Programa de Pós-Graduação em Recursos Pesqueiros e Engenharia de Pesca - PPREP

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PROJETO DE PESQUISA DOUTORADO

1. IDENTIFICAÇÃO:
Nome do Candidato: SERGIO MAURICIO VALELONGO DOS SANTOS
Nome do curso e área de concentração do mestrado: MESTRE Ano de conclusão do
EM QUÍMICA, QUÍMICA ANALÍTICA mestrado: 2013
Universidade que concluiu o mestrado: UFPR

2. LINHA DE PESQUISA E ORIENTAÇÃO:

Linha de pesquisa Opções de orientador
( ) Aquicultura 1 – PITÁGORA PIANA
( X ) Manejo e Conservação de Recursos 2 – ALDI FEIDEN
Pesqueiros de Águas Interiores

3. QUESTIONÁRIO E TERMO DE COMPROMISSO:

1. Por que você deseja cursar Doutorado? POR RAZÃO DE SER CONVIDADO PARA
DESENVOLVER UMA MELHORIA EM UM PRODUTO BIOTECNOLÓGICO PARA
AQUICULTURA.
2. Por que a escolha dessa instituição e deste programa? POR JÁ CONHECER O
PROGRAMA E CONFIAR NO ORIENTADOR PITÁGORAS PARA EXECUTAR O
PROJETO.
3. Qual sua experiência na área de concentração? QUÍMICA ANALÍTICA,
DESENVOLVIMENTO DE METODOLOGIA PARA PRODUÇÃO DE FERMENTADO
COMO BIOPROCESSO.
4. Possui vínculo empregatício? ( X ) Não; ( ) Sim;
Em caso afirmativo, qual a carga semanal do vínculo.........................
Se selecionado, manterá vínculo empregatício? ( ) Sim ( ) Não
Em caso afirmativo, a liberação será: ( ) Integral ( ) Parcial ____ horas/semana
dedicadas à pós-graduação.
5. Caso seja selecionado aceita alterar o ante-projeto de pesquisa apresentado na
inscrição? ( X ) Sim ( ) Não
6. Possui disponibilidade de realizar doutorado sandwich no exterior? ( X ) Sim (
) Não
7. Declaro que este pedido contém informações completas e exatas, que aceito o sistema
e os critérios adotados pela Instituição para avaliá-lo e que, em caso de cursar disciplinas
de pós-graduação nesta Universidade, comprometo-me a cumprir fielmente seus
regulamentos e os do programa no qual solicito minha admissão.

ASSINATURA:______________________________________

Assinatura do candidato: Local: CASCAVEL

Data: 28/11/2022
4. PROJETO DE TESE:

Título: DETERMINAÇÃO DE CONDICIONANTES PARA O MELHORAMENTO DE

PRODUTO SIMBIÓTICO COM USO DE MICRO-ORGANISMOS DE BIOAUMENTAÇÃO.
A necessidade de reaproveitamento dos recursos hídricos na aquicultura tem se
tornado cada vez mais comum, devido a legislação, e preferências comerciais principalmente
de países importadores e cooperativas deste mercado consumidor. Tendo em vista esses
pontos, há pesquisas e produtos sendo desenvolvidos envolvendo algas, bactérias como
probióticos ou bioaumentação, no entanto pouco ainda é desenvolvido no sentido do uso de
vários deles ao mesmo tempo, tão pouco como fontes ativas para biorremediação utilizando
biorreatores ou fotobioreatores in situ nos tanques de produção.
Sendo assim esta tese tem como objetivo, determinar condições de melhoramento do
produto Aqualife® Biostarter com uso de micro-organismos de bioaumentação ou probióticos
para uso concomitante, avaliando o efeito da presença em diversas concentrações de
bactérias especificas, que sejam de uso comum na literatura e disponíveis no mercado, em
consórcio com outras espécies microbiológicas. Acompanhando parâmetros de
desenvolvimento dos peixes durante os testes aplicáveis e identificando os melhores
resultados do uso em consórcio entre os micro-organismos testados.
É esperado a determinação de cepas e espécies de micro-organismos e suas
concentrações para uso concomitante com o produto Biostarter e outros possíveis produtos
semelhantes no mercado, buscando melhoria na qualidade da água dos criadouros e no
crescimento dos alevinos.

1. INTRODUÇÃO
A aquacultura é o setor de produção alimentícia que nos últimos tempos vem
apresentando algumas das maiores taxas de crescimento mundial. Segundo a FAO (2014)
apresentando um crescimento médio anual na casa dos 8% entre 1950 e 2012.
No Brasil a taxa de crescimento da produção do setor também vem crescendo onde a
Tilápia de água doce tem sido significativo para o setor. De acordo com dados da FAO
(2022) apenas em se tratando da produção de Tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus), em
2020 a produção nacional alcançou a marca de 630200 toneladas, representando um
aumento de quase 5% em relação a produção do ano anterior e cerca de 16% de aumento
em relação a produção de 2016. Indicando que o aumento dessa cultura ainda progride
acelerado.
No entanto infecções, principalmente bacterianas continuam sendo um dos principais
fatores limitantes na expansão do setor. O uso indiscriminado e ou de forma incorreta de
antibióticos, implicou em algumas dificuldades como infecções mais resistentes em outras
gerações e acúmulo de antibióticos nos tecidos dos peixes e também problemas ecológicos
em áreas costeiras de grande atividade exploratória e industrial. Tais fatores em associação
com outros relativos ao consumo dos animais criados de tal maneira levou a um banimento
completo em 2006 por países da união europeia. (IGE, B.A., 2013).
Probióticos são uma opção promissora como alternativa ao uso de produtos químicos
e antibióticos em animais aquáticos. (HAI, N. V., 2015). Segundo a FAO/OMS probióticos
são organismos vivos que oferecem benefício ao hospedeiro quando em dosagens
adequadas (FAO, 2001). Bacillus subtillis e Saccharomyces cerevisiae são exemplos de
probióticos já utilizados na piscicultura. Sendo utilizados como reguladores de espécies
bacterianas no meio de cultura e como forma de controle da microbiota intestinal dos peixes,
melhorando o sistema imune e saúde geral da produção. (Telli, G. S., 2017).
Trabalhos de revisão como de LOPES, R. B., et al. 2010 apontam que o uso de
bactérias que podem ser também consideradas probióticos tem influência positiva na
remoção de matéria orgânica do meio de cultura sem modificação aguda na composição
química da água.
Outro fator que necessita acompanhamento diário nos tanques de produção de
peixes é a quantidade de oxigênio dissolvido presente na água, que sofre variações
acentuadas durante as etapas do dia influenciada pelo metabolismo dos seres presentes na
água de criação, principalmente da presença de fitoplanctons e de luminosidade. A
importância da densidade de oxigênio presente na água de criação de peixes, passa por
efeitos na digestão do peixe que se torna mais lenta conforme a densidade do gás dissolvido
cai no meio, chegando até a morte dos peixes. (MALLYA Y. J., 2007)
Foto biorreatores já vem a sendo estudados e desenvolvimentos a vários anos e nas
últimas décadas vem sendo extensivamente pesquisados para a produção de algas focando
biodiesel e biomassa para diversas utilidades. (LEE, C-G., PALSSON, B. O., 1994; SUH, I.
S., LEE, C-G., 2003; AI, W., et al., 2008; UGWU, C. U., AOYAGI. H., UCHIYAMA, H., 2008;
TERMINI, I. D., et al., 2011; SINGH, R.N., SHARMA, S., 2012; SERO, E. T., et al., 2019;
NWOBA, E.G., et al., 2019). No entanto não há relatos sobre tal tipo de tecnologia aplicada
a tanques criadouros a fim de mitigar a formação de características indesejadas no meio de
produção proveniente da prática.
Água de boa qualidade é imprescindível como suporte à vida dos organismos
presentes nela ou que a consumam. As características químicas e físico-químicas dos
corpos de água utilizados para aquacultura são influenciados tanto por fatores internos como
externos. (FARANTICA, et al., 2020).
Fatores característicos da água utilizada nos criadouros como pH, salinidade e até
mesmo características temporárias como temperatura influenciam na adaptação de certas
espécies a mesma. Embora esses fatores possam ser ativamente regulados por meio de
produtos, processos químicos ou outros processos indiretos, as características físico
químicas do recurso hídrico podem ser alteradas inadvertidamente, assim como sua
composição devido à má gerência dos recursos, assim falhas no acompanhamento de
características simples como a temperatura, podem influenciar na digestão dos animais, por
sua vez resíduos de alimentos na água irão degradar no meio hídrico que potencialmente irá
tender a menor qualidade do meio de cultura. (SU et. al., 2020).
Amônia é uma fonte comum de nitrogênio para o crescimento de algas e microalgas e
um contaminante comum para os meios de criação de peixes, principalmente os semi-
intensivos e intensivos, devido as funções biológicas dos peixes. (SALBITANI, G.,
CARFAGNA, S., 2021).

2. JUSTIFICATIVA
A necessidade de reaproveitamento dos recursos hídricos na aquacultura tem se
tornado cada vez mais comum, devido a legislação e preferencias comerciais principalmente
de países importadores e cooperativas com esse mercado consumidor. Assim como o
crescente custo de insumos químicos e antibióticos.
Tendo em vista desses pontos há pesquisas e produtos sendo desenvolvidos
envolvendo algas, bactérias como probióticos ou bioaumentação, no entanto pouco ainda é
desenvolvido no sentido do uso de vários deles ao mesmo tempo, tão pouco como fontes
ativas para biorremediação utilizando biorreatores ou fotobioreatores in situ nos tanques de
produção.
Portanto há espaço e necessidade de desenvolvimento de produtos e pesquisa sobre
formas possivelmente mais econômicas e menos agressivas ao meio ambiente, para
melhoria da qualidade da água de produção e aumento da capacidade de suporte do meio.

3. OBJETIVOS
a. Determinar condições de melhoramento do produto Aqualife® Biostarter com uso
de micro-organismos de bioaumentação ou probióticos para uso concomitante;
b. Avaliar o efeito da presença em diversas concentrações de bactérias especificas,
que sejam de uso comum na literatura como probióticos ou em bioaumentação na
aquacultura, em consórcio com outras espécies microbiológicas;
c. Desenvolver e avaliar potencial de aplicação de biofiltros ou fotobiorreatores de
baixo custo, visando seus efeitos benéficos para o meio de produção, assim como sua
estabilidade durante uso e vida útil;
d. Acompanhar parâmetros físico-químicos dos recursos hídricos utilizados nos
ambientes de cultivo durante a cultura dos peixes com uso de probióticos em consórcio com
outros micro-organismos comerciais;
 e. Acompanhar parâmetros de desenvolvimento dos peixes durante os testes
aplicáveis;
f. Identificar os melhores resultados do uso em consórcio entre os micro-organismos
testados.

4. MATERIAL E MÉTODOS
As bactérias e algas utilizadas nos testes serão adquiridas em parceria com a empresa
regional Aqualife®, ou produtos semelhantes disponíveis no mercado nas datas necessárias. Assim
como o produto Biostarter.
Inicialmente será feito testes de toxicidade aguda em parceria com laboratório A3Q, para
determinar a faixa de concentração útil das bactérias comerciais, baseado na letalidade dos
zooplânctons presentes a partir do Biostarter Aqualife®, com a finalidade de definir quais cepas se
adequam melhor ao uso concomitante.
A determinação dos micro-organismos escolhidos para testes posteriores será feita a partir
dos resultados obtidos nos testes em parceira com o laboratório A3Q, baseado nas faixas de
concentrações que podem ser utilizadas, disponibilidade no mercado e variações possíveis de pH,
que se adequem melhor as características procuradas para a produção de tilápias.
Os testes concomitantes do produto Biostarter e micro-organismos escolhidos serão feitos
em tanques de produção de 3,00 x 4,00 x 1,20 metros de concreto do INPAA, na fase de alevinagem
das tilápias, com o modelo produtivo a ser definido de acordo com o orientador e disponibilidade de
insumos do mercado na data necessária, buscando sempre a semelhança com o método adotado
pelos produtores do oeste do estado do Paraná. Os testes serão feitos pelo menos em triplicata,
concomitante ou não, modificando concentrações dos bioaumentadores ou probióticos, para se
encontrar condições ideiais de uso em consórcio levando em conta parâmetros físico-químicos e
biometria dos alevinos durante 40 dias. Todos os testes simultâneos haverá um teste “branco” sem o
uso de nenhum adicional dos micro-organismos testados para possível comparação.
Os parâmetros físico-químicos do meio de cultura, temperatura, pH, densidade de oxigênio
dissolvido, alcalinidade, concentração de amônia e turbidez serão acompanhados diariamente,
sempre que possível feito acompanhamento in situ, quando possível for usar sondas analíticas,
minimizando a quantidade retirada de água dos meios para análise. Para as análises que não sejam
possíveis serem acompanhadas por sonda, será retirado amostra com volume suficiente para mais
de três replicatas a serem feitas nos laboratórios da Unioeste. As metodologias laboratoriais
necessárias serão selecionadas de acordo com adequação a função esperada e capacidade e
disponibilidade de equipamentos e reagentes nos laboratórios da Unioeste.
O acompanhamento do desenvolvimento dos alevinos será por amostragem para biometria
para fins de comparação paralela entre desenvolvimento dos alevinos e desenvolvimento das
características físico-químicas do meio de cultura a fim de se traçar paralelos uteis entre
possibilidade de melhorias na alevinagem assim como possíveis melhorias na qualidade da água
que possibilitem economia futura em tratamento da água. Será acompanhado também a mortalidade
dos alevinos nos criadouros para comparação entre os testes.
O desenvolvimento dos biofiltros e ou fotobiorreatores será feita com materiais de
reaproveitamento que possam ser testados como estruturas para os mesmos. Os insumos serão
adquiridos em parceria com a empresa Aqualife®. Serão produzidos módulos, para que possam ser
dimensionados para uso nos tanques de teste prevendo ampliação das dimensões para tanques de
produção reais.
Os desenvolvimentos dos testes com biofiltros e ou fotobiorreatores serão feitos inicialmente
a partir do final dos 40 dias de acompanhamento dos alevinos dos testes concomitantes, com
finalidade de acompanhar principalmente as mudanças dos parâmetros físico-químicos do meio. Se
possível será também feitos testes com estes módulos desde o início do acompanhamento dos
testes concomitantes para comparação dos resultados de biometria e comparação dos resultados
físico-químicos. Sendo todos os testes feitos, pelo menos, em triplicatas para haver a possibilidade
de tratamento estatístico dos dados e possível comparação entre modelos diferentes e uso de
quantidades diferentes de insumos, fontes luminosas ou formas diferentes de aplicação.

5. RESULTADOS ESPERADOS
É esperado a determinação de cepas ou pelo menos espécies de micro-organismos e suas
respectivas concentrações de uso concomitante com o produto Biostarter e outros possíveis
produtos semelhantes no mercado. Buscando melhoria na qualidade da água dos criadouros e no
crescimento dos alevinos.
Em ambos os testes se espera uma melhor qualidade final da água no sentido de que
precise menor tempo e ou custo de tratamento para reaproveitamento da água dos criadouros em
comparação aos brancos testados simultaneamente, além de um melhor desenvolvimento dos
alevinos é esperado também menor mortalidade dos alevinos nos criadouros.
6. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Ai, W., Guo, S., Qin, L., Tang, Y.; Development of a ground-based space micro-algae
photo-bioreactor. Advances in space research 41, 742-747, 2008.
FAO/WHO – Food and agriculture organization of the United nations, World heslth
organization. Evaluation of health and nutritional properties of powder milk and live lactic acid
bacteria. 2001
FAO. (Food and Agricultural Organization). Fisheries and Aquaculture Software.
FishStatJ-software for Fishery Statistical Time Series. Rome, Italy: FAO Fisheries and
Aquaculture Department (2014).
Farantika, R., Putro, S. p., Hadi, M., Triarso, I., Study on water quality physical-chemical
parameters aquaculture, áreas in Menjangan Besar, Island, Kepulauan Karimunjawa, Jepara,
Indonésia. Journal of physics: conference series. 2019.
Hai, N. V., Reasearch findings from the use of probiotics in tilápia aquaculture: A
review. Fish & Shellfish Immunology, 45 592-597, 2015.
Ige, B. A., Probiotics use in intensive fish farming. African Journal of Microbiology
Research. 7, 2701-2711, 2013.
Lee, C-G, Palsson, B. Ø., High-Density Algal Photobioreactors Using Light-Emitting
Diodes. Biotechnology and Bioengineering, 40, n°10, 1994.
Lopes, R. B., Olinda, R. A., Souza, B. A. I., Cyrino, J. E. P., Dias, C. T. S., Queiroz, J. F.,
Tavares, L. H. S., Efficiency of bioaugmentation in the removal of organic matter in aquaculture
systems. Brazilian Journal of Biology, 71, 409-419, 2011.
Nwoba, E. G., Parlevliet, D. A., Laird, D. W., Alameh, K., Moheimani, N. R., Light
management Technologies for increasing algal photobioreactor efficiency. Algal research,
2019.