MÉTODOS DE

ESTUDO
EM PATOLOGIA
Profa. Vanessa S. Aquino Silva
 Exames
Anatomopatológicos
 AUTÓPSIA ou NECRÓPSIA
 BIÓPSIA

 CITOLOGIA ESFOLIATIVA
 PUNÇÃO ASPIRATIVA COM
AGULHA FINA (PAAF)
AUTÓPSIA

“A lição de Anatomia do Dr. Tulp” (1632)

Rembrandt
 AUTÓPSIA

 determinar causa e modo de

morte

 estudo da história natural da

doença
BIÓPSIA

DIAGNÓSTICO
 Procedimento

 assepsia

 anestesia

 remoção de fragmento

 fixador – formalina 10%

Incisional e Excisional
 CITOLOGIA
ESFOLIATIVA

 A citologia esfoliativa corresponde ao

estudo de células descamadas da
mucosa, principalmente suprabasais,
por meio de microscopia de luz, onde
se analisam as mudanças
morfológicas e morfométricas das
células.
 CITOLOGIA
ESFOLIATIVA

 1940

 Raspagem

Geórgios Papanicolau
(1883-1962)
 CITOLOGIA
ESFOLIATIVA

Carcinoma espinocelular
PUNÇÃO ASPIRATIVA COM
AGULHA FINA (PAAF)

 INDICAÇÕES
 avaliação de órgãos
palpáveis
 tireóide
 mama
 gânglios linfáticos

 VANTAGENS
 não invasivo
 diagnóstico mais
rápido e efetivo
Carcinoma medular de tireóide
CITOLOGIA ASPIRATIVA
PUNÇÃO
 Processamento
histopatológico

 1. Coleta
 2. Fixação
 3. Desidratação
 4. Clarificação ou diafanização
 5. Inclusão
 6. Microtomia
 7. Coloração
 MÉTODOS DE
ESTUDO
1. Estudo morfológico
 colorações de rotina –
Hematoxilina-eosina
 colorações especiais
2. Imunoistoquímica
3. Imunofluorescência
4. Cultura de células
5. Citometria de fluxo
6. Técnicas de biologia molecular
 Formalina 10%

1. Estudos
morfológicos

Hematoxilina-eosina (HE)
 Grocott

tricrômio de Gomori PAS

Whartin-Starry
A coloração de metenamina de prata de Grocott-
Gomori
detectar fungos, sendo particularmente útil na
coloração de carboidratos.
tricrômica de Masson -combinação de corantes
distinguir células do tecido conjuntivo

 queratina e fibras musculares, colágeno e tecidos

ósseos, citoplasma, núcleos da células.
Warthin-Starry ( WS ) é um método de coloração
à base de nitrato de prata
Detecção de espiroquetas

Bartonella henselae - doença da arranhadura do

gato
PAS

identificar glicogênio em tecidos

 reagente de Schiff- púrpura-magenta
 2. Imunoistoquímica
Método que utiliza anticorpos como reagentes
específicos para a detecção de um antígeno presente em
células ou tecidos.
 2. Imunoistoquímica
Indicações
 Determinação do órgão de origem
de uma neoplasia
 Subtipagem de neoplasias
(linfomas)
 Elucidação do tecido de origem de
uma neoplasia
2. Imunoistoquímica

Muzio et al., 2000

2. Imunoistoquímica

CD-34
Cepeda et al., 2008
3. Imunofluorescência
Permite a visualização de antígenos nos
tecidos ou em suspensões celulares utilizando
corantes fluorescentes, que absorvem luz e a
emitem num determinado comprimento de
onda.
3. Imunofluorescencia
 4. Cultura de células

A cultura celular compreende um conjunto de

técnicas que envolve a distribuição e isolamento
de células em um ambiente artificial (in vitro) com
o objetivo de estudar a sua fisiologia e bioquímica.
4. Cultura de células
 4. Cultura de células

Aplicações
 Pesquisas sobre o câncer
 Fabricação de vacinas

 Seleção e melhoria de
medicamentos
 Terapia genética

 Biologia de células-tronco

 Tecnologia de fertilização in vitro.

5. Citometria de fluxo
É uma metodológia capaz de
analisar e caracterizar múltiplos
aspectos físicos, químicos e
biológicos de diferentes
elementos, que se movem
através de um sistema fluídico,
por meio de uma fonte de laser.
 5. Citometria de fluxo
Citômetro de fluxo
 5. Citometria de fluxo

Como funciona?
5. Citometria de fluxo

Aplicações

Gráficos gerados
6. Técnicas de Biologia
Molecular
Material de estudo

 tecido

 sangue

 saliva
 DNA
 RNA

 Proteína
Reação em Cadeia da
Polimerase (PCR)

Técnica de grande
versatilidade que permite
obter múltiplas cópias de um
segmento de DNA
Reação em Cadeia da
Polimerase (PCR)
Reação em Cadeia da
Polimerase (PCR)
Método de FISH
A hibridização molecular é a
reunião de características
estruturais, parciais de duas
substâncias biotivas distintas
em uma nova molécula. Esta
reunião origina uma nova
substancia que poderá
apresentar a atividade de uma
das substâncias originais ou
conjugar ambas as atividades
em uma única molécula.
 Método de FISH
fluorescent in situ hybridization-FISH

Método que utiliza recursos moleculares

para analisar os cromossomos, ou seja, é
o mapeamento de um gene por
hibridização molecular de uma seqüência
de DNA clonada (sonda), marcada por
fluorescência, num cromossomo
espalhado em lâmina.
 Método de FISH
Aplicações

Cromossopatias
 Diagnóstico pré-natal
Leucemias

 Aconselhamento genético
 PROGNÓSTICO
 pro= antecipado
 gnosticu = alusivo ao
conhecimeto de

 Previsão do curso da doença

 REFERÊNCIAS
BIBLIOGRÁFICAS
BRASILEIRO FILHO, G. Bogliolo Patologia. 7. ed.
Guanabara-Koogan, 2006.
BRASILEIRO FILHO, G. Bogliolo: Patologia
Geral. 4. ed. Guanabara-Koogan, 2009.
KUMAR, V.; ABBAS, A. K., FAUSTO, N.;
MITCHELL, R. N. Robbins Patologia Básica. 8.
ed., Elsevier, 2008.
MONTENEGRO MR; FRANCO M. Patologia –
Processos gerais. 4.ed. Atheneu, 1999.
“Quem não sabe o que procura,
não interpreta o que acha.”
Claude Bernard