Atividade Avaliativa 2 – Engenharia Biotecnológica

Profa Grazielle S. S. Andrade

1) Um grupo de pesquisadores trabalharam na extração de lipídio de um fungo

filamentoso. Para isso, avaliaram 3 diferentes meios de cultivo, a fim de determinar
qual seria o melhor meio para geração do óleo microbiano. Os meios de cultivos
(aquosos) foram:

Composição (g/L) Meio 1 Meio 2 Meio 3

Fonte de carbono (FC) glicose glicose glicose
Concentração da FC 20 20 20
Fonte de nitrogênio (FN) sulfato de amônio milhocina* sulfato de amônio
Concentração da FN 1,5 0,5 1,5
Ácido nicotínico 0,001
Tiamina 0,001
KH2PO4 6
MgSO4.7H2O 0,5
*milhocina=resíduo agroindustrial do processamento do milho

Todos os processos fermentativos foram operados em frascos agitados operados sob

regime batelada, sem suprimento forçado de O2, com agitação de 250 rpm e temperatura
de 26°C. A fermentação durou 120h e o pH do meio foi mantido a 4,5. Amostras do meio
fermentado foram retiradas diariamente para dosagem da glicose residual. Ao final do
cultivo, os lipídios foram extraídos da biomassa por extração com solventes orgânicos.
Resultados obtidos:
Meio 1
Tempo (h) Biomassa (g/L) Glicose (g/L) Lipídio (g/L)
0 0 20 0
12 0,8 18 11
24 1,2 14 20
48 2,9 11,1 27
72 3,4 7,5 35
96 4,5 6,3 42
120 4,6 5,8 43

Meio 2
Tempo (h) Biomassa (g/L) Glicose (g/L) Lipídio (g/L)
0 0 20 0
12 1,9 16,5 2
24 5,5 12,5 5
48 7,4 7,8 11
72 9 4,7 14
96 11,8 1,5 18,2
120 12,5 0,4 22,8
 Meio 3
Tempo (h) Biomassa (g/L) Glicose (g/L) Lipídio (g/L)
0 0 20 0
12 2,3 18 5
24 2,5 15,8 11
48 2,7 12 16,8
72 3 11 21,7
96 3,2 7,5 22,5
120 3,2 7 25

Parte1
A respeito do processo fermentativo e dos meios de cultura utilizados responda:
a) Qual a importância da fonte de carbono e de nitrogênio no meio de cultura?
Quanto cada um representa aproximadamente em % da biomassa celular obtida?
b) Os meios de cultura são considerados sintéticos ou complexos? Explique.
c) Qual o papel do ácido nicotínico e tiamina no meio de cultura?
d) Qual o papel dos sais KH2PO4 e MgSO4.7H2O no meio de cultura?
e) Classifique os processos fermentativos quanto ao tipo de fermentação. Explique.
f) Classifique os processos fermentativos quanto ao tipo de inóculo. Explique.
g) Classifique os processos fermentativos quanto ao suprimento de O2. Explique.
h) Para armazenar o fungo em geladeira, qual meio de cultura seria ideal? Explique.
i) Como foi possível acompanhar o crescimento da biomassa fúngica? E se fosse um
cultivo de bactérias como poderia ser feito?
j) Qual a importância de se manter o controle de temperatura no cultivo? O que
poderia acontecer se houvesse um aumento expressivo na temperatura?
k) Qual a importância de se manter o controle do pH no cultivo? O que poderia
acontecer se houvesse mudança brusca de pH?
l) Você acha que o fungo cresceria sem agitação? Qual a importância da agitação
nos cultivos? Explique.

Parte2
Com base nos dados obtidos, trace o gráfico da produção de biomassa, consumo de
substrato e formação de produto para todos os meios e responda:
m) Compare os meios 1 e 2. Explique as diferenças encontradas nos componentes do
processo fermentativo ao longo do tempo e o que pode ter contribuído para essas
diferenças. Diga em qual cinética de formação de produto se enquadra o óleo.
n) Determine a produtividade em biomassa e em produto, a velocidade específica de
crescimento celular e o rendimento global observado para biomassa por substrato,
biomassa por produto e produto por substrato para os meios 1 e 2. Compare os
resultados. Explique o comportamento do crescimento da biomassa com base no
que você aprendeu sobre curva de crescimento microbiano.
 o) Compare os meios 2 e 3. Explique as diferenças encontradas nos componentes do
processo fermentativo ao longo do tempo e o que pode ter contribuído para essas
diferenças. Diga em qual cinética de formação de produto se enquadra o óleo.
p) Determine a produtividade em biomassa e em produto, a velocidade específica de
crescimento celular e o rendimento global observado para biomassa por substrato,
biomassa por produto e produto por substrato para os meios 2 e 3. Compare os
resultados. Explique o comportamento do crescimento da biomassa com base no
que você aprendeu sobre curva de crescimento microbiano.
q) Compare os meios 1 e 3. Explique as diferenças encontradas nos componentes do
processo fermentativo ao longo do tempo e o que pode ter contribuído para essas
diferenças. Diga em qual cinética de formação de produto se enquadra o óleo.
r) Determine a produtividade em biomassa e em produto, a velocidade específica de
crescimento celular e o rendimento global observado para biomassa por substrato,
biomassa por produto e produto por substrato para os meios 1 e 3. Compare os
resultados. Explique o comportamento do crescimento da biomassa com base no
que você aprendeu sobre curva de crescimento microbiano.

Observações:
 Cada grupo deverá escolher 2 itens da Parte 1 e 1 item da Parte 2 para responder
(serão 6 grupos de 6 pessoas).
 Todas os cálculos e explicações devem ser detalhados.
 Exercícios semelhantes entre os grupos serão zerados.
 Entrega das atividades atrasadas não serão aceitas.
 Colocar nome completo dos participantes nas apresentações.