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Luís Silva Nº10 Turma:11ºA
 Relatório Nº1 – Extração do DNA de células eucarióticas vegetais
Teorias/Princípios:
Teoria celular - Foi formulada pelos
conhecimentos acumulados sobre a célula,
que deu a possibilidade a Theodor SchWann
visualizar o DNA das células
(1810-1882), Matthias Schleiden (1821-1902)
e Rudolf Virchow (1821-1902) de a criar. A
Teoria celular, sofreu algumas alterações ao
longo do tempo, mas assenta, atualmente, três
princípios fundamentais:
A célula é a unidade estrutural e
funcional de todos os seres vivos;
Todas as células têm origem em
células preexistentes;
A célula é a unidade de reprodução,
de desenvolvimento e de
hereditariedade dos seres vivos.
Modelo do mosaico fluido - Foi proposto
por Singer e Nicholson, em 1972, tem sofrido
alterações por cientistas que estão
constantemente a rever, a melhorar e a refinar,
para conseguirem explicar e entenderem
melhor o comportamento das membranas das
células.
Conclusão:
Como é possível extrair e É possível extrair o DNA através de métodos
químicos e físicos. Pois como o DNA
encontra se no núcleo, temos de destruir a
eucarióticas vegetais? parede celular, é um método físico, a
degradação da membrana celular e nuclear,
são métodos químicos, assim como todos
depois desses até á subida do DNA ao topo.
Também é possível visualizar
macroscopicamente o DNA, o aglomerado de
DNA, uma massa esbranquiçada composta
por milhares de moléculas de DNA’s juntos,
pois se fosse apenas uma não seria possível.
Mas o que se visualiza é DNA impuro, não é
Material: só DNA, também tem RNA, proteínas,
1 Banana histonas, entre outros.
Sal de cozinha
Detergente
líquido Resultados:
Vareta
Balança Como se pode ver na imagem ao lado,
Faca formaram-se duas fases distintas, no fundo da
Água destilada (garrafa de esguicho) proveta temos a fase aquosa com algum
substrato filtrado da banana misturado uma
solução de sal de cozinha e detergente.
O modelo do mosaico fluido tem como função Varinha mágica Seguida dessa fase temos a fase alcoólica, de
explicar o porquê de a membrana celular ser Álcool etílico álcool etílico, que é menos denso do que a fase
uma estrutura dinâmica e fluida, em que os 4 Gobelés alcoólica e por isso não se mistura, em que é
seus componentes apresentam alguma 2 Gaze possível observar algum DNA a subir, já que
mobilidade. Os principais constituintes são Sumo de ananás é menos denso que o álcool. No topo é
lípidos, proteínas e glícidos. Na estrutura da Funil possível observar o DNA, uma massa
membrana plasmática tem: Proveta graduada
esbranquiçada, que já subiu, mas o que está
Proteínas extrínsecas; Placa de aquecimento
Fosfolípidos (Bicamada nessa massa não é DNA puro, também contém
fosfolipídica); RNA, algumas proteínas, entre outros
Colesterol (apenas nas células
Procedimento: constituintes.
animais); 1. Começamos por tirar a casaca da banana
Proteínas intrínsecas; e de seguida com uma faca cortamo-la em Aglomerado de
Glicolípidos; pedaços e pesamos dentro do gobelé cerca DNA
Glicoproteínas. de 50g na balança;
2. Usámos a varinha mágica para moer a
banana; Fase Alcoólica
Conceitos: 3. Em uma balança pesamos 3g de sal de
DNA cozinha (NaCl), dentro do gobelé e foi
aquecido 90ml de água destilada dentro
Parede celular Fase Aquosa
Membrana celular de um gobelé, até 60ºC, na placa de
Membrana nuclear aquecimento, para prepararmos uma
Núcleo solução de NaCl;
Célula 4. Na solução anterior, NaCl, adicionamos
Lípidos cerca de 10ml de detergente líquido e
mexemos lentamente com uma vareta;
Prótidos
5. Adicionamos a banana macerada à Discussão de Resultados:
Ácidos Nucleicos
solução obtida na etapa 4 e envolvemos a
Células eucarióticas vegetais A maceração é uma técnica física
Enzimas com a vareta durante alguns minutos;
utilizada para extrair substâncias de um
RNA determinado corpo, no nosso caso de uma
Biomoléculas banana.
o DNA contém um grupo fosfato, assim como
o RNA, via ter carga negativa. Os iões 𝑁𝑎+ do
sal de cozinha, dispersos na solução, vão se
juntar com o DNA anulando a sua carga,
ficando com carga neutra, para que os DNA’s
não se repelem entre si e assim possam se
juntar.
O álcool etílico é menos denso que a
solução, por isso irá se formar duas fases, a
fase aquosa e a fase alcoólica. O DNA é
menos denso que a fase alcoólica e a fase
aquosa, e também como o DNA é insolúvel no
álcool etílico. Logo, como o álcool vai
desidratar o DNA, fazendo com ele não fique
mais dissolvido na solução aquosa, o DNA vai
subir e surgir no topo da fase alcoólica.
O sumo de ananás é rico em enzimas,
que são biocatalisadoras que aceleram a
velocidade das reações, as enzimas existentes
no ananás são as proteases, como o exemplo
da Bromelina, em que vão atuar nas proteínas.
O DNA está associado a proteínas, como as
histonas, logo, as proteases do sumo de ananás
vão quebrar as ligações das proteínas do
DNA, permitindo que o DNA se solte mais
facilmente das proteínas.
Não é possível obter DNA sem
quebras mecânicas ou químicas, já que para
passar pela parede celular e a membrana
nuclear e plasmática, assim como em outras
etapas, esses processos iram ocorrer. Também
não é possível obter DNA puro, pois também
vai levar consigo outras biomoléculas.
6. Colocamos a gaze no funil e filtramos
para um gobelé a preparação obtida na
etapa 5;
7. Á filtração obtida anteriormente
adicionamos cerca de 25ml de sumo de
ananás;
8. Á solução anterior preparada retiramos
20ml para a proveta;
9. Com ajuda da vareta adicionamos muito
lentamente cerca de 20ml de álcool frio na
solução da proveta;
10. Deixamos a solução final, da etapa
anterior, em repouso durante 5 min
(minutos);
11. Nos 40min subsequentes observamos as
alterações das posições do agregado
molecular e registamos, na forma de
fotografias.
A banana é um fruto, por isso é constituída por
células eucarióticas vegetais, apresentando
parede celular, para alem de outros organelos
celulares, em que a sua função é conferir
suporte e proteção á célula. Nesta experiência
a maceração será útil para conseguirmos
destruir a parede celular das células da
banana.
O detergente é um composto químico,
que apresenta uma região hidrofóbica, repele
a água, e outra região hidrofílica, afinidade
para a água. As células da banana apresentam
membrana plasmática, assim como qualquer
célula, e membrana nuclear. Ambas as
membranas apresentam uma bicamada
fosfolipídica, segundo o modelo do mosaico
fluido, constituída por fosfolipídios (um tipo
de lípidos), em que também apresenta duas
regiões, uma hidrofílica e outra hidrofóbica.
Sabendo isso a detergente vai se inserir entre
as moléculas fosfolípidos degradando-os, e
assim ocorre o desestruturamento da
bicamada fosfolipídica, levando-a á sua rotura
dispersando o conteúdo celular na solução.
O sal de cozinha, NaCl, quando está
dissolvido na água dividisse em dois iões, o
sódio (𝑁𝑎+ ) com carga positiva e o cloro
(𝐶𝑙 − ) com carga negativa. O DNA é
constituído por nucleótidos, e estes por uma
desoxirribose, um grupo fosfato, e uma base
nitrogenada, que pode ser uma Adenina (A),
Timina (T), Citosina (C) e Guanina (G), como