Bioquímica e Fisiologia de microorganismos

Thais Faleiro Mendonça Matrícula: 192750047

Juan Nóbrega de Freitas Matrícula: 192750013
Paloma Laís Caldeira Matrícula: 192750014
Dayanne Pereira de Souza Matrícula: 192750048
Laura meneghini silva Matrícula: 192750034

1- a) Durante uma coloração de Gram, uma etapa pode ser omitida e ainda
assim permitir a diferenciação entre células gram-positivas e gram-negativas.
Qual seria ela?

As bactérias são organismos unicelulares cujas células são procariontes.

Essas células são envolvidas por uma camada de peptidoglicanos que pode ser
mais espessa ou mais fina. Quando queremos visualizar as bactérias no
microscópio, é realizado um processo chamado de coloração de Gram. Desse
método surgem as gram-positivas e gram-negativas.

Acontece que durante a coloração é utilizado um cristal violeta como corante e

algumas bactérias retêm esse corante devido à uma camada de peptidoglicanos
mais espessa. Essas bactérias são, então, chamadas de gram-positivas. Já outras,
as gram-negativas, não retêm esse cristal e ficam com uma cor vermelha devido ao
processo de descoloração com safranina devido apresentarem uma camada mais
fina. Como forma de facilitar a visualização ao microscópio, existe uma etapa que
utiliza iodo para intensificar a coloração violeta. Porém, essa etapa não é
obrigatória. Portanto, a etapa que utiliza iodo pode ser omitida. Pois ele apenas é
responsável pela maior fixação do cristal violeta. Sendo as outras etapas
indispensáveis.

b) Por que a coloração de Gram não é recomendada para uso em bactérias

ácido resistentes?

As bactérias ácido resistentes (ácido-álcool resistente) possuem na parede celular

alto teor de lipídeos, cerca de 60%, principalmente compostas por ácido micólico
(são longos ácidos graxos encontrados nas paredes celulares de um grupo de
bactérias, como o Mycobacterium tuberculosis, o agente causador da tuberculose).
Quando ocorre a descoloração com etanol, ele não penetra na parede dessas
bactérias, ocasionando um erro no resultado.
c) Se você realizasse uma coloração de Gram em bactérias ácido resistentes,
qual seria sua reação de Gram? Qual a reação de Gram para bactérias que não
são ácido resistentes?

Usaria a reação de Ziehl-Neelsen, para essas bactérias é utilizado o método

Ziehl-Neelsen, no qual é usada a característica de possuírem parede celular de
lipídio, cujo corante Fucsina fenicada irá fornecer coloração vermelha à bactéria, e
persistirá à descoloração por álcool-ácido forte.
Ademais, coloração de Gram é um método que permite diferenciar bactérias com
diferentes estruturas de parede celular a partir das colorações que estas adquirem
após tratamento com agentes químicos específicos. Esse método consiste em tratar
sucessivamente um esfregaço(uma leve camada de matéria orgânica sobre uma
lâmina de vidro) bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol,
etanol-acetona e fucsina básica. As bactérias que adquirem a coloração azul violeta
são chamadas de Gram-positivas e aquelas que adquirem a coloração vermelha
são chamadas de Gram-negativas.

d) Preencha a tabela abaixo em relação à coloração de Gram:

APARÊNCIA APÓS ESTA ETAPA

ETAPAS CÉLULAS GRAM CÉLULAS GRAM

POSITIVAS NEGATIVAS

CRISTAL VIOLETA a. roxa e. vermelha

IODO b. violeta no processo f. violeta no processo

final final

ÁLCOOL-ACETONA c. roxo no processo de g. coram a cor vermelho

coloração final no processo de coloração
final

SAFRANINA d. coram pela cor rosa h. coram pela cor

arroxeado