COLORAÇÃO DE GRAM

- Paula
- Isabeli
- Luiz
INTRODUÇÃO :

- Em 1884, o médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram desenvolveu a

técnica de Gram, também conhecida como coloração de Gram. Essa abordagem
possibilita a diferenciação de bactérias com distintas estruturas de parede celular
através das colorações que adquirem após serem tratadas com agentes químicos
específicos. O procedimento consiste em tratar um esfregaço bacteriano,
previamente fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol, etanol-acetona
e fucsina básica, nessa ordem. As bactérias Gram-positivas adquirem uma
coloração violeta, enquanto as Gram-negativas ficam vermelhas/rosa.
OBJETIVO :

É a caracterização e classificação das bactérias, em Gram positivo e Gram negativo

MATERIAL :

- Microscópio

- Alça de platina

- Bico de Bunsen

- Ágar nutriente

- Álcool areia

- 2 Frascos de meio de cultura

- Lâminas de vidro

- Lamínula

- Cristal-violeta

- Lugol

- Água destilada

- Álcool-acetona

- Fucsina
METODOLOGIA :

Prepare uma lâmina de vidro limpa e seca.

Espalhe uma pequena quantidade da cultura bacteriana na lâmina.
Cubra o espaço da célula com cristal violeta e aguarde por 1 minuto.
Lave com água corrente para remover o excesso de corante.
Cubra a lâmina com lugol e aguarde por 1 minuto antes de descartar o corante.
Incline a lâmina e goteje álcool-acetona até que não haja mais desprendimento do
corante. Em seguida, lave a lâmina novamente.
Cubra a lâmina com fucsina básica, aguarde 30 segundos e lave com água corrente.
Seque a lâmina com cuidado.
Observe a lâmina ao microscópio em objetiva de imersão (100x) para analisar a
coloração de Gram.
Este procedimento é essencial para classificar as bactérias em dois grupos
principais, Gram-positivas (que retêm a cor violeta) e Gram-negativas (que retêm a
cor vermelha/rosa). Essa distinção é fundamental na microbiologia para orientar os
procedimentos subsequentes de identificação e tratamento das bactérias.
CONCLUSÃO :

- Aqui sobre a visão pelo microscópio verificou-se uma grande colonia de

Estafilococos de gram positivo, e pequenas outras bactérias diversas sobre a lâmina,
- Nessa outra imagem existem várias colônias de Bacilo gram negativo juntamente
de outras diversas bactérias