Quem criou o Método Gram?

Hans Christian Joachim Gram (1853-1938) foi um grande

bacteriologista da Dinamarca. Filho de um professor de
jurisprudência (na época, um juiz) com uma dona de casa, sua
paixão pelas plantas o levou às bases dos estudos famcológicos.
Gram estudou Botânica na Universidade de Copenhagen, capital
da Dinamarca, além de Farmacologia e Bacteriologia em
Estrasburgo, capital da região de Grand Est na França, Marburgo,
às margens do rio Lahn, na Alemanha, e Berlim, capital da
própria Alemanha. Em só um ano após concluir sua formação em
Bacteriologia em Berlim, acabou desenvolvendo um método de
identificação e separação entre bactérias, que consiste na
coloração dessas. A famosa metodologia ficou batizada com o
último nome de seu inventor, GRAM.

Por que e como o criou?

Primeiramente, a verdade é que Hans nunca teve a intenção de
criar esse método, implicando que aquela tinha sido uma
descoberta "acidental". Aconteceu que enquanto ele examinava os
tecidos do pulmão de um paciente que havia falecido por conta da
pneumonia, o bacteriologista observou o aplique e a ação de
alguns corantes nas bactérias Streptococcus pneumoniae. Gram
percebeu que enquanto algumas bactérias retiam o corante em
suas paredes celulares, outras não eram capazes de realizá-lo. Ao
ver isso, criou então a técnica da coloração que levou o último
nome de seu inventor, Gram.

Qual sua função?

A principal função do método gram é identificar de forma
preliminar a morfologia das bactérias, ou pra estabelecer se há ou
não um número significativo de bactérias nas amostras clínicas,
uma vez que sem coloração é impossível observa-las e
extremamente difícil identifica-las. Caso a bactéria seja gram
positivo, ela ficará com uma coloração roxa devido à retenção do
cristal violeta, evidenciando assim, a presença de uma espessa
camada de peptidoglicano. Agora, caso seja gram negativo,
significa que ela apresenta uma parede de peptidoglicano mais
fina e que não retém o cristal violeta. Elas recebem a cor
vermelha no processo de coloração final.
Por isso, esse método pode ser muito útil. Com a análise do
peptoglicano de uma bactéria e sua morfologia, os profissionais
podem identificar a bactéria, diagnosticar a doença e saber como
as combaterem. Caso terão de dar um antibiótico mais pesado ou
mais leve.

Onde é utilizado?
O método é utilizado em laboratório de microbiologia (área da
biologia que estuda os microorganismos) e análises clínicas,
utilizados quase sempre como o primeiro passo pra caracterizar
amostras de bactérias. Algumas doenças que podem ser
identificadas pelo teste são: salmonela, pneumonia, gonorreia, e
infecções urinárias

Descrição do método

1º: O processo todo começa com um corante de cor primária, que

se chama Cristal Violeta, e assim como o nome sugere, ele deixa
as bactérias em um tom roxo.
2º: a amostra passa por uma etapa de lavagem com água destilada,
que em seguida é adicionado um fixador sendo ele lodo ou
Lugol(medicamento usado pra repor deficiência de iodo). A
função de um fixador é formar um complexo insolúvel em água
com o corante primário. Em um grande resumo, até aqui, tanto as
bactérias de gram positivas quanto de gram negativas são
coloridas pelo corante primário, sendo fixado pelo iodo Mas uma
breve pausa, o que é e define uma bactéria de gram positivo pra
uma de gram negativo além das cores que aplicamos com o
Cristal violeta. As de gram positivo, são aquelas que possuem
uma parede de peptidoglicano(polímero composto por açucares, e
aminoácidos) mais espessa. Já as de gram negativo, possuem a
parede peptidoglicano mais fina.
3º: mais uma vez sendo lavado com água destilada, a amostra é
submetida a um descolorante, sendo normalmente o álcool ou
acetona. Nessa etapa, o cristal violeta-iodo permanece preso na
parede celular de gram positivos, e se solta da parede celular dos
gram negativos, que assim, perdem sua cor
4º: após nova lavagem, com água destilada, é adicionado o
contracorante que normalmente é a Safranina. O contracorante
colore as bactérias de gram negativo com tom avermelhado ou
rosa escuro, que não acaba por afetar as de gram positivo que já
estão em todo arroxado. Isso ocorre pela diferença de densidade
da Safranina pro Cristal violeta
5º: após todas estas estapas, lava-se uma última vez com água
destilada(a lavagem sempre ocorre com a finalidade de não deixar
acumular tanta substância seja quaisquer a que apliquemos),
secar, e observar a amostra ao microscópio. Com o resultado de,
gram positivos coloridas de roxo, e gram negativas de vermelho
ou rosa(pelo contracorante da safranina)

Fontes:
https://kasvi.com.br/bacteria-gram-positiva-gram-negativa/
https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/2843125/mod_resource/
content/1/Colora%C3%A7%C3%B5es%20Gram%20e
%20Ziehl.pdf
https://pt.wikipedia.org/wiki/Hans_Christian_Gram
http://micro-ifrj.blogspot.com/2019/05/a-biografia-de-hans-
christian-gram.html
https://knoow.net/ciencterravida/biologia/gram-hans-christian/
https://blog.jaleko.com.br/como-e-feito-o-metodo-de-gram/