ATIVIDADES SOBRE COLORAÇÃO DE GRAM

1 – A parede da célula de uma bactéria permite a sua diferenciação em bactérias Gram

positiva e Gram negativas com o uso da técnica de coloração de Gram. Com base na
imagem abaixo, qual a diferença da parede celular de uma bactéria Gram positiva para
uma bactéria Gram negativa? O que acontece com a parede celular destas bactérias que
possibilita a sua diferenciação?
Ao microscópio , as células Gram-positivas aparecem coradas em violeta escuro e as
Gram-negativas em vermelho ou rosa escuro, Células de bactérias Gram-|Positivas ,
células velhas , mortas ou com envelopes danificados por agentes físicos ou químicos ,
tendem a perder o cristal violeta e uma amostra bacteriana pode exibir parte ou todas as
células coradas como Gram-Negativas .

2 – A coloração de Gram é o método bacterioscópico e mais utilizado atualmente na

bacteriologia. Qual a finalidade deste método?
O método consiste em sucessivamente um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com
reagentes violeta de genciana , lugol, etanol-acetona ( descorante) e fucsina .
3 – Como é a ação dos corantes utilizados na coloração de Gram sobre a parede das
bactérias? O primeiro corante (cristal de metila), penetra na bactéria assim como o
mordente ( soluto de lugol) intracelularmente forma-se um complexo de corante-lodo,
insolúvel em agua , que vai corar o protoplasma e a parede celular. A camada de
peptidoglicano é maior em bactérias gram positivas , e as gram negativas , por suas vez
possuem pouco peptidoglicano e são coradas pelo vermelho de safranina .

4 – O que acontece com as paredes das bactérias Gram-positivas e Gram-negativas

durante o tratamento com etanol-acetona?
o álcool- acetona extrai os lipídios, aumentando a porosidade / permeabilidade da
parede celular das bactérias Gram-negativas. A Parede celular das bactérias Gram-
Positivos , em virtude de sua composição, torna -se desidratada durante o tratamento
com álcool-acetona, a porosidade diminui , permeabilidade é reduzida e o complexo
CVI não pode ser extraído..

5 – O método de coloração de Gram consiste no tratamento de uma amostra de uma

cultura bacteriana crescida em meio sólido ou líquido. Inicia o processo com um corante
primário, o violeta de genciana. Como ocorre absorção do corante primário nas
bactérias Gram-positivas e Gram-negativas? Com o corante primário tem como
diferenciar Gram-positivas de Gram-negativas?
Tanto as bactérias GRam- Positivas , quanto as bactérias Gram-Negativas absorvem de
maneira idêntica o corante primário e o fixador , adquirindo uma coloração violeta
devido a formação de um cristal violeta - iodo, insolúvel, em seus citoplasmas . As
bactérias que adquirem a coloração azul violeta são chamados de gram-positiva e
aquelas que adquirem a coloração vermelha sao chamadas de gram- negativas.