Questão central Conclusão

da pág. 18 do Manual BioGeo11 - Biologia)

V de Gowin para a atividade de laboratório
Princípios
• O DNA, molécula que existe nas células de todos os seres vivos, armazena A extração do DNA de células eucarióticas vegetais foi possível através da mace-
Como extrair ração de polpa de banana e das restantes etapas do procedimento experimental,
a informação genética e transmite-a ao longo das gerações; o DNA encontra-
se sobretudo no núcleo das células eucarióticas, associado a proteínas, e visualizar que permitiram a destruição das paredes celulares e das membranas lipídicas, a
macroscopicamente neutralização do DNA e a quebra das proteínas que lhe estão associadas. A visua-
formando a cromatina.
o DNA de células lização macroscópica de DNA foi possível devido à adição de uma fase alcoólica à
• As células eucarióticas vegetais possuem parede celular. fase aquosa, que promoveu a desidratação e precipitação de muitas moléculas de
• Os detergentes emulsionam as gorduras, dispersando-os. eucarióticas
DNA que, assim, ficaram visíveis na forma de aglomerados de cor esbranquiçada,
• Os grupos fosfato conferem carga negativa ao DNA. vegetais? mas, eventualmente, ainda com muitas outras moléculas associadas (ex.: RNA, prote-
+ –
• Em solução aquosa, o sal dissocia-se em iões de Na e Cl . ínas).
• O sumo de ananás possui protéases. Discussão
• O DNA é menos denso do que a água. 1. A maceração da banana foi necessária para desagregar tecidos e romper
• O DNA é pouco solúvel em álcool etílico a 96%, que o desidrata. as paredes das células vegetais, desintegrando as células e, assim, disper-

Investigação da presença de DNA em células eucarióticas vegetais

sando o conteúdo celular, nomeadamente a cromatina/DNA.
Conceitos 2. A função do detergente foi remover os lípidos das membranas nuclear e
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• Célula eucariótica; núcleo; parede celular; cromatina; DNA; fosfolípidos; pro- plasmática, ambas fosfolipídicas, desorganizando-as.
téase. 3. A função do sal de cozinha (NaCl) foi promover a ligação entre os iões de
+
Na , uma vez que têm carga positiva, aos fosfatos do DNA neutralizando
Material a sua carga negativa, tornando as moléculas de DNA neutras e estabiliza-
• Balança • Faca das permitindo, assim, a sua aglomeração.
• Provetas graduadas • Água destilada 4. O DNA é insolúvel em álcool etílico na concentração utilizada neste pro-
• Tubo de ensaio • Álcool a 96% a 4 ºC (frigorífico) cedimento, pelo que a sua função foi desidratar as moléculas de DNA
• Gobelés • Sal de cozinha (1 colher de chá) (afastar a água à volta do DNA), de modo a promover a sua precipitação
• Funil • Detergente líquido da louça (1 colher de chá) e visualização sob a forma de aglomerados de cor esbranquiçada. Quanto
• Vareta • Gaze mais gelado o álcool, menos solúvel será o DNA.
• Almofariz • Polpa de banana (50 g) 5. As protéases do sumo de ananás degradam as proteínas associadas ao enrola-
• Sumo de ananás mento do DNA, pelo que a sua utilização visa a obtenção de um extrato de
DNA.
Procedimento 6. A subida do aglomerado molecular obtido deve-se ao facto de o DNA ser
1. Pesou-se 50 g de polpa de banana, que foram cortados em pequenos peda- pouco solúvel no álcool na concentração utilizada pelo que, ao desidratar
ços. as moléculas de DNA, retira-as da fase aquosa. Além disso, a ocorrência
2. Deitou-se os pedaços para o almofariz, e macerou-se muito bem. de um choque térmico resultante da adição do álcool a frio origina uma
3. Misturou-se 3 g de sal de cozinha com 90 mL de água destilada, aquecida fação gasosa que facilita a sua ascensão na fase alcoólica.
a 60 ºC, para preparar uma solução de NaCl. 7. a) Não, uma vez que foi promovida a rotura mecânica das paredes e das
4. Adicionou-se 10 mL de detergente à solução de NaCl e mexeu-se lenta- membranas celulares para que o DNA e as proteínas se dispersassem na
mente com a vareta. solução, assim como se utilizaram enzimas para degradação das histonas
5. Adicionou-se a banana macerada à solução obtida na etapa 3 e envolveu-se associadas ao DNA. b) Não, visto que o precipitado final corresponde a
com a vareta durante alguns minutos. milhares de moléculas de DNA, com muitas outras moléculas associadas
6. Colocou-se a gaze num funil e filtrou-se para um gobelé o preparado ante- (RNA, proteínas), e, portanto, tem um elevado grau de impureza.
rior. Resultados
7. Adicionou-se 25 mL de sumo de ananás ao filtrado obtido.
8. Mediu-se 20 mL do preparado anterior para um tubo de ensaio ou uma proveta.
9. Adicionou-se muito lentamente, com a ajuda de uma vareta, 20 mL de
álcool frio.
1
 2
10. Deixou-se repousar durante 5 minutos. Fig. 1 Fig. 2
11. Observou-se e registaram-se as alterações de posição do agregado mole- Observação Observação
da posição da posição
cular nos 40 minutos subsequentes à etapa 10. do agregado do agregado
molecular molecular
após a após alguns
etapa 10. minutos após a
etapa 10.

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