Estudo dos Efeitos de Regulação de Carga na Adsorção do

Citocromo-C em Poros Carregados

¹Ricardo B. S. Júnior*, ¹Sidney Jurado de Carvalho
*ricardo.belarmino@unesp.br
¹Campus de São José do Rio Preto, Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE), Universidade
Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” (UNESP)

Introdução Resultados
A adsorção de proteínas em superfícies porosas carregadas tem
atraído interesse devido a sua aplicabilidade em bioquímica e
biotecnologia, como catálise enzimática, fracionamento de fluidos
biológicos, drug delivery e cristalização de proteínas, além de assegurar
maior estabilidade térmica e química às proteínas. Na maioria dos casos,
a adsorção é favorecida em pH próximo do ponto isoelétrico (pI) da
proteína, onde a repulsão eletrostática proteína-proteína é minimizada, e
as cargas locais de sinal oposto à da superfície promovem a atração
proteína-poro. Entretanto, resultados recentes da adsorção do
Citocromo-C em mesoporos de sílica SBA-15 revelaram um
comportamento inesperado, que esse modelo eletrostático falha em
prever: o pH onde ocorre a máxima adsorção está acima do pI da
proteína (≈ 10.5). Nossa hipótese é que esse comportamento estaria no
entendimento do mecanismo da regulação de carga e como ele atua na
adsorção da proteína [1-3].

Objetivo
O presente trabalho buscou entender os efeitos do mecanismo de
regulação de carga na adsorção do Citocromo-C na superfície interna de
um poro cilíndrico carregado.
Metodologia
O estudo da adsorção do Citocromo-C no poro cilíndrico carregado foi
feito por meio de simulação computacional pelo método de Monte Carlo
a pH constante com algoritmo de Metropolis.
O poro foi modelado como um cilindro infinito, com densidade de
carga superficial σ em solução iônica composta por íons monovalentes.
A proteína foi modelada de acordo com o Structure-Based Model,
onde a estrutura tridimensional de mínima energia é a estrutura nativa,
considerando cada resíduo como um único monômero esférico centrado
na posição do carbono-α. A titulação dos resíduos foi realizada de
acordo com o critério de Metropolis, que leva em conta a variação da
energia dada por:
Conclusão
➔ A adsorção da proteína em superfície opostamente carregada causa um
aumento em seu ponto isoelétrico em relação à proteína livre
➔ Quanto maior o poro, maior a atração eletrostática proteína-poro
➔ O aumento do pI é proporcional ao aumento do raio do poro
◆ A superfície negativa atrai contraíons positivos nas proximidades, o
que aumenta a protonação dos resíduos (pH aparente é mais ácido na
região), ou seja, produz um efeito de regulação de carga, então é
necessário um pH mais básico para tornar a proteína neutra
➔ Os resíduos mais próximos da superfície apresentaram carga média
mais positiva do que os resíduos livres (sem superfície), por conta da
regulação de carga
➔ Análises futuras:
◆ Influência da força iônica na adsorção
◆ Adsorção com a proteína desenovelada

onde χ é 1 ou -1, dependendo se o resíduo é básico ou ácido,
respectivamente, e ΔVES é a variação do potencial eletrostático no
processo de protonação [3].
A energia potencial eletrostática entre o poro e a proteína é dada por:
Referências
[1] Moerz, S. T., Huber, P. pH-Dependent Selective Protein Adsorption into Mesoporous
Silica. The Journal of Physical Chemistry C. 2015, 119(48), 27072-27079.
[2] Moerz, S. T.; Huber, P. Protein Adsorption into Mesopores: A Combination of Electrostatic
Interaction, Counterion Release, and van der Waals Forces. Langmuir 2014, 30, 2729-2737
[3] Caetano D. L. Z.; Metzler. R.; Chertsvy A. G.; de Carvalho S. J. Adsorption of Lysozyme Into a
Charged Confining Pore. Phys. Chem. Chem. Phys., 2021,23, 27195-27206

onde zi é a carga do i-ésimo resíduo, ri é a distância radial entre o i-

Agradecimentos
ésimo resíduo e o eixo do poro, K0, I0, K1 e I1 são as funções modificadas
de Bessel de primeiro e segundo tipos, respectivamente, a é o raio do
cilindro e κ é o inverso do comprimento de Debye.