COLORAÇÃO DE

GRAM
 HISTÓRICO

• 1884, HANS CRISTIAN GRAM,

DESCOBRUI QUE AS BACTÉRIAS
PODIAM SER DIVIDIDAS EM DOIS
GRANDES GRUPOS, PARTINDO DA
CAPACIDADE QUE TÊM AS
CÉLULAS CORADAS DE
RESISTITEM OU NÃO A UMA
DESCOLORAÇÃO PELO ÁLCOOL.
 •ESSA AÇÃO, PROVAVELMENTE,
OCORRE PELA MAIOR QUANTIDADE
DE LIPÍDIOS NA PARADE CELULAR
DAS BACTÉRIAS.
•A PAREDE DA CÉLULA GRAM
NEGATIVA TÊM UM CONTEÚDO
LIPÍDICO MAIS ELEVADO QUE AS
CÉLULAS GRAM POSITIVAS.
 FINALIDADE

É UM MÉTODO USADO PARA

DIFERENCIAR AS BACTÉRIAS:
• GRAM - POSITIVAS

• GRAM - NEGATIVAS
ESTRUTURA
BACTERIANA
ESTRUTURA BACTERIANA
ESTRUTURA GRAM POSITIVA
ESTRUTURA GRAM POSITIVA
ESTRUTURA GRAM POSITIVA
ESTRUTURA GRAM NEGATIVA
ESTRUTURA GRAM NEGATIVA
ESTRUTURA GRAM NEGATIVA
DIFERENÇA ENTRE GRAM POSITIVA E
GRAM NEGATIVA
 CORANTES E REAGENTES

CRISTAL VIOLETA (VIOLETA

DE METILA).
LUGOL.
ÁLCOOL.
SAFRANINA.
 MÉTODO DA
COLORAÇÃO DE
GRAM
 COLORAÇÃO PRIMÁRIA

 ESFREGAÇO FIXADO COM SOLUÇÃO

DE CRISTAL VIOLETA DURANTE 1
MINUTO.
 LAVAR COM ÁGUA CORRENTE.
 AS CÉLULAS NESTE ESTÁGIO
ADQUIREM TONALIDADE AZUL-ESCURA
OU PÚRPURA.
 MORDENTE

 ESFREGAÇO É COBERTO POR UMA

SOLUÇÃO DE IODO.
IODO
 CRISTAL VIOLETA É FIXADO À CÉLULA
PELO MORDENTE.
 COMPLEXO VIOLETA-IODO É
FORTEMENTE RETIDO POR UM GRUPO
DE BACTÉRIAS.
 DESCOLORAÇÃO

 APLICAR ÁLCOOL ETILÍCO NO ESFREGAÇO.

 A FUNÇÃO DO ÁLCOOL É DESIDRATAR OS
CARBOITRADOS EXISTENTES NA PAREDE
CELULAR DE BACTÉRIAS GRAM-POSITIVAS,
RETENDO O CORANTE PRIMÁRIO.
 AS GRAM-NEGATIVAS, ATRAVÉS DA
DISSOLUÇÃO DOS LIPÍDIOS, TÊM A
POROSIDADE OU PERMEABILIDADE DA PAREDE
CELULAR AUMENTADA, EVITANDO QUE O
COMPLEXO CORANTE SEJA RETIDO.
 CONTRASTE
 FUCSINA DILUÍDA OU SAFRANINA CONSTITUI
O CORANTE SECUNDÁRIO.
 SE AS CÉLULAS PERMITEM O DESCORAMENTO
PELO ÁLCCOL, ELAS FIXAM O CORANTE
SECUNDÁRIO NESTA SEGUNDA ETAPA.
 COLORAÇÃO DAS BACTÉRIAS DE ROXO:
GRAM-POSITIVAS.
 COLORAÇÃO DAS BACTÉRIAS DE VERMELHO:
GRAM-NEGATIVAS.
PASSOS PARA COLORAÇÃO DE GRAM
RESULTADOS
RESULTADO
RESULTADO
PRANCHAS COLORIDAS
GRAM POSITIVAS
GRAM NEGATIVAS
CLASSIFICAÇÃO
DAS BACTÉRIAS
 AERÓBIOS
1) COCOS
GRAM-POSITIVOS: Staphylococcus, Streptococcus.
GRAM-NEGATIVOS: Neisseria.

2) BACILOS
GRAM-POSITIVOS: Corynebacterium, Lactobacillus, Listeria,etc.
GRAM-NEGATIVOS: Enterobactérias (Escherichia, Proteus,
Klebsiella, Salmonella, Shigella), Pseudomonas, Bordetella,
Haemophilus, etc.
 ANAERÓBIOS

1) COCOS
GRAM-POSITIVOS: Peptococcus, etc.
GRAM-NEGATIVOS: Veilonella, etc.

2)BACILOS
GRAM-POSITIVOS: Clostridium, etc.
GRAM-NEGATIVOS: Bacteroides, etc.
 OBSERVAÇÃO

REGRA GERAL:
OS COCOS, COM EXCEÇÃO DA
Neisseria, SÃO GERALMENTE GRAM
(+).
OS BASTONETES, COM EXCEÇÃO
DAS CORINEBACTÉRIAS, Listeria,
Bacillus E CLOSTRÍDIOS, GRAM (-).
 BIBLIOGRAFIA
ANTUNES, G.S. MANUAL DE DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO. 2ª
EDIÇÃO, PORTO ALEGRE, EDITORA UNIVERSIDADE/UFRGS, 1995.
BIDDLE, W. GUIA DE BATALHA CONTRA OS GERMES. RIO DE
JANEIRO, EDITORA RECORD, 1998.
MENEZES, C.H.P. BACTERIOLOGIA, UM TEXTO ILUSTRADO.
TERESÓPOLIS, RIO DE JANEIRO, EDITORA EVENTOS, 1999.
PILONETTO M. MANUAL DE PROCEDIMENTOS LABORATORIAIS EM
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LABORATÓRIOS LTDA, 1998.
SANTOS, L.F. MANUAL DE MICROBIOLOGIA CLÍNICA. JOÃO
PESSOA, ED. UNIVERSITÁRIA/UFPB, 1996.
VALLADA, E.P. MANUAL DE COPROCULTURA. 2ª EDIÇÃO, SÃO
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