Universidade Federal de Uberlândia

Instituto de Biotecnologia
Programa de Pós Graduação em Genética e
Bioquímica
I Webinar Nacional de Citogenética:
Explorando as fronteiras entre ciência e
tecnologia

USO DE UM MÉTODO DE VISUALIZAÇÃO DE ESTÔMATOS PARA

INDICAÇÃO DE POLIPLOIDIA EM UMA POPULAÇÃO MISTA DA
ESPÉCIE Eriotheca pubescens

JULIA DANTAS BASTOS SILVA; JESSYCA SANTANA DOS SANTOS;

RAFAELA CABRAL MARINHO; CLESNAN MENDES RODRIGUES; PAULO
EUGÊNIO ALVES MACEDO DE OLIVEIRA

RESUMO
A espécie Eriotheca pubescens é uma árvore endêmica do Cerrado brasileiro
cujo sistema reprodutivo e a ploidia foram analisados anteriormente. Estes
estudos descreveram níveis de ploidia diferentes e esta variação genômica
nesta espécie está associada a mudanças reprodutivas. Por isso, estudos em
escalas populacionais são necessários a fim de entender como esses
fenômenos estão relacionados em plantas nativas. Foram descritos para esta
espécie dois níveis de ploidia (2n= 4x= 184 e 2n= 6x= 276), mas uma
população recentemente estudada demonstra ter diferentes sistemas
reprodutivos e esta variação pode estar relacionada com a presença de
diferentes níveis de poliploidia. O objetivo deste trabalho é estabelecer um
protocolo alternativo baseado no destaque da epiderme abaxial das folhas para
a avaliação dos níveis de ploidia em uma população da espécie E. pubescens.
O protocolo estabelecido se trata de uma forma inovadora de análise de
estômatos nesta espécie. Estudos anteriores realizaram análise de estômatos,
mas utilizaram apenas a impressão foliar como forma visualização. A produção
destas lâminas de impressão foliar é muito difícil, pois a folha é muito rígida e
contém muitos tricomas, por isso utilizamos o método a seguir: as folhas
coletadas foram armazenadas em silica gel e, por isso, o material foi hidratado
com água a temperatura ambiente por 72 horas. Em seguida, foram realizadas
secções na face abaxial da folha a mão com o auxílio de um bisturi, produzindo
cortes da epiderme. Os cortes produzidos foram submersos em uma solução
de hipoclorito de sódio diluído a 60% durante 10 minutos e lavados com água e
as lâminas foram finalizadas com glicerina diluída a 50% e lamínula. As lâminas
foram fotografadas em microscópio óptico com câmera acoplada. As medições
dos estômatos foram realizadas com auxílio do software Image J. Cinquenta
estômatos de cada um dos seis individuos foram medidos. Esse protocolo se
mostrou mais eficiente e fácil do que o anteriormente usado e os indivíduos até
então analisados apresentaram as médias das medidas de altura dos
estômatos muito similares e correspondentes com indivíduos hexaploides
analisados anteriormente (31.68 ± 2.13; 39.50 ± 3.18; 35.75 ± 3.51; 31.19 ±
2.85; 29.17 ± 2.79; 34.02 ± 3.65). Serão necessárias mais medidas de
estômatos em mais indivíduos que pertencem a essa população para
estabelecer se a população é mista, pois os dados apresentados sugerem que
os indivíduos analisados tem a mesma ploidia.

Palavras-chave: Poliploidia; Cerrado; Malvaceae; níveis de ploidia;

morfometria

Agradecimentos: Fapemig por financiamento do projeto e ao CNPq pela bolsa

de iniciação científica da primeira autora.