BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR

Lição nº 12

Sumario:
Apoptose celular

Objectivo:
Conhecer como a celula autodestroi-se programadamente, as moleculas envolvidas e
como acontece este processo.

A apoptose é um processo de morte celular programada, que esta determinada

geneticamente e e tambem influenciada por agentes toxicos do ambiente. Neste
mecanismo as celulas promovem a sua autodestruicao de modo programado, no caso,
necessaria ao bom funcionamento e a sobrevivencia do organismo.

“Apoptose” e derivado do grego e significa “o ato de cair”, como caem as folhas das
arvores no outono.

Importância da apoptose
• Controla o número de células num organismo
• É essencial ao desenvolvimento, morfogénese e homeostase.
• Elimina as células danificadas num tecido sem afectar as células vizinhas
• Encontra-se em equilíbrio com a mitose (ciclo celular) em tecidos adultos

Há duas principais vias de sinalização da apoptose:

 Via intrínseca (ou via da mitocôndria)
 Via extrínseca
Via Intrínseca (ou via da mitocôndria)
As vias intrínsecas de sinalização da apoptose envolvem diversos estímulos. Duas
principais categorias de estimolos:
 Sinais positivos
 Sinais negativos.
Sinais negativos são aqueles que estão relacionados com a perda da supressão da
apoptose e subsequente ativação deste processo, como a ausência de certos fatores de
crescimento, ions de zinco, hormônios ou citocinas.
Sinais positivos são aqueles que induzem a apoptose, como radiação, toxinas, hipóxia,
infecções virais, radicais livres, erros no material genético, etc.
Estes estímulos aumentam a transição da permeabilidade mitocondrial (MPT) pela
formação de poro e liberação de dois principais grupos de proteínas pro-apoptóticas
intermembranais no citosol.
Proteínas pro-apoptóticas:
1) Processo reversivel: citocromo c, Apaf-1.
2) Precursores do processo irreversivel: Smac/DIABLO, proteaseHtrA2,
3) Processo irreversivel: AIF, endonuclease G, e CAD

Elaborado pelo: Prof. Luis Bandeira (MsC. ECL)

O primeiro grupo ativam as vias dependentes de caspases: o citocromo c se liga à e
ativa Apaf-1 e a procaspase-9, formando um complexo chamado apoptossomo, que
resulta na ativação da caspase-9; já as outras promovem a apoptose ao inibir a atividade
de inibidores de proteínas da apoptose (IAP - Inhibitors of apoptosis proteins).
O segundo grupo de proteínas proapoptóticas AIF, endonuclease G, e CAD, são
liberadas pela mitocôndria durante a apoptose após o processo se tornar irreversível e
estão relacionadas com processos de gramentação e condensação da cromatina.
Proteinas de Regulação do processo apoptotico
Essa via é regulada pelas proteínas da família Bcl2
As proteínas da família Bcl-2 controlam a permeabilidade da membrana mitocondrial e
é composta por duas subfamílias: As proapoptóticas, antiapoptóticas.
As proapoptóticas: Sensores BH3-apenas (Bid, Bad, Bim, Bik, Noxa, Puma, BMF),
efectores BH123 (Bax, Bak).
Bad, Bik, Noxa, Puma: Ligam a proteinas antiapoptoticas e liberam a Bak e a Bax.
Bid/Bim: Ligam a Bax e Bak, potencializando-as e neutralizando moderadamente as
proteinas antiapoptoticas.
Bax/Bak: São responsável por estimular o processo apoptótico permitindo a saída mais
fácil do citocromo c para o citoplasma atravez da abertura dos poros da membrana
externa mitocondrial, além de outras proteínas mitocondriais intermembranares.
As antiapoptóticas: Bcl-2, Bcl-x, Bcl-XL, Bcl-XS, Bcl-w e BAG. Têm ação contrária,
impedindo que as proteínas intermembranares sejam expulsas para o citosol.
Já as antiapoptóticas (Bcl2, Bcl-XL...) estão localizadas na superfície citosólica da
membrana mitocondrial externa e garantem a integridade da membrana, impedindo a
Abertura de poros por inativação de proteínas proapoptóticas (BH123) impedindo a
saida do citocromo C, evitando, consequentemente, o início da cascata apoptótica de
ativação das caspases.
Via Extrínseca
Este mecanismo ocorre por meio de receptores localizados na membrana celular e
proteínas sinalizadoras (ou ligantes). Tais receptores são homotrímeros pertencentes à
superfamília dos receptores de necrose tumoral (rTNF).
Composição dos rTNF
 Extracelular rico em cisteína, que se associa ao ligante;
 transmembrana;
 Intracelular e um "domínio de morte", que tem o papel crucial de transmitir a
sinalização de morte para as vias intracelulares.
Um exemplo que ilustra esse mecanismo é a ativação de FasR pelo seu ligante FasL
(similar também ao modelo TNF-α/TNFR1), que estimula os domínios de morte a
recrutar proteínas adaptadoras intracelulares (FADD, no caso da ligação Fas, e TRADD
no caso da ligação TNF) que, uma vez recrutadas, reúnem procaspases iniciadoras

Elaborado pelo: Prof. Luis Bandeira (MsC. ECL)

(procaspase-8, no caso da ligação Fas), formando o complexo de sinalização indutor de
morte (DISC, death-inducing signaling complex). A partir desse complexo, os domínios
“pro” das procaspases iniciadoras são clivados e essas proteínas, então, são dimerizadas,
tornando-se ativas. Após esse processo, as caspases iniciadoras podem ativar as
procaspases executoras ao clivar o domínio “pro” destas. A célula pode acionar ainda
mecanismos intrínsecos a fim de amplificar a cascata de caspases e, assim, tornar a
apoptose mais efetiva.
Algumas células apresentam maneiras de inibição e controle da via extrínseca. Ela pode
ser inibida pela proteína c-FLIP, que se liga ao FADD e à caspase-8, inativando-as e
impedindo que a cascata siga para a via de execução.

Via de execusão
As caspase 8, 9, 10, são as caspases iniciadoras elas activam as caspases executoras
(3,6,7), a Caspase 3 é a mais importante delas, activa a endonuclease CAD.
A caspase 3 cliva a ICAD que é o inibidor da CAD, de forma que a CAD passa a
degradar o DNA cromossomal dentro do nucleo e condensa a cromatina e tambem
induz a reorganização do citoesqueleto e desintegra a celula em corpos apoptoticos.

Criterios morfologicos da apoptose:

 Condensação da cromatina no nucleo
 Destruição do citoesqueleto
 Degradação do envelope nuclear
 Fragmentação do DNA nuclear.

Elaborado pelo: Prof. Luis Bandeira (MsC. ECL)

O mais importante e que a superficie celular e alterada, provocando a imediata
fagocitose da celula, tanto pelas celulas vizinhas como pelos macrofagos.
Uma caracteristica marcante desse processo e que a apoptose e “silenciosa”. Não ha,
como na necrose, a “desordem” da inflamação.

Elaborado pelo: Prof. Luis Bandeira (MsC. ECL)