta múltipla ( Derringer
& Suich, 1980 ). Este método transformou as variáveis de resposta ( Y i ) em uma função individual de desejabilidade adimensional ( g i ) (equação (4)
), variando de 0 (resposta indesejável) a 1 (resposta desejada). A função de desejabilidade global ( G ) (equação (5) ) foi obtida a partir das médias
geométricas dos desejos individuais. G foi posteriormente maximizado usando o software Mathematic 5.0.
(4)
Onde:
(5)
onde Y min era o valor mínimo da resposta e Y max era o valor máximo da resposta, k era o número de respostas consideradas e n era o peso de cada
resposta.
No caso da solubilidade, a equação (4) teve que ser redesenhada, para obter os valores mínimos para essas respostas (equação (6) ).
(6)
Por fim, os filmes de farinha de cúrcuma foram preparados nas condições ideais, para validar as condições de processo otimizadas obtidas pela
análise multi-resposta. Os experimentos de validação foram realizados em triplicata, e os filmes resultantes foram caracterizados quanto às suas
propriedades mecânicas, solubilidade, WVP, microestrutura e atividade antioxidante.
3 . Resultados e discussão
(7)
(8)
(9)
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(10)
(11)
(12)
(13)
Usamos esses modelos para gerar a superfície de resposta ( Fig. 1 , Fig. 2 , Fig. 3 , Fig. 4 ).
Fig. 1 . Resistência à tração (a), alongamento na ruptura (b) e módulo de Young (c) de filmes de farinha de cúrcuma em função da temperatura de
aquecimento e pH.
Fig. 2 . Solubilidade em água (a) e teor de umidade (b) de filmes de farinha de cúrcuma em função da temperatura de aquecimento e pH.
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Fig. 3 . WVP dos filmes de farinha de cúrcuma em função da temperatura de aquecimento e pH.
A Fig. 1 (a–c) mostra as superfícies de resposta para TS, E e YM de filmes de farinha de cúrcuma plastificados com sorbitol. A superfície de resposta
para TS apresentou uma região máxima entre 85 e 92 °C e pH 7,5 a 9,4 ( Fig. 1 a). Portanto, valores mais altos de temperatura de aquecimento e pH
produziram uma matriz polimérica mais densa e mecanicamente mais forte. Nossa equipe observou esse mesmo comportamento no caso de
filmes de farinha de achira e amaranto ( Andrade-Mahecha et al., 2012 , Tapia-Blácido et al., 2005 , Tapia-Blácido et al., 2011 ). Por outro lado, uma
faixa de temperatura semelhante e pH entre 7,5 e 8,5 forneceu maior alongamento na ruptura ( Fig. 1 b).Andrade-Mahecha et al. (2012) também
relataram valores máximos de resistência à tração e alongamento na ruptura em faixas de temperatura e pH semelhantes. Valores de pH mais
elevados (pH > 8,5) proporcionaram os valores máximos de YM, independentemente da temperatura de aquecimento ( Fig. 1 c). Em pH alto (meio
alcalino), as proteínas da cúrcuma podem ter atingido a máxima dissolução e sofrido certas mudanças de conformação, que afetaram as
propriedades mecânicas dos filmes.
Foi possível associar o efeito da temperatura de aquecimento nas propriedades mecânicas do filme de farinha de cúrcuma com a gelatinização do
amido e a desnaturação de proteínas. A análise térmica do amido de Curcuma longa Linneu por DSC mostrou que a temperatura de início de
gelatinização ( T o ), temperatura de pico ( T p ) e temperatura de conclusão ( T c ) foram 70,8, 81,0 e 97,0 °C, respectivamente ( Braga et al., 2006).
Portanto, a alta temperatura de aquecimento (>85 °C) promoveu a gelatinização completa do amido presente na farinha de cúrcuma, devido à
lixiviação da amilose. Isso culminou no aumento das interações entre o amido e outros componentes da matriz polimérica (proteínas, lipídios e
fibras). A desnaturação das proteínas presentes na farinha também pode ter aumentado o número de interações entre os diversos biopolímeros,
como as interações polifenol/proteína, devido à presença de lignina, um composto polifenólico ( Montaño-Leyva et al., 2013 ). Alguns autores
relataram que a alta temperatura dos filmes preparados deve ser entendida em termos de um estado de compactação onde ocorre extensa ligação
intermolecular, inibindo orientação adicional e melhor alinhamento das cadeias de proteínas e amido.Arvanitoyannis, Nakayama, & Aiba, 1998 ).
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A Fig. 2a demonstra que a superfície de resposta de solubilidade atingiu um mínimo entre 80 e 88°C, em pH > 7,5. Assim, em temperaturas de
aquecimento intermediárias e valores de pH mais elevados produzem filmes menos solúveis.
A Fig. 2b revelou que temperaturas variando de 82 a 90 °C e valores de pH mais altos (9–9,4) definiram uma região de teor mínimo de umidade.
Valores de pH mais altos proporcionaram filmes com menor teor de umidade (consulte a Tabela 1). Uma temperatura de 85°C e pH 9,4 (ensaio 8)
forneceu o teor mínimo de umidade (7,6 g/100 g). Portanto, altas temperaturas e valores de pH forneceram uma rede que apresentou menos
grupos hidrofílicos para interagir com os grupos -OH das moléculas de água. Mais interações hidrofóbicas devem ocorrer nessas condições
porque, além das interações proteína-proteína e amido-amido, os lipídios devem interagir com as proteínas, culminando em um filme de farinha
de cúrcuma com menor solubilidade e teor de umidade. A presença de celulose, hemiceluloses e lignina na farinha de cúrcuma também
contribuiu para a menor afinidade do filme com a água. A lignina provavelmente se localizou na superfície das fibras de cúrcuma, aumentando o
número de sítios hidrofóbicos na matriz do filme ( Montaño-Leyva et al., 2013). Por outro lado, outros autores relataram que a adição de
nanocristais de celulose de fibras de kenaf reduziu a absorção de água, porque uma rede de nanopartículas de celulose se originou, impedindo o
inchaço do amido e a absorção de água ( Zainuddin, Ahmad, & Kargarzadeh, 2013 ). A menor hidrofilicidade dos filmes de farinha de cúrcuma pode
explicar os menores valores de E (0,7-2%) obtidos para esses filmes em comparação com a farinha de amaranto (12,9 ± 5,2%) ( Tapia-Blácido et al.,
2005 ), e farinha de achira (14,6 %) ( Andrade-Mahecha et al., 2012 ).
A Fig. 3 evidenciou que a alta temperatura de aquecimento (acima de 80 °C) produziu filmes com menor WVP em todas as faixas de pH estudadas.
De acordo com a Tabela 1 , os filmes produzidos a 85°C e pH 6,59 foram menos permeáveis ao vapor de água (ensaio 7). Assim, a temperatura de
aquecimento afetou a solubilidade e WVP de forma semelhante. Talvez o aumento da temperatura de aquecimento tenha favorecido as interações
entre os biopolímeros (amido, proteína, lipídio e fibra), bem como a distribuição homogênea dessas interações dentro da matriz do filme, o que
pode ter resultado em menor WVP.
A Fig. 4 mostrou que a temperatura de aquecimento mais baixa (78–82 °C) e valores de pH (6,6–7,5) forneceram um filme de farinha de cúrcuma
mais opaco. A opacidade dos filmes de farinha de cúrcuma diminuiu com o aumento da temperatura de aquecimento em toda a faixa de pH
testada aqui.
(14)
A função G otimizada forneceu T = 86,7 °C e pH = 8,5. Os filmes de farinha de cúrcuma preparados nestas condições de processo ajudaram a validar
a metodologia de otimização. Medimos e comparamos o TS, E , S e WVP dos filmes de farinha de cúrcuma com os valores previstos pelas Eqs. (7) ,
(8) , (10) , (12) . Os valores de desvio relativo revelaram que o previsto e o experimental se correlacionaram bem ( Tabela 2 ).
Os filmes de farinha de cúrcuma preparados com a formulação ideal foram mais resistentes (17,99 MPa) do que os filmes de farinha de achira (7,0
MPa) ( Andrade-Mahecha et al., 2012 ) e filmes de farinha de amaranto das espécies caudatus e cruentus (1,5–5,4 MPa) ( Tapia-Blácido et al., 2007 ,
Tapia-Blácido et al., 2011 ). No entanto, o alongamento foi inferior (1,78%) ao dos filmes constituídos por farinha de arroz e fibras de celulose
(4,0%) ( Dias, Muller, Larotonda, & Laurindo, 2011 ), filme de farinha de amaranto ( Tapia-Blácido et al., 2005 , Tapia-Blácido et al., 2011 ), e filmes
de farinha de achira (22%) ( Andrade-Mahecha et al., 2012 ).
Os filmes de farinha de cúrcuma apresentaram WVP de 0,415 × 10 −10 g m −1 s −1 Pa −1 . Este valor é baixo em comparação com os filmes feitos
com farinha de amaranto das espécies caudatus e cruentus (0,8–3,8 × 10 −10 g m −1 s −1 Pa −1 ) ( Tapia-Blácido et al., 2007 , Tapia-Blácido et al., 2011 ),
farinha de arroz (0,8–1,1 × 10 −10 g m −1 s −1 Pa −1 ) ( Dias et al., 2010 , Dias et al., 2011 ) e farinha de achira (5,3 × 10−10 g m −1 s −1 Pa −1 ) ( Andrade-
Mahecha et al., 2012 ). No filme de farinha de cúrcuma, as fibras influenciam as propriedades do filme que dependem da interface fibra-matriz;
somente uma boa adesão fibra-matriz permite que as fibras atuem como agentes de reforço, aumentando a rigidez do filme ( Andrade-Mahecha et
al., 2012 ). O comprimento e o diâmetro das fibras, bem como sua orientação e distribuição na matriz polimérica, podem afetar a extensão em que
a fibra e a matriz aderem ( Wollerdorfer & Bader, 1998 ).
A solubilidade do filme de farinha de cúrcuma preparada foi menor (36,32%) em comparação com filmes de farinha de amaranto (42,2%) ( Tapia-
Blácido et al., 2007 , Tapia-Blácido et al., 2005 , Tapia-Blácido et al., 2011 ), filmes de casca de batata (41,2%) ( Kang & Min, 2010 ) e filmes de farinha
de achira (38,3%) ( Andrade-Mahecha et al., 2012). As fibras presentes na farinha de cúrcuma devem ter se incorporado à matriz mais facilmente
sugerindo um bom grau de interação fibra-matriz. De fato, essas fibras foram distribuídas espontaneamente na farinha de cúrcuma. Essa forte
interação entre a matriz e as fibras (~65%) fez com que a matriz e a água interagissem menos, levando a uma menor solubilidade em água. A
incorporação de nanocristais de celulose (CNCs) na matriz plastificada de biocompósitos de fécula de mandioca diminuiu a solubilidade em água (
Zainuddin et al., 2013 ). Müller, Laurindo e Yamashita (2009) também verificaram que a solubilidade diminuiu em filmes de fécula de mandioca
com o aumento da quantidade de fibras (celulose).
Fig. 5 . Micrografias SEM de filmes de farinha de cúrcuma obtidos nas condições de processo otimizadas. (a) ×500 (b) ×1500 ampliação.
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Fig. 6 . Perfil de HPLC para (A) curcuminóides, (B) o extrato da torta de cúrcuma e (C) filme de farinha de cúrcuma preparado nas condições
otimizadas. Picos relativos à bisdemetoxicurcumina (a), demetoxicurcumina (b) e curcumina (c).
As concentrações de bisdemetoxicurcumina, demetoxicurcumina e curcumina no filme de farinha de cúrcuma foram 0,0037, 0,0008 e 0,0001
mg.mL - 1 , respectivamente. Portanto, o processo utilizado para extrair o corante da torta de cúrcuma removeu maior quantidade de curcumina.
Os filmes de cúrcuma apresentaram maiores quantidades de bisdemetoxicurcumina e desmetoxicurcumina.
A análise DPPH do filme ótimo plastificado com sorbitol deu 50,8% de AA. Esse valor foi inferior ao obtido para alguns antioxidantes utilizados na
indústria, como o hidroxil anisol butilado (BHA) (94%AA) e o ácido ascórbico (92%AA) ( Yu-Ling, Yang, & Mau, 2008 ), mas foi importante
considerando que a matéria-prima utilizada para preparar os filmes era um resíduo. Como os filmes de farinha de cúrcuma apresentam
propriedades antioxidantes efetivas, eles podem ser usados como embalagens ativas.
4 . Conclusão
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O resíduo de extração com solvente de corante de cúrcuma constitui uma fonte promissora para desenvolver filmes ativos biodegradáveis: o filme
de farinha de cúrcuma contém curcuminóides residuais com propriedade antioxidante efetiva. Os parâmetros do processo (temperatura de
aquecimento e pH) usados durante a formação do filme afetam as propriedades mecânicas, solubilidade, teor de umidade, permeabilidade ao
vapor de água e opacidade do filme resultante. A alta temperatura de aquecimento promove mais interações entre os polímeros presentes na
farinha de cúrcuma (amido-amido, proteína-proteína, proteína-lipídio e fibra-fibra), proporcionando uma estrutura polimérica mais resistente
com baixo WVP, umidade e opacidade. Valores de pH mais altos também favorecem uma matriz mais densa e mecanicamente mais resistente, com
menor solubilidade em água e permeabilidade ao vapor de água. A presença de material lignocelulósico contribui para aumentar a
hidrofobicidade, culminando em filmes de farinha de cúrcuma menos homogêneos e menos flexíveis. As condições ideais para produzir filmes de
farinha de cúrcuma com boa resistência à tração, baixa solubilidade, baixo WVP e baixa opacidade sãoT = 86,7°C e pH = 8,5.
Reconhecimento
Os autores agradecem a Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) e CAPES (Coordenação de Aperfeicionamento de Pessoal
de Nível Superior) pelo apoio financeiro.
Artigos recomendados
Referências
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Desenvolvimento e otimização de filmes biodegradáveis à base de farinha de achira
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alimentos – Uma revisão bibliométrica
2021, Tendências em Ciência e Tecnologia de Alimentos
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https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0023643813004829?via%3Dihub 13/13