Sequenciamento d e DN A

Elaborado por Profa. Dra Marta F.Bastos

Sequenciamento d e DN A

Sequenciamento d e DN A p roposto por Maxam e

Gilbert e aprimorado por Frederick Sanger em 1977.

1981- Feito o 1º seq. completo, pelo grupo de Sanger de

uma organela citoplasmática com 16569 nucleotídeos.
Métod o d e Sanger

Nucleotídeo normal que Nucleotídeo alterado no C3‘,

permite a continuidade impedindo a continuidade da
da polimerização da fita polimerização da fita
Sequenciamento d e DN A- PCR
Sequenciamento de DNA- Eletroforese
Sequenciamento d e DN A- Manual
Sequenciamento d e DN A- Manual
Sequenciamento d e DN A- Manual
A T C G
Sequenciamento de DNA- Automático

Venter (1995): uniu PCR,

nucleotídeos marcados com
substâncias fluorescentes e
robótica
Sequenciamento de DNA- Automático
Sequenciamento de DNA- Automático
Sequenciamento de DNA- Automático
Sequenciamento de DNA- Automático

Eletroferograma
Genom a, Transcriptom a e
Proteoma
Genôm ica
Ciência que estuda o genoma.

Genoma é o conjunto de todo material genético que define um ser

vivo.

Determinação da sequência de nucleotídeos (ACGTs)

Sequenciamento deDNA
Projeto Genoma Humano
▪▪ Setor público: NIH(National Holanda, Israel, Itália,
Institute of Health) e pelo Japão, México, Reino Unido,
DOE (Departament of Rússia, Suécia, União
Energy). Européia.

▪▪ Setor privado: Celera

genomics Corporation.

18 países: Alemanha,
Austrália, Brasil, Canadá,
China, Coréia, Dinamarca,
Estados Unidos, França,
Projeto Genoma Humano
1990: início do projeto em u m esforço conjunto do Depto de
Energia e do Instituto Nacional de Saúde dos EUA.

Junho de 2000: término do rascunho de todo o genoma

humano.

Abril de 2003: o seqüenciamento de todo o genoma humano

foi completado e o projeto é declarado finalizado dois anos
antes da data prevista
Projeto Genoma Humano
Venter etal., 2001 Lander et al.,2001
 Genom a Estudos sobre a seqüência de
DNA dos organismos

Transcriptoma Estudos sobre os RNAs que

são expressos nas diferentes
células dos organismos

Proteom a Estudos sobre as proteínas e

suas interações, que são
expressas nas diferentes
células dos organismos
Transcriptom a humano

Em fase inicial

Comparação entre saúde e doença

Técnicas utilizadas: SAGE (Análise serial da expressão

gênica) e Microarray
Proteom a

Estu d os sobre as p roteínas e suas interações, que são

expressas nas diferentes células dos organismos.

Caracterização do proteoma das diferentes células é uma

etapa chave para entender como o genoma atua e como genes
alterados podem desencadear doenças.
Proteom a