SISTEMA

UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
DISCIPLINA DE IMUNOLOGIA CLÍNICA
Discentes: Ana Carolina Lopes, João Guilherme Sabino,
João Marcos Costa, Maria Alice Santana
Docente: Valdenia Maria Oliveira de Souza
 Sistema ABO

Karl Landsteiner
 Sistema ABO

Os alelos A,B e O vão codificar as enzimas:

Alelo A: 1,3-N-acetilgalactosamina transferase;
Alelo B: 1,3-N-acetilgalactosil transferase;
Alelo O: Não codifica nenhuma enzima.

Cromossomo 9
Sistema ABO
Sistema ABO
Classificação
Sistema ABO

"O que não estiver

na membrana do
indivíduo, vai ter
a produção de
anticorpos..."
 Reações transfusionais
Reação hemolítica intravascular

Erros de identificação do receptor ou de amostras

coletadas para os testes pré transfusionais

Hemólise intravascular das hemácias incompatíveis

Opsonização e fagocitose de hemácias transfundidas

A resposta é T independente e os anticorpos em sua

maioria são IgM, mas pode haver IgG
 Reações transfusionais
Reação hemolítica intravascular
Fagolisossomo

Radicais livres, NO

Citocinas pró-
inflamatórias

Elastases, defensinas,
catepsinas

Inflamação
Reações transfusionais
 Reações transfusionais
Reação hemolítica intravascular

Dor torácica, hipotensão,

Febre, sudorese, náusea
dispneia

Insuficiência renal, Coagulação intravasvular

hemoglobinúria disseminada
 Reações transfusionais
Tratamento

Manter a diurese;
Uso de furosemida;
Dopamina;
Transfusão de Concentrado de plaquetas ou
crioprecitado;
Transfusão de concentrado de hemácias;
Eculizumab.
 Tipagem Sanguínea ABO
A reação antígeno-anticorpo na Hemaglutinação
 Tipagem Sanguínea ABO
A reação antígeno-anticorpo na Hemaglutinação

ANTI-A
ANTI-B
 Tipagem Sanguínea ABO
A reação antígeno-anticorpo na Hemaglutinação

ANTI-A
ANTI-B
Tipagem Sanguínea ABO
Prova Direta
Tem o objetivo de identificar a
presença ou não dos antígenos A
e B nas hemácias testadas.

Prova reversa
É a contra-prova, verifica a
presença ou não de anti-A e Anti-
B no soro testado.
 Tipagem Sanguínea ABO
Prova Direta Prova reversa
1. Uso do soro Anticorpos: anti-A,
1. Concentrado de suspensão de
anti-B e anti-AB
hemácias tipadas A1 e B
2. Concentrado da suspensão de
2. Soro a ser testado
hemácias a serem testadas
3. Suporte escolhido
3. Suporte escolhido para o teste
para o teste
4. Centrífuga
4. Centrífuga
Tipagem Sanguínea ABO
Suportes para realização dos testes
Colunas de
Tubos Microplacas
algutinação
 Tipagem Sanguínea ABO
Tubo - Prova direta

1. Identificar os tubos de ensaio: A, B e AB

2. Colocar uma gota dos soros anti-A, anti-B e
anti-AB, respectivamente nos tubos
identificados
3. Acrescentar uma gota da suspensão de
hemácias a 5% (amostra)
4. Agitação dos tubos e centrifugação adequada
5. Leitura da aglutinação contra fundo iluminado,
com ressuspensão do botão de aglutinação
 Tipagem Sanguínea ABO
Tubo - Prova reversa

1. Rotular os tubos de ensaio: A1 e B

2. Colocar 2 gotas do soro da amostra a testar
em cada tubo
3. Adicionar no tubo A: uma gota de hemácias
tipo A 5%
4. Adicionar no tubo B: uma gota de hemácias
tipo B 5%
5. Agitar o tubos e centrifugar
6. Leitura da aglutinação contra um fundo
iluminado, com a ressuspensão do botão.
 Tipagem Sanguínea ABO
Microplacas
O método consiste na utilização de
microplacas de acrílico ou microplacas de
poliestireno

Pode ser realizada de forma manual ou semi

automatizada

Permite a execução de 12 determinações de

grupos sanguíneos

Prova direta, reversa e de outros antígenos

eritrocitários
 Tipagem Sanguínea ABO
MATERIAIS Microplacas
Placa com 96 poços
Diluente
Anticorpos anti-A, anti-B e anti-AB
Hemácias-teste A e B
Amostra (suspensão de hemácias e plasma)

PROCEDIMENTO

1- Adicionar o anticorpo anti-A em um poço e o

anticorpo anti-B em outro poço.
2- Adicionar os reagentes de antígeno A e B em
poços separados da microplaca.
3- Colocar amostras de sangue nos poços
designados na microplaca.
4- Incubar a microplaca a uma temperatura
adequada para permitir a reação entre os
antígenos e anticorpos presentes.
5- Observar a reação e registrar os resultados.
 Tipagem Sanguínea ABO
Microplacas
INTERPRETAÇÃO DO RESULTADO

Reagente: padrão de aglutinação expandido das partículas.

Forma-se uma rede de hemácias unidas aos Acs se
espalhando por toda superfície do poço.

Não reagente: as hemácias se depositam no fundo do

poço mostrando uma aglomerado em forma de botão
 Tipagem Sanguínea ABO
Coluna de aglutinação
Microtécnica em que se utilizam cartões contendo
micro tubos com Gel Sephadex 6100 ou
Poliacrilamida

As reações são estáveis e podem ser revistas até 48

horas após a realização dos testes

Grande sensibilidade

Facilidade na leitura e interpretação de resultados

Prova direta, reversa e de outros antígenos

eritrocitários
 Tipagem Sanguínea ABO
Coluna de aglutinação
PROCEDIMENTO
MATERIAIS

ID-Card 1. Identificar o ID-Card com o nome ou número

ID-DiaCell A1 → Hemácia A do kit
ID-DiaCell B → Hemácia B do kit
Plasma do paciente
Suspensão de hemácias do paciente
apropriado.
2. Retirar o lacre de alumínio mantendo o ID-Card na
posição vertical.
3. Pipetar 50 μl de “ID-DiaCell A1 ” no microtubo 5 (A1 ).
4. Pipetar 50 μl de “ID-DiaCell B” no microtubo 6 (B).
5. Pipetar 50 μl de plasma nos microtubos 5 e 6.
Uma incubação de 10 minutos em temperatura ambiente
(18-25 °C) é recomendada
6. Pipetar 10 - 12,5 μl da suspensão de hemácias do
paciente nos microtubos 1 a 4 (A, B, D, ctl).
7. Centrifugar o ID-Card durante 10 minutos.
8. Ler e anotar os resultados das reações.
 Tipagem Sanguínea ABO
Coluna de aglutinação
INTERPRETAÇÃO DO RESULTADO

Reagente aglutinação

Não reagente: as hemácias se depositam no fundo da

coluna

Intensidade da aglutinação
Tipagem Sanguínea ABO

PROVA DIRETA- Ausência de aglutinação

PROVA REVERSA- Presença de algutinação

Tipagem Sanguínea ABO

PROVA DIRETA- Presença de aglutinação

PROVA REVERSA- Ausência de algutinação

Tipagem Sanguínea ABO

PROVA DIRETA- Presença de aglutinação no anti-B e

ausência no anti-A

PROVA REVERSA- Ausência de algutinação nas

hemácias B e aglutinação nas hemácias A
Tipagem Sanguínea ABO

PROVA DIRETA- Presença de aglutinação no anti-A e

ausência no anti-B

PROVA REVERSA- Ausência de algutinação nas hemácias A

e aglutinação nas hemácias B
Tipagem Sanguínea ABO
Interpretação dos resultados
Tipagem Sanguínea ABO
Tipagem Sanguínea ABO

PROVA DIRETA- Ausência de aglutinação --> tipo O

PROVA REVERSA- Ausência de algutinação --> tipo AB

 Tipagem Sanguínea ABO
Erros e discrepâncias nas provas
Os erros podem ocorrer em qualquer etapa do processo, incluindo a identificação do paciente, a
coleta e a rotulagem da amostra, além desses erros no registro

ERROS TÉCNICOS:
- Concentração inadequada da suspensão do hemácias
- Quantidade do soro insuficiênte
- Centrifugação inadequada
- Reagentes contaminados

ERROS RELACIONADOS A FATORES DO PACIENTE:

- Idade: Recém nascidos
- Diagnóstico do paciente
- Medicamentos (Imunossupressor)
Referências
GARCIA, Laís. Conceitos básicos em imunohematologia. Hospital das clínicas, Porto Alegre,
RS.

SCHORNER, E.J. Curso de Boas Práticas no Ciclo do Sangue: Triagem laboratorial – Imuno-
hematologia dodoador. Centro estadual de vigilância em saúde. RS

LIU, I.P. Análise de resultados da tipagem sanguínea antes e após a implantação da técnica
de semiautomação. 2012.

MAYER, Gene. REAÇÕES ANTÍGENO-ANTICORPO E TESTES SELECIONADOS. School of Medicine

Columbia. Disponível em: Pathology, Microbiology and Immunology - School of Medicine
Columbia | University of South Carolina.

Ministério da Saúde. Imuno-Hematologia Laboratorial. Brasília-DF, 2014. Ed. 1°. Brasil.

NERY, Caio Vinicius da Silva. A elaboração de um protocolo de reserva de Concentrado de

Hemácias para cirurgias eletivas realizadas em um hospital público do Distrito Federal como
ferramenta para otimização do uso racional do sangue. 2018. Tese de Doutorado.
Universidade de São Paulo.
Referências
SOUSA, Maria; MOTA, Sandra. Manual prático de imunohematologia. 2020.

JUNIOR, David Sebastião Lopes Nevoa. Laboratório de Imuno-hematologia. Gov.br/anvisa.

Disponível em: <https://www.gov.br/anvisa/pt-
br/assuntos/sangue/capacitacoes/arquivos/7499json-file-1>. Acesso em: 18, Abril de 2023

SCHORNER, Everaldo José. Triagem laboratorial – Imuno-hematologia do doador.

Gov.br/anvisa. Disponível em: <https://www.gov.br/anvisa/pt-
br/assuntos/sangue/capacitacoes/arquivos/7484json-file-1>. Acesso em: 18, Abril de 2023

GARCÍA, Carlos Alberto Arbeláez. Sistema de grupo sanguíneo ABO. Medicina y laboratorio, v.
15, n. 7-8, p. 329-347, 2009.

OLIVEIRA, Luciana CO; COZAC, Ana Paula CNC. Reações transfusionais: diagnóstico e
tratamento. Medicina (Ribeirão Preto), v. 36, n. 2/4, p. 431-438, 2003.

DE SIQUEIRA RAMOS¹, Paula et al. Reação hemolítica transfusional: diagnóstico e manejo

anestésico. Rev Med Minas Gerais, v. 27, n. Supl 4, p. S46-S51, 2017.