ROTEIRO DE AULA PRÁTIA I

Universidade Cruzeiro do Sul- UNICSUL

Disciplina de Hematologia Clínica e Banco de Sangue – Biomedicina
Profa. Graziela Batista

Normas do Relatório:
1) Preparado em Word, salvar e enviar como PDF:
a) tamanho = A4; orientação = retrato;
b) fonte da letra: Times New Roman;
c) tamanho da letra = 12;
d) margens: esquerda 3 cm, direita 2cm, superior 3cm, inferior 2cm;
e) parágrafo: justificado;
g) espaçamento entre linhas: 1,5cm;
f) paginação no canto superior direito;
g) mínimo de páginas: 3;

2)Apresentar capa com nome, campus, período, RGM, disciplina, título da atividade
(Relatório da Prática: Tipagem sanguínea e microscopia);
3)Apresentar o protocolo descrito abaixo.
4)Apresentar os resultados obtidos durante a observação das lâminas no microscópio e
da tipagem sanguínea.
5)Responder as questões apresentadas nesse documento, apresentando a pergunta e
a resposta;
6)Referenciar as fontes para respostas das questões com textos científicos ou
publicações em mídias confiáveis.

Critérios de avaliação:
1) Apresentação do relatório;
2) Organização da apresentação dos resultados obtidos na aula;
3) Conteúdo de respostas do questionário;
4) Fonte de consultas descritas nas referências.

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 EXPERIMENTO I

1) Analise as extensões sanguíneas preparadas e coradas anteriormente.

2) Inicie focando a lâmina na objetiva de 4X, seguindo para as próximas objetivas
gradativamente, até chegar na objetiva de 100X. LEMBRAR que para usar a
objetiva de 100X é necessário o uso de óleo de imersão.
3) Realizar uma análise morfológica das hemácias, leucócitos e plaquetas.
4) Para realizar a contagem diferencial relativa dos leucócitos, deve ser contado no
total de 100 células.
5) Observe abaixo como realizar a contagem:

Na figura ao lado, as setas na lâmina

Paciente 1

indicam o sentido da leitura para a

contagem diferencial dos leucócitos.

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RESULTADOS:

1) Desenhe ou fotografe as células sanguíneas visualizadas no microscópio.

2) Em seguida, descreva as características morfológicas de cada célula sanguínea.

Célula visualizada: Características morfológicas:

3) Apresente a contagem diferencial relativa dos leucócitos:

Tipo de leucócitos Valor relativo %

Neutrófilos
Bastonetes
Neutrófilos segmentados
Eosinófilos
Basófilos
Monócitos
Linfócitos
Total de células

Responda a seguinte Questão:

1) Qual o tipo de leucócito mais frequente e menos frequente no sangue

periférico, baseado na leitura de lâmina?

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 EXPERIMENTO II

Protocolo de Tipagem Sanguínea

TIPAGEM DIRETA

MATERIAIS NECESSÁRIOS
 Hemácias a serem testadas
 Soros anti-A, anti-B
 Tubos 12 x 75 mm
 Estantes para os tubos
 Pipetas graduadas, 50 µL
 Solução de cloreto de sódio a 0,9%
 Centrífuga para imunohematologia

MÉTODO
 Identifique dois tubos individualmente para cada um dos anti-soros a serem
utilizados (anti-A, anti-B). Anote o número da amostra em todos os tubos e em
cada um as letras “A“, “B”, de acordo com o antissoro a ser utilizado.
 Centrifugar as amostras dos pacientes com anticoagulante e fazer duas
pipetagens de 50 µL, diretamente das hemácias sedimentadas, ressuspendendo-
as com solução fisiológica a 0,9% até 1 cm da borda do tubo (10mL).
 Lave a amostra de hemácias três vezes com solução de cloreto de sódio a 0,9%.
Centrifugar 1000 rpm por 1 minuto. Para preparar a suspensão a 5 % das
hemácias lavadas, após a última lavagem ressuspender as hemácias, em tubo,
misturar 950 µL de salina com 50 µL (1 gota) de concentrado de hemácias e
homogeneizar.
 Coloque uma gota de cada antissoro em seu respectivo tubo, anti-A no primeiro,
anti-B no segundo.
 Coloque uma gota da suspensão de hemácias de 3% a 5% em cada tubo.
 Agite o tubo e centrifugue a 3.400 rpm por 20 seg.
 Retire os tubos da centrífuga.
 Agite cada um delicadamente para ressuspender o botão de hemácias,
observando através da Lupa.
 Verifique a ocorrência de aglutinação ou não e anote os resultados.

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RESULTADOS ESPERADOS E INTERPRETAÇÃO

POSITIVO: ocorre aglutinação (+)

NEGATIVO: não ocorre aglutinação (-)

GRUPOS SANGUÍNEOS ANTISOROS

ABO ANTI-A ANTI-B

A + -
B - +
O - -
AB + +

RESULTADO DA TIPAGEM

Amostra Grupo Prova Direta

Sanguíneo Soro Anti -A Soro Anti - B Soro Anti-AB

Responda a seguinte Questão

1) Se fosse possível realizar a prova reversa para determinar o sistema ABO,

qual seria o possível resultado baseado na tipagem que você realizou
acima?

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TIPAGEM RH D

MATERIAIS NECESSÁRIOS
 Hemácias a serem testadas
 Soro anti-D (Rh)
 Controle Rh (D)
 Tubos 12 x 75 mm
 Pipetas graduadas / 50 µL
 Estante para os tubos
 Solução de cloreto de sódio a 0,9%
 Centrífuga para Imunohematologia

METODO
 Lave a amostra de hemácias três vezes com solução de cloreto de sódio a 0,9%.
 Prepare uma suspensão de hemácias de 3% a 5% em solução de cloreto de sódio a
0,9%, a partir da amostra a ser testada.
 Identifique dois tubos com o número da amostra do paciente e “D” no primeiro e “CRh”
no segundo).
 No primeiro coloque uma a uma gota do soro anti-D e no segundo uma a uma gota
do soro controle.
 Coloque uma gota da suspensão de hemácias em cada um dos tubos.
 Centrifugue a 3.400 rpm por 20 seg.
 Retire os tubos da centrífuga agite-os delicadamente para verificar a ocorrência de
aglutinação ou não.
 Anote o resultado.

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RESULTADOS ESPERADOS E INTERPRETAÇÃO
POSITIVO: ocorre aglutinação (+)
NEGATIVO: não ocorre aglutinação (-)

AGLUTINAÇÃO AGLUTINAÇÃO INTERPRETAÇÃO

Anti-D Controle Rh Tipo Rh (D) das Hemácias
+ - Positivo
+ + Prejudicado
- - Negativo

RESULTADO DA TIPAGEM

Amostra Grupo
Sanguíneo Soro Anti -D Soro Controle

Responda a seguinte Questão

1) Quando o resultado da determinação do fator Rh se apresenta negativo,

qual a conduta a ser tomada no laboratório?

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