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Exploiting the Nanoparticle Plasmon Effect: Observing Drug

Delivery Dynamics in Single Cells via Raman/Fluorescence


Imaging Spectroscopy

Explorando o efeito plasmon de nanopartículas: observando a


dinâmica de distribuição de drogas em células individuais por
meio da espectroscopia de imagem Raman/Fluorescência

Jéssica de Souza Ferreira matrícula: 231114316


Objetivo
• Foi proposto uma nova estratégia, espectroscopia de imagem
Raman/fluorescência sintonizável por plasmônico (P-TRFIS), para
rastrear diretamente a entrega e liberação de uma droga
anticancerígena de AuNPs em células vivas únicas.
• A doxorrubicina (DOX), foi
conjugada à superfície das
AuNPs para promover a
liberação da droga responsiva
ao pH.
• Os sinais Raman e de
fluorescência das moléculas
DOX foram seletivamente
“LIGADOS” ou “DESLIGADOS”
pelo campo plasmônico das
AuNPs, dependendo da
distância entre as moléculas
DOX e as AuNPs
• 460  C=O no plano de deformação
• 1080C-O movimento de reflexão
• 1200C-O-H
• 1420C-H
• 1580vibrações no anel
• 1650 C=O por ligação de oxigênio
(estiramento)

• Banda escolhida: 460 cm-1


• Espectros de fluorescência
(comprimento de onda de 490
nm)

• DOX livre em solução (1)


ausência das partículas de
ouro.
• DOX-AuNPs em pH 7,4 (2) 
acoplamento das AuNPs.
• DOX-AuNPs em pH 5,0
(3)Liberação da droga.
• AuNPs sem DOX (4)  não
emite fluorescência.
• Foram estudadas células de
carcinoma escamoso (HSC-3).
• Pelo menos 10 espectros foram
registrados de células diferentes
em cada experimento usando um
laser 785 como fonte de excitação
Espectros Raman de células HSC-3 de controle
(a), DOX-AuNPs (b) e células HSC-3 tratadas com
DOX-AuNPs 0,2 nM por diferentes períodos de
tempo (c) 6h (d) e 12h (e).

500 -S-S- guanina


645 guanina e C-S
838  O-P-O DNA
1000 Fenilalanina
1128  C-N ligação peptídica
1300 Amida III
Espectros Raman de células HSC-3 de controle (a), DOX-AuNPs (b) e
células HSC-3 tratadas com DOX-AuNPs por 3h (c) 6h (d) e 12h (e).

O espectro Raman das células HSC-3 tratadas


com DOX-AuNPs por 3h foi semelhante ao das
células HSC-3 controle, pois foram observadas
as bandas características das células HSC-3.

As características Raman de DOX-AuNPs não


puderam ser distinguidas no espectro, exceto
pela banda forte e nítida em 460 cm -1
Estudo em tempo real da dinâmica de
liberação de DOX em células vivas
• Monitoramento do espectro na região de 400
1000 cm -1
• A intensidade da banda de 460 cm 1 diminuiu
continuamente em 4 h de incubação de DOX-
AuNP até desaparecer completamente após 12
h de tratamento.
• A liberação de DOX dos AuNPs dependia do
tempo.
Conclusão

Esta técnica tem o potencial de ser uma ferramenta útil para estudar os
mecanismos moleculares de entrega e liberação de drogas em células
vivas, bem como a resposta celular à ação da droga. Estudos adicionais
estão sendo conduzidos para investigar a citotoxicidade e os efeitos
celulares a longo prazo de AuNPs funcionalizadas com DOX.

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