Disciplina de Microbiologia

Ensino Remoto
Curso de Nutrição - Integral

Professor Ministrante:
Renato Geraldo da Silva Filho
renato.geraldo.silva@unirio.br

Aula: Método de Coloração de Gram

 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 2

INTRODUÇÃO

➔ Preparação “a fresco”:

➔ Preparação “corada”

Coloração Simples Coloração Diferencial

Morfologia
Morfologia e Reação Tintorial
 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 3

EMPREGO DO MÉTODO

➔ Permite Associar Morfologia + Reação Tintorial (Taxonomia):

Identificação Presuntiva do Gênero Bacteriano

Agrupados
Reação Possivelmente
Coco Predominantemente
Positiva Staphylococcus
em Cachos de Uvas

Agrupados
Reação Possivelmente
Coco Predominantemente
Negativa Neisseria
dois a dois (diplococo)
e são “rineformes”

Possivelmente
Reação Bacillus
Bastonete Esporulado
Positiva Possivelmente
Clostridium
 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 4

EMPREGO DO MÉTODO

➔ Taxonomia (Fluxogramas de Identificação):

Identificação
Morfo-Tintorial

• Provas Bioquímicas
• Testes Fisiológicos
• Testes Sorológicos
 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 5

EMPREGO DO MÉTODO

➔ Método de Coloração Diferencial (Morfologia + Reação Tintorial):

• Diagnóstico Clínico-Laboratorial Presuntivo de Infecções:

Bacterioscopia com
Clinica Diagnóstico Presuntivo
o Método de Gram

Paciente do sexo
masculino Uretrite
apresentando Gonocócica
secreção uretral ....

Paciente
apresentando sinais
Meningite
de irritação
Pneumocócica
meníngea, febre,
liquor turvo, ...
 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 6

EXECUÇÃO DO MÉTODO
Materiais Clínicos (pus, liquor, líquido sinovial, ...)
Esfregaço
Cultura

+ fixar
Solução
Solução de
Solução de Álcool Safranina
Solução de Iôdo Etílico ou
de Cristal de Gram 95% ou Fucsina
Violeta (Lugol) Acetona Diluída
1 minuto 1 minuto “o suficiente” 30 seg

Corante Mordente Descorante Corante

Interpretação
Reação Positiva = Roxo Reação Negativa = Rosa
do Resultado:
 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 7

HIPÓTESES QUE EXPLICAM A REAÇÃO DAS BACTÉRIAS

Membrana
➔ Espessura da Camada de Peptidioglicana:
Externa

ParedeCelular

Membrana Celular
Gram Positiva Gram Negativa

➔ Desorganização da Membrana Externa das Bactérias Gram Negativas

pelo Diferenciador (Solvente Orgânico);

➔ Presença de Ácidos Teicóicos nas Bactérias Gram Positivas;

Complexo Corante = CV-I = iodo-pararosanilina

 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 8

DESCRIÇÃO MORFO-TINTORIAL DAS BACTÉRIAS AO GRAM

Cocos Gram Cocos Gram Cocos Gram

positivos agrupados positivos agrupados positivos agrupados
em cachos de uvas em cadeias em tétrades

Estafilococos Estreptococos “Sarcinas”

 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 9

DESCRIÇÃO MORFO-TINTORIAL DAS BACTÉRIAS AO GRAM

Cocos lanceolados Bastonetes Gram Bastonetes Gram

Gram positivos positivos não positivos esporulados
agrupados 2 a 2 esporulados
(diplococos)

Pneumococos
 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM 10

DESCRIÇÃO MORFO-TINTORIAL DAS BACTÉRIAS AO GRAM

Cocos rineformes Bastonetes Bastonetes Gram

Gram negativos (cocobacilos) Gram lábeis não
agrupados 2 a 2 negativos esporulados
(diplococos) intra e
extra-celulares

Neissérias

Formas Disgenésicas Formas Pleomórficas

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➔ Aproveite a Aula de Estudo Sincrônico para retirar suas dúvidas;

OBRIGADO