UNIVERSIDADE ESTADUAL DO RIO GRANDE DO SUL

GRADUAÇÃO ENGENHARIA DE BIOPROCESSOS E

BIOTECNOLOGIA

RENATA ANDRADE DE VASCONCELOS

RELATÓRIO FINAL
AULAS PRÁTICAS MICROBIOLOGIA

Porto Alegre
2023
PRÁTICA 1 - MEIOS DE CULTURA PARA BACTÉRIAS

1. Qual seria a sequência de meios a serem utilizados para:

a) Diagnosticar bactérias Gram negativas de uma amostra de urina ?

Meios diferenciais como o ágar de MacConkey

b) Bactérias causadoras de uma infecção ocular?

Meios como MacConkey

c) Diagnosticar enterobactérias de uma amostra de fezes?

O Meio SIM (caracterizado pela sigla que representa Sulfito de Hidrogênio,

Indol e Motilidade) é uma combinação que testa três parâmetros diferentes,
motilidade dos microrganismos e produção de sulfito de hidrogênio e indol,
recomendado para realizar a diferenciação de enterobactérias, especialmente
Escherichia

d) Caracterizar bactérias de uma amostra de água?

Meios como XLD

PRÁTICA 2 – MICRO-ORGANISMOS NO AMBIENTE

Sem questões

PRÁTICA 3 – ESTUDO MACROSCÓPICO DE COLÔNIAS (MORFOLOGIA DE

COLÔNIAS)

1. A placa foi coletada com Swab de qual local?

do corrimão

2. É possível contar as colônias que apareceram?

Sim

3. Qual o valor encontrado?

11 UFC

3. Número de morfotipos encontrados na placa:

2
 Colônia 1 Colônia 2

Forma
circular circular

Elevação
não não

Bordos
inteira inteira

Transparênci
a opaca opaca

Brilho
fosco fosco

Pigmentação
presente presente

Superfície
lisa lisa

Consistência
seca seca

PRÁTICA 4 - TÉCNICA DE SEMEADURA

1. Por que deve-se flambar os tubos ou boca dos frascos antes e depois de
cada transferência?

Para evitar possíveis contaminações do meio proveniente dos instrumentos ou vice-

versa.

2. Por que deve-se manter sempre que possível a placa de Petri com meio
sólido invertida?

Para evitar muito contato direto com o ar, evitando contaminação do meio por
possíveis microorganismos contidos ele

3. Qual a finalidade de se fazer várias estrias, na semeadura em placa,

contendo meio sólido?

Cobrir totalmente o meio com o microrganismo selecionado, a fim de obter mais

sucesso de cultivo.
PRÁTICA 5 - COLORAÇÃO DE GRAM

Gram negativa

1.Qual a razão das bactérias Gram positivas manterem a coloração violeta e as

Gram negativas a coloração rosa?

O corante púrpura e o iodo se combinam no citoplasma de cada bactéria, corando-a

de violeta escuro ou púrpura. As bactérias que retêm essa cor após a tentativa de
descolori-las com álcool são classificadas como gram-positivas pois tem dupla
camada de peptidoglicanos; as bactérias que perdem a cor violeta escuro ou
púrpura após a descoloração são classificadas como gram-negativas. Como as
bactérias gram-negativas são incolores após a lavagem com álcool, elas não são
mais visíveis. É por isso que o corante básico safranina é aplicado; ele cora a
bactérias gram-negativas de rosa. Os corantes como a safranina, que possuem uma
cor contrastante com a coloração primária, são denominados contracorantes. Como
as bactérias gram-positivas retêm a cor púrpura original, não são afetadas pelo
contracorante safranina

PRÁTICA 6 – VISUALIZAÇÃO DE LEVEDURAS E FUNGOS FILAMENTOSOS

Faça um esboço das características morfológicas de cada uma das duas lâminas
visualizadas.

Levedura viva

Fungo filamentoso

PRÁTICA 7 - MÉTODOS PARA TESTAR A SENSIBILIDADE DAS BACTÉRIAS

AOS ANTIBIÓTICOS (ANTIBIOGRAMA)

Leitura da placa

a) Medir e anotar o diâmetro de cada halo (incluindo o diâmetro do disco).

R - resistente, I - intermediário, S - sensível

Renata - E.coli

Antibiótico Tamanho Classificação

Levofloxacina

Trimetoprima

Estreptomicina 0 mm R

amicacina

Azitromicina 23 mm S

Rifampicina

Ciprofloxacino 30 mm S

Eritromicina 0 mm R
b) Caso haja o crescimento de colônias satélites (adjacentes), medir o halo de
inibição a partir destas colônias.

Não houve

Questões

a) O que deve ser observado na leitura de um antibiograma?

O antibiograma, também conhecido por Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos

(TSA), é um exame que tem como objetivo determinar o perfil de sensibilidade e
resistência de bactérias e fungos aos antibióticos. Para ler um antibiograma, deve-
se prestar atenção no diâmetro formado a partir da parte de contato da bactéria com
o antibiótico.Deve-se observar também a formação de colônias satélites e o efeito
que o antibiótico causou nas colônias. Através do resultado do antibiograma o
médico pode indicar qual o antibiótico mais indicado para tratar a infecção da
pessoa, evitando, assim, o uso de antibióticos desnecessários e que não combatem
a infecção, além de evitar o surgimento de resistência.

b) Explique o resultado do seu antibiograma.

O antibiograma apresentou halos pequenos, intermediários e grandes. O resultado

para o antibiograma de E.coli demonstrou que é sensível para os seguintes
antibióticos:

c) Qual o princípio do teste de sensibilidade realizado nesta aula?

Sua aplicação básica consiste em avaliar a provável eficácia de uma variedade de

antibióticos sobre uma determinada bactéria. A partir da medida do tamanho do halo
o micro-organismo poderá ser definido como sensível, intermediário ou resistente
àquele antimicrobiano

d) Houve diferenças quando o mesmo antibiótico era utilizado

contra diferentes bactérias? Justifique sua resposta.

Sim, o antibiótico, de acordo com a tabela padrão de classificação apresentou ser

sensível para E.coli e intermediário para Klebsiella. A Estreptomicina se mostrou
resistente para E.coli e intermediária para Klebsiella. A Eritromicina e Novobiocina é
resistente para E.coli e sensível a Klebsiella.

PRÁTICA 8 - CONTROLE DA POPULAÇÃO BACTERIANA POR MÉTODOS

FÍSICOS
a) O que pode ser observado com a utilização do calor úmido? Interprete os
resultados.

O mecanismo de ação da fervura é a desnaturação de proteínas. Não é um

método de esterilização, mas após cerca de 15 minutos de fervura pode matar uma
grande quantidade de microorganismos, mas não é eficaz contra endósporos
bacterianos e alguns vírus.

O calor foi eficaz para matar E.coli

b) Interprete o resultado observado na placa que foi colocada sob raios UV.

Ao contato com os micro-organismos, a UV provoca alterações fotobioquímicas que

modificam o DNA ou RNA celular e de organelas intracelulares, promovendo a
inviabilidade ou a morte. As leveduras são células eucariotas e por possuírem
núcleo necessitam de uma maior exposição a essa radiação quando comparadas às
células procariotas. Desta forma, o uso de células fúngicas torna-se uma opção
viável para a avaliação da UV como método de desinfecção.

O UV foi eficiente para matar a E.coli com 15 minutos de exposição.

PRÁTICA 9 - CONTROLE DA POPULAÇÃO BACTERIANA POR MÉTODOS

QUÍMICOS
a) Foi observada alguma diferença quanto à sensibilidade das bactérias Gram-
positivas e Gram-negativas aos anti-séptico? Discuta seus resultados.

Antisséptico age por rompimento de membranas citoplasmáticas, precipitando

conteúdos celulares. Tem melhor atividade contra bactérias gram-positivas, menor
atividade contra bactérias gram-negativas e fungos e mínima atividade contra o
bacilo da tuberculose. Não é esporocida.

Foi possível observar que sem nenhum tipo de antisséptico cresceu uma grande
quantidade de bactérias, já no com apenas álcool diminuiu consideravelmente e
com água aparecem 2 colônias isoladas e uma terceira grande. Foi usada para esse
método a E.coli que é gram negativa que pertence à família Enterobacteriaceae. As
gram negativas têm uma camada de peptideoglicano mais fina o que facilita a ação
do álcool.

b) Por que o álcool 70% é mais eficaz que o álcool a 100%?

Usamos somente álcool 70%

Álcool etílico é usado como antisséptico e desinfetante. A concentração ideal é de

70%. Age rapidamente sobre bactérias vegetativas (inclusive micobactérias), vírus e
fungos, mas não é esporocida. Por isso não se recomenda para esterilização,
apenas para desinfecção de superfícies e antissepsia de pele. Atua por meio do
rompimento de membranas, com rápida desnaturação de proteínas e consequente
lise celular. A ação antimicrobiana aumenta em presença de água, por isso
concentrações acima de 90% não são tão eficazes