de acordo com as instruções do fabricante.

As amostras foram incubadas no

Detector de sequência ABI PRISM 7000 para uma desnaturação inicial a 95 °C por 10

min, seguido por 40 ciclos de PCR, cada ciclo consistindo em 95 °C por 15 s, 60 °C por

1 min e 72°C durante 1 min. Os seguintes primers foram usados: PGC-1 humana:

5 TGCCCTGGATTGTTGACATGA (sentido) e 5 TTTGTCAGGCTGGGGGTAGG

(anti-sentido); PGC 1 humana: 5 TTGAGGAGTGCGAGGTGCTG (sentido) e

5 ATCTGGGCCAGCAGAAGTGC (anti-sentido), PPAR humano: 5 AGGCGAGGGCGATCTTGACAG

(sentido) e 5 GATGCGGATGGCCACCTCTTT (anti-sentido); superóxido dismutase humano 1
(SOD1): 5 GGTGTGGCCGATGTGTCTATT (sentido)

e 5CTGCTTTTTCATCGACCACCA (anti-sentido); SOD2 humana: 5 TGCTGCTTGTCCAAATCAGG

(sentido) e 5 CACACATCAATCCCCAGCAGT (anti-sentido); GPx1 humana: 5
GCGGCGGCCCAGTCGGTGTA (sentido) e 5 GAGCTTGGGGTCGGTCATAA (anti-sentido); catalase
humana: 5 TCCGGGATCTTTTTAACGCCATTG

(sentido) e 5TCGAGCACGGTAGGGACAGTTCAC (anti-sentido); humano 18S

rRNA: 5 TGCCATGTCTAAGTACGCACG (sentido); 5 TTGATAGGGCAGACGTTCGA

(anti-sentido). As emissões de fluorescência do SYBR Green I foram monitoradas após cada

ciclo. Expressão de PGC-1, PGC-1, PPAR, SOD1, SOD2, GPx1, CAT e 18S

rRNA foram quantificados usando o método da segunda derivada máxima do

Software TaqMan (Applied Biosystems) determinando os pontos de cruzamento de

amostras individuais por um algoritmo que identifica o primeiro ponto de viragem de

a curva de fluorescência. A amplificação de transcrições específicas foi confirmada por

perfis de curva de fusão (resfriando a amostra a 68 °C e reaquecendo lentamente até

95 °C com medições paralelas de fluorescência) no final de cada PCR. a

especificidade da PCR foi ainda verificada submetendo a amplificação

produtos à eletroforese em gel de agarose.

Análise Estatística. Todos os processos de coleta de dados e estatísticas subsequentes

as análises foram realizadas com SPSS, Versão 15.0. As variáveis foram testadas para

distribuição normal pelo teste de Kolmogorov-Smirnov. Variáveis com distribuição não normal
foram transformadas em log para aproximar uma distribuição normal
 antes de aplicar o teste t ou estatísticas gerais de modelagem linear. Valores P de menos

superiores a 0,05 foram considerados significativamente diferentes.

As comparações de grupo (Tabela 1) foram feitas usando um Student não pareado de 2 lados

testes t. Dentro de subgrupos previamente não treinados (n 20) ou pré-treinados (n 20),

efeitos interindividuais do tratamento antioxidante entre os grupos de tratamento em

linha de base, bem como após a intervenção, foram comparados com testes t de Student não
pareados bilaterais. Para comparar os efeitos intra-individuais do exercício

dentro dos grupos de tratamento (pré vs. pós-exercício), testes de Student pareados de 2 lados

(Tabela 1 e Figs. 1 e 2).

Para determinar os efeitos supostamente diferenciais do status de treinamento inicial

(anteriormente não treinado vs. pré-treinado), foram realizadas análises multivariadas usando

uma abordagem de modelo linear geral sobre os valores delta (pós-valores menos pré-valores)
de todos os 39 indivíduos. As estatísticas ANOVA para efeitos da vitamina

suplementos como variável dependente são fornecidos após o ajuste para as covariáveis
"aberto" versus "cego" e "status de treinamento inicial" (anteriormente não treinado versus
pré-treinado). Um valor P significativo indicaria que a vitamina

suplementação tem um efeito sobre as medidas de resultado, independentemente do

estado de formação inicial. Este teste específico foi denominado ‘‘ANOVA’’

nas seções de Resultados e Discussão.

Também realizamos uma ANOVA adicional incluindo um termo de interação

(status de treinamento por suplemento) novamente usando valores delta (postvalues menos

pré-valores) e ajuste para as covariáveis acima. Um valor P significativo seria

indicam que o efeito da suplementação vitamínica é dependente

estado de treino. Este teste foi denominado “interação de vitaminas

por status de pré-treinamento por ANOVA'' ao longo dos Resultados e Discussão

Seções.