Bacteriologia

Cocos Gram Positivos:

1. Staphylococcus aureus - Staphylococcus epidermidis - Staphylococcus saprophyticus
2. Streptococcus pyogenes - Streptococcus agalactiae - Streptococcus pneumoniae
3. Enterococcus faecalis

A identificação presuntiva começa com a inoculação primária na placa de ágar sangue de car-
neiro que deve ser incubada em 5% de tensão de CO² (método da vela ou estufa de CO2).
As colônias de estafilococos são geralmente maiores, convexas, de coloração variando do branco-
porcelana a amarelo podendo apresentar hemólise ou não. Note-se que o desenvolvimento da cor
amarelada no S. aureus ocorre somente após incubação prolongada (72 h), à temperatura ambiente.
As colônias de estreptococos tendem a serem menores (puntiformes), e com halos de hemólise total
ou parcial (beta e alfa hemólise).

1. Faz -se a coloração de gram = Gram positivo

2. Prova da Catalase: Com a alça bacteriológica ou com um palito coleta-se o centro de uma colô-
nia suspeita e esfrega-se em uma lamina de vidro. Colocar sobre este esfregaço uma gota de
água oxigenada a 3% e observar a formação de bolhas. Para a família Microccocacea (estafilo-
cocos) a prova é geralmente positiva, enquanto que para a família Streptococcacea (estrepto-
cocos) é negativa. - Se a catalase for positiva, o próximo teste a se fazer é o de coagulase

3. Teste de Coagulase: Este teste baseia-se na presença da coagulase livre que reage com um fator
plasmático formando um complexo que atua sobre o fibrinogênio formando a fibrina. O teste é
melhor efetuado se:
Adicionar 0,1 ml de caldo BHI, incubado por uma noite, com colônia suspeita a um tubo de en-
saio com 0,5 ml de plasma; Incubar por 4 horas à 35°C em estufa ou banho maria; A formação
do coágulo é observada pela inclinação suave do tubo de ensaio a 90 graus da vertical. - Se o
teste de coagulase for Positivo= S. Aureus/ Se for negativo fazer teste de resistência a novobio-
cina
4. Teste de resistência a novobiocina: A cepa é semeada de maneira semelhante ao antibiograma
em placa de Muller Hinton acrescida de um disco teste de novobiocina contendo 5 µg. As amos-
tras resistentes mostram zonas de inibição de 6 a 12 mm, enquanto as susceptíveis apresentam
halos de 16 mm ou mais. As cepas de Staphylococcus saprophyticus são resistentes e as cepas
de Staphylococcus epidermidis são sensíveis

5. Se a prova de catalase for negativa é preciso fazer a classificação hemolítica :

Streptococcus pyogenes: b-hemolítico e sensível a bacitracina

Streptococcus agalactiae: b- hemolítico; confirmado através do teste de CAMP- O teste visa a
identificação de cepas de S. agalactiae (grupo B). Estas cepas produzem o fa-
tor CAMP (Christie, Atkins e Munch-Petersen) que atua sinergicamente com a β-he-
molisina produzida pelo Staphylococcus aureus em ágar sangue.
Streptococcus pneumoniae: a- hemolítico e sensível a optoquina