NOME: Kauane de Moraes CURSO: Farmácia 1° período MATÉRIA: Biologia celular

RELATÓRIO COLORAÇÃO DE GRAM

1) Qual o objetivo da técnica de coloração de gram?

A técnica de coloração de gram é amplamente utilizada em microbiologia para diferenciar e
classificar bactérias com base na composição de suas paredes celulares. Ela é utilizada para
distinguir entre bactérias Gram- positivas, que retêm a corante violeta da coloração, e bactérias
Gram- negativas, que não retêm o corante e são coradas por um corante contraste.
2) Quais são os passos principais da técnica de coloração de Gram?
COLORAÇÃO DE GRAM
_ Cobrir toda a lâmina com cristal violeta – 1 min;
_ Lavar com água destilada;
_ Cobrir com lugol- 1 min;
_ Inclinar e jogar o restante do corante;
_ Gotejar álcool absoluto- 30 seg;
_ Lavar a lâmina;
_ Cobrir com fucsina- 30 seg;
_ Lavar a lâmina;
_ Colocar óleo de imersão- 1 gota 1.000x.

3) Porque a coloração de Gram é uma técnica importante em microbiologia? Quais informações

podemos obter através dela?
A coloração de Gram é crucial porque fornece informações valiosas que podem orientar o
tratamento de infecções, a classificação de bactérias e até mesmo auxiliar no diagnóstico de
doenças.
Uma técnica fundamental em microbiologia por várias razões:
_ Identificação de Bactérias: a coloração de Gram permite a diferenciação de bactérias em dois
grupos principais Gram- positiva e Gram- negativa. Isso fornece informações inicias importantes
sobre a composição das paredes celulares das bactérias.
_ Auxílio no diagnóstico: usada para auxiliar no diagnóstico de infecções bacterianas. Com base na
reação da bactéria à coloração, os profissionais de saúde podem ter uma ideia inicial do tipo de
bactéria envolvida.
_ Determinação do Tratamento: Como diferentes tipos de bactérias respondem de maneira diferente
aos antibióticos, a categorização em Gram- positivas e negativas pode ajudar os médicos a escolher
o tratamento mais apropriado antes mesmo de os resultados de cultura estarem disponíveis.
_Classificação Microbiológica: A coloração de Gram é parte integrante da classificação microbiana
e é frequentemente o primeiro passo para a identificação de desconhecidos em laboratórios de
microbiologia.
4) Quais são os componentes do complexo de parede celular bacteriana que influenciam na
coloração de Gram? Como esses componentes interagem com os corantes utilizados na técnica?
São a presença de uma camada de peptidoglicano espessa e a presença ou ausência de uma
membrana lipídica externa. A técnica de coloração de Gram envolve a interação dos corantes cristal
violeta e safranina com esses componentes da parede celular. Quando um cristal violeta é aplicado,
ele se liga ao peptidoglicano na parede celular de algumas bactérias, formando um complexo cristal
violeta- peptidoglicano. Em seguida, a adição de iodo forma um complexo de cristal violeta- iodo
que retém o corante na parede celular. Durante a etapa de descoloração com álcool ou acetona, as
bactérias com uma membrana lipídica externa ficam descoloridas, já as bactérias com uma camada
de peptidoglicano espessa retêm o corante e ficam coradas. Por fim, a adição de safranina cora as
bactérias que perderam o cristal violeta durante a etapa de descoloração.
5) Quais são as principais diferenças no resultado da coloração entre bactérias Gram- Positivas e
Gram- negativas?
BACTÉRIAS GRAM- POSITIVAS: Após a coloração de Gram, as bactérias Gram- positivas retêm
o corante cristal violeta, aparecendo na cor violeta ou azul escuro. Isso ocorre devido à espessa
camada de peptidoglico em sua parede celular, que retêm o corante, mesmo após a etapa de
descoloração. Quando coradas com safranina, essas bactérias não mudam de cor significativamente,
permanecendo na cor violeta ou azul.
BACTÉRIAS GRAM- NEGATIVAS: Perdem o corante cristal violeta durante a etapa de
descoloração devido à presença de uma membrana lipídica externa. Após a descoloração, essas
bactérias com safranina, adquirindo uma coloração rosa ou vermelha. A coloração rosada ou
vermelha indica que o corante safranina foi capaz de penetrar na parede celular mais fina e na
membrana lipídica externa das bactérias Gram- negativas.

FOTOS DA PRÁTICA EXECUTADA SÃO GRAM- POSITIVAS